---
title: "\"МУК 4.1.2859-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2859-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2859-11"
---

## "МУК 4.1.2859-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2859-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 31.03.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 31 марта 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
31 марта 2011 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЕНПИРОКСИМАТА В ЯБЛОЧНОМ**
**СОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2859-11**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:<br>
с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 28.12.2010 N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 31 марта 2011 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


### <a id="p100011"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики от 01.12.2010 N 0062.30.11.10.
<a id="p100013"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/кг.
<a id="p100014"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100015"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК:
<a id="p100016"></a>Трет-бутил-(Е)-а-(1,3-диметил-5-феноксипиразол1-4-илметилена-мино-окси)-р-толуат.
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C  H  N O .
                           24 27 3 4
<a id="p100018"></a>Молекулярная масса: 421,5.
<a id="p100019"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100020"></a>Цвет, запах: белый без запаха.
<a id="p100021"></a>Давление паров: 0,0075 мПа (при 25 °С).
<a id="p100022"></a>    Коэффициент распределения октанол - вода: K   log P = 5,01 (при 20 °С).
                                               ow
<a id="p100023"></a>    Температура плавления: 101,1 - 102,4 °С.
                                                       -2
<a id="p100024"></a>    Растворимость в воде, мг/куб. дм (20 °С): 1,46 х 10  .
<a id="p100025"></a>Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 25 °С): ацетон - 150; дихлорметан - 1307; метанол - 15; хлороформ - 1197; тетрагидрофуран - 737.
<a id="p100026"></a>Стабилен в кислой и щелочной средах.
<a id="p100027"></a>    DT   в почве составляет 26,3 - 49,7 дня.
      50
<a id="p100028"></a>    Краткая  токсикологическая  характеристика:  Фенпироксимат  относится к
веществам  умеренно  опасным по острой пероральной (ЛД   для крыс от 245 до
                                                      50
480 мг/кг), малоопасным по дермальной токсичности (ЛД   для крыс более 2000
                                                     50
мг/кг), но чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК
                                                                         50
для  крыс (4 ч) от 330 до 360 мг/куб. м). Слегка раздражает глаза кроликов,
но  не  вызывает раздражения кожных покровов. В длительном опыте не выявлен
канцерогенный, тератогенный и мутагенный эффект.
<a id="p100029"></a>Область применения: Фенпироксимат - акарицид, который ингибирует митохондриальный транспорт электронов. Действует на стадиях личинок, нимф и взрослых особей. Применяется на посадках цитрусовых, яблок, персиков, груш, винограда в концентрации 25 - 75 г/га.
<a id="p100030"></a>Проходит регистрационные испытания на яблонях с нормой расхода 0,75 куб. дм/га.
<a id="p100031"></a>В России для Фенпироксимата установлены следующие гигиенические нормативы: МДУ в яблочном соке - 0,2 мг/кг.


### 1. <a id="p100032"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100033"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="right">

<a id="p100034"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100035"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ФЕНПИРОКСИМАТА**

</div>



| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Яблочный сок | 0,1 - 1,0 вкл. | 25 | 2,24 | 6,22 | 7,40 |


<a id="p100038"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<div align="right">

<a id="p100039"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100040"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ**<br>
**ОТКЛОНЕНИЕ, ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**<br>
**ДЛЯ ФЕНПИРОКСИМАТА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Полнота извлечения вещества, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Яблочный сок</td><td>0,1</td><td>0,1 - 1,0</td><td>90,17</td><td>1,71</td><td>0,72</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100043"></a>Метод измерений


<a id="p100044"></a>Метод основан на определении Фенпироксимата с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и очистки экстракта на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак Амин.
<a id="p100045"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100046"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.


### 3. <a id="p100047"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100048"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100049"></a>Весы аналитические "OHAUS", ЕР 114 с наибольшим
пределом взвешивания до 110 г и дискретностью
0,0001 г, класс точности - специальный (I) ГОСТ 24104-2001
<a id="p100050"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 600 г и пределом
допустимой погрешности + 0,038 г "ACCULAB" V600,
соответствуют классу точности - среднему (III) ГОСТ 24104-2001
<a id="p100051"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и
1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100052"></a>Микрошприц для жидкостной хроматографии "Hamilton
1700", объем 100 куб. мм, фирма "SUPELCO", кат.
N 26281
<a id="p100053"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100054"></a>pH-метр/милливольтметр pH - 150 0...14
pH; +/- 1999 мВ, номер госрегистрации N 10663
<a id="p100055"></a>Хроматограф жидкостный Waters 515 с
ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной
волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц
адсорбции на шкалу, номер госрегистрации 15311-02
<a id="p100056"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100057"></a>Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100058"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100059"></a>Фенпироксимат, CAS 134098-61-6, аналитический
стандарт с содержанием действующего вещества не
менее 99,6%, фирма "Dr. Ehreustorfer GmbH",
аккредитованный                                     ИСО 9001-2000
<a id="p100060"></a>Ацетон, осч                                         ТУ 6-09-3513-86
<a id="p100061"></a>Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм                         ТУ 6-09-2167-84
<a id="p100062"></a>Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная
(вода дистиллированная, перегнанная повторно в
стеклянной емкости) ГОСТ 6709-72
<a id="p100063"></a>Гелий очищенный марки "А"                           ТУ 51-940-80
<a id="p100064"></a>n-Гексан, хч                                        ТУ 6-09-3818-89
<a id="p100065"></a>Калий марганцовокислый, чда ГОСТ 20490-75
<a id="p100066"></a>Кальций хлористый, ч ТУ 6-09-4711-81
<a id="p100067"></a>Концентрирующие патроны Диапак Амин и Диапак С
(0,6 г), фирма "БиоХимМак СТ"                       ТУ 4215-002-05451931-94
<a id="p100068"></a>Натрий сернокислый безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100069"></a>Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77
<a id="p100070"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100071"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100072"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23)
для работы с концентрирующими патронами
<a id="p100073"></a>Диапак Амин и Диапак С16 ГОСТ 25336-82
<a id="p100074"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1"
<a id="p100075"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см,
полипропилен, кат. N 3120-0250, фирма "NALGENE"
<a id="p100076"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA"
<a id="p100077"></a>**UNIMA OLSZTYN UM-4**
<a id="p100078"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая
нестерильная [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100079"></a>Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100080"></a>Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100081"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110
Buchi с водяной баней В-480, фирма "Buchi"
<a id="p100082"></a>Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и
1000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100083"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на
100, 250 куб. см и 4000 куб. см ТС                  ТУ 92-891.029-91
<a id="p100084"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной
250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry
Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100085"></a>Насос диафрагменный FT.19, фирма "KNF Neu
Laboport"
<a id="p100086"></a>Предколонка хроматографическая стальная Simmetry
C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100087"></a>Стаканы стеклянные термостойкие объемом
50 - 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100088"></a>Установка для перегонки растворителей с
круглодонной колбой объемом 4000 куб. см
и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см
<a id="p100089"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-1678-86
<a id="p100090"></a>Фильтры для очистки растворителей диаметром
20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100091"></a>Шприц инъекционный однократного применения объемом
10 куб. см (ИСО 7886-84)                            ГОСТ 24861-91
<a id="p100092"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100093"></a>Требования безопасности


<a id="p100094"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100095"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100096"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100097"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100098"></a>Условия измерений


<a id="p100099"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100100"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100101"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100102"></a>Подготовка к выполнению определений


<a id="p100103"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак С и Диапак Амин для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак Амин, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100104"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100105"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100106"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100107"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

##### <a id="p100108"></a>7.1.2 Очистка ацетона

<a id="p100109"></a>Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/куб. дм.
<a id="p100110"></a>Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

##### <a id="p100111"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды

<a id="p100112"></a>Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцово-кислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100113"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.


#### <a id="p100114"></a>7.2. Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100115"></a>7.2.1 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100116"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.
<a id="p100117"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 куб. дм помещают 800 куб. см ацетонитрила и 200 куб. см очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

##### <a id="p100118"></a>7.2.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100119"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией Фенпироксимата 1,0 мг/куб. см.
<a id="p100120"></a>Взвешивают 50 мг Фенпироксимата в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100121"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией Фенпироксимата 10,0 мкг/куб. см.
<a id="p100122"></a>Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100123"></a>7.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией Фенпироксимата 1,0 мкг/куб. см.
<a id="p100124"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 3 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100125"></a>7.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией Фенпироксимата 0,5 мкг/куб. см.
<a id="p100126"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 4 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100127"></a>7.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией Фенпироксимата 0,2 мкг/куб. см.
<a id="p100128"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 5 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100129"></a>7.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией Фенпироксимата 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100130"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 6 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 6 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100131"></a>7.2.2.7. Стандартные растворы Фенпироксимата с концентрацией 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 мкг/куб. см для внесения в контрольные образцы.
<a id="p100132"></a>Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 мкг/куб. см, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы.


#### <a id="p100133"></a>7.3. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100134"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Фенпироксимата в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100135"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100161). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


#### <a id="p100136"></a>7.4. Подготовка последовательно соединенных концентрирующих патронов Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху) для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на них


<a id="p100137"></a>7.4.1. Подготовка последовательно соединенных концентрирующих патронов Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху) для очистки экстракта.
<a id="p100138"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100139"></a>Патрон Диапак Амин устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100140"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1 и 10 куб. см смеси гексана. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100141"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
<a id="p100142"></a>7.4.2. Проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на последовательно соединенных концентрирующих патронах Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху).
<a id="p100143"></a>Из стандартного раствора Фенпироксимата в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см гексана, перемешивают и вносят на подготовленные патроны. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100144"></a>Исходный концентратор обмывают двумя порциями по 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и последовательно вносят на патроны. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100145"></a>Определяют фракции, содержащие Фенпироксимат, полноту смывания с патронов и необходимый объем элюента.
<a id="p100146"></a>Изучение поведения Фенпироксимата на концентрирующих патронах Диапак Амин и Диапак С проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100147"></a>7.5. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии


<a id="p100148"></a>Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Symmetry C8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 ч.


### 8. <a id="p100149"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100150"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.1979 N 2051-79, а также в соответствии с ГОСТ 656-79 "Соки плодовые и ягодные натуральные. ТУ".
<a id="p100151"></a>Пробы яблочного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С не более 5 суток.


### 9. <a id="p100152"></a>Подготовка проб и выполнение измерений



#### <a id="p100153"></a>9.1. Яблочный сок



##### <a id="p100154"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100155"></a>Образец яблочного сока массой 10 г помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия и перемешивают. Туда же прибавляют 20 куб. см ацетонитрила и встряхивают делительную воронку в течение 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан объемом 50 куб. см, а верхний ацетонитрильный слой - в химический стакан объемом 100 куб. см. Повторяют экстракцию два раза, используя каждый раз по 20 куб. см ацетонитрила и встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. Водный слой отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт объединяют в химическом стакане объемом 100 куб. см. Объединенный ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку, выдерживают 5 мин. при комнатной температуре, выделившуюся водную фазу (нижний слой) отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт переносят через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см, обмывают осушитель 10 куб. см ацетонитрила, объединяют смыв с основным экстрактом и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100156"></a>9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100157"></a>К сухому остатку в концентраторе, полученному по [п. 9.1.1](#p100154), прибавляют 5 куб. см ацетона, 50 куб. см дистиллированной воды и 10 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Фенпироксимат экстрагируют тремя порциями гексана по 20 куб. см, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан объемом 50 куб. см, а верхний гексановый слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100158"></a>9.1.3 Очистка экстракта на последовательно соединенных концентрирующих патронах Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху)

<a id="p100159"></a>Сухой остаток, полученный в [п. 9.1.2](#p100156), растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см гексана, перемешивают и вносят на подготовленные патроны. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и последовательно вносят на патроны. Элюат собирают в тот же концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100160"></a>Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100161"></a>9.2. Условия хроматографирования


<a id="p100162"></a>Хроматограф жидкостный Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации N 15311-02, или другой с аналогичными характеристиками.
<a id="p100163"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм х 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100164"></a>Предколонка стальная Symmetry C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100165"></a>Температура колонки: 30 °С.
<a id="p100166"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 80:20.
<a id="p100167"></a>Длина волны: 258 нм.
<a id="p100168"></a>Время удерживания Фенпироксимата: 7,404 мин. +/- 2%.
<a id="p100169"></a>Чувствительность не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).
<a id="p100170"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100171"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.


### 10. <a id="p100172"></a>Обработка результатов


<a id="p100173"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Empower 2.
<a id="p100174"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100175"></a>    Содержание Фенпироксимата рассчитывают по формуле:

                               S   х A х V
                                пр
<a id="p100176"></a>                          X = ------------- х P,
                              100 х S   х m
                                     ст

    где:
    X - содержание Фенпироксимата в пробе, мг/кг;
    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
    A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
    P - содержание Фенпироксимата в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100177"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100178"></a>    За  результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух
параллельных  определений,  расхождение между которыми не превышает предела
повторяемости (1):

                         2 х |X  - X | х 100
                               1    2
<a id="p100179"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                               (X  + X )
                                 1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100035), при этом r = 2,8 х
сигма .
     r
<a id="p100180"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100179) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100181"></a>Оформление результатов


<a id="p100182"></a>    Результат анализа представляют в виде:

              _
<a id="p100183"></a>             (X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,

    где:
    _
    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100184"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

    где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100035)), %.
<a id="p100185"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100186"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,1 мг/кг" <*>.

<a id="p100187"></a>

---

<a id="p100188"></a><*> 0,1 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100189"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100190"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100191"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100192"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100193"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100194"></a>                       C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _,
                        д         л,X         л,X'

    где   +/-  ДЕЛЬТА  _  (+/-  ДЕЛЬТА  _ )  -  характеристика  погрешности
                     л,X              л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100195"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100196"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

    где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100035)), %.
<a id="p100197"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100198"></a>                             К  = X' - X - C ,
                              к             д

         _    _
    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100177)), содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100199"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100200"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

<a id="p100201"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100202"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100203"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

<a id="p100204"></a>    процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100205"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100203) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100206"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100207"></a>    Расхождение  между  результатами  измерений,  выполненных в двух разных
лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |X  - X | х 100
                               1    2
<a id="p100208"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[табл. 1](#p100035)), %.


### 14. <a id="p100209"></a>Разработчики


<a id="p100210"></a>Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева.
<a id="p100211"></a>Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (495) 976-37-68, факс: (495) 976-43-26.





<div align="right">

<a id="p100212"></a>Приложение 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100213"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ФЕНПИРОКСИМАТА ИЗ ЯБЛОЧНОГО СОКА**<br>
**(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="26%"><col width="31%"><col width="29%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено Фенпироксимата, мг/кг</td><td>Обнаружено Фенпироксимата, мг/кг</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Яблочный сок</td><td>0,1</td><td>0,0902 +/- 0,0016</td><td>90,2</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,1797 +/- 0,0034</td><td>89,9</td></tr>
<tr><td>0,5</td><td>0,4469 +/- 0,1241</td><td>89,4</td></tr>
<tr><td>1,0</td><td>0,9119 +/- 0,0158</td><td>91,2</td></tr>
</table>




<a id="p100219"></a>

---