---
title: "\"МУК 4.1.2858-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Топрамезона в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2858-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2858-11"
---

## "МУК 4.1.2858-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Топрамезона в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2858-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Топрамезона в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 31.03.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 31 марта 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

31 марта 2011 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТОПРАМЕЗОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, ЗЕРНЕ И МАСЛЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2858-11**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 28.12.2010 N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 31.03.2011.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


### <a id="p100011"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики от 01.12.2010 N 0059.29.11.10.
<a id="p100013"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Топрамезона в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/куб. дм и в почве в диапазоне 0,01 - 0,10 мг/кг, а также уровня его остаточных количеств в зеленой массе кукурузы в диапазоне 0,05 - 0,50 мг/кг, в зерне и масле кукурузы в диапазоне 0,01 - 0,10 мг/кг.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: [3-(4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил)-4-мезил-о-толил](5-гидрокси-1-метилпиразол-4-ил)метанон.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: C  H  N O S.
                           16 17 3 5
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 363,29.
<a id="p100018"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100019"></a>Цвет, запах: химически чистый Топрамезон представляет собой белый кристаллический порошок.
                             -7
<a id="p100020"></a>    Давление паров: 1,00 x 10   мПа(при 25 °C).
<a id="p100021"></a>Температура плавления: 221,6 °C.
<a id="p100022"></a>Коэффициент распределения октанол-вода (pH 7, 20 °C): 1,52.
<a id="p100023"></a>Константа диссоциации (рКа) (при 25 °C): 4,06 (слабая кислота).
<a id="p100024"></a>Растворимость в воде (при 20 °C): 100 г/куб. дм.
<a id="p100025"></a>Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, при 20 °C): ацетон - 10, гексан - 10, толуол - 10, этилацетат - 10.
<a id="p100026"></a>Топрамезон стабилен в водных растворах (период полураспада при pH 5,0 - 9,0, при 20 °C составляет 30 дней).
<a id="p100027"></a>Период полураспада в воде при фотолизе составляет 72 дня (в природной воде), в буферном растворе при pH в диапазоне 5 - 9 стабилен.
<a id="p100028"></a>Топрамезон долго сохраняется в почве с периодом полураспада в лаборатории 186 дней, в поле - 45 дней. Может повреждать последующие культуры севооборота (соя).
<a id="p100029"></a>    Краткая   токсикологическая   характеристика:  Топрамезон  относится  к
веществам  малоопасным  по  острой пероральной (ЛД   для крыс 2000 мг/кг) и
                                                  50
дермальной  (ЛД    для  крыс 2000 мг/кг) токсичности, но к умеренно опасным
               50
веществам  по  ингаляционной  токсичности (ЛК   для крыс (4 ч) 5400 мг/куб.
                                             50
м).  Раздражает  глаза  и  кожные  покровы. Имеются подозрения относительно
канцерогенности.
<a id="p100030"></a>Область применения: Топрамезон - системный селективный гербицид листового действия из группы ингибиторов синтеза каратиноидов, эффективно подавляет рост и развитие двудольных однолетних и некоторых злаковых сорняков в посевах кукурузы.
<a id="p100031"></a>В России предлагается в качестве смесевого гербицида в посевах кукурузы с нормой расхода 240 г д.в./га.
<a id="p100032"></a>МДУ Топрамезона (в импортируемой продукции): зерно и масло кукурузы - 0,01 мг/кг.


### 1. <a id="p100033"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100034"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100035"></a>Таблица 1

<a id="p100036"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ТОПРАМЕЗОНА**


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="24%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Вода</td><td>0,005 - 0,01 вкл.</td><td>100</td><td>1,35</td><td>3,75</td><td>4,47</td></tr>
<tr><td>0,01 - 0,05 вкл.</td><td>50</td><td>1,48</td><td>4,12</td><td>4,90</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>0,81</td><td>2,24</td><td>2,67</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса</td><td>0,05 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,78</td><td>4,94</td><td>5,88</td></tr>
<tr><td>кукурузы</td><td>0,1 - 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>1,63</td><td>4,53</td><td>5,39</td></tr>
<tr><td>Зерно кукурузы</td><td>0,01 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,90</td><td>5,29</td><td>6,30</td></tr>
<tr><td>Масло кукурузы</td><td>0,01 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,82</td><td>5,07</td><td>6,03</td></tr>
</table>


<a id="p100045"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100046"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100047"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

**ДЛЯ ТОПРАМЕЗОНА**


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>полнота извлечения вещества, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,05</td><td>84,06</td><td>3,98</td><td>1,56</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>81,53</td><td>4,21</td><td>1,61</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса кукурузы</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,50</td><td>77,08</td><td>3,25</td><td>1,17</td></tr>
<tr><td>Зерно кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>78,81</td><td>5,86</td><td>2,16</td></tr>
<tr><td>Масло кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>88,04</td><td>4,65</td><td>1,91</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100054"></a>Метод измерений


<a id="p100055"></a>Метод основан на определении Топрамезона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на концентрирующих патронах Диапак Амин, Диапак П и Диапак Диол.
<a id="p100056"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100057"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.


### 3. <a id="p100058"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100059"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100060"></a>Весы аналитические "OHAUS", EP 114 с наибольшим
пределом взвешивания до 110 г и дискретностью
0,0001 г, класс точности по ГОСТ 24104-2001 -
специальный (I)
<a id="p100061"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г "ACCULAB" V600, соответствуют
классу точности по ГОСТ 24104-2001 - средний (III)
<a id="p100062"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100063"></a>Микрошприц для жидкостной хроматографии "Hamilton, 1700",
объем 10 куб. мм, фирма "SUPELCO", кат. N 26281
<a id="p100064"></a>Пипетки мерные на 1,0, 2,0, 5,0 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
pH-метр/милливольтметр pH-150 0 - 14 pH;
+/- 1999 мВ, номер госрегистрации 10663
<a id="p100065"></a>Хроматограф жидкостной Waters 510 с ультрафиолетовым
детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью
не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу,

<div align="center">

номер госрегистрации 15311-02

</div>

<a id="p100066"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100067"></a>Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100068"></a>3.2. Реактивы и материалы


<a id="p100069"></a>Топрамезон, CAS 210631-68-8,
аналитический стандарт с содержанием
действующего вещества не менее 99,8%,
фирма "Dr. Ehreustorfer GmbH",
аккредитованная по ИСО-9001-2000
<a id="p100070"></a>Аммоний уксуснокислый (аммония ацетат)
безводный (98%, CAS 631-61-8),
фирма "Acros Organics"
<a id="p100071"></a>Ацетон, ос.ч.                                       ТУ 6-09-3513-86
<a id="p100072"></a>Ацетонитрил, ос.ч., УФ-200 нм                       ТУ 6-09-2167-84
<a id="p100073"></a>Вода дистиллированная и (или)
бидистиллированная (вода дистиллированная,
перегнанная повторно в стеклянной емкости) ГОСТ 6709-72
<a id="p100074"></a>Гелий очищенный, марки "А"                          ТУ 51-940-80
<a id="p100075"></a>n-Гексан, х.ч.                                      ТУ 6-09-3818-89
<a id="p100076"></a>Калий марганцово-кислый, ч.д.а. ГОСТ 20490-75
<a id="p100077"></a>Кальций хлористый, ч. ТУ 6-09-4711-81
<a id="p100078"></a>Концентрирующие патроны Диапак Амин,
Диапак Диол и Диапак П (0,6 г),
фирма "БиоХимМак СТ"                                ТУ 4215-002-05451931-94
<a id="p100079"></a>Кислота муравьиная, ч.д.а. [ГОСТ 5848-73](https://bukva.ai/docs/gost-5848-73)
<a id="p100080"></a>Кислота соляная, х.ч. [ГОСТ 857-95](https://bukva.ai/docs/gost-857-95)
<a id="p100081"></a>Кислота уксусная ледяная, х.ч. ГОСТ 61-75
<a id="p100082"></a>Метилен хлористый, х.ч.                             ТУ 6-09-2662-77
<a id="p100083"></a>Натрий фосфорно-кислый однозамещенный,
2-водный, ч.д.а. [ГОСТ 245-76](https://bukva.ai/docs/gost-245-76)
<a id="p100084"></a>Натрий фосфорнокислый двузамещенный,
12-водный, х.ч. [ГОСТ 4172-76](https://bukva.ai/docs/gost-4172-76)
<a id="p100085"></a>Натрий сернокислый, безводный, х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100086"></a>Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77
<a id="p100087"></a>Натрия гидроокись, х.ч. ГОСТ 4328-77
<a id="p100088"></a>Спирт метиловый (метанол), х.ч. [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)

<div align="center">

<a id="p100089"></a>Хлороформ, х.ч. [ГОСТ 20015-88](https://bukva.ai/docs/gost-20015-88)

</div>

<a id="p100090"></a>Этилацетат, ч.д.а. [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
<a id="p100091"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100092"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100093"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23)
для работы с концентрирующими патронами
Диапак Амин и Диапак С16 ГОСТ 25336-82
<a id="p100094"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1"
<a id="p100095"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см,
полипропилен, кат. N 3120-0250, фирма "NALGENE"
<a id="p100096"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4
<a id="p100097"></a>Вата медицинская гигроскопическая
хлопковая нестерильная [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100098"></a>Воронки делительные на 250 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100099"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi
с водяной баней B-480, фирма "Buchi"
<a id="p100100"></a>Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100101"></a>Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм,
с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RPI8,
зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100102"></a>Насос диафрагменный FT.19, фирма "KNF Neu Laboport"
<a id="p100103"></a>Предколонка хроматографическая стальная Simmetry C18,
20 мм x 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100104"></a>Сито лабораторное с полотном из латуни
или нержавеющей стали с размером ячеек 1 мм ГОСТ 3826-82
 и ГОСТ 6613-86
<a id="p100105"></a>Стаканы стеклянные термостойкие
объемом 100 - 500 куб. см ГОСТ 25336-82

<a id="p100106"></a>Установка для перегонки растворителей с круглодонной
колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической
колбой объемом 1000 куб. см
<a id="p100107"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ-6-09-1678-86
<a id="p100108"></a>Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с
отверстиями пор 20 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100109"></a>Центрифуга MPW-350e с числом оборотов 4000 об./мин. и с
набором полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см
<a id="p100110"></a>Шприц инъекционный однократного
применения объемом 10 куб. см                               ГОСТ 24861-91
                                                            (ИСО 7886-84)
<a id="p100111"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100112"></a>Требования безопасности


<a id="p100113"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100114"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100115"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100116"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100117"></a>Условия измерений


<a id="p100118"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100119"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100120"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100121"></a>Подготовка к выполнению определений


<a id="p100122"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия, концентрирующих патронов Диапак Амин и Диапак С16 для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак Амин и Диапак С16, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100123"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100124"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100125"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100126"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100127"></a>7.1.2 Очистка ацетона


<a id="p100128"></a>Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/куб. дм.
<a id="p100129"></a>Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100130"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды


<a id="p100131"></a>Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100132"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.


#### <a id="p100133"></a>7.2. Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100134"></a>7.2.1 Приготовление рабочих растворов



###### <a id="p100135"></a>7.2.1.1 Приготовление 1%-го раствора ацетата аммония.

<a id="p100136"></a>10 г безводного сульфата натрия переносят в мерную колбу на 1000 куб. см, добавляют 200 - 300 куб. см очищенной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

###### <a id="p100137"></a>7.2.1.2 Раствор однозамещенного фосфата натрия (Раствор A).

<a id="p100138"></a>    3,12  г  однозамещенного  фосфата  натрия  (NaH PO   x 2H O) помещают в
                                                   2  4      2
мерную  колбу  объемом  100  куб. см, добавляют в 50 - 60 куб. см очищенной
воды,  перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до
метки.

###### <a id="p100139"></a>7.2.1.3 Раствор двузамещенного фосфата натрия (Раствор B).

<a id="p100140"></a>    35,6  г  двузамещенного  фосфата  натрия  (Na HPO   x 12H O) помещают в
                                                 2   4       2
мерную  колбу  объемом  1000 куб. см, добавляют 300 - 500 куб. см очищенной
воды,  перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до
метки.

###### <a id="p100141"></a>7.2.1.4 Приготовление фосфатного буфера (Раствор C).

<a id="p100142"></a>В плоскодонной колбе на 1000 куб. см смешивают 26,5 куб. см раствора A, 473,5 куб. см раствора B и 500 куб. см дистиллированной воды.

###### <a id="p100143"></a>7.2.1.5 Приготовление 1 М раствора гидроокиси натрия.

<a id="p100144"></a>20 г гидроксида натрия переносят в мерную колбу на 500 куб. см, добавляют 200 - 300 куб. см дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).


##### <a id="p100145"></a>7.2.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100146"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и 1%-й раствор ацетата аммония.
<a id="p100147"></a>В плоскодонную колбу объемом 1000 куб. см помещают 800 куб. см 1%-го водного раствора ацетата аммония и 100 куб. см ацетонитрила. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.


##### <a id="p100148"></a>7.2.3 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100149"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией Топрамезона 1,0 мг/куб. см.
<a id="p100150"></a>Взвешивают 50 мг Топрамезона в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100151"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией Топрамезона 10,0 мкг/куб. см.
<a id="p100152"></a>Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Стандартный раствор N 2 используется для внесения в контрольные образцы и для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100153"></a>7.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией Топрамезона 1,0 мкг/куб. см.
<a id="p100154"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Стандартный раствор N 3 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100155"></a>7.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией Топрамезона 0,5 мкг/куб. см.
<a id="p100156"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Стандартный раствор N 4 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100157"></a>7.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией Топрамезона 0,2 мкг/куб. см.
<a id="p100158"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Стандартный раствор N 5 используется для установления градуировочной характеристики и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100159"></a>7.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией Топрамезона 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100160"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки смесью ацетонитрила с водой в соотношении 9:1. Стандартный раствор N 6 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 6 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100161"></a>7.2.2.7. Стандартные растворы с концентрацией Топрамезона 5,0; 2,5; 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/куб. см для внесения в контрольные образцы.
<a id="p100162"></a>Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,5; 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/куб. см, и используют эти растворы с целью внесения в контрольные образцы. Стандартные растворы для внесения в контрольные образцы хранятся в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100163"></a>Для внесения в контрольные образцы масла готовят растворы Топрамезона, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4 и 0,2 мкг/куб. см, в ацетоне.


#### <a id="p100164"></a>7.3. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100165"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Топрамезона в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0, 0,5, 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100166"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.6](#p100243). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


#### <a id="p100167"></a>7.4. Подготовка концентрирующих патронов Диапак Амин для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Топрамезона на них



##### <a id="p100168"></a>7.4.1 Подготовка концентрирующих патронов Диапак Амин

для очистки экстракта

<a id="p100169"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100170"></a>Патрон Диапак Амин устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100171"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетонитрила, а затем 5 куб. см очищенной воды. Элюат отбрасывают.
<a id="p100172"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.


##### <a id="p100173"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения Топрамезона

на патроне Диапак Амин

<a id="p100174"></a>В концентратор объемом 100 куб. см помещают 50 куб. см раствора C [(п. 7.2.1.4)](#p100141), прибавляют туда 1 куб. см стандартного раствора Топрамезона в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см. Доводят pH раствора до значения 1,4 при помощи 6 М раствора соляной кислоты и порционно наносят на подготовленный концентрирующий патрон Диапак Амин. Весь элюат собирают в чистый концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100175"></a>Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100176"></a>Определяют фракции, содержащие Топрамезон, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100177"></a>Изучение поведения Топрамезона на концентрирующих патронах Диапак Амин проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100178"></a>7.5. Подготовка концентрирующих патронов Диапак П для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Топрамезона на них



##### <a id="p100179"></a>7.5.1 Подготовка концентрирующих патронов Диапак П

для очистки экстракта

<a id="p100180"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100181"></a>Патрон Диапак П устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100182"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетонитрила, а затем 5 куб. см очищенной воды. Элюат отбрасывают.
<a id="p100183"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.


##### <a id="p100184"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения

Топрамезона на патроне Диапак П

<a id="p100185"></a>В концентратор объемом 100 куб. см помещают 1 куб. см стандартного раствора Топрамезона в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см и упаривают досуха. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 20 куб. см очищенной воды и доводят pH раствора до значения 1,4 при помощи 6 М раствора соляной кислоты, наносят на патрон, элюат собирают в чистый концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100186"></a>Исходный концентратор обмывают сначала 5 куб. см 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты, а затем пятью порциями по 10 куб. см каждая 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле. Полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100187"></a>Определяют фракции, содержащие Топрамезон, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100188"></a>Изучение поведения Топрамезона на концентрирующих патронах Диапак П проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100189"></a>7.6. Подготовка концентрирующих патронов Диапак Диол для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Топрамезона на них



##### <a id="p100190"></a>7.6.1 Подготовка концентрирующих патронов Диапак Диол

для очистки экстракта

<a id="p100191"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100192"></a>Патрон Диапак Диол устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100193"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см метилового спирта, а затем 5 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:1. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100194"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.


##### <a id="p100195"></a>7.6.2 Проверка хроматографического поведения

Топрамезона на патроне Диапак Диол

<a id="p100196"></a>В концентратор объемом 100 куб. см помещают 1 куб. см стандартного раствора Топрамезона в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см и упаривают досуха. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 2 куб. см гексана и полученный раствор наносят на предварительно кондиционированный патрон Диапак Диол. Элюат собирают в чистый концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100197"></a>Исходный концентратор обмывают сначала 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:1, затем 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 3:7, затем тремя порциями по 10 куб. см каждая 0,1%-го раствора уксусной кислоты в метаноле, полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100198"></a>Определяют фракции, содержащие Топрамезон, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100199"></a>Изучение поведения Топрамезона на концентрирующих патронах Диапак П проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100200"></a>7.7. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии


<a id="p100201"></a>Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Simmetry C18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °C и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 ч.


### 8. <a id="p100202"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100203"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.1979 N 2051-79, а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 17.4.3.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ 13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83) "Зерно. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ Р 50436-92](https://bukva.ai/docs/gost-r-50436-92) (ИСО 950-79) "Зерновые. Отбор проб зерна", [ГОСТ 27262-87](https://bukva.ai/docs/gost-27262-87) "Корма растительного происхождения. Методы отбора проб", [ГОСТ 8808-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-8808-2000) "Масло кукурузное, ТУ", ГОСТ 5471-83 "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100204"></a>Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C; пробы почвы - в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C.
<a id="p100205"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
<a id="p100206"></a>Пробы зеленой массы кукурузы хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °C в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранятся в морозильной камере при температуре -18 °C.
<a id="p100207"></a>Отобранные пробы зерна подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
<a id="p100208"></a>Пробы кукурузного масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C; пробы почвы - в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C.


### 9. <a id="p100209"></a>Подготовка проб и выполнение измерений



#### <a id="p100210"></a>9.1. Вода



##### <a id="p100211"></a>9.1.1 Экстракция


<a id="p100212"></a>Пробу воды объемом 100 куб. см помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют туда 1 куб. см 1 М водного раствора соляной кислоты до значения pH 1,4 и перемешивают.


##### <a id="p100213"></a>9.1.2 Очистка пробы воды на концентрирующих

патронах Диапак П

<a id="p100214"></a>Раствор, полученный по [п. 9.1.1](#p100211), наносят на заранее подготовленный патрон Диапак П, элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 5 куб. см 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты и также наносят на патрон, элюат отбрасывают.
<a id="p100215"></a>Топрамезон элюируют 40 куб. см 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле, элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100216"></a>Сухой остаток после упаривания растворяют в 5 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100217"></a>9.2. Почва



##### <a id="p100218"></a>9.2.1 Экстракция


<a id="p100219"></a>Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют туда 50 куб. см смеси метанола с фосфатным буфером (раствор C, [п. 7.2.1.4](#p100141)) в соотношении 1:1. Пробу помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин. при скорости 4000 об./мин. Супернатант фильтруют через фильтр "красная лента" в концентратор объемом 250 см. Экстракцию повторяют еще один раз, используя 50 куб. см смеси метанола с фосфатным буфером в соотношении 1:1 и помещая пробу сначала на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 30 мин на аппарат для встряхивания. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см и упаривают до водного остатка (~ 50 куб. см) на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.


##### <a id="p100220"></a>9.2.2 Очистка экстракта на концентрирующих

патронах Диапак Амин

<a id="p100221"></a>Водный остаток из концентратора, полученный по [п. 9.2.1](#p100218), переносят в мерный цилиндр объемом 100 куб. см и доводят объем раствора до метки 50 куб. см очищенной водой. Доводят pH раствора до значения 1,4 при помощи 6 М раствора соляной кислоты и наносят на подготовленный патрон Диапак Амин. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и подвергают дальнейшей очистке на концентрирующих патронах Диапак П, как указано в [п. 9.1.2](#p100213).


##### <a id="p100222"></a>9.2.3 Очистка экстракта на концентрирующих патронах

Диапак Диол

<a id="p100223"></a>Сухой остаток в концентраторе, полученный после очистки экстракта на патронах Диапак П, растворяют в 2 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 2 куб. см гексана и наносят на подготовленный патрон Диапак Диол, элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают сначала 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:1, а затем 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 3:7, элюаты также отбрасывают.
<a id="p100224"></a>Топрамезон элюируют 20 куб. см 1%-го раствора уксусной кислоты в метаноле, элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100225"></a>Сухой остаток после упаривания растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100226"></a>9.3. Зерно кукурузы



##### <a id="p100227"></a>9.3.1 Экстракция


<a id="p100228"></a>Образец измельченного зерна кукурузы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют 50 куб. см этилацетата и помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, затем на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин. при скорости 4000 об./мин. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 куб. см через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см этилацетата и помещая на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Пробы центрифугируют, фильтруют, экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100229"></a>Далее проводят очистку экстракта на концентрирующих патронах Диапак Диол, как указано в [п. 9.2.3](#p100222).
<a id="p100230"></a>Сухой остаток после очистки растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100231"></a>9.4. Масло кукурузы



##### <a id="p100232"></a>9.4.1 Экстракция


<a id="p100233"></a>Из пробы кукурузного масла отбирают в стакан навеску массой 20 г и переносят ее в делительную воронку объемом 250 куб. см тремя порциями гексана объемом по 50 куб. см. Прибавляют 25 куб. см фосфатного буфера (раствор C, [п. 7.2.1.4](#p100141)), который предварительно подщелачивают до pH 9 с помощью 1 М раствора гидроокиси натрия. Воронку осторожно встряхивают 2 мин. После разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в плоскодонную колбу объемом 100 куб. см. Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 25 куб. см фосфатного буфера с pH 9. Далее гексан отбрасывают, а водный экстракт объединяют в плоскодонной колбе объемом 100 куб. см. Затем экстракт отфильтровывают через фильтр "красная лента" в делительную воронку и отделяют остатки гексана. Водный экстракт собирают в стакан объемом 100 куб. см.
<a id="p100234"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.3](#p100222) "Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Диол" и по [п. 9.1.2](#p100213) "Очистка пробы воды на концентрирующих патронах Диапак П".
<a id="p100235"></a>Сухой остаток после очистки растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100236"></a>9.5. Зеленая масса кукурузы



##### <a id="p100237"></a>9.5.1 Экстракция


<a id="p100238"></a>Образец измельченной зеленой массы кукурузы массой 5 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют туда 50 куб. см смеси метанола с фосфатным буфером (раствор C, [п. 7.2.1.4](#p100141)) в соотношении 1:1 и помещают на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 куб. см через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 куб. см смеси метанола с фосфатным буфером и помещая на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 35 °C.


##### <a id="p100239"></a>9.5.2 Очистка экстракта перераспределением

в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100240"></a>Полученный в [п. 9.5.1](#p100237) водный остаток подкисляют 6 Н соляной кислотой до pH 1 и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Топрамезон экстрагируют четырьмя порциями хлороформа объемом по 40 куб. см, каждый раз встряхивая делительную воронку по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 35 °C.
<a id="p100241"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.3](#p100222) "Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Диол" и по [п. 9.2.2](#p100220) "Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Амин".
<a id="p100242"></a>Сухой остаток после очистки растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100243"></a>9.6. Условия хроматографирования


<a id="p100244"></a>Хроматограф жидкостной Waters 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации 15311-02, или другой с аналогичными характеристиками.
<a id="p100245"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм x 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100246"></a>Предколонка стальная Symmetry C18, 20 мм x 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100247"></a>Температура колонки: 25 °C.
<a id="p100248"></a>Температура колонки: 30 °C.
<a id="p100249"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 1%-й водный раствор ацетата аммония в соотношении 10:80.
<a id="p100250"></a>Длина волны: 254 нм.
<a id="p100251"></a>Время удерживания Топрамезона: 11,9 +/- 2%, мин.
<a id="p100252"></a>Чувствительность: не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).
<a id="p100253"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100254"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.


### 10. <a id="p100255"></a>Обработка результатов


<a id="p100256"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Millenium 3.05.01.
<a id="p100257"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100258"></a>Содержание Топрамезона рассчитывают по формуле:

                               S   x A x V
                                пр
<a id="p100259"></a>                          X = ------------- x P,
                              100 x S   x m
                                     ст

<a id="p100260"></a>    где:
<a id="p100261"></a>    X - содержание Топрамезона в пробе, мг/кг;
<a id="p100262"></a>    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
<a id="p100263"></a>    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
<a id="p100264"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
<a id="p100265"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100266"></a>m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
<a id="p100267"></a>P - содержание Топрамезона в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100268"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100269"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100270"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100271"></a>    где:
<a id="p100272"></a>    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
<a id="p100273"></a> r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100036), при этом r = 2,8 x
сигма .
     r
<a id="p100274"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100270) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100275"></a>Оформление результатов


<a id="p100276"></a>Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100277"></a>              (X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,

<a id="p100278"></a>    где:
    _
<a id="p100279"></a>    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100280"></a>    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;
                                          _
<a id="p100281"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

<a id="p100282"></a>где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100036)), %.
<a id="p100283"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100284"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100285"></a>

---

<a id="p100286"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100287"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100288"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100289"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100290"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100291"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100292"></a>                        C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                         д         л,X         л,X'

<a id="p100293"></a>    где:
<a id="p100294"></a>    где  +/- ДЕЛЬТА  _  (+/- ДЕЛЬТА  _ )   -   характеристика   погрешности
                   л,X             л,X'
(абсолютная погрешность)   результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента в испытуемом образце  (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100295"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

<a id="p100296"></a>    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;
                                          _
<a id="p100297"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

<a id="p100298"></a>    где  дельта  -  граница  относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100036)), %.
<a id="p100299"></a>    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  к
                                  _    _
<a id="p100300"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              к             д

<a id="p100301"></a>    где:
         _    _
<a id="p100302"></a>    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100268)) содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100303"></a>    Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100304"></a>                       K = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

<a id="p100305"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
<a id="p100306"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100307"></a>                              |K | <= K,                                (2)
                                к

<a id="p100308"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100309"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100307) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100310"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100311"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100312"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100313"></a>    где:
<a id="p100314"></a>    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
<a id="p100315"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100036)), %.


### 14. <a id="p100316"></a>Разработчики


<a id="p100317"></a>Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А. Тимирязева.
<a id="p100318"></a>Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов".





<div align="right">

<a id="p100319"></a>Приложение 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100320"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ТОПРАМЕЗОНА ИЗ ВОДЫ, ПОЧВЫ, ЗЕЛЕНОЙ**<br>
**МАССЫ, ЗЕРНА И МАСЛА КУКУРУЗЫ (5 ПОВТОРНОСТЕЙ**<br>
**ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="30%"><col width="26%"><col width="26%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено Топрамезона, мг/кг</td><td>Обнаружено Топрамезона, мг/кг</td><td>Полнота извлечения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,005</td><td>0,0041 +/- 0,0001</td><td>81,2</td></tr>
<tr><td>0,010</td><td>0,0087 +/- 0,0001</td><td>87,2</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,0174 +/- 0,0002</td><td>87,2</td></tr>
<tr><td>0,050</td><td>0,0403 +/- 0,0007</td><td>80,6</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,01</td><td>0,0083 +/- 0,0001</td><td>83,4</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0152 +/- 0,0002</td><td>76,0</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0411 +/- 0,0004</td><td>82,1</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0846 +/- 0,0004</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,0075 +/- 0,0001</td><td>75,2</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0166 +/- 0,001</td><td>83,1</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0416 +/- 0,0003</td><td>83,3</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0736 +/- 0,0017</td><td>73,6</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Масло кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,0086 +/- 0,0002</td><td>86,4</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0182 +/- 0,0004</td><td>91,0</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0414 +/- 0,0004</td><td>82,8</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0920 +/- 0,0014</td><td>92,0</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зеленая масса кукурузы</td><td>0,05</td><td>0,0399 +/- 0,0007</td><td>79,8</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0788 +/- 0,0017</td><td>78,8</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,1498 +/- 0,0030</td><td>74,9</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>0,3744 +/- 0,0048</td><td>74,9</td></tr>
</table>




<a id="p100342"></a>

---