--- title: "\"МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.2889-11" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2889-11" --- ## "МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания" # "МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания" (утв. Роспотребнадзором 06.07.2011) > [!IMPORTANT] > Документ [введен](#p100002) в действие с 6 июля 2011 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
6 июля 2011 года
#### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИС(2-ЭТИЛГЕКСИЛ)ФТАЛАТА** **В ЖИДКИХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2889-11**
Дата введения:
с момента утверждения
1. Разработаны ГУ НИИ питания РАМН. 2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. 3. Утверждены и введены в действие руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 6 июля 2011 года. 4. Введены впервые. ## Область применения Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором для определения массовых концентраций бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах (бутилированная вода, безалкогольные напитки, соковая продукция) в диапазоне 0,1 - 1000,0 мг/кг. Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и других служб, осуществляющих надзор (контроль) качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы другими лабораторными центрами, аккредитованными в установленном порядке. ## 1. Краткая характеристика бис(2-этилгексил)фталата Общепринятое название: бис(2-этилгексил)фталат. Название по номенклатуре ИЮПАК: бис(2-этилгексиловый) эфир 1,2-бензолдикарбоновой кислоты. Синонимы: бис-(изооктил)фталат, ВЕНР. Структурная формула (не приводится). Эмпирическая формула: С Н3 О . 24 8 4 Молекулярная масса: 390,56. Номер CAS: 117-81-7. Физические свойства: бесцветная или слегка желтоватая жидкость, температура плавления - 55 °С, температура кипения 384 °С, плотность D 0,981 г/куб. см при 25 °С. Практически нерастворим в воде (0,285 мг в 1 л при 24 °С), растворим в гексане, хлористом метилене, трихлортрифторэтилене и других органических растворителях. В промышленности бис(2-этилгексил)фталат (далее - БЭГФ) используют в качестве пластификатора для пластмасс на основе поливинилхлорида для получения гибкости полимерных продуктов. Поливинилхлоридные пластмассы могут содержать от 1 до 40% БЭГФ. БЭГФ относится к 3-й группе токсичности. Европейское агентство по безопасности пищи (EFSA) оценило уровень, при котором отсутствуют наблюдаемые вредные эффекты (NOAEL), в 5 мг на 1 кг веса тела в день. С учетом дополнительного коэффициента безопасности (100) допустимый уровень суточного воздействия (TDI) установлен в 0,05 мкг/куб. дм веса тела, что эквивалентно 0,003 - 0,004 мкг/куб. дм веса тела/сутки. В Российской Федерации согласно СанПиН 2.1.4.1116-02 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества" нормативами качества воды по показателю ди(2-этилгексил)фталата являются для воды первой категории 6 мкг/куб. дм; для воды высшей категории - 0,1 мкг/куб. дм. ## 2. Методика определения бис(2-этилгексил)фталата в воде, безалкогольных напитках и соковой продукции методом капиллярной газожидкостной хроматографии с пламенно-ионизационным и масс-спектрометрическим детектором ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип методики Методика основана на определении бис(2-этилгексил)фталата методом капиллярной газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ) с использованием пламенно-ионизационного детектора (ПИД) или масс-спектрометрического детектора (далее - МС) после экстракции водного раствора гексаном (в случае воды) и перегонки с водяным паром и экстракции гексаном из водного дистиллята (в случае безалкогольных напитков и соковой продукции). Для количественного определения применен метод внутреннего стандарта, в качестве которого используется дейтерированный аналог 4 бис-(н-гексил)-фталат-d (БГФ-d). ##### 2.1.2 Метрологические характеристики методики
Таблица 1
**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ**
**ПРИ АНАЛИЗЕ ВОДЫ**
Метрологические характеристикиДиапазон концентраций БЭГФ в пробе
0,05 - 50,0 мкг/куб. дм50 - 5000 мкг/куб. дм
Предел повторяемости (r), %19,215,5
Предел воспроизводимости (R ), % r23,219,3
Относительная систематическая погрешность измерений (+/- дельта), %, Р = 0,9516,913,8
Примечание: метрологические характеристики рассчитаны для образцов с содержанием бис(2-этилгексил)фталата 1,0 и 500,0 мкг/куб. дм.
Таблица 2
**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ**
**ПРИ АНАЛИЗЕ БЕЗАЛКОГОЛЬНЫХ НАПИТКОВ И СОКОВОЙ ПРОДУКЦИИ**
Метрологические характеристикиДиапазон концентраций БЭГФ в пробе
1 - 100 мкг/куб. дм100 - 5000 мкг/куб. дм
Предел повторяемости (r), %19,917,8
Предел воспроизводимости (R ), % r24,521,6
Относительная систематическая погрешность измерений (+/- дельта), %, Р = 0,9517,515,7
Примечание: метрологические характеристики рассчитаны для образцов с содержанием бис(2-этилгексил)фталата 10 и 500 мкг/куб. дм.
### 2.2. Реактивы Бис(2-этилгексил)фталат, кат. N 48557, подобные производства фирмы "Sigma-Aldrich" или с аналогичными характеристиками 4 Бис(н-гексил)фталат-d , кат. N 34167, подобные производства фирмы "Riedel-de Haen" - внутренний стандарт или с аналогичными характеристиками Гексан, ч ТУ 6-09-3534-74 Дихлорметан (хлористый метилен), осч Натрий хлористый Натрий серно-кислый безводный, хч ГОСТ 199-68 Вода бидистиллированная ГОСТ 6709 (в стеклянной посуде) ### 2.3. Приборы, оборудование, посуда
Система капиллярной ГЖХ с пламенно-
ионизационным детектором (ПИД) Система капиллярной ГЖХ с квадрупольным масс-спектрометром Микрошприц МШ-10 для жидкостной хроматографии или аналогичный Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С или аналогичный ТУ 64-1-2451-78 Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 200 г и погрешностью +/- 0,0001 г ГОСТ 24104 Колбы плоскодонные с конусом 14/23 объемом 100 куб. см ГОСТ 25336 Цилиндры вместимостью 100 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-25 или 5-2-25 [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) Вайл (емкость 4 - 6 куб. см с герметично завинчивающейся крышкой) Фильтры беззольные ФО-ФС-15 "Синяя лента" ТУ 2642-001-42624157-98 Допускается использование приборов и посуды с метрологическими характеристиками и реактивов квалификацией не ниже указанных в МУК. Все растворители перед проведением анализа следует перегонять с использованием только стеклянной лабораторной посуды. На дальнейших этапах используется только стеклянная лабораторная посуда, предварительно промытая перегнанным в стекле гексаном или хлористым метиленом. Для исключения возможности получения ложноположительных результатов на всех этапах проведения анализа экстракты не должны контактировать с пластиками. ### 2.4. Отбор проб Для учета специфики отбора проб отдельных видов продуктов следует руководствоваться действующей нормативно-технической документацией на конкретную продукцию. ### 2.5. Подготовка к определению ##### 2.5.1 Приготовление стандартных растворов бис(2-этилгексил)фталата и дейтерированного бис(н-гексил)фталата Навеску (0,01 +/- 0,001) г БЭГФ количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в 20 куб. см метиленхлорида, затем добавляют гексан до метки. Получают основной стандартный раствор БЭГФ в 100 куб. см смеси гексан-хлористый метилен (4:1) с концентрацией 100 мг/куб. дм. Аналогично готовят основной стандартный раствор внутреннего стандарта БГФ-d с концентрацией 100 мг/куб. дм. Рабочие растворы с концентрацией фталатов 1 мг/куб. дм (1 нг/куб. мм) готовят разбавлением в 100 раз гексаном стандартных растворов. Основной и рабочие стандартные растворы хранят в стеклянной посуде (мерной колбе) с притертой стеклянной пробкой в прохладном месте (при температуре около 0 °С). Сроки годности основного раствора - 9 месяцев, рабочих растворов - 1 месяц. ##### 2.5.2 Подготовка пробы для анализа ###### 2.5.2.1 Подготовка образца воды К 100 куб. см образца воды продукта добавляют 5 г сухого хлористого натрия. Добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 0,8 куб. см гексана, добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 2 мкг/куб. дм. Встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев из верхнего органического слоя вносят микрошприцем 1 - 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы. Количество БЭГФ в образце воды определяют по сравнению площади его пика с пиком внутреннего стандарта по калибровочной зависимости площади пиков анализируемого вещества и его дейтерированного аналога по формуле. При анализе воды высшей категории, где установленный уровень МДУ составляет 0,1 мкг/куб. дм, применяют следующий вариант подготовки пробы: к 1 куб. дм образца воды добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 9,8 куб. см гексана (добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 0,2 мкг/куб. дм). Смесь встряхивают, отделяют верхний гексановый слой и удаляют гексан в токе азота до объема примерно в 1,0 - 1,5 куб. см, вносят микрошприцем 1 - 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы. ###### 2.5.2.2 Подготовка образца безалкогольных напитков и соковой продукции В круглодонную перегонную колбу на 250 куб. см помещают 100 куб. см напитка, добавляют 5 г хлористого натрия и 0,2 куб. см (2 мкг/куб. дм БГФ-d в напитке) рабочего раствора внутреннего стандарта. Смесь нагревают на глицериновой бане до кипения, отгоняя 50 куб. см дистиллята. К водному дистилляту добавляют 1 куб. см гексана, встряхивают, после разделения слоев 1 - 2 куб. мм из верхнего органического слоя вносят в инжектор ГЖХ-системы. Далее анализируют по [пункту 2.5.2.1](#p100068). ### 2.6. Описание определения Образцы анализируют с помощью системы ГЖХ-ПИД. Разделение проводят на капиллярной колонке 30 m x 0,32 mm x 0,25 um, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-lms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель - азот, скорость потока до сброса - 40 - 42 мл/мин., входное давление - 15 psi. Температура инжектора 280 °С, режим ввода без разделения потока (splitless) газа-носителя, температура программируется от 60 до 280 °С со скоростью 20 °С/мин., температура детектора 300 °С. Примерное время выхода растворителя 1,2 - 1,4 мин., БЭГФ - около 11 мин., внутреннего стандарта БГФ-d - около 10 мин. Относительное приведенное время удерживания выхода БЭГФ по внутреннему стандарту составляет примерно 1,095 - 1,085. ГЖХ-ПИД должна обеспечивать уровень сигнала фталатов, превышающий шум в 3 раза, при вводе 0,05 нг БЭФГ или БГФ-d. ##### 2.6.1 Калибровка хроматографа Для градуировки в хроматограф из рабочих растворов БЭГФ и внутреннего стандарта с концентрацией 1 нг/куб. мм каждый готовят смеси. Калибровочная смесь N 1: к 1 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта, получая смесь с концентрацией каждого вещества 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:1. Калибровочная смесь N 2: к 0,5 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1,0 куб. см раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,25 нг/куб. мм и БГФ-d 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:2. Калибровочная смесь N 3: к 1,0 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 0,5 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,5 нг/куб. мм и БГФ-d 0,25 нг/куб. мм при соотношении стандартов 2:1. Вводят 1 - 2 куб. мм каждой смеси в ГЖХ-ПИД систему, определяют соотношения площадей пиков БЭГФ и внутреннего стандарта БГФ-d. Строят калибровочный график зависимости соотношения площадей на хроматограммах (S/S ) от соотношения концентраций БЭГФ и внутреннего сr стандарта БГФ-d (C/C ), определяя коэффициент К. ст ##### 2.6.2 ГЖХ-МС анализ Для подтверждения наличия БЭГФ используют систему ГЖХ-МС, основанную на Thermo Trace GC 200 газовом хроматографе, соединенном с квадрупольным масс-спектрометром DSQ II (подобного производства США), или аналогичную систему. Разделение проводят на капиллярной колонке 25 м х 0,32 мм х 0,25 мкм, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-1ms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель - гелий, скорость потока через колонку - 1 см/мин. Температура переходных линий - 250 °С, температура термостата колонки программируется от 60 до 280 °С со скоростью 10 см/мин, диапазон регистрируемых масс - от 40 до 450 а.е.м. Базовая масса БЭГФ - m/z = 149, другие характеристические ионы 113, 167 и 279. Базовая масса внутреннего стандарта БГФ-d - m/z = 153. ### 2.7. Обработка результатов измерения Содержание в образцах рассчитывают методом внутреннего стандарта по формуле: S обр. С = К х С х -----, ст. S ст. где: С - массовая концентрация БЭГФ, мкг/куб. дм; С - массовая концентрация добавленного внутреннего стандарта, ст. мкг/куб. дм; S обр. ----- - отношение площади пика БЭГФ в образце к площади пика S ст. внутреннего стандарта; К - калибровочный коэффициент, получаемый из калибровочной кривой [(пункт 2.6.1)](#p100076). За результат принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений и выражают с точностью до одного десятичного знака. ## 3. Оперативный контроль результатов измерений #### 3.1 Проверка приемлемости результатов параллельных определений Хроматографирование проб проводят не менее двух раз, сравнивают отношение площади пика исследуемого вещества к площади пика внутреннего стандарта БГФ-d. Допустимое расхождение между параллельными измерениями (R) определяют на основании предела повторяемости (r) [(табл. 1)](#p100029): _ R = 0,01 х (r, %) х X, мкг/куб. дм, _ где X - средняя концентрация двух определений С и С . 1 2 Если расхождение между параллельными определениями не превышает допустимого: |С - С | <= R, 1 2 то среднее арифметическое принимают за результат анализа. При превышении норматива R следует повторить измерения, используя новую пробу. ## 4. Требования техники безопасности При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф. ## 5. Требования к квалификации операторов Работу по указанной методике могут исполнять высококвалифицированные специалисты в области газожидкостной хроматографии и санитарной химии. Исполнители должны быть проинструктированы по основным мерам техники безопасности при работе с веществами 1 - 2-го класса опасности, органическими растворителями, а также по основным правилам безопасности при работе в химлаборатории [(п. 3)](#p100089). ## 6. Условия измерений Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с веществами 1 - 2-го класса опасности, органическими растворителями. Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционной системой согласно ГОСТ 12.4.021. Температура окружающего воздуха должна быть от 15 до 25 °С. Относительная влажность воздуха не более 80% при 25 °С. Атмосферное давление 730 - 760 мм рт. ст. Напряжение электропитания 210 - 220 В. Частота переменного тока 45 - 50 Гц. ---