МУК 4.1.2859-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания

(утв. Роспотребнадзором 31.03.2011)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЕНПИРОКСИМАТА В ЯБЛОЧНОМ СОКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.2859-11

1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом — МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 28.12.2010 № 3).

3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 31 марта 2011 г.

4. Введены в действие с момента утверждения.

5. Введены впервые.

Общие положения и область применения

Свидетельство об аттестации методики от 01.12.2010 № 0062.30.11.10.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Фенпироксимата в яблочном соке в диапазоне 0,1 — 1,0 мг/кг.

Структурная формула (не приводится).

Название действующего вещества по ИЮПАК:

Трет-бутил-(Е)-а-(1,3-диметил-5-феноксипиразол1-4-илметилена-мино-окси)-р-толуат.

Эмпирическая формула: C H № O . 24 27 3 4

Молекулярная масса: 421,5.

Агрегатное состояние: порошок.

Цвет, запах: белый без запаха.

Давление паров: 0,0075 мПа (при 25 °С).

Коэффициент распределения октанол — вода: K log P = 5,01 (при 20 °С). ow

Температура плавления: 101,1 — 102,4 °С. -2

Растворимость в воде, мг/куб. дм (20 °С): 1,46 х 10 .

Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 25 °С): ацетон — 150; дихлорметан — 1307; метанол — 15; хлороформ — 1197; тетрагидрофуран — 737.

Стабилен в кислой и щелочной средах.

DT в почве составляет 26,3 — 49,7 дня. 50

    Краткая  токсикологическая  характеристика:  Фенпироксимат  относится к
веществам  умеренно  опасным по острой пероральной (ЛД   для крыс от 245 до

                                                  50

480 мг/кг), малоопасным по дермальной токсичности (ЛД для крыс более 2000 50 мг/кг), но чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК 50

для  крыс (4 ч) от 330 до 360 мг/куб. м). Слегка раздражает глаза кроликов,
но  не  вызывает раздражения кожных покровов. В длительном опыте не выявлен

канцерогенный, тератогенный и мутагенный эффект.

Область применения: Фенпироксимат — акарицид, который ингибирует митохондриальный транспорт электронов. Действует на стадиях личинок, нимф и взрослых особей. Применяется на посадках цитрусовых, яблок, персиков, груш, винограда в концентрации 25 — 75 г/га.

Проходит регистрационные испытания на яблонях с нормой расхода 0,75 куб. дм/га.

В России для Фенпироксимата установлены следующие гигиенические нормативы: МДУ в яблочном соке — 0,2 мг/кг.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Анализируемый объект	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95	Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r	Предел повторяемости, r, %	Предел воспроизводимости, R, %
Яблочный сок	0,1 — 1,0 вкл.	25	2,24	6,22	7,40

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

Анализируемый объект	Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20
	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Полнота извлечения вещества, %	Стандартное отклонение, S, %	Доверительный интервал среднего результата, +/-, %
Яблочный сок	0,1	0,1 — 1,0	90,17	1,71	0,72

2. Метод измерений

Метод основан на определении Фенпироксимата с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и очистки экстракта на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак Амин.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Весы аналитические «OHAUS», ЕР 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс точности — специальный (I) ГОСТ 24104-2001

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности + 0,038 г «ACCULAB» V600, соответствуют классу точности — среднему (III) ГОСТ 24104-2001

Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см ГОСТ 1770-74

Микрошприц для жидкостной хроматографии «Hamilton 1700», объем 100 куб. мм, фирма «SUPELCO», кат. № 26281

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см ГОСТ 29227-91

pH-метр/милливольтметр pH — 150 0...14 pH; +/- 1999 мВ, номер госрегистрации № 10663

Хроматограф жидкостный Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации 15311-02

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см ГОСТ 1770-74

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Фенпироксимат, CAS 134098-61-6, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,6%, фирма «Dr. Ehreustorfer GmbH»,

аккредитованный                                     ИСО 9001-2000
Ацетон, осч                                         ТУ 6-09-3513-86
Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм                         ТУ 6-09-2167-84

Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) ГОСТ 6709-72

Гелий очищенный марки "А"                           ТУ 51-940-80
n-Гексан, хч                                        ТУ 6-09-3818-89

Калий марганцовокислый, чда ГОСТ 20490-75

Кальций хлористый, ч ТУ 6-09-4711-81

Концентрирующие патроны Диапак Амин и Диапак С (0,6 г), фирма «БиоХимМак СТ» ТУ 4215-002-05451931-94

Натрий сернокислый безводный, хч ГОСТ 4166-76

Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аллонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами

Диапак Амин и Диапак С16 ГОСТ 25336-82

Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LT1»

Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. № 3120-0250, фирма «NALGENE»

Ванна ультразвуковая «UNITRA»

UNIMA OLSZTYN UM-4

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная ГОСТ 5556-81

Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82

Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82

Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней В-480, фирма «Buchi»

Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 куб. см и 4000 куб. см ТС ТУ 92-891.029-91

Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма «Waters»

Насос диафрагменный FT.19, фирма «KNF Neu Laboport»

Предколонка хроматографическая стальная Simmetry C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters»

Стаканы стеклянные термостойкие объемом 50 — 500 куб. см ГОСТ 25336-82

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см

Фильтры бумажные «красная лента» ТУ 6-09-1678-86

Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма «Waters»

Шприц инъекционный однократного применения объемом 10 куб. см (ИСО 7886-84) ГОСТ 24861-91

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак С и Диапак Амин для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак Амин, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка органических растворителей

7.1.1 Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

7.1.2 Очистка ацетона

Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/куб. дм.

Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды

Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцово-кислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.

В плоскодонную колбу объемом 1 куб. дм помещают 800 куб. см ацетонитрила и 200 куб. см очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

7.2.2 Приготовление градуировочных растворов

7.2.2.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией Фенпироксимата 1,0 мг/куб. см.

Взвешивают 50 мг Фенпироксимата в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

7.2.2.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией Фенпироксимата 10,0 мкг/куб. см.

Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.

7.2.2.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией Фенпироксимата 1,0 мкг/куб. см.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 3 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 3 хранится в холодильнике не более 30 суток.

7.2.2.4. Стандартный раствор № 4 с концентрацией Фенпироксимата 0,5 мкг/куб. см.

Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 4 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 4 хранится в холодильнике не более 30 суток.

7.2.2.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией Фенпироксимата 0,2 мкг/куб. см.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 5 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 5 хранится в холодильнике не более 30 суток.

7.2.2.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией Фенпироксимата 0,1 мкг/куб. см.

Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор № 6 используется для хроматографического исследования и приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 6 хранится в холодильнике не более 30 суток.

7.2.2.7. Стандартные растворы Фенпироксимата с концентрацией 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 мкг/куб. см для внесения в контрольные образцы.

Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 10,0; 5,0; 2,0 и 1,0 мкг/куб. см, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Фенпироксимата в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.

7.4. Подготовка последовательно соединенных концентрирующих патронов Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху) для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на них

7.4.1. Подготовка последовательно соединенных концентрирующих патронов Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху) для очистки экстракта.

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 — 2 кап./с).

Патрон Диапак Амин устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 1:1 и 10 куб. см смеси гексана. Элюаты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.4.2. Проверка хроматографического поведения Фенпироксимата на последовательно соединенных концентрирующих патронах Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху).

Из стандартного раствора Фенпироксимата в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см гексана, перемешивают и вносят на подготовленные патроны. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.

Исходный концентратор обмывают двумя порциями по 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и последовательно вносят на патроны. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.

Определяют фракции, содержащие Фенпироксимат, полноту смывания с патронов и необходимый объем элюента.

Изучение поведения Фенпироксимата на концентрирующих патронах Диапак Амин и Диапак С проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.

7.5. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Symmetry C8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 — 4 ч.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» от 21.08.1979 № 2051-79, а также в соответствии с ГОСТ 656-79 «Соки плодовые и ягодные натуральные. ТУ».

Пробы яблочного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С не более 5 суток.

9. Подготовка проб и выполнение измерений

9.1. Яблочный сок

9.1.1 Экстракция

Образец яблочного сока массой 10 г помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия и перемешивают. Туда же прибавляют 20 куб. см ацетонитрила и встряхивают делительную воронку в течение 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан объемом 50 куб. см, а верхний ацетонитрильный слой — в химический стакан объемом 100 куб. см. Повторяют экстракцию два раза, используя каждый раз по 20 куб. см ацетонитрила и встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. Водный слой отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт объединяют в химическом стакане объемом 100 куб. см. Объединенный ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку, выдерживают 5 мин. при комнатной температуре, выделившуюся водную фазу (нижний слой) отбрасывают, а ацетонитрильный экстракт переносят через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см, обмывают осушитель 10 куб. см ацетонитрила, объединяют смыв с основным экстрактом и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.1.1, прибавляют 5 куб. см ацетона, 50 куб. см дистиллированной воды и 10 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Фенпироксимат экстрагируют тремя порциями гексана по 20 куб. см, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан объемом 50 куб. см, а верхний гексановый слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.1.3 Очистка экстракта на последовательно соединенных концентрирующих патронах Диапак С (внизу) и Диапак Амин (вверху)

Сухой остаток, полученный в п. 9.1.2, растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см гексана, перемешивают и вносят на подготовленные патроны. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 9:1 и последовательно вносят на патроны. Элюат собирают в тот же концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.

9.2. Условия хроматографирования

Хроматограф жидкостный Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации № 15311-02, или другой с аналогичными характеристиками.

Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм х 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters».

Предколонка стальная Symmetry C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters».

Температура колонки: 30 °С.

Подвижная фаза: ацетонитрил — вода в соотношении 80:20.

Длина волны: 258 нм.

Время удерживания Фенпироксимата: 7,404 мин. +/- 2%.

Чувствительность не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 — 20 нг.

10. Обработка результатов

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Empower 2.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание Фенпироксимата рассчитывают по формуле:

                           S   х A х V
                            пр

X = ------------- х P, 100 х S х m ст

где:
X - содержание Фенпироксимата в пробе, мг/кг;
S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
 ст
S   - высота (площадь) пика образца, мм;
 пр
A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
P - содержание Фенпироксимата в аналитическом стандарте, %.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

    За  результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух
параллельных  определений,  расхождение между которыми не превышает предела

повторяемости (1):

                         2 х |X  - X | х 100
                               1    2
                         ------------------- <= r,                      (1)
                               (X  + X )
                                 1    2

где:

    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2

r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 х сигма . r

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

          _

(X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,

где:
_
X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных

приемлемыми, мг/кг; ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                      _

ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель

точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0,1 мг/кг» <*>.

---

<*> 0,1 мг/кг — предел обнаружения.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки C должна удовлетворять условию: д

                       C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _,
                        д         л,X         л,X'

    где   +/-  ДЕЛЬТА  _  (+/-  ДЕЛЬТА  _ )  -  характеристика  погрешности
                     л,X              л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента

в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

ДЕЛЬТА = +/- 0,84 ДЕЛЬТА, л

где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                      _

ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель

точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры К рассчитывают по формуле: к

                                  _    _
                             К  = X' - X - C ,
                              к             д

         _    _
    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных

               д

определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                          _____________________

                             /     2            2
                       К = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом

                                                        к

контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|К | <= К, (2) к

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |X  - X | х 100
                               1    2
                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

где:

    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,

табл. 1), %.

14. Разработчики

Российский государственный аграрный университет — МСХА имени К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (495) 976-37-68, факс: (495) 976-43-26.

Среда	Внесено Фенпироксимата, мг/кг	Обнаружено Фенпироксимата, мг/кг	Полнота определения, %
Яблочный сок	0,1	0,0902 +/- 0,0016	90,2
	0,2	0,1797 +/- 0,0034	89,9
	0,5	0,4469 +/- 0,1241	89,4
	1,0	0,9119 +/- 0,0158	91,2

---