МУК 4.1.2904-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Ципросульфамида в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 12.07.2011)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ введен в действие с 12 июля 2011 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
12 июля 2011 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦИПРОСУЛЬФАМИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, ЗЕРНЕ И МАСЛЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
с момента утверждения
1. Разработаны: Российским государственным аграрным университетом — МСХА им. К.А. Тимирязева; Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 02.06.2011 № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.
4. Введены в действие с момента утверждения.
Свидетельство о метрологической аттестации от 25.04.2011 № 0086.25.04.11.
Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Ципросульфамида в воде в диапазоне 0,005 — 0,050 мг/куб. дм и в почве в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в зеленой массе кукурузы в диапазоне 0,02 — 0,20 мг/кг, в зерне и масле кукурузы в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг.
Название действующего вещества по ИЮПАК: N-{[(4-циклопропилкарбамоил)фенил]сульфонил}-2-метоксибензамид.
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: C H № O S. 18 18 2 5
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белый с легким характерным запахом.
-9 -8 Давление паров: 5,72 х 10 Па (при 20 °C); 1,10 х 10 Па (при 25 °C);
-7
2,19 х 10 Па (при 50 °C). Коэффициент распределения октанол - вода: log P K = 1,77 (pH 4), log
ow
P K = -0,80 (pH 7), log P K = -1,81 (pH 9). ow ow
Температура плавления: выше 450 °C.
Растворимость в воде (мг/куб. дм, при 20 °C): при pH 4 — 0,0034; pH 5,1 — 0,0125; pH 6,9 — 1,09; pH 8,1 — 26,1.
Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, при 20 °C): ацетон — 3,1; н-гексан < 0,001; диметилсульфоксид > 200; дихлорметан — 3,5; толуол — 0,0047; этанол — 0,47; этилацетат — 0,51.
Стабилен в водных растворах при pH 3 — 10 и температуре 22 °C до 20 месяцев.
Краткая токсикологическая характеристика. Ципросульфамид относится к малоопасным по острой оральной (ЛД для крыс более 2000 мг/кг) и
50
дермальной токсичности (ЛД для крыс более 2000 мг/кг), но к умеренно 50 опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК для крыс (4 ч) более 50 3513 мг/куб. м).
Область применения препарата. Ципросульфамид — антидот, обеспечивающий достаточно высокий уровень толерантности культуры к гербицидному препарату.
В России гигиенические нормативы не установлены.
1. Метрологическая характеристика метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ЦИПРОСУЛЬФАМИДА
| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг, (мг/куб. дм) | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| Вода | 0,005 — 0,01 вкл. | 40 | 2,22 | 6,18 | 8,65 |
| 0,01 — 0,05 вкл. | 30 | 1,76 | 4,88 | 6,83 | |
| Почва | 0,01 — 0,1 вкл. | 50 | 3,62 | 10,06 | 14,08 |
| Зеленая масса кукурузы | 0,02 — 0,1 вкл. | 50 | 1,62 | 4,50 | 6,31 |
| 0,1 — 0,2 вкл. | 25 | 2,72 | 7,55 | 10,57 | |
| Зерно кукурузы | 0,01 — 0,1 вкл. | 50 | 4,18 | 11,63 | 16,28 |
| Масло кукурузное | 0,01 — 0,1 вкл. | 50 | 3,35 | 9,30 | 13,02 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
ДЛЯ ЦИПРОСУЛЬФАМИДА
| Анализируемый объект | Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20 | ||||
| предел обнаружения, мг/кг, (мг/куб. дм) | диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/куб. дм) | полнота извлечения вещества, % | стандартное отклонение, S, % | доверительный интервал среднего результата, +/-, % | |
| Вода | 0,005 | 0,005 — 0,05 | 93,89 | 2,04 | 2,53 |
| Почва | 0,01 | 0,01 — 0,1 | 81,52 | 4,28 | 5,25 |
| Зеленая масса кукурузы | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 74,01 | 3,10 | 4,19 |
| Зерно кукурузы | 0,01 | 0,01 — 0,1 | 77,36 | 4,88 | 6,06 |
| Масло кукурузное | 0,01 | 0,01 — 0,1 | 80,91 | 2,08 | 2,57 |
2. Метод измерений
Метод основан на определении Ципросульфамида с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия и концентрирующих патронах Диапак С, Диапак Диол и Диапак Амин.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерений
Весы аналитические «OHAUS», ЕР 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс точности по ГОСТ 24104-1 — специальный (I)
Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г «ACCULAB» V600, соответствуют классу точности по ГОСТ 24104-1 — средний (III)
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см ГОСТ 1770-74
Микрошприц для жидкостной хроматографии «Hamilton, 1700», объем 100 куб. мм, фирма «SUPELCO», кат. № 26281
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см ГОСТ 29227-91 pH-метр/милливольтметр pH-150 0...14 pH; +/- 1999 мВ, номер госрегистрации № 10663
Хроматограф жидкостный Waters 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации № 15311-02
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см ГОСТ 1770-74.
Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Ципросульфамид, СAS 221667-31-8, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 98,8%, фирма Dr. Ehreustorfer GmbH, аккредитованная по ИСО 9001-2000
Алюминий окись для хроматографии, ч ТУ 6-09-3916-75 Ацетон, осч ТУ 6-09-3513-86 Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм ТУ 6-09-2167-84
Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная ГОСТ 6709-72 (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости)
Гелий очищенный марки "А" ТУ 51-940-80 n-Гексан, хч ТУ 6-09-3818-89
Калий марганцовокислый, чда ГОСТ 20490-75
Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-х водный, чда ГОСТ 2493-75
Кальций хлористый, ч ТУ 6-09-4711-81
Кислота соляная, хч ГОСТ 3118-77
Кислота муравьиная, чда ГОСТ 5848-73
Кислота уксусная, ледяная, хч ГОСТ 61-75
Концентрирующие патроны Диапак Диол, Диапак Амин
и Диапак С (0,6 г), фирма "БиоХимМак СТ" ТУ 4215-002-05451931-94 Метилен хлористый, хч ТУ 6-09-2662-77
Натрий сернокислый безводный, хч ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3. Вспомогательные устройства и материалы
Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами Диапак Диол, Диапак Амин и Диапак С ГОСТ 25336-82
Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LT1»
Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. № 3120-0250, фирма «NALGENE»
Ванна ультразвуковая «UNITRA» UNIMA OLSZTYN UM-4
Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная ГОСТ 5556-81
Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82
Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней В-480, фирма «Buchi»
Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4000 куб. см ТС ТУ 92-891.029-91
Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма «Waters»
Насос диафрагменный FT.19, фирма «KNF Neu Laboport»
Печь микроволновая MS-1724 W/U с выходной мощностью 700 Вт и частотой микроволн 2,450 МГц, фирма «LG Electronics Inc.»
Предколонка хроматографическая стальная, Symmetry С8, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters»
Сито лабораторное с полотном из латуни или ГОСТ 3826-82 и нержавеющей стали с размером ячеек 1 мм ГОСТ 6613-86
Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 50 — 500 куб. см ГОСТ 25336-82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см
Фильтры бумажные «красная лента» ТУ-6-09-1678-86
Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма «Waters»
Центрифуга MPW-350e с числом оборотов 4000 об./мин. и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см
Шприц инъекционный однократного применения объемом 10 куб. см ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-84).
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению определений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия, концентрирующих патронов Диапак С, Диапак Диол и Диапак Амин для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С, Диапак Диол и Диапак Амин, установление градуировочной характеристики.
7.1. Подготовка органических растворителей
7.1.1 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей. Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.
7.1.2 Очистка ацетона
Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 ч. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцовокислый калий из расчета 100 мг/куб. дм. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.
7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды
Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C отбрасывают.
7.1.4 Очистка хлористого метилена
Хлористый метилен промывают равным объемом 5%-го раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 ч. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.
7.2. Приготовление растворов для проведения анализа
7.2.1 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ
Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду, а также муравьиную кислоту.
В плоскодонную колбу объемом 1000 куб. см помещают 450 куб. см ацетонитрила, 550 куб. см очищенной воды и 1,0 куб. см муравьиной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.
7.2.2 Приготовление рабочих растворов
7.2.2.1 Приготовление 6 М раствора соляной кислоты.
Мерным цилиндром отбирают 246 куб. см концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 500 куб. см, куда предварительно наливают около 100 куб. см дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
7.2.2.2 Приготовление 1 М раствора гидроокиси натрия.
Переносят в мерную колбу на 500 куб. см 20 г гидроокиси натрия, добавляют 200 — 300 куб. см дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
7.2.2.3. Приготовление 0,05 М раствора двузамещенного фосфорнокислого калия.
Переносят в мерную колбу на 500 куб. см 5,7 г K HPO х 3H O и 50 г 2 4 2 NaCl, добавляют 200 - 300 куб. см бидистиллированной воды, перемешивают до полного растворения солей, проверяют pH полученного раствора. Если pH
раствора менее 9, доводят его до указанного значения с помощью 1 М раствора гидроокиси натрия, контролируя pH. После достижения нужного значения pH объем доводят водой до метки.
7.2.3 Приготовление градуировочных растворов
7.2.3.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией Ципросульфамида 1,0 мг/куб. см.
Взвешивают 50 мг Ципросульфамида в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.3.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией Ципросульфамида 10,0 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.
7.2.3.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией Ципросульфамида 1,0 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор № 3 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
7.2.3.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией Ципросульфамида 0,5 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор № 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
7.2.3.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией Ципросульфамида 0,2 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор № 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
7.2.3.6. Стандартный раствор с концентрацией Ципросульфамида 0,1 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 при перемешивании. Стандартный раствор № 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике не более 30 суток.
7.2.3.7. Стандартные растворы Ципросульфамида с концентрацией 5,0; 2,0; 1,0; 0,4; и 0,2 мкг/куб. см для внесения в образцы.
Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 2 готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,0; 1,0; 0,4; и 0,2 мкг/куб. см и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы.
Методом последовательного разведения ацетоном стандартного раствора № 2 готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/куб. см и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы зерна и масла.
7.3. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Ципросульфамида в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.6. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на ней
7.4.1 Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 куб. см ацетонитрила.
7.4.2 Проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на колонке с окисью алюминия
В концентратор объемом 100 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Ципросульфамида в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха при температуре не выше 30 °C, растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют. Исходную колбу обмывают тремя порциями смеси ацетонитрил — ледяная уксусная кислота в соотношении 99:1 объемом 10 куб. см каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентратор и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
Определяют фракции, содержащие Ципросульфамид, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.
Изучение поведения Ципросульфамида на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.
7.5. Подготовка концентрирующих патронов Диапак С для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на них
7.5.1 Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки экстракта
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1-2 кап./с).
Патрон Диапак С устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетона, 5 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.5.2 Проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на концентрирующем патроне Диапак С
Из стандартного раствора Ципросульфамида в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 и 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:0,1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие Ципросульфамид, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Изучение поведения Ципросульфамида на концентрирующих патронах Диапак С проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
7.6. Подготовка концентрирующих патронов Диапак Диол для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на них
7.6.1 Подготовка концентрирующего патрона Диапак Диол для очистки экстракта
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1-2 кап./с).
Патрон Диапак Диол устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 5 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:3 и 5 куб. см гексана. Элюаты отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.6.2 Проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на концентрирующем патроне Диапак Диол
Из стандартного раствора Ципросульфамида в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 куб. см гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и тремя порциями по 10, 5 и 5 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие Ципросульфамид, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Изучение поведения Ципросульфамида на концентрирующих патронах Диапак Диол проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
7.7. Подготовка концентрирующего патрона Диапак Амин для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на них
7.7.1 Подготовка концентрирующего патрона Диапак Амин для очистки экстракта
Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1-2 кап./с).
Патрон Диапак Амин устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетона, 5 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Элюаты отбрасывают.
Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
7.7.2 Проверка хроматографического поведения Ципросульфамида на концентрирующем патроне Диапак Амин
Из стандартного раствора Ципросульфамида в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см гексана с ацетоном в соотношении 2:1, 10 куб. см гексана с ацетоном в соотношении 1:1, 10 куб. см ацетона, 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:0,1, 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:1. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и хроматографируют.
Определяют фракции, содержащие Ципросульфамид, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
Изучение поведения Ципросульфамида на концентрирующих патронах Диапак Амин проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии патронов.
7.8. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии
Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Symmetry C8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °C и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. в течение 3 — 4 ч.
8. Отбор проб и хранение
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 17.4.3.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 28168-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 13586.3-83 «Зерно. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ 8808-2000 «Масло кукурузное, ТУ» и ГОСТ Р 52062-2003 «Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб».
Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C; пробы почвы — в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C.
Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Зеленую массу кукурузы хранят в морозильной камере при температуре -18 °C.
Отобранные пробы зерна кукурузы подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов. Перед анализом пробы зерна кукурузы измельчают на лабораторной мельнице.
Пробы кукурузного масла хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 0 — 4 °C.
9. Подготовка проб и выполнение измерений
Анализ образцов должен быть выполнен в течение одного дня.
9.1. Вода
9.1.1 Экстракция
Пробу воды объемом 100 куб. см помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют туда 10 г хлористого натрия, 1 куб. см 6 М соляной кислоты до pH 1 и перемешивают до полного растворения соли. Ципросульфамид экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 куб. см, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 5 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
9.2. Почва
9.2.1 Экстракция и очистка полученного экстракта
Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют туда 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин. на скорости 4000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через фильтр «красная лента» в делительную воронку объемом 250 куб. см. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Пробы центрифугируют, экстракты фильтруют и объединяют в делительной воронке объемом 250 куб. см.
Объединенный ацетонитрильный экстракт в делительной воронке промывают двумя порциями гексана объемом по 50 куб. см, каждый раз интенсивно встряхивая воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний гексановый слой отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
9.2.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.2.1, прибавляют 5 куб. см ацетона, 50 куб. см щелочного буфера pH 9, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Полученную смесь промывают двумя порциями по 30 куб. см хлористого метилена, интенсивно встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой (хлористый метилен) отбрасывают. Водную фракцию в делительной воронке подкисляют 6 М соляной кислотой до pH 2. Ципросульфамид экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 20 куб. см, каждый раз интенсивно встряхивая воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
9.2.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С
Сухой остаток, полученный по п. 9.2.2, растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на заранее подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, элюат отбрасывают. Ципросульфамид элюируют 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:0,1. Элюат собирают в концентратор объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
9.3. Зерно кукурузы
9.3.1 Экстракция и очистка полученного экстракта
Образец измельченного зерна кукурузы массой 20 г помещают в плоскодонную колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 50 куб. см ацетонитрила, помещают в микроволновую печь и нагревают 1 мин. при мощности 350 ватт. Ацетонитрильный экстракт декантируют в полипропиленовую банку для центрифугирования объемом 200 куб. см. Экстракцию повторяют еще 2 раза в тех же условиях и с тем же количеством растворителя. Экстракты объединяют и центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4000 оборотов в минуту. Экстракт фильтруют в делительную воронку объемом 250 куб. см.
К ацетонитрильному экстракту прибавляют 50 куб. см гексана и встряхивают делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) отбрасывают, а нижний слой (ацетонитрил) возвращают в делительную воронку и повторяют процедуру еще раз, используя 50 куб. см гексана. Нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
9.3.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
Сухой остаток, полученный по п. 9.3.1, растворяют в 5 куб. см ацетона и проводят очистку по п. 9.2.2 «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей».
9.3.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С
Сухой остаток, полученный по п. 9.3.2, растворяют в 2 куб. см ацетона и проводят очистку на концентрирующих патронах Диапак С по п. 9.2.3 «Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С».
9.3.4 Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия
Сухой остаток в концентраторе, полученный по п. 9.3.2, растворяют в 10 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора, наносят на заранее подготовленную колонку, элюат отбрасывают. Исходную колбу обмывают тремя порциями по 10 куб. см смеси ацетонитрила с ледяной уксусной кислотой в соотношении 99:1 и вносят на колонку. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
9.4. Зеленая масса кукурузы
9.4.1 Экстракция и очистка полученного экстракта
Образец измельченной зеленой массы кукурузы массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют 50 куб. см ацетонитрила, помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Ацетонитрильный экстракт фильтруют через фильтр «красная лента» в делительную воронку объемом 250 куб. см. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см ацетонитрила и помещая на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 5 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в делительной воронке объемом 250 куб. см.
К ацетонитрильному экстракту прибавляют 50 куб. см гексана и встряхивают делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) отбрасывают, а нижний слой (ацетонитрил) возвращают в делительную воронку и повторяют процедуру еще раз, используя 50 куб. см гексана. Нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
9.4.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
Сухой остаток, полученный по п. 9.4.1, растворяют в 5 куб. см ацетона и проводят очистку по п. 9.2.2 «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей».
9.4.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С
Сухой остаток, полученный по п. 9.4.2, растворяют в 2 куб. см ацетона и проводят очистку на концентрирующих патронах Диапак С по п. 9.2.3 «Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С».
9.4.4 Очистка экстракта на колонках с окисью алюминия
Сухой остаток, полученный по п. 9.4.3, растворяют в 10 куб. см ацетонитрила и проводят очистку на колонках с окисью алюминия по п. 9.3.4 «Очистка экстракта на колонках с окисью алюминия».
9.4.5 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Диол
Сухой остаток, полученный по п. 9.4.4, растворяют в 1 куб. ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 5 куб. см гексана, перемешивают и вносят на заранее подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1, элюат отбрасывают. Ципросульфамид элюируют 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
9.4.6 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Амин
Сухой остаток, полученный по п. 9.4.5, растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 куб. см гексана, перемешивают и вносят на заранее подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1, 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1, 10 куб. см ацетона, 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:0,1, все элюаты отбрасывают. Ципросульфамид элюируют 10 куб. см смеси гексана и ацетона с ледяной уксусной кислотой в соотношении 50:50:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
9.5. Масло кукурузы
9.5.1 Экстракция
Из пробы кукурузного масла отбирают в стакан навеску массой 20 г и переносят ее в делительную воронку объемом 250 куб. см тремя порциями гексана объемом по 30 куб. см. Ципросульфамид экстрагируют тремя порциями ацетонитрила объемом по 50 куб. см, встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см. Верхний слой (гексан) отбрасывают.
Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.2 «Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей», по п. 9.2.3 «Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С», по п. 9.3.4 «Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия» и по п. 9.4.5 «Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Диол».
После очистки элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
9.6. Условия хроматографирования
Хроматограф жидкостной Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации № 15311-02 или другой с аналогичными характеристиками.
Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм х 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters».
Предколонка стальная Symmetry C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters».
Подвижная фаза: ацетонитрил — вода — муравьиная кислота в соотношении 450:550:1.
Время удерживания Ципросульфамида: 7,143 мин. +/- 2%.
Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
Чувствительность не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 — 20 нг.
10. Обработка результатов
Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Millenium 3.05.01.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание Ципросульфамида рассчитывают по формуле:
S х A х V
пр
X = ------------- х P, 100 х S х m ст
где:
X - содержание Ципросульфамида в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
S - высота (площадь) пика стандарта, мм;
ст
S - высота (площадь) пика образца, мм;
пр
A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
P - содержание Ципросульфамида в аналитическом стандарте, %.
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 |X - X | х 100
1 2
----------------- <= r, (1)
(X + X )
1 2
где:
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг;
1 2
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 х сигма . r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
_
(X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг при вероятности P = 0,95,
где:
_
X - среднее арифметическое результатов определений, признанных
приемлемыми, мг/кг; ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
_
дельта х X
где дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг» <*>.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки C должна удовлетворять условию: д
C = ДЕЛЬТА _ + ДЕЛЬТА _ , д л,X л,X' где +/- ДЕЛЬТА _ (+/- ДЕЛЬТА _ ) - характеристика погрешности л,X л,X' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;
_
дельта х X
дельта - граница относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры К рассчитывают по формуле: к
_ _ К = X' - X - C , к д _ _ где X', X, C - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
______________________
/ 2 2 К = \/ ДЕЛЬТА _ + ДЕЛЬТА _. л,X' л,X Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
к
контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 |X - X | х 100
1 2
----------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
где:
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
1 2
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
табл. 1), %.
14. Разработчики
Российский государственный аграрный университет — МСХА им. К.А. Тимирязева.
Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов».