МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания
Актуально на 31.10.2026.
Как цитировать: "МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания". МУК 4.1.2889-11. https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2889-11
(утв. Роспотребнадзором 06.07.2011)
Примечание
Документ введен в действие с 6 июля 2011 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
6 июля 2011 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИС(2-ЭТИЛГЕКСИЛ)ФТАЛАТА В ЖИДКИХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ
МУК 4.1.2889-11
с момента утверждения
1. Разработаны ГУ НИИ питания РАМН.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены и введены в действие руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 6 июля 2011 года.
Область применения
Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором для определения массовых концентраций бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах (бутилированная вода, безалкогольные напитки, соковая продукция) в диапазоне 0,1 — 1000,0 мг/кг.
Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и других служб, осуществляющих надзор (контроль) качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы другими лабораторными центрами, аккредитованными в установленном порядке.
1. Краткая характеристика бис(2-этилгексил)фталата
Общепринятое название: бис(2-этилгексил)фталат.
Название по номенклатуре ИЮПАК: бис(2-этилгексиловый) эфир 1,2-бензолдикарбоновой кислоты.
Синонимы: бис-(изооктил)фталат, ВЕНР.
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: С Н3 О . 24 8 4
Физические свойства: бесцветная или слегка желтоватая жидкость, температура плавления — 55 °С, температура кипения 384 °С, плотность D 0,981 г/куб. см при 25 °С. Практически нерастворим в воде (0,285 мг в 1 л при 24 °С), растворим в гексане, хлористом метилене, трихлортрифторэтилене и других органических растворителях.
В промышленности бис(2-этилгексил)фталат (далее — БЭГФ) используют в качестве пластификатора для пластмасс на основе поливинилхлорида для получения гибкости полимерных продуктов. Поливинилхлоридные пластмассы могут содержать от 1 до 40% БЭГФ. БЭГФ относится к 3-й группе токсичности. Европейское агентство по безопасности пищи (EFSA) оценило уровень, при котором отсутствуют наблюдаемые вредные эффекты (NOAEL), в 5 мг на 1 кг веса тела в день. С учетом дополнительного коэффициента безопасности (100) допустимый уровень суточного воздействия (TDI) установлен в 0,05 мкг/куб. дм веса тела, что эквивалентно 0,003 — 0,004 мкг/куб. дм веса тела/сутки. В Российской Федерации согласно СанПиН 2.1.4.1116-02 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества» нормативами качества воды по показателю ди(2-этилгексил)фталата являются для воды первой категории 6 мкг/куб. дм; для воды высшей категории — 0,1 мкг/куб. дм.
2. Методика определения бис(2-этилгексил)фталата в воде, безалкогольных напитках и соковой продукции методом капиллярной газожидкостной хроматографии с пламенно-ионизационным и масс-спектрометрическим детектором
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип методики
Методика основана на определении бис(2-этилгексил)фталата методом капиллярной газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ) с использованием пламенно-ионизационного детектора (ПИД) или масс-спектрометрического
детектора (далее — МС) после экстракции водного раствора гексаном (в случае
воды) и перегонки с водяным паром и экстракции гексаном из водного дистиллята (в случае безалкогольных напитков и соковой продукции). Для количественного определения применен метод внутреннего стандарта, в качестве которого используется дейтерированный аналог
4
бис-(н-гексил)-фталат-d (БГФ-d).
2.1.2 Метрологические характеристики методики
ПРИ АНАЛИЗЕ ВОДЫ
| Метрологические характеристики | Диапазон концентраций БЭГФ в пробе | |
| 0,05 — 50,0 мкг/куб. дм | 50 — 5000 мкг/куб. дм | |
| Предел повторяемости (r), % | 19,2 | 15,5 |
| Предел воспроизводимости (R ), % r | 23,2 | 19,3 |
| Относительная систематическая погрешность измерений (+/- дельта), %, Р = 0,95 | 16,9 | 13,8 |
| Примечание: метрологические характеристики рассчитаны для образцов с содержанием бис(2-этилгексил)фталата 1,0 и 500,0 мкг/куб. дм. | ||
ПРИ АНАЛИЗЕ БЕЗАЛКОГОЛЬНЫХ НАПИТКОВ И СОКОВОЙ ПРОДУКЦИИ
| Метрологические характеристики | Диапазон концентраций БЭГФ в пробе | |
| 1 — 100 мкг/куб. дм | 100 — 5000 мкг/куб. дм | |
| Предел повторяемости (r), % | 19,9 | 17,8 |
| Предел воспроизводимости (R ), % r | 24,5 | 21,6 |
| Относительная систематическая погрешность измерений (+/- дельта), %, Р = 0,95 | 17,5 | 15,7 |
| Примечание: метрологические характеристики рассчитаны для образцов с содержанием бис(2-этилгексил)фталата 10 и 500 мкг/куб. дм. | ||
2.2. Реактивы
Бис(2-этилгексил)фталат, кат. № 48557, подобные производства фирмы «Sigma-Aldrich» или с аналогичными характеристиками 4
Бис(н-гексил)фталат-d , кат. № 34167, подобные производства фирмы «Riedel-de Haen» — внутренний стандарт или с аналогичными характеристиками
Дихлорметан (хлористый метилен), осч
Натрий серно-кислый безводный, хч ГОСТ 199-68
Вода бидистиллированная ГОСТ 6709 (в стеклянной посуде)
2.3. Приборы, оборудование, посуда
ионизационным детектором (ПИД)
Система капиллярной ГЖХ с квадрупольным масс-спектрометром
Микрошприц МШ-10 для жидкостной хроматографии или аналогичный
Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С или аналогичный ТУ 64-1-2451-78
Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 200 г и погрешностью +/- 0,0001 г ГОСТ 24104
Колбы плоскодонные с конусом 14/23 объемом 100 куб. см ГОСТ 25336
Цилиндры вместимостью 100 куб. см ГОСТ 1770
Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-25 или 5-2-25 ГОСТ 29227
Вайл (емкость 4 — 6 куб. см с герметично завинчивающейся крышкой) Фильтры беззольные ФО-ФС-15 «Синяя лента» ТУ 2642-001-42624157-98
Допускается использование приборов и посуды с метрологическими характеристиками и реактивов квалификацией не ниже указанных в МУК.
Все растворители перед проведением анализа следует перегонять с использованием только стеклянной лабораторной посуды. На дальнейших этапах используется только стеклянная лабораторная посуда, предварительно промытая перегнанным в стекле гексаном или хлористым метиленом. Для исключения возможности получения ложноположительных результатов на всех этапах проведения анализа экстракты не должны контактировать с пластиками.
2.4. Отбор проб
Для учета специфики отбора проб отдельных видов продуктов следует руководствоваться действующей нормативно-технической документацией на конкретную продукцию.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1 Приготовление стандартных растворов бис(2-этилгексил)фталата и дейтерированного бис(н-гексил)фталата
Навеску (0,01 +/- 0,001) г БЭГФ количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в 20 куб. см метиленхлорида, затем добавляют гексан до метки. Получают основной стандартный раствор БЭГФ в 100 куб. см смеси гексан-хлористый метилен (4:1) с концентрацией 100 мг/куб. дм. Аналогично готовят основной стандартный раствор внутреннего стандарта БГФ-d с концентрацией 100 мг/куб. дм. Рабочие растворы с концентрацией фталатов 1 мг/куб. дм (1 нг/куб. мм) готовят разбавлением в 100 раз гексаном стандартных растворов. Основной и рабочие стандартные растворы хранят в стеклянной посуде (мерной колбе) с притертой стеклянной пробкой в прохладном месте (при температуре около 0 °С). Сроки годности основного раствора — 9 месяцев, рабочих растворов — 1 месяц.
2.5.2 Подготовка пробы для анализа
2.5.2.1 Подготовка образца воды
К 100 куб. см образца воды продукта добавляют 5 г сухого хлористого натрия. Добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 0,8 куб. см гексана, добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 2 мкг/куб. дм.
Встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев из верхнего органического слоя вносят микрошприцем 1 — 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы. Количество БЭГФ в образце воды определяют по сравнению площади его пика с пиком внутреннего стандарта по калибровочной зависимости площади пиков анализируемого вещества и его дейтерированного аналога по формуле.
При анализе воды высшей категории, где установленный уровень МДУ составляет 0,1 мкг/куб. дм, применяют следующий вариант подготовки пробы: к 1 куб. дм образца воды добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 9,8 куб. см гексана (добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 0,2 мкг/куб. дм). Смесь встряхивают, отделяют верхний гексановый слой и удаляют гексан в токе азота до объема примерно в 1,0 — 1,5 куб. см, вносят микрошприцем 1 — 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы.
2.5.2.2 Подготовка образца безалкогольных напитков и соковой продукции
В круглодонную перегонную колбу на 250 куб. см помещают 100 куб. см напитка, добавляют 5 г хлористого натрия и 0,2 куб. см (2 мкг/куб. дм БГФ-d в напитке) рабочего раствора внутреннего стандарта. Смесь нагревают на глицериновой бане до кипения, отгоняя 50 куб. см дистиллята. К водному дистилляту добавляют 1 куб. см гексана, встряхивают, после разделения слоев 1 — 2 куб. мм из верхнего органического слоя вносят в инжектор ГЖХ-системы. Далее анализируют по пункту 2.5.2.1.
2.6. Описание определения
Образцы анализируют с помощью системы ГЖХ-ПИД. Разделение проводят на капиллярной колонке 30 m x 0,32 mm x 0,25 um, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-lms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель — азот, скорость потока до сброса — 40 — 42 мл/мин., входное давление — 15 psi. Температура инжектора 280 °С, режим ввода без разделения потока (splitless) газа-носителя, температура программируется от 60 до 280 °С со скоростью 20 °С/мин., температура детектора 300 °С. Примерное время выхода растворителя 1,2 — 1,4 мин., БЭГФ — около 11 мин., внутреннего стандарта БГФ-d — около 10 мин. Относительное приведенное время удерживания выхода БЭГФ по внутреннему стандарту составляет примерно 1,095 — 1,085. ГЖХ-ПИД должна обеспечивать уровень сигнала фталатов, превышающий шум в 3 раза, при вводе 0,05 нг БЭФГ или БГФ-d.
2.6.1 Калибровка хроматографа
Для градуировки в хроматограф из рабочих растворов БЭГФ и внутреннего стандарта с концентрацией 1 нг/куб. мм каждый готовят смеси.
Калибровочная смесь № 1: к 1 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта, получая смесь с концентрацией каждого вещества 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:1.
Калибровочная смесь № 2: к 0,5 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1,0 куб. см раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,25 нг/куб. мм и БГФ-d 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:2.
Калибровочная смесь № 3: к 1,0 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 0,5 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,5 нг/куб. мм и БГФ-d 0,25 нг/куб. мм при соотношении стандартов 2:1.
Вводят 1 — 2 куб. мм каждой смеси в ГЖХ-ПИД систему, определяют соотношения площадей пиков БЭГФ и внутреннего стандарта БГФ-d.
Строят калибровочный график зависимости соотношения площадей на хроматограммах (S/S ) от соотношения концентраций БЭГФ и внутреннего
сr
стандарта БГФ-d (C/C ), определяя коэффициент К. ст
2.6.2 ГЖХ-МС анализ
Для подтверждения наличия БЭГФ используют систему ГЖХ-МС, основанную на Thermo Trace GC 200 газовом хроматографе, соединенном с квадрупольным масс-спектрометром DSQ II (подобного производства США), или аналогичную систему. Разделение проводят на капиллярной колонке 25 м х 0,32 мм х 0,25 мкм, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-1ms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель — гелий, скорость потока через колонку — 1 см/мин. Температура переходных линий — 250 °С, температура термостата колонки программируется от 60 до 280 °С со скоростью 10 см/мин, диапазон регистрируемых масс — от 40 до 450 а.е.м. Базовая масса БЭГФ — m/z = 149, другие характеристические ионы 113, 167 и 279. Базовая масса внутреннего стандарта БГФ-d — m/z = 153.
2.7. Обработка результатов измерения
Содержание в образцах рассчитывают методом внутреннего стандарта по формуле:
S
обр.
С = К х С х -----, ст. S
ст.
где:
С - массовая концентрация БЭГФ, мкг/куб. дм;
С - массовая концентрация добавленного внутреннего стандарта,
ст.
мкг/куб. дм; S обр. ----- — отношение площади пика БЭГФ в образце к площади пика S ст. внутреннего стандарта; К — калибровочный коэффициент, получаемый из калибровочной кривой (пункт 2.6.1).
За результат принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений и выражают с точностью до одного десятичного знака.
3. Оперативный контроль результатов измерений
3.1 Проверка приемлемости результатов параллельных определений
Хроматографирование проб проводят не менее двух раз, сравнивают отношение площади пика исследуемого вещества к площади пика внутреннего стандарта БГФ-d.
Допустимое расхождение между параллельными измерениями (R) определяют на основании предела повторяемости (r) (табл. 1):
_
R = 0,01 х (r, %) х X, мкг/куб. дм,
_
где X - средняя концентрация двух определений С и С .
1 2
Если расхождение между параллельными определениями не превышает
допустимого:
то среднее арифметическое принимают за результат анализа.
При превышении норматива R следует повторить измерения, используя новую пробу.
4. Требования техники безопасности
При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
5. Требования к квалификации операторов
Работу по указанной методике могут исполнять высококвалифицированные специалисты в области газожидкостной хроматографии и санитарной химии. Исполнители должны быть проинструктированы по основным мерам техники безопасности при работе с веществами 1 — 2-го класса опасности, органическими растворителями, а также по основным правилам безопасности при работе в химлаборатории (п. 3).
6. Условия измерений
Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с веществами 1 — 2-го класса опасности, органическими растворителями. Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционной системой согласно ГОСТ 12.4.021.
Температура окружающего воздуха должна быть от 15 до 25 °С. Относительная влажность воздуха не более 80% при 25 °С. Атмосферное давление 730 — 760 мм рт. ст. Напряжение электропитания 210 — 220 В. Частота переменного тока 45 — 50 Гц.