---
title: "\"МУК 4.1.2785-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств паклобутразола в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2785-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2785-10"
---

## "МУК 4.1.2785-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств паклобутразола в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2785-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств паклобутразола в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 24.11.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 24 ноября 2010 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

24 ноября 2010 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПАКЛОБУТРАЗОЛА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ РАПСА МЕТОДОМ**
**КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2785-10**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским научно-исследовательским институтом фитопатологии.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 14.10.2010 N 2).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 24 ноября 2010 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


### <a id="p100011"></a>Общие положения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики N 0035.16.07.10 от 19.07.2010.
<a id="p100013"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств паклобутразола в воде в диапазоне 0,001 - 0,01 мг/куб. дм, в почве и семенах рапса в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг, в зеленой массе и масле рапса в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг.
<a id="p100014"></a>Название вещества по ИСО: паклобутразол.
<a id="p100015"></a>Название вещества по ИЮПАК: (2RS, 3RS)-1-(4-хлорфенил)-4,4-диметил-2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пентан-3-ол.
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100017"></a>    C  H  ClN O.
     15 20   3
<a id="p100018"></a>    Мол. масса: 293,8.
<a id="p100019"></a>    Бесцветное  кристаллическое  вещество.  Температура плавления 165 - 166
°С. Давление  паров  при  20 °С:  0,001  мПа.   Коэффициент   распределения
н-октанол/вода:  K   log P = 3,2. Растворимость (г/куб. дм) при 20 °С: вода
                  ow
-  0,026,  н-гексан  -  10, дихлорметан - 100, ацетон - 110, метанол - 150,
циклогексан - 180.
<a id="p100020"></a>    Вещество  устойчиво  к  фотолизу  и  гидролизу  в кислой, нейтральной и
щелочной средах.
<a id="p100021"></a>    В почвах паклобутразол разрушается очень медленно (в среднем DT   = 180
                                                                   50
-  360  дней);  только  в  щелочных  почвах (pH 8,8) этот процесс протекает
быстрее (DT   < 42 дней).
           50
<a id="p100022"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100023"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для крыс - 1300 - 2000 мг/кг;
                                         50
острая  дермальная  токсичность  (LD  ) для крыс и кроликов - > 1000 мг/кг;
                                    50
острая  ингаляционная  токсичность  (LD  )  для крыс - 3,2 - 4,8 мг/куб. дм
                                       50
воздуха.  Оказывает слабое раздражающее действие на слизистую оболочку глаз
и кожу. LD   для рыб - 27,8 мг/куб. дм (96 ч). Паклобутразол нетоксичен для
          50
птиц, пчел, дафний, водорослей.
<a id="p100024"></a>Область применения
<a id="p100025"></a>Паклобутразол - системный ретардант, обладающий также фунгицидными свойствами. Как ретардант активен на ряде плодовых, древесных, декоративных и зерновых культур. Препарат ингибирует вегетативный рост и увеличивает образование плодовых почек у некоторых плодовых культур, тормозит рост и уменьшает полегание зерновых культур. Помимо этого в небольших дозах он проявляет фунгицидный эффект в отношении возбудителей мучнистой росы и парши. Паклобутразол свободно передвигается по флоэме и ксилеме и поэтому активен как при опрыскивании растений, так и при внесении в почву.
<a id="p100026"></a>Проходит регистрационные испытания в России в качестве ретарданта и фунгицида в составе смесевых препаратов на посевах ярового рапса при норме расхода до 60 г д.в./га и двукратной обработке за сезон.


### 1. <a id="p100027"></a>Метрологические характеристики метода


<a id="p100028"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в [табл. 1](#p100030).
<a id="p100029"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в [табл. 2](#p100041).

<a id="p100030"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="20%"><col width="19%"><col width="14%"><col width="16%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>от 0,001 до 0,01 вкл.</td><td>100</td><td>2,9</td><td>8</td><td>9</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Почва</td><td>от 0,02 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>2,8</td><td>8</td><td>9</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,2 вкл.</td><td>25</td><td>2,5</td><td>7</td><td>8</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зеленая масса</td><td>от 0,05 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>2,9</td><td>8</td><td>10</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>2,7</td><td>7</td><td>9</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Семена</td><td>от 0,02 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>2,7</td><td>7</td><td>9</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,2 вкл.</td><td>25</td><td>2,2</td><td>6</td><td>7</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Масло</td><td>от 0,05 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>3,0</td><td>8</td><td>10</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>2,6</td><td>7</td><td>8</td></tr>
</table>


<a id="p100041"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="15%"><col width="19%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>полнота извлечения вещества, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата, +/- %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,001</td><td>0,001 - 0,01</td><td>91,3</td><td>2,6</td><td>+/- 2,5</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>88,7</td><td>3,6</td><td>+/- 3,3</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>86,1</td><td>4,1</td><td>+/- 3,8</td></tr>
<tr><td>Семена</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>84,8</td><td>3,3</td><td>+/- 3,1</td></tr>
<tr><td>Масло</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>86,0</td><td>3,4</td><td>+/- 3,2</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100048"></a>Метод измерений


<a id="p100049"></a>Методика основана на определении вещества с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД). Контроль паклобутразола в матрицах осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из воды смесью гексан - этилацетат (8:2, по объему), из почвы и зеленой массы рапса водным ацетоном, из семян и масла рапса ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем.
<a id="p100050"></a>Идентификация вещества проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100051"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.


### 3. <a id="p100052"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



#### <a id="p100053"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100054"></a>Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" ТИД (СКБ           номер Госреестра
"Хроматэк", Россия)                                     N 14516-95
<a id="p100055"></a>Весы аналитические Sartorius 6110 с наибольшим
пределом взвешивания до 110 г и пределом допустимой
погрешности 0,0001 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100056"></a>Весы лабораторные Metler P-160 с наибольшим пределом
взвешивания до 160 г и пределом допустимой
погрешности 0,005 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100057"></a>Набор гирь ГОСТ 7328-2001
<a id="p100058"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100059"></a>Пипетки градуированные 1-1-2-1, 1-1-2-2, 1-2-2-5,
1-2-2-10 [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100060"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой
П-2-5-0,1; П-2-10-0,2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100061"></a>Цилиндры мерные 1-25; 1-50; 1-100; 1-500; 1-1000 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100062"></a>Микрошприц МШ-1А                                        ТУ 64-1-2850


#### <a id="p100063"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100064"></a>Аналитический стандарт паклобутразола
(CAS 76738-62-0) с содержанием основного вещества
99,7% (Сингента, Швейцария)
<a id="p100065"></a>Ацетон квалификации чда ГОСТ 2603-79
<a id="p100066"></a>Ацетонитрил квалификации хч                             ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100067"></a>Вода дистиллированная или деионизированная ГОСТ 6709-72
<a id="p100068"></a>н-Гексан квалификации хч                                ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100069"></a>Калий углекислый квалификации хч [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100070"></a>Калия перманганат квалификации хч ГОСТ 20490-75
<a id="p100071"></a>Кальция хлорид квалификации хч                          ГОСТ 4161-77
<a id="p100072"></a>Кислота серная квалификации хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100073"></a>Натрий углекислый квалификации хч                       ГОСТ 83-63
<a id="p100074"></a>Натрия сульфат безводный квалификации хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100075"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат)
квалификации ч [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)


#### <a id="p100076"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<div align="center">

<a id="p100077"></a>Азот газообразный (баллон) квалификации осч ГОСТ 9293-74

</div>

<a id="p100078"></a>Аппарат для встряхивания проб АВУ-1                     ТУ 64-1-1081-73
<a id="p100079"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма Branson
Instr. Co. (США)
<a id="p100080"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая
нестерильная [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100081"></a>Гомогенизатор "Omni-mixer" (Sorvall, США) или
гомогенизатор                                           МРТУ 42-1505
<a id="p100082"></a>Дистиллятор Cyclon III, мод. 4 BD (Fistreem,
Великобритания)
<a id="p100083"></a>Установка Elgastat B 114 с патроном Elgacan B 114
для получения деионизированной воды (Elga,
Великобритания)
<a id="p100084"></a>Воронки делительные вместимостью 100 и 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100085"></a>Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100086"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100087"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100088"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100089"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 25 и
100 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100090"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая
ZB-1 (типа SE-30), длина 25 см, внутренний диаметр
0,32 мм, толщина пленки 0,5 мкм, фирма Phenomenex
(США), или аналогичная
<a id="p100091"></a>Колонка хроматографическая стеклянная длиной 25 см,
внутренним диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100092"></a>Мельница лабораторная электрическая                     ТУ 46-22-236-84
<a id="p100093"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или
ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi
(Швейцария)                                             ТУ 25-11-917-76
<a id="p100094"></a>Силикагель 60 (0,063 - 0,2 мм) для колоночной
хроматографии (Мерк, Германия)
<a id="p100095"></a>Стаканы химические вместимостью 50 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100096"></a>Стекловата
<a id="p100097"></a>Установка для перегонки растворителей с [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
дефлегматором                                           (ИСО 641-75)
<a id="p100098"></a>Фильтры бумажные "красная лента" обеззоленные           ТУ 6-09-2678-77.
<a id="p100099"></a>Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не хуже приведенных в разделе 3.


### 4. <a id="p100100"></a>Требования безопасности


<a id="p100101"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100102"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100103"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100104"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100105"></a>Условия выполнения измерений



#### <a id="p100106"></a>6.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия.

<a id="p100107"></a>Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:
- <a id="p100108"></a>температура воздуха (20 +/- 5) °С;
- <a id="p100109"></a>атмосферное давление (84 - 106) кПа;
- <a id="p100110"></a>относительная влажность воздуха не более 80%.

#### <a id="p100111"></a>6.2 Условия хроматографического анализа.

<a id="p100112"></a>Температура термостата испарителя 270 °С;
<a id="p100113"></a>Температура детектора 300 °С.
<a id="p100114"></a>Режим программирования температуры колонки:
<a id="p100115"></a>начальная температура 170 °С (1 мин.), скорость подъема температуры до 245 °С (0 мин.) 20 °С/мин.;
<a id="p100116"></a>от 245 до 260 °С (4 мин.), скорость подъема температуры 5 °С/мин.;
<a id="p100117"></a>от 260 до 280 °С (5 мин.), скорость подъема температуры 20 °С/мин.
<a id="p100118"></a>Расход газов:
<a id="p100119"></a>газа-носителя (азот) 2,2 куб. см/мин.;
<a id="p100120"></a>водорода 12,2 куб. см/мин.;
<a id="p100121"></a>воздуха 185 куб. см/мин.
<a id="p100122"></a>Деление потока: 1:1.
<a id="p100123"></a>Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
<a id="p100124"></a>Время удерживания паклобутразола: 6 мин. 07 с +/- 2%.
<a id="p100125"></a>Линейный диапазон детектирования: (0,05 - 1,0) нг.


### 7. <a id="p100126"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100127"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем.


#### <a id="p100128"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100129"></a>7.1.1 Очистка н-гексана

<a id="p100130"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

##### <a id="p100131"></a>7.1.2 Очистка этилацетата

<a id="p100132"></a>Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

##### <a id="p100133"></a>7.1.3 Очистка ацетона

<a id="p100134"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом  калия  и  поташом (на 1 куб. дм
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3

##### <a id="p100135"></a>7.1.4 Очистка силикагеля

<a id="p100136"></a>Силикагель 60 (0,063 - 0,2 мм) для колоночной хроматографии встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона, высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре в течение 5 - 6 часов и затем активируют при температуре 130 °С в течение 5 часов.


#### <a id="p100137"></a>7.2. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта


<a id="p100138"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 3 г силикагеля в 15 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 куб. см гексана со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.


#### <a id="p100139"></a>7.3. Определение объема элюента, необходимого для полного вымывания паклобутразола из колонки с силикагелем


<a id="p100140"></a>При отработке методики или поступлении новой партии силикагеля проводят определение объема элюента, необходимого для полного вымывания паклобутразола из колонки с силикагелем.
<a id="p100141"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора N 1 паклобутразола с массовой концентрацией 10,0 мкг/куб. см в смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему) [(п. 7.5.2)](#p100149) и отдувают растворитель током теплого воздуха. Остаток растворяют в 3 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по [п. 7.2](#p100137). Промывают колонку 30 куб. см смеси гексан - этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Затем через колонку с силикагелем пропускают 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (4:6, по объему), отбирая последовательно по 5 куб. см элюата. Каждую фракцию упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °С, сухие остатки растворяют в 2 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и затем хроматографируют в соответствии с [п. 6.2](#p100111). По результатам обнаружения паклобутразола в каждой фракции определяют объем смеси гексан - этилацетат (4:6, по объему), необходимый для полного вымывания вещества с колонки.
<a id="p100142"></a>*Примечание.* При разработке метода анализа паклобутразола в масличных культурах целесообразно проверку хроматографического поведения вещества на колонке с силикагелем проводить с использованием экстрактов контрольных образцов семян и масла.


#### <a id="p100143"></a>7.4. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100144"></a>Капиллярную кварцевую колонку ZB-1 (типа SE-30) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280 °С и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 - 10 часов.


#### <a id="p100145"></a>7.5. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100146"></a>7.5.1 Исходный раствор паклобутразола для градуировки с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см

<a id="p100147"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают (0,010 +/- 0,0001) г паклобутразола, растворяют в 40 куб. см ацетона, доводят объем раствора этим же растворителем до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100148"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше (-18) °С в течение 2-х месяцев.

##### <a id="p100149"></a>7.5.2 Градуировочный раствор паклобутразола с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см (раствор N 1)

<a id="p100150"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного раствора паклобутразола с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.5.1)](#p100146), разбавляют смесью гексан - этилацетат (8:2, по объему) до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100151"></a>Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше (-18) °С в течение месяца.
<a id="p100152"></a>7.5.3. Градуировочные растворы паклобутразола с массовой концентрацией (0,05 - 0,5) мкг/куб. см (растворы N 2 - 5)
<a id="p100153"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 куб. см градуировочного раствора N 1 паклобутразола с массовой концентрацией 10,0 мкг/куб. см [(п. 7.5.2)](#p100149), доводят до метки смесью гексан - этилацетат (8:2, по объему), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией паклобутразола 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100154"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


#### <a id="p100155"></a>7.6. Градуировка хроматографа


<a id="p100156"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х с) от концентрации паклобутразола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м градуировочным растворам [(п. 7.5.3)](#p100152).
<a id="p100157"></a>В испаритель (инжектор) хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора [(п. 7.5.3)](#p100152) и анализируют при условиях хроматогрфирования по [п. 6.2](#p100111). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предела повторяемости r.


#### <a id="p100158"></a>7.7. Контроль стабильности градуировочной характеристики


<a id="p100159"></a>Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.
<a id="p100160"></a>Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.
<a id="p100161"></a>Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

                         S    - S
                          изм    гр
<a id="p100162"></a>                         ---------- х 100 <= К  ,
                            S                 гр
                             гр
    где:
    S     и  S    -  значение  площади  пика  паклобутразола  в образце для
     изм      гр
контроля,   измеренное   и   найденное  по   градуировочной  характеристике
соответственно, усл. ед.;
    К   - норматив контроля;
     гр

<a id="p100163"></a>                             К   = 0,5 ДЕЛЬТА,
                              гр

 где +/- дельта - границы относительной погрешности, % [(табл. 1)](#p100030).
<a id="p100164"></a>Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.
<a id="p100165"></a>Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.


### 8. <a id="p100166"></a>Отбор, подготовка и хранение проб


<a id="p100167"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.1979) и правилами, определенными [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 17.4.3.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 8988-2002](https://bukva.ai/docs/standart-gost-8988-2002) "Масло рапсовое. ТУ".
<a id="p100168"></a>Пробы воды анализируют в день отбора или замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре (-18) °С не более 2-х недель.
<a id="p100169"></a>Образцы почвы подсушивают на воздухе в темноте, помещают в герметичную полиэтиленовую тару и хранят в холодильнике при температуре (4 - 6) °С не более 4-х недель. Для длительного хранения образцы почвы замораживают и хранят при температуре (-18) °С.
<a id="p100170"></a>Пробы зеленой массы рапса хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 1 дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят при (-18) °С.
<a id="p100171"></a>Пробы семян подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
<a id="p100172"></a>Пробы масла рапса хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре (0 - 4) °С. В некоторых случаях масло получают из семян рапса экстракцией органическими неполярными растворителями (петролейный и диэтиловый эфиры) непосредственно перед проведением анализа.
<a id="p100173"></a>Перед проведением анализа зеленую массу измельчают, а семена размалывают на электрической мельнице.


### 9. <a id="p100174"></a>Выполнение определения



#### <a id="p100175"></a>9.1. Экстракция и очистка


<a id="p100176"></a>9.1.1. Вода. 100 куб. см отфильтрованной воды помещают в делительную воронку вместимостью 250 куб. см, добавляют 30 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему) и воронку интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний органический слой отделяют и фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу. Водную фазу экстрагируют указанной выше смесью еще дважды порциями по 25 куб. см. Объединенную органическую фракцию упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), раствор помещают в ультразвуковую ванну на 1 минуту и анализируют на содержание паклобутразола по 10.
<a id="p100177"></a>9.1.2. Почва. Образец воздушно-сухой почвы массой 25 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 125 куб. см смеси ацетон - вода (8:2, по объему), перемешивают и колбу помещают на встряхиватель на 1 час. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Почву повторно экстрагируют 75 куб. см указанной выше смеси в течение 30 минут при встряхивании и фильтруют. Измеряют объем объединенного экстракта и 1/5 его часть, эквивалентную 5 г образца, переносят в круглодонную колбу. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. 9.2](#p100181).
<a id="p100178"></a>9.1.3. Зеленая масса. Навеску (20 г) измельченного растительного материала помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, приливают 100 куб. см смеси ацетон - вода (8:2, по объему), перемешивают и колбу помещают на встряхиватель на 40 минут. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Остаток на фильтре промывают 50 куб. см смеси ацетон - вода (8:2, по объему). Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/4 его часть, эквивалентную 5 г образца, переносят в круглодонную колбу. Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2](#p100181).
<a id="p100179"></a>9.1.4. Семена. Образец размолотых семян массой 10 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 50 куб. см ацетонитрила и колбу помещают на аппарат для встряхивания на 40 минут. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Растительный материал, оставшийся на фильтре, повторно экстрагируют 30 куб. см ацетонитрила в течение 30 минут при встряхивании и суспензию фильтруют. Измеряют объем объединенного ацетонитрильного экстракта и 1/2 его часть, эквивалентную 5 г образца, переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 10 куб. см насыщенного ацетонитрилом гексана, интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают, а ацетонитрильную фракцию упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. 9.3](#p100183).
<a id="p100180"></a>9.1.5. Масло. Образец масла массой 5 г переносят в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 50 куб. см ацетонитрила и колбу помещают на аппарат для встряхивания на 40 минут. Верхний ацетонитрильный слой декантируют в делительную воронку через слой ваты, помещенной в конусную воронку. К оставшемуся в колбе маслу приливают 25 куб. см ацетонитрила и операцию экстракции повторяют. После декантации вату промывают 10 куб. см ацетонитрила, которые объединяют с фильтратом. В делительную воронку, содержащую объединенную ацетонитрильную фракцию, вносят 15 куб. см насыщенного ацетонитрилом гексана, интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают, а ацетонитрильную фракцию упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С. Далее очистку экстракта проводят по [п. 9.3](#p100183).


#### <a id="p100181"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100182"></a>Экстракты, полученные по [пп. 9.1.2](#p100177) и [9.1.3](#p100178) и помещенные в круглодонные колбы, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °С. К водному остатку прибавляют 20 куб. см дистиллированной воды, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2), интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя 30 и 20 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему). Объединенную органическую фракцию, содержащую паклобутразол, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток экстракта почвы растворяют в 2 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), раствор помещают в ультразвуковую ванну на 1 минуту и анализируют на содержание паклобутразола по [п. 10](#p100185). Экстракт зеленой массы подвергают дальнейшей очистке по п. 9.3.


#### <a id="p100183"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем


<a id="p100184"></a>Сухой остаток экстрактов семян и масла, полученный по [пп. 9.1.4](#p100179) и [9.1.5](#p100180), и сухой остаток экстракта зеленой массы, полученный по [п. 9.2](#p100181), растворяют в 2 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.2](#p100137). Колбу обмывают 2 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), которые также наносят на колонку. Колонку промывают 25 куб. см смеси гексан - этилацетат (1:1, по объему) при анализе экстракта зеленой массы и 15 куб. см этой же смеси при анализе экстрактов семян и масла со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Паклобутразол элюируют с колонки 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (4:6, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток экстракта семян растворяют в 2 куб. см, а экстрактов зеленой массы и масла в 5 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание паклобутразола по п. 10.


### 10. <a id="p100185"></a>Выполнение измерений


<a id="p100186"></a>10.1. В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм очищенного экстракта анализируемой пробы ([пп. 9.1](#p100175) - 9.3), анализируют при условиях [п. 6.2](#p100111) и регистрируют хроматограмму. Каждый экстракт хроматографируют дважды.
<a id="p100187"></a>10.2. Для каждого образца воды, почвы, зеленой массы, семян и масла рапса повторяют операции по [пп. 9.1](#p100175) - 9.3, [10.1](#p100186).


### 11. <a id="p100188"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100189"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программа сбора и обработки хроматографической информации "Хроматэк Аналитик", версия 1.20.
<a id="p100190"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100191"></a>Содержание паклобутразола рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                  H  х A х V
                                   1
<a id="p100192"></a>                             X = ------------,
                                 100 х H  х m
                                        0

    где:
    X - содержание паклобутразола в пробе, мг/куб. дм, мг/кг;
    H  - площадь пика образца, мВ х с;
     1
    H  - площадь пика стандарта, мВ х с;
     0
    A - концентрация стандартного раствора паклобутразола, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемой части  образца, соответствующая доле экстракта,
использованной  для очистки и последующего хроматографического определения,
куб. см, г.


### 12. <a id="p100193"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100194"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                          2 |X  - X | х 100
                              1    2
<a id="p100195"></a>                          ----------------- <= r,                       (1)
                              (X  + X )
                                1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг (куб. дм);
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100030), при этом r = 2,8 сигма .
                                                                        r
<a id="p100196"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100195) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 13. <a id="p100197"></a>Оформление результатов


<a id="p100198"></a>Результат анализа представляют в виде:

<a id="p100199"></a>        (X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, (куб. дм) при вероятности Р = 0,95,

    где:
    _
    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг (куб. дм);
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг (куб. дм);

<a id="p100200"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100030)), %.
<a id="p100201"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100202"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения"
<a id="p100203"></a>менее 0,001 мг/куб. дм для воды <*>;
<a id="p100204"></a>менее 0,02 мг/кг для почвы и семян <**>;
<a id="p100205"></a>менее 0,05 мг/кг для зеленой массы и масла <***>.

<a id="p100206"></a>

---

<a id="p100207"></a><*> 0,001 мг/куб. дм - предел обнаружения для воды.
<a id="p100208"></a><**> 0,02 мг/кг - предел обнаружения для почвы и семян.
<a id="p100209"></a><***> 0,05 мг/кг - предел обнаружения для зеленой массы и масла.

<a id="p100210"></a>Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал паклобутразола, превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуировочного раствора с массовой концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют, но не более чем в 10 раз, и анализируют в соответствии с данной методикой. При расчете содержания паклобутразола учитывают разбавление.


### 14. <a id="p100211"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100212"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100213"></a>14.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100214"></a>14.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100215"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100216"></a>                       С  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,X         л,X'

    где  +/-  ДЕЛЬТА  _ (+/-  ДЕЛЬТА  _ )  -   характеристика   погрешности
                    л,X             л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг (куб. дм) при этом:

<a id="p100217"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг (куб. дм);

<a id="p100218"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х X / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100030)), %.
<a id="p100219"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к
                                  _    _
<a id="p100220"></a>                             К  = X' - X - С ,
                              к             д

         _   _
    где  X', X, С   -  среднее  арифметическое   результатов   параллельных
                 д
определений (признанных приемлемыми по [п. 12](#p100193)) содержания компонента в
образце   с   добавкой,    испытуемом    образце,   концентрация    добавки
соответственно, мг/кг (куб. дм).
<a id="p100221"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              ______________________
                             /      2             2
<a id="p100222"></a>                      К =   / ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА   .
                          \/        л,X'         л,X

<a id="p100223"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100224"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100225"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

    процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100226"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100225) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100227"></a>14.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100228"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                          2 |X  - X | х 100
                              1    2
<a id="p100229"></a>                          ----------------- <= R,                       (3)
                              (X  + X )
                                1    2

    где:
    X , X   -  результаты  измерений  в  двух  разных  лабораториях,  мг/кг
     1   2
(куб. дм);
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[табл. 1](#p100030)), %.





<div align="right">

<a id="p100230"></a>Приложение

<a id="p100231"></a>Таблица

</div>


<div align="center">

<a id="p100232"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПАКЛОБУТРАЗОЛА В МОДЕЛЬНЫХ МАТРИЦАХ**<br>
(n = 5)

</div>



<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="28%"><col width="31%"><col width="28%"></colgroup>
<tr><td>Матрица</td><td>Внесено паклобутразола, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Открыто паклобутразола, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,001</td><td>89,2</td><td>+/- 3,3</td></tr>
<tr><td>0,002</td><td>91,2</td><td>+/- 2,4</td></tr>
<tr><td>0,005</td><td>91,8</td><td>+/- 2,3</td></tr>
<tr><td>0,01</td><td>93,0</td><td>+/- 1,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,02</td><td>86,0</td><td>+/- 3,9</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>88,0</td><td>+/- 3,2</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>88,6</td><td>+/- 2,4</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>92,2</td><td>+/- 2,1</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зеленая масса</td><td>0,05</td><td>83,4</td><td>+/- 4,4</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>84,6</td><td>+/- 3,3</td></tr>
<tr><td>0,25</td><td>86,0</td><td>+/- 2,8</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>90,2</td><td>+/- 2,5</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Семена рапса</td><td>0,02</td><td>83,0</td><td>+/- 3,3</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>83,2</td><td>+/- 3,2</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>85,6</td><td>+/- 2,7</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>87,2</td><td>+/- 2,3</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Масло рапса</td><td>0,05</td><td>85,4</td><td>+/- 4,0</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>84,0</td><td>+/- 3,2</td></tr>
<tr><td>0,25</td><td>86,0</td><td>+/- 3,0</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>88,4</td><td>+/- 2,7</td></tr>
</table>




<a id="p100254"></a>

---