---
title: "\"МУК 4.1.2854-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Проквиназида в зерне и соломе зерновых культур методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2854-11"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2854-11"
---

## "МУК 4.1.2854-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Проквиназида в зерне и соломе зерновых культур методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2854-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Проквиназида в зерне и соломе зерновых культур методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 31.03.2011)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 31 марта 2011 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

31 марта 2011 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРОКВИНАЗИДА В ЗЕРНЕ**
**И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2854-11**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 28.12.2010 N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 31.03.2011.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


### <a id="p100011"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики от 06.10.2010 N 0049.27.09.10.
<a id="p100013"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Проквиназида в зерне зерновых культур в диапазоне 0,01 - 0,2 мг/кг; в соломе зерновых культур в диапазоне 0,04 - 0,4 мг/кг.
<a id="p100014"></a>Название по ИЮПАК: 6-йодо-2-пропокси-3-пропилхиназолин-4(3H)-он.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: C  H  IN O .
                           14 17  2 2
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса: 372,21.
<a id="p100018"></a>Агрегатное состояние: кристаллы.
<a id="p100019"></a>Цвет, запах: белого цвета, без запаха.
                                       -2
<a id="p100020"></a>    Давление насыщенного пара: 9,0 x 10   мПа при 25 °C.
<a id="p100021"></a>    Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 25 °C: K   log P =
                                                                 ow
5,5.
<a id="p100022"></a>Растворимость в воде (при 25 °C и pH 7): 0,93 мг/куб. дм.
<a id="p100023"></a>Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм): в ацетоне, дихлорметане, этилацетате, н-гексане - > 250, в ацетонитриле - 154 +/- 2,1, в метаноле - 136 +/- 1,4.
<a id="p100024"></a>    Проквиназид гидролитически стабилен при pH 4, 7, 9 и не разрушается, но
быстро разлагается на свету с периодом полураспада DT   0,03 дня.
                                                     50
<a id="p100025"></a>    Краткая   токсикологическая  характеристика:  Проквиназид  относится  к
веществам  малоопасным  по острой пероральной (ЛД   для крыс > 4846 мг/кг),
                                                 50
умеренно опасным веществам по дермальной токсичности (ЛД   для кроликов 500
                                                        50
мг/кг) и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК   (4
                                                                      50
ч)  для  крыс более 5200 мг/куб. м воздуха). Не раздражает кожу и слизистые
оболочки  глаз.  Имеются ограниченные доказательства канцерогенного эффекта
при хроническом воздействии.
<a id="p100026"></a>Область применения: Проквиназид - фунгицид контактного действия со специфичной активностью против мучнисторосяных грибов на винограднике и зерновых колосовых культурах.
<a id="p100027"></a>МДУ Проквиназида (в импортируемой продукции): зерно и солома зерновых - 0,02 мг/кг.


### 1. <a id="p100028"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100029"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100030"></a>Таблица 1

<a id="p100031"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ПРОКВИНАЗИДА**


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="19%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зерно зерновых</td><td>0,01 - 0,1</td><td>50</td><td>2,70</td><td>7,51</td><td>8,94</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,2</td><td>25</td><td>3,54</td><td>9,84</td><td>11,71</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Солома зерновых</td><td>0,04 - 0,1</td><td>50</td><td>2,82</td><td>7,84</td><td>9,33</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,4</td><td>25</td><td>2,90</td><td>8,06</td><td>9,59</td></tr>
</table>


<a id="p100037"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100038"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100039"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

**ДЛЯ ПРОКВИНАЗИДА**


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>полнота извлечения вещества, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Зерно зерновых</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,2</td><td>86,35</td><td>3,40</td><td>+/- 1,37</td></tr>
<tr><td>Солома зерновых</td><td>0,04</td><td>0,04 - 0,4</td><td>87,79</td><td>2,89</td><td>+/- 1,19</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100043"></a>Метод измерения


<a id="p100044"></a>Метод основан на определении Проквиназида методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов после экстракции его из зерна и соломы зерновых культур ацетонитрилом, очистки экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися фазами и на колонках с Флоризилом.
<a id="p100045"></a>Идентификация проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100046"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность метода достигается за счет подбора колонки и условий программирования.


### 3. <a id="p100047"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100048"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100049"></a>Весы аналитические "OHAUS", EP 114 с наибольшим
пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г,
класс точности по ГОСТ 24104-2001 - специальный (I)
<a id="p100050"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г "ACCULAB" V600,
соответствуют классу точности
по ГОСТ 24104-2001 - средний (III)
<a id="p100051"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100052"></a>Микрошприц для газовой хроматографии, объем 10 куб. мм,
фирма "Хроматэк", кат. N SO400
<a id="p100053"></a>Пипетки мерные на 1,0, 2,0, 5,0 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
pH-метр/милливольтметр pH-150 0 - 14 pH;
+/- 1999 мВ, номер госрегистрации 10663
<a id="p100054"></a>Хроматограф газовый HP6890 Series GC System
с детектором по захвату электронов (ЭЗД),
регистрационный номер в государственном
реестре средств измерения N 201/978
<a id="p100055"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100056"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100057"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100058"></a>Проквиназид, CAS 189278-12-4, аналитический
стандарт с содержанием действующего вещества
не менее 98,0%, фирма "Dr. Ehreustorfer GmbH",
аккредитованная по ИСО-9001-2000
<a id="p100059"></a>Азот, ос.ч. ГОСТ 9293-74
<a id="p100060"></a>Ацетон, ос.ч.                                               ТУ 6-09-3513-86
<a id="p100061"></a>Ацетонитрил, ос.ч., УФ-200 нм                               ТУ 6-09-2167-84
<a id="p100062"></a>Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72 и (или)
бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная
повторно в стеклянной емкости)
<a id="p100063"></a>Гелий очищенный, марки "A"                                  ТУ-51-940-80
<a id="p100064"></a>n-Гексан, х.ч.                                              ТУ 6-09-3818-89
<a id="p100065"></a>Калий марганцово-кислый, х.ч. ГОСТ 20490-75
<a id="p100066"></a>Кальций хлористый, ч. ТУ 6-09-4711-81
<a id="p100067"></a>Натрий сернокислый, безводный, х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100068"></a>Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77
<a id="p100069"></a>Флоризил (R) (Магния силикат, 99%, CAS 1343-88-0)
для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш,
фирма "Acros Organics"
<a id="p100070"></a>Эфир диэтиловый, ФС 42-3643-98
<a id="p100071"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


#### <a id="p100072"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100073"></a>Аппарат для встряхивания проб
**"SKLO UNION TYP LT1"**
<a id="p100074"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см,
полипропилен, кат. N 3120-0250, фирма "NALGENE"
<a id="p100075"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4
<a id="p100076"></a>Вата медицинская гигроскопическая
хлопковая нестерильная [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100077"></a>Виалы (пузырьки) с тефлоновыми прокладками емкостью
40 куб. см, кат. N Z 27,702-9, фирма "Aldrich"
<a id="p100078"></a>Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100079"></a>Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100080"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi
с водяной баней B-480, фирма "Buchi"
<a id="p100081"></a>Колбы конические плоскодонные
на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100082"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы)
на 100, 250 куб. см и 4000 куб. см ТС                      ТУ 92-891.029-91
<a id="p100083"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая
Rtx(R)-1 (100% диметилполисилоксана), длина 30 м,
внутренний диаметр 0,25 мм,
толщина пленки 0,25 мкм, фирма "Restek"
<a id="p100084"></a>Насос диафрагменный FT.19,
фирма "KNF Neu Laboport"
<a id="p100085"></a>Стаканы стеклянные термостойкие
объемом 100 - 2000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100086"></a>Установка для перегонки растворителей
с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см
и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см
<a id="p100087"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ-6-09-1678-86
<a id="p100088"></a>Центрифуга MPW-350e с набором
полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см
<a id="p100089"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100090"></a>Требования безопасности


<a id="p100091"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100092"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100093"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100094"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100095"></a>Условия измерений


<a id="p100096"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100097"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100098"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100099"></a>Подготовка к определению


<a id="p100100"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с Флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с Флоризилом, построение калибровочной кривой.


#### <a id="p100101"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100102"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100103"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100104"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100105"></a>7.1.2 Очистка ацетона


<a id="p100106"></a>Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм.
<a id="p100107"></a>Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.


##### <a id="p100108"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды


<a id="p100109"></a>Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
<a id="p100110"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.


#### <a id="p100111"></a>7.2. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100112"></a>7.2.1 Стандартный раствор N 1 с концентрацией

Проквиназида 1,0 мг/куб. см

<a id="p100113"></a>Взвешивают 50 мг Проквиназида в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и построения калибровочной кривой. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике не более 4 месяцев.


##### <a id="p100114"></a>7.2.2 Стандартный раствор N 2 с концентрацией

Проквиназида 10,0 мкг/куб. см

<a id="p100115"></a>Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.


##### <a id="p100116"></a>7.2.3 Стандартный раствор N 3 с концентрацией

Проквиназида 1,0 мкг/куб. см

<a id="p100117"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 3 используется для приготовления стандартных растворов. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике не более 1 месяца.


##### <a id="p100118"></a>7.2.4 Стандартный раствор N 4 с концентрацией

Проквиназида 0,2 мкг/куб. см

<a id="p100119"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 2 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 4 используется для приготовления стандартных растворов и для построения калибровочной кривой. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике не более 7 дней.


##### <a id="p100120"></a>7.2.5 Стандартный раствор N 5 с концентрацией

Проквиназида 0,1 мкг/куб. см

<a id="p100121"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 5 используется для приготовления стандартных растворов и для построения калибровочной кривой. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 7 дней.


##### <a id="p100122"></a>7.2.6 Стандартный раствор N 6 с концентрацией

Проквиназида 0,05 мкг/куб. см

<a id="p100123"></a>Из стандартного раствора N 5 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 6 используется для построения калибровочной кривой и хранится в холодильнике не более 7 дней.


##### <a id="p100124"></a>7.2.7 Стандартный раствор N 7 с концентрацией

Проквиназида 0,02 мкг/куб. см

<a id="p100125"></a>Из стандартного раствора N 5 отбирают пипеткой 2 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 7 используется для построения калибровочной кривой и хранится в холодильнике не более 7 дней.


#### <a id="p100126"></a>7.3. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100127"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Проквиназида в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,2, 0,1, 0,05 и 0,02 мкг/куб. см.
<a id="p100128"></a>В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.3](#p100158). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.


#### <a id="p100129"></a>7.4. Подготовка колонки с Флоризилом для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Проквиназида на ней



##### <a id="p100130"></a>7.4.1 Подготовка колонки с Флоризилом

для очистки экстракта

<a id="p100131"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г Флоризила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой Флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
<a id="p100132"></a>Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 куб. см ацетона и затем 10 куб. см гексана тщательно отжимают.


##### <a id="p100133"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения Проквиназида

на колонке с Флоризилом

<a id="p100134"></a>В концентратор объемом 100 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Проквиназида в ацетоне с концентрацией 0,2 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 5 куб. см гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на заранее подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Исходную колбу обмывают 15 куб. см, наносят на колонку, элюат собирают. Затем колонку последовательно промывают четырьмя порциями смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 объемом 5 куб. см каждая. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100135"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 куб. см ацетона и 1 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100136"></a>Определяют фракции, содержащие Проквиназид, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
<a id="p100137"></a>Изучение поведения Проквиназида на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии Флоризила.


### 8. <a id="p100138"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100139"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", от 21.08.1979 N 2051-79, а также по [ГОСТ 13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83) "Зерно. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ Р 50436-92](https://bukva.ai/docs/gost-r-50436-92) (ИСО 950-79) "Зерновые. Отбор проб зерна" и [ГОСТ 27262-87](https://bukva.ai/docs/gost-27262-87) "Корма растительного происхождения. Методы отбора проб".
<a id="p100140"></a>Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.


### 9. <a id="p100141"></a>Подготовка проб и выполнение измерений



#### <a id="p100142"></a>9.1. Зерно зерновых культур



##### <a id="p100143"></a>9.1.1 Экстракция


<a id="p100144"></a>Образец измельченного зерна пшеницы массой 10 г помещают в банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют 10 куб. см дистиллированной воды, 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 45 мин. на аппарат для встряхивания проб. Пробу центрифугируют в течение 5 мин. при скорости 4000 об./мин. и экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 куб. см через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракт объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C.


##### <a id="p100145"></a>9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе

несмешивающихся растворителей

<a id="p100146"></a>К сухому остатку в концентраторе, полученному в [п. 9.1.1](#p100143), прибавляют 5 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, помещают на 1 мин. в ультразвуковую ванну. Затем в концентратор добавляют 100 куб. см воды, 5 г хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см.
<a id="p100147"></a>Проквиназид экстрагируют тремя порциями диэтилового эфира объемом по 50 куб. см, каждый раз встряхивая делительную воронку по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (эфир) собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C.
<a id="p100148"></a>Сухой остаток в концентраторе разводят в 5 куб. см и аликвоту 1 куб. мм вводят в хроматограф.


#### <a id="p100149"></a>9.2. Солома зерновых культур



##### <a id="p100150"></a>9.2.1 Экстракция


<a id="p100151"></a>Образец измельченной соломы пшеницы массой 5 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см воды и оставляют при комнатной температуре на 10 мин. Проквиназид экстрагируют 50 куб. см ацетонитрила, помещая на 45 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 куб. см через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб. Экстракт объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C.


##### <a id="p100152"></a>9.2.2 Очистка экстракта перераспределением в системе

несмешивающихся растворителей

<a id="p100153"></a>К сухому остатку в концентраторе, полученному в [п. 9.2.1](#p100150), прибавляют 5 куб. см ацетонитрила и проводят очистку экстракта, как указано в [п. 9.1.2](#p100145).


##### <a id="p100154"></a>9.2.3 Очистка экстракта на колонке с Флоризилом


<a id="p100155"></a>Сухой остаток в концентраторе, полученный в [п. 9.2.2](#p100152), растворяют в 5 куб. см гексана, тщательно обмывая стенки концентратора, и наносят на заранее подготовленную колонку с Флоризилом. Затем колонку промывают 15 куб. см гексана, элюаты отбрасывают.
<a id="p100156"></a>Проквиназид элюируют с колонки 15 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100157"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 куб. см ацетона и 1 куб. мм вводят в хроматограф.


#### <a id="p100158"></a>9.3. Условия хроматографирования


<a id="p100159"></a>Хроматограф газовый HP6890 Series GC System с детектором по захвату электронов (ЭЗД) в модификации с электронным управлением пневмонической системы (ЭУПС).
<a id="p100160"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая Rtx(R)-1 (100% диметилполисилоксана), длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
<a id="p100161"></a>Температура детектора - 300 °C, поток обдува анода (азот) - 6,0 куб. см/мин., поток поддува - 58,5 куб. см/мин.
<a id="p100162"></a>Температура испарителя - 270 °C, режим - Split, тип газа - гелий, давление - 25,65 psi, деление потока - 20:1, split поток - 29,8 куб. см/мин.
<a id="p100163"></a>Программированный нагрев колонки с 220 °C (выдержка 1 мин.) по 10 град./мин. до 260 °C (выдержка 3 мин.), режим постоянный поток, поток колонки 1,5 куб. см/мин., средняя скорость 40 см/с.
<a id="p100164"></a>Абсолютное время удерживания Проквиназида: 7,294 мин. +/- 3%.
<a id="p100165"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,02 - 0,2 нг.


### 10. <a id="p100166"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100167"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа HP GC ChemStation Rev. A.06.03RUS.
<a id="p100168"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100169"></a>Содержание Проквиназида рассчитывают по формуле:

                               S   x A x V
                                пр
<a id="p100170"></a>                          X = ------------- x P,
                              100 x S   x m
                                     ст

<a id="p100171"></a>    где:
<a id="p100172"></a>    X - содержание Проквиназида в пробе, мг/кг;
<a id="p100173"></a>    S   - высота (площадь) пика стандарта, Hz;
     ст
<a id="p100174"></a>    S   - высота (площадь) пика образца, Hz;
     пр
<a id="p100175"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
<a id="p100176"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100177"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100178"></a>P - содержание Проквиназида в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100179"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100180"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100181"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100182"></a>    где:
<a id="p100183"></a>    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
<a id="p100184"></a> r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100031), при этом r = 2,8 x
сигма .
     r
<a id="p100185"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100181) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100186"></a>Оформление результатов


<a id="p100187"></a>Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100188"></a>              (X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,

<a id="p100189"></a>    где:
    _
<a id="p100190"></a>    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100191"></a>    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100192"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

<a id="p100193"></a>где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100031)), %.
<a id="p100194"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100195"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100196"></a>

---

<a id="p100197"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100198"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100199"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100200"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100201"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100202"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100203"></a>                        C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                         д         л,X         л,X'

<a id="p100204"></a>    где +/- ДЕЛЬТА  _   (+/- ДЕЛЬТА  _ )   -   характеристика   погрешности
                  л,X              л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента в испытуемом  образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100205"></a>                       ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 x ДЕЛЬТА,
                             л

<a id="p100206"></a>    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100207"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

<a id="p100208"></a>    где  дельта  -  граница  относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100031)), %.
<a id="p100209"></a>    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  к
                                  _    _
<a id="p100210"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              к             д

         _    _
<a id="p100211"></a>    где  X',  X,  C  -  среднее   арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100179)) содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100212"></a>    Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100213"></a>                       K = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

<a id="p100214"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
<a id="p100215"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100216"></a>                              |K | <= K,                                (2)
                                к

<a id="p100217"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100218"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100216) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100219"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100220"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100221"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100222"></a>    где:
<a id="p100223"></a>    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
<a id="p100224"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100031)), %.


### 14. <a id="p100225"></a>Разработчики


<a id="p100226"></a>Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А. Тимирязева.
<a id="p100227"></a>Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов".
<a id="p100228"></a>Методика прошла метрологическую экспертизу (Свидетельство об аттестации N 0049.27.09.10 от 06.10.2010 и внесена в Федеральный реестр (ФР.1.31.2010.09014).





<div align="right">

<a id="p100229"></a>Приложение 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100230"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПРОКВИНАЗИДА ИЗ ЗЕРНА И СОЛОМЫ ЗЕРНОВЫХ**<br>
**КУЛЬТУР (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="27%"><col width="27%"><col width="27%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено Проквиназида, мг/кг</td><td>Обнаружено Проквиназида, мг/кг</td><td>Полнота извлечения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно зерновых культур</td><td>0,2</td><td>0,1735 +/- 0,0076</td><td>86,8</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0879 +/- 0,0036</td><td>87,9</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0417 +/- 0,0011</td><td>83,4</td></tr>
<tr><td>0,01</td><td>0,0087 +/- 0,0003</td><td>87,3</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Солома зерновых культур</td><td>0,4</td><td>0,3501 +/- 0,0094</td><td>87,5</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,1742 +/- 0,0063</td><td>87,1</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0863 +/- 0,0030</td><td>86,3</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0361 +/- 0,0010</td><td>90,2</td></tr>
</table>




<a id="p100240"></a>

---