---
title: "\"МУК 4.1.2866-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Хлорантранилипрола в плодовых (косточковых) культурах, перце, огурцах, томатах, ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2866-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2866-11"
---

## "МУК 4.1.2866-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Хлорантранилипрола в плодовых (косточковых) культурах, перце, огурцах, томатах, ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2866-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Хлорантранилипрола в плодовых (косточковых) культурах, перце, огурцах, томатах, ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 31.03.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 31 марта 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
31 марта 2011 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ХЛОРАНТРАНИЛИПРОЛА**
**В ПЛОДОВЫХ (КОСТОЧКОВЫХ) КУЛЬТУРАХ, ПЕРЦЕ, ОГУРЦАХ, ТОМАТАХ,**
**ЯГОДАХ И СОКЕ ВИНОГРАДА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.2866-11**

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 28.12.2010 N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 31 марта 2011 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## <a id="p100011"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики от 28.09.2010 N 0050.27.09.10.
<a id="p100013"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций Хлорантранилипрола в плодовых косточковых культурах, перце, огурцах, томатах, ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

<a id="p100014"></a>Хлорантранилипрол

<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 3-Бром-N-[4-хлор-2-метил-6-(метилкарбамоил)фенил]-1-(3-хлорпиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-карбоксамид.
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C  H  BrCl N O .
                           18 14    2 5 2
<a id="p100018"></a>    Молекулярная масса: 483,15.
<a id="p100019"></a>    Порошок  белого  цвета  без запаха. Температура плавления 208 - 210 °С.
                           -12                            -11
Давление  паров  6,3  х  10     Па  при  20  °С;  2,1 х 10    Па при 25 °С.
Растворимость  в органических растворителях при 20 °С (в г/куб. дм): ацетон
-  3,446;  ацетонитрил - 0,711; диметилформамид - 124; дихлорметан - 2,476;
этилацетат  -  1,144;  метанол  -  1,714; толуол - 0,32; н-октанол - 0,386;
н-гексан < 0,0001. Растворимость в воде при 20 °С (в мг/куб. дм): 0,972 (pH
4),  0,880  (pH  7), 0,971 (pH 9). Коэффициент распределения н-октанол/вода
K   log P = 2,76.
 ow
<a id="p100020"></a>    Краткая    токсикологическая    характеристика:    Острая   пероральная
токсичность  (LD  )  для крыс и мышей - более 5000 мг/кг; острая дермальная
                50
токсичность  (LD  )  для  крыс  -  более  5000  мг/кг; острая ингаляционная
                50
токсичность (LC  ) для крыс - более 5,1 г/куб. дм (4 ч).
               50
<a id="p100021"></a>Область применения: Хлорантранилипрол - инсектицид широкого спектра действия класса антранилдиамидов, эффективно подавляет развитие вредителей из отряда чешуекрылых, жесткокрылых (колорадский жук), двукрылых (минеры).
<a id="p100022"></a>МДУ Хлорантранилипрола (в импортируемой продукции) в винограде, перце, плодовых (косточковых) - 1,0 мг/кг, томатах - 0,3 мг/кг, огурцах - 0,2 мг/кг.


## 1. <a id="p100023"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100024"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100025"></a>Таблица 1

<a id="p100026"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , r % | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Плодовые (косточковые) культуры | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 3,6 | 10 | 12 |
| Перец | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 3,9 | 11 | 13 |
| Огурцы | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 3,4 | 10 | 12 |
| Томаты | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 3,6 | 10 | 12 |
| Ягоды винограда | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 2,9 | 8 | 10 |
| Виноградный сок | от 0,01 до 0,1 вкл. | 50 | 2,6 | 7 | 8 |


<a id="p100034"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100035"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="21%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Полнота извлечения вещества, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Плодовые (косточковые) культуры</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>87,47</td><td>2,9</td><td>1,5</td></tr>
<tr><td>Перец</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,45</td><td>3,6</td><td>1,9</td></tr>
<tr><td>Огурцы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>90,70</td><td>3,2</td><td>1,7</td></tr>
<tr><td>Томаты</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>87,29</td><td>3,0</td><td>1,6</td></tr>
<tr><td>Ягоды винограда</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>87,09</td><td>3,6</td><td>1,9</td></tr>
<tr><td>Виноградный сок</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>91,33</td><td>2,7</td><td>1,4</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100043"></a>Метод измерений


<a id="p100044"></a>Метод основан на определении Хлорантранилипрола с использованием обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после извлечения вещества из анализируемых образцов ацетонитрилом, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с флорисилом.
<a id="p100045"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100046"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100047"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100048"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором
с переменной длиной волны фирмы "Agilent"                  Номер Госреестра
                                                           16193-06
<a id="p100049"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-2001
<a id="p100050"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100051"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-500-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100052"></a>Меры массы ГОСТ 7328-2001
<a id="p100053"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100054"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой
вместимостью 5 и 10 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100055"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью
25, 50, 100, 250, 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100056"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100057"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100058"></a>Хлорантранилипрол, аналитический стандарт
с содержанием действующего вещества 99,7%
(CAS No. 563-12-2)
<a id="p100059"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч                        ТУ 6-09-14-2167-84
<a id="p100060"></a>Вода для лабораторного анализа (деионизованная,
бидистиллированная) [ГОСТ Р 52501-2005](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005)
<a id="p100061"></a>н-Гексан (гексан) для ВЭЖХ                               ТУ 6-09-06-657-84
<a id="p100062"></a>Калий марганцово-кислый (перманганат калия), хч ГОСТ 20490-75
<a id="p100063"></a>Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч,
прокаленный [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100064"></a>Кальций хлористый (хлорид кальция), хч,
насыщенный водный раствор [ГОСТ 450-77](https://bukva.ai/docs/gost-450-77)
<a id="p100065"></a>Кислота ортофосфорная, хч, 85% ГОСТ 6552-80
<a id="p100066"></a>Кислота серная концентрированная, хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100067"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), хч [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100068"></a>Натрий сернокислый (сульфат натрия) безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100069"></a>Натрий углекислый (карбонат натрия), хч ГОСТ 83-79
<a id="p100070"></a>Натрий хлористый, хч, насыщенный водный раствор ГОСТ 4233-77
<a id="p100071"></a>Флорисил для колоночной хроматографии (60 - 100 меш)
фирм "SERVA", "MERK" (Германия) или аналогичный
<a id="p100072"></a>Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид
фосфора)                                                 ТУ 6-09-4173-85
<a id="p100073"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), хч [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
<a id="p100074"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией, не требующих выполнения [п. 7.1](#p100112) (очистка растворителей).


### <a id="p100075"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100076"></a>Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с              ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100077"></a>Баня ультразвуковая фирмы "Донау"
(Швейцария)
<a id="p100078"></a>Бумажные фильтры "красная лента"
обеззоленные или фильтры из
хроматографической бумаги Ватман 3ММ              ТУ 2642-001-05015242-07
<a id="p100079"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100080"></a>Воронка делительная вместимостью
250 и 1000 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100081"></a>Воронки стеклянные конусные типа В-36-80 ХС
и В-56-80 ХС ГОСТ 25336-82
<a id="p100082"></a>Гомогенизатор
<a id="p100083"></a>Груша резиновая                                   ТУ 9398-05-0576-9082-2003
<a id="p100084"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100085"></a>Колбы конические (плоскодонные) вместимостью
100, 250, 300 куб. см ГОСТ 23932-90
<a id="p100086"></a>Колбы круглодонные на шлифе (для упаривания)
вместимостью 10, 150 и 500 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100087"></a>Колонка стеклянная для препаративной
хроматографии длиной 25 см, внутренним
диаметром 10 - 12 мм
<a id="p100088"></a>Мембранные фильтры микропористые марки
ММК капроновые диаметром 50 мм, размер
пор 0,45 мкм                                      ТУ 9471-002-10471723-2003
<a id="p100089"></a>Набор для фильтрации растворителей через
мембрану
<a id="p100090"></a>Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 25336-82
<a id="p100091"></a>Стаканы химические вместимостью
100, 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100092"></a>Стекловата
<a id="p100093"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100094"></a>Ректификационная колонна с числом
теоретических тарелок не менее 30
<a id="p100095"></a>Ротационный вакуумный испаритель В-169
фирмы "Buchi", Швейцария
<a id="p100096"></a>Установка для перегонки растворителей
Хроматографическая колонка стальная длиной
150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм,
содержащая Eclipse XDB С18, зернение 5 мкм
<a id="p100097"></a>Центрифуга роторная, скорость вращения до
3500 об./мин., с центрифужными стаканами
объемом 100 куб. см
<a id="p100098"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа вместимостью 50 - 100 куб. мм
<a id="p100099"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100100"></a>Требования безопасности


<a id="p100101"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100102"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.


## 5. <a id="p100103"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100104"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 13](#p100202).
<a id="p100105"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100106"></a>Условия измерений


<a id="p100107"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100108"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100109"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100110"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100111"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, раствора внесения, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, приготовление смесей растворителей для очистки экстрактов на колонке, подготовка колонки с флорисилом, проверка хроматографического поведения Хлорантранилипрола на ней.


### <a id="p100112"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100113"></a>7.1.1 Ацетонитрил

<a id="p100114"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 куб. дм ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 куб. дм ацетонитрила 10 г карбоната калия).
<a id="p100115"></a>7.1.2. н-Гексан
<a id="p100116"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

##### <a id="p100117"></a>7.1.3 Хлористый метилен и этилацетат

<a id="p100118"></a>7.1.3.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%. Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 куб. см, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.
<a id="p100119"></a>7.1.3.2. Очистка растворителей. Каждый растворитель промывают последовательно 5%-ным водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.


### <a id="p100120"></a>7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100121"></a>7.2.1. Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,2% (0,2%-ный раствор). В мерную колбу вместимостью 500 куб. см помещают 250 - 300 куб. м бидистиллированной воды, вносят 1 куб. см ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.
<a id="p100122"></a>7.2.2. Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 500 куб. см ацетонитрила, вносят 500 куб. см 0,2%-го раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.


### <a id="p100123"></a>7.3. Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100124"></a>Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 7.2](#p100120)) при скорости подачи растворителя 0,8 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.


### <a id="p100125"></a>7.4. Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100126"></a>7.4.1. Исходный раствор Хлорантранилипрола для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г Хлорантранилипрола, растворяют в 50 - 70 куб. см ацетонитрила, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.
<a id="p100127"></a>Градуировочные растворы N 2 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.
<a id="p100128"></a>7.4.2. Раствор N 1 Хлорантранилипрола для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного раствора Хлорантранилипрола с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.4.1)](#p100126), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают.
<a id="p100129"></a>Раствор хранится в холодильнике не более месяца.
<a id="p100130"></a>Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено".
<a id="p100131"></a>7.4.3. Рабочие растворы N 2 - 5 Хлорантранилипрола для градуировки (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/куб. см).
<a id="p100132"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10 куб. см раствора N 1 Хлорантранилипрола с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.4.2)](#p100128), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.2](#p100120), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией Хлорантранилипрола 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100133"></a>Растворы хранятся в холодильнике не более недели.


### <a id="p100134"></a>7.5. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100135"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площадей пиков (мЕА х с) от концентрации Хлорантранилипрола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.
<a id="p100136"></a>В инжектор хроматографа вводят 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.3](#p100169). Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.
<a id="p100137"></a>Градуировочную характеристику проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значение площади отличается более чем на 12% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.


### <a id="p100138"></a>7.6. Приготовление смесей гексан - этилацетат для очистки экстрактов на колонке с флорисилом


<a id="p100139"></a>7.6.1. Смесь гексан - этилацетат (объемное соотношение 9:1). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 90 куб. см гексана и 10 куб. см этилацетата, перемешивают.
<a id="p100140"></a>7.6.2. Смесь гексан - этилацетат (объемное соотношение 8:2). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 80 куб. см гексана и 20 куб. см этилацетата, перемешивают.
<a id="p100141"></a>7.6.3. Смесь гексан - этилацетат (объемное соотношение 7:3). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 70 куб. см гексана и 30 куб. см этилацетата, перемешивают.


### <a id="p100142"></a>7.7. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстрактов


<a id="p100143"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г флорисила в 30 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, на который помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают смесью гексан - этилацетат в объемном соотношении 7:3, затем гексаном порциями по 30 куб. см, скорость прохождения растворителя 1 - 2 капли в секунду. Колонка готова к работе.


### <a id="p100144"></a>7.8. Проверка хроматографического поведения Хлорантранилипрола на колонке с флорисилом


<a id="p100145"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,5 куб. см раствора N 1 Хлорантранилипрола с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.4.2)](#p100128), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 3 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему), помещая на ультразвуковую баню на 40 - 60 с, и наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.7](#p100142). Колбу обмывают дважды этой же смесью растворителей порциями по 3 куб. см, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают колонку 50 куб. см гексана, смесями гексан - этилацетат в объемном соотношении 9:1, затем 8:2 порциями по 30 куб. см, элюат отбрасывают.
<a id="p100146"></a>Затем колонку промывают 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (7:3, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Фракционно (по 10 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ, анализируют содержание Хлорантранилипрола по [п. 9.3](#p100169).
<a id="p100147"></a>Фракции, содержащие Хлорантранилипрол, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100148"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100149"></a>Примечание: Проверку хроматографического поведения Хлорантранилипрола следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.


## 8. <a id="p100150"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100151"></a>Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами: [21920-76](https://bukva.ai/docs/gost-21920-76) "Слива и алыча крупноплодная свежие. ТУ"; [21833-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-21833-76) "Персики свежие. ТУ"; [21921-76](https://bukva.ai/docs/gost-21921-76) "Вишня свежая. ТУ"; [21922-76](https://bukva.ai/docs/gost-21922-76) "Черешня свежая. ТУ"; [21832-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-21832-76) "Абрикосы свежие. ТУ"; [21405-75](https://bukva.ai/docs/gost-21405-75) "Алыча мелкоплодная свежая. ТУ"; [1725-85](https://bukva.ai/docs/gost-1725-85) "Томаты свежие. ТУ"; [Р 51810-2001](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-r-51810-2001) "Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети. ТУ"; [1726-85](https://bukva.ai/docs/gost-1726-85) "Огурцы свежие. ТУ"; [13908-68](https://bukva.ai/docs/gost-13908-68) "Перец сладкий свежий. ТУ"; [25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый. ТУ", 28472-90 "Виноград свежий ручной уборки для консервирования. Требования при заготовках и поставках"; [26313-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84) "Продукты переработки плодов и овощей"; "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (от 21.08.1979 N 2051-1979).
<a id="p100152"></a>Отобранные пробы плодов косточковых культур, огурцов, томатов, перца, винограда, сока хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 5 дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.
<a id="p100153"></a>Перед анализом образцы плодов косточковых культур, огурцов, томатов, перца, ягод винограда измельчают с помощью гомогенизатора.


## 9. <a id="p100154"></a>Выполнение определения



### <a id="p100155"></a>9.1. Плодовые косточковые культуры, огурцы, томаты, перец, ягоды винограда



##### <a id="p100156"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100157"></a>Образец измельченных с помощью гомогенизатора плодов косточковых культур, огурцов, томатов, перца, ягод винограда массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 - 300 куб. см, вносят 20 куб. см бидистиллированной воды, помещают на аппарат для встряхивания на 20 мин. Добавляют 80 куб. см ацетонитрила, интенсивно встряхивают (или гомогенизируют) в течение 1 мин., затем помещают на аппарат для встряхивания на 30 мин.
<a id="p100158"></a>Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр "красная лента". Растительный остаток повторно экстрагируют 100 куб. см ацетонитрила при встряхивании в течение 30 мин., раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в колбу для упаривания на 500 куб. см и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С до объема 10 - 15 куб. см. Очищают перераспределением в системе несмешивающихся растворителей по [п. 9.1.2](#p100159), затем на колонке с флорисилом по [п. 9.1.3](#p100161).

##### <a id="p100159"></a>9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100160"></a>Водный остаток в колбе, полученный по [п. п. 9.1.1](#p100156) или [9.2.1](#p100165), переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см, колбу дополнительно обмывают 40 куб. см воды, которую также переносят в воронку, вносят 20 куб. см насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают. Затем в воронку вносят 30 куб. см дихлорметана, интенсивно встряхивают в течение 1 мин., после полного разделения фаз нижний дихлорметановый слой переносят в коническую колбу на 250 - 300 куб. см. Экстракцию Хлорантранилипрола повторяют еще дважды порциями дихлорметана объемом 30, затем 20 куб. см. Для обеспечения лучшего расслаивания проб раствор переносят в центрифужный стакан и центрифугируют 5 мин. при 3000 об./мин. Объединенный дихлорметановый экстракт фильтруют через слой (около 2 см) безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в химическую воронку, в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 150 куб. см, упаривают досуха и дополнительно очищают на колонке с флорисилом по п. 9.1.3.

##### <a id="p100161"></a>9.1.3 Очистка экстракта на колонке с флорисилом

<a id="p100162"></a>Остаток, полученный по [п. 9.1.2](#p100159), находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 3 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему), помещая на ультразвуковую баню на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.7](#p100142). Колбу обмывают дважды смесью гексан - этилацетат (9:1, по объему) порциями по 3 куб. см, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают колонку 50 куб. см гексана, 30 куб. см смеси гексан - этилацетат в объемном соотношении 9:1, затем 30 куб. см смеси гексан - этилацетат в объемном соотношении 8:2, элюат отбрасывают.
<a id="p100163"></a>Хлорантранилипрол элюируют с колонки 40 куб. см смеси гексан - этилацетат в объемном соотношении 7:3 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С, остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы и анализируют на содержание Хлорантранилипрола по [п. 9.3](#p100169).


### <a id="p100164"></a>9.2. Виноградный сок



##### <a id="p100165"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100166"></a>Пробу сока массой 20 г помещают в коническую колбу на 250 - 300 куб. см, добавляют 20 куб. см насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают, вносят 80 куб. см бидистиллированной воды, интенсивно встряхивают (или гомогенизируют) в течение 1 мин., затем помещают на аппарат для встряхивания на 30 мин.
<a id="p100167"></a>Пробу переносят в делительную воронку на 250 куб. см, после полного разделения слоев нижний водный слой собирают в колбу, в которой находилась проба, верхний переносят в колбу для упаривания на 500 куб. см, фильтруя через бумажный фильтр, помещенный в химическую воронку. В коническую колбу с пробой вносят новую порцию ацетонитрила объемом 100 куб. см и повторно экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Затем раствор переносят в делительную воронку на 250 куб. см, после полного разделения слоев нижний водный слой отбрасывают, верхний фильтруют через бумажный фильтр, помещенный в химическую воронку, и переносят в колбу для упаривания, объединяя с первой порцией экстракта.
<a id="p100168"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С до объема 10 - 15 куб. см. Очищают перераспределением в системе несмешивающихся растворителей по [п. 9.1.2](#p100159), затем на колонке с флорисилом по [п. 9.1.3](#p100161).


### <a id="p100169"></a>9.3. Условия хроматографирования


<a id="p100170"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны.
<a id="p100171"></a>Рабочие длины волн: 260 и 245 нм <*>.

<a id="p100172"></a>

---

<a id="p100173"></a><*> Хроматографирование пробы при двух длинах волн повышает надежность идентификации.

<a id="p100174"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Eclipse XDB С18, зернение 5 мкм.
<a id="p100175"></a>Температура колонки: 25 °С.
<a id="p100176"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,2%-ная ортофосфорная кислота (50:50, по объему).
<a id="p100177"></a>Скорость потока элюента: 0,8 куб. см/мин.
<a id="p100178"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100179"></a>Ориентировочное время выхода Хлорантранилипрола: 6,97 - 7,15 мин.
<a id="p100180"></a>Линейный диапазон детектирования 2 - 20 нг.
<a id="p100181"></a>Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площади пиков вещества (в мЕА х с), находят среднее значение, с помощью градуировочной характеристики определяют концентрацию Хлорантранилипрола в хроматографируемом растворе.
<a id="p100182"></a>Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.2](#p100120), не более чем в 50 раз.


## 10. <a id="p100183"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100184"></a>Содержание Хлорантранилипрола в пробе (Х, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                    С х V
<a id="p100185"></a>                                Х = -----,
                                      m

<a id="p100186"></a>где:
<a id="p100187"></a>С - концентрация Хлорантранилипрола, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/куб. см;
<a id="p100188"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100189"></a>m - масса анализируемого образца, г.


## 11. <a id="p100190"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100191"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100192"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100026), при этом r = 2,8 сигма .
                                                                        r
<a id="p100193"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100192) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100194"></a>Оформление результатов


<a id="p100195"></a>Результат анализа представляют в виде:

              _
<a id="p100196"></a>             (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100197"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100026)), %.
<a id="p100198"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100199"></a>"содержание Хлорантранилипрола в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100200"></a>

---

<div align="center">

<a id="p100201"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.

</div>



## 13. <a id="p100202"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100203"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100204"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100205"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100206"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100207"></a>                       С  >= ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д          л,Х         л,Х'

    где    +/- ДЕЛЬТА  _ (+/- ДЕЛЬТА  _ )  -   характеристика   погрешности
                     л,Х            л,Х'
(абсолютная погрешность) результатов  анализа,  соответствующая  содержанию
компонента в испытуемом образце (расчетному  значению содержания компонента
в образце с добавкой), мг/кг, при этом:

<a id="p100208"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100209"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, [табл. 1](#p100026)),
%.
<a id="p100210"></a>    Контрольный параметр процедуры (К ) рассчитывают по формуле:
                                     к

                                  _    _
<a id="p100211"></a>                             К  = Х' - Х - С ,
                              к             д

          _    _
    где   Х',  Х,   С  - среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                     д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100190)) содержания компонента в
образце    с    добавкой,    испытуемом   образце,   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100212"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100213"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,Х'         л,Х

<a id="p100214"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100215"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100216"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100217"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100216) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100218"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100219"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100220"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с  диапазоном определяемых

<div align="center">

концентраций, [табл. 1](#p100026)), %.

</div>



## 14. <a id="p100221"></a>Разработчики


<a id="p100222"></a>ФГУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора.



<a id="p100223"></a>

---