---
title: "\"МУК 4.1.2779-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пикоксистробина в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур, зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2779-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2779-10"
---

## "МУК 4.1.2779-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пикоксистробина в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур, зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2779-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пикоксистробина в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур, зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 24.11.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 24 ноября 2010 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
24 ноября 2010 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПИКОКСИСТРОБИНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ**
**И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2779-10**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 14.10.2010 N 2).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 24 ноября 2010 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


### <a id="p100011"></a>Общие положения


<a id="p100012"></a>Свидетельство об аттестации методики 0047.22.09.10 от 28.09.2010.
<a id="p100013"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Пикоксистробина в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/куб. дм и в почве в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/кг, а также уровня остаточных количеств в зерне зерновых культур в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, в соломе зерновых культур в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг, в зеленой массе сахарной свеклы в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг и в корнеплодах сахарной свеклы в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК:
<a id="p100015"></a>Метил (Е)-3-метокси-2-[2-(6-трифторметил-2-пиридилоксиметил) фенил]акрилат.
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C  H  F NO .
                           18 16 3  4
<a id="p100018"></a>Молекулярная масса: 367,3.
<a id="p100019"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100020"></a>Цвет, запах: от белого до светло-бежевого цвета без запаха.
                            -3
<a id="p100021"></a>    Давление паров: 5,5 х 10   мПа (при 20 °С).
<a id="p100022"></a>    Коэффициент распределения октанол - вода (20 °С): K   log P = 3,6.
                                                       ow
<a id="p100023"></a>Температура плавления: 75 °С.
<a id="p100024"></a>Растворимость в воде, мг/куб. дм (20 °С): 3,1.
<a id="p100025"></a>Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 20 °С): метанол - 96; 1,2-дихлорэтан, ацетон, ксилол, этилацетат - более 250.
<a id="p100026"></a>Устойчив к гидролизу в диапазоне pH 5 - 7.
<a id="p100027"></a>    Краткая  токсикологическая  характеристика:  Пикоксистробин относится к
веществам  мало  опасным  по  острой  пероральной (ЛД   для крыс более 5000
                                                     50
мг/кг)  и  дермальной токсичности (ЛД   для крыс 2120 мг/кг), но к умеренно
                                     50
опасным  веществам  по  ингаляционной  токсичности  (ЛК   для крыс (4 часа)
                                                       50
более  2000  мг/куб.  м).  Не  вызывает  покраснения кожных покровов и глаз
кроликов.   Не   обладает  генотоксическим,  канцерогенным  и  тератогенным
свойствами.
<a id="p100028"></a>Область применения: Пикоксистробин - фунгицид защитного, ограниченно системного действия, применяется для борьбы с широким спектром заболеваний, вызываемых ложномучнисторосяными и мучнисторосяными грибами.
<a id="p100029"></a>Предлагается в России в качестве фунгицида в посевах зерновых колосовых культур при норме расхода 120 г д.в./га.
<a id="p100030"></a>В России для Пикоксистробина установлены следующие гигиенические нормативы:
<a id="p100031"></a>ДСД - 0,04 мг/кг массы человека; ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 мг/куб. м; ОДК в почве - 0,4 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,03 мг/куб. дм; МДУ в зерне хлебных злаков - 0,2 мг/кг, в корнеплодах сахарной свеклы - 0,05 мг/кг.


### 1. <a id="p100032"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100033"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100034"></a>Таблица 1

<a id="p100035"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ПИКОКСИСТРОБИНА**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="24%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Вода</td><td>0,005 - 0,01 вкл.</td><td>100</td><td>0,95</td><td>2,63</td><td>3,14</td></tr>
<tr><td>0,01 - 0,05 вкл.</td><td>50</td><td>0,60</td><td>1,67</td><td>1,99</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,1 - 1,0 вкл.</td><td>25</td><td>1,28</td><td>3,56</td><td>4,24</td></tr>
<tr><td>Зерно пшеницы</td><td>0,01 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,26</td><td>3,50</td><td>4,16</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Солома пшеницы</td><td>0,05 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,07</td><td>2,97</td><td>3,54</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>1,46</td><td>4,05</td><td>4,82</td></tr>
<tr><td>Корнеплоды сахарной свеклы</td><td>0,01 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>1,24</td><td>3,44</td><td>4,10</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса</td><td>0,02 - 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>0,81</td><td>2,24</td><td>2,67</td></tr>
<tr><td>сахарной свеклы</td><td>0,1 - 0,2 вкл.</td><td>25</td><td>0,61</td><td>1,70</td><td>2,02</td></tr>
</table>


<a id="p100046"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100047"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100048"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

**ДЛЯ ПИКОКСИСТРОБИНА**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="24%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>полнота извлечения вещества, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,05</td><td>94,8</td><td>1,13</td><td>+/- 0,50</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,1</td><td>0,1 - 1,0</td><td>80,7</td><td>2,51</td><td>+/- 0,95</td></tr>
<tr><td>Зерно пшеницы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>73,9</td><td>0,99</td><td>+/- 0,34</td></tr>
<tr><td>Солома пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>76,9</td><td>2,52</td><td>+/- 0,91</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса сахарной свеклы</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>77,8</td><td>4,44</td><td>+/- 0,45</td></tr>
<tr><td>Корнеплоды сахарной свеклы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,5</td><td>1,14</td><td>+/- 1,62</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100056"></a>Метод измерений


<a id="p100057"></a>Метод основан на определении Пикоксистробина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами на колонках с окисью алюминия и концентрирующих патронах Диапак С16.
<a id="p100058"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100059"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.


### 3. <a id="p100060"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



#### <a id="p100061"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100062"></a>Весы аналитические "OHAUS", ЕР 114 с наибольшим пределом
взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс
точности по ГОСТ 24104-2001 - специальный (I)
<a id="p100063"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г "ACCULAB" V600, соответствуют
классу точности по ГОСТ 24104-2001 - средний (III)
<a id="p100064"></a>Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100065"></a>Микрошприц для жидкостной хроматографии, объем
100 куб. мм, фирма "Hamilton", кат. N 80665
<a id="p100066"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100067"></a>рН-метр/милливольтметр рН-150, 0... 14 рН;
+/- 1999 мВ, номер госрегистрации N 10663
<a id="p100068"></a>Хроматограф жидкостный Agilent 1200 LCMS с диодно-
матричным детектором G1315В, снабженный термостатом для
колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С и
стандартным автосамплером для автоматического ввода
пробы в хроматографическую систему (1200 Series
Autosampler с дозирующим объемом от 0,1 до 100 куб. мм)    N госрегистрации
                                                           16193-06
<a id="p100069"></a>Хроматограф жидкостный Waters 515 с ультрафиолетовым
детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью
не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер
госрегистрации N 15311-02
<a id="p100070"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100071"></a>Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100072"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100073"></a>Пикоксистробин, CAS 117428-22-5, аналитический
стандарт с содержанием действующего вещества не
менее 99,2%, фирма Dr. Ehreustorfer GmbH,
аккредитованная по ИСО-9001-2000
<a id="p100074"></a>Алюминий, окись для хроматографии, ч                ТУ 6-09-3916-75
<a id="p100075"></a>Ацетон, осч                                         ТУ 6-09-3513-86
<a id="p100076"></a>Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм                         ТУ 6-09-2167-84
<a id="p100077"></a>Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная
(вода дистиллированная, перегнанная повторно в
стеклянной емкости) ГОСТ 6709-72
<a id="p100078"></a>Гелий очищенный марки "А"                           ТУ 51-940-80
<a id="p100079"></a>n-Гексан, хч                                        ТУ 6-09-3818-89
<a id="p100080"></a>Калий марганцовокислый, чда ГОСТ 20490-75
<a id="p100081"></a>Кальций хлористый, ч ТУ 6-09-4711-81
<a id="p100082"></a>Концентрирующие патроны Диапак Амин и Диапак С16
(0,6 г), фирма "БиоХимМак СТ"                       ТУ 4215-002-05451931-94
<a id="p100083"></a>Натрий сернокислый безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100084"></a>Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77.
<a id="p100085"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100086"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100087"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы
с концентрирующими патронами Диапак Амин и Диапак С16 ГОСТ 25336-82
<a id="p100088"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1"
<a id="p100089"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см,
полипропилен, кат. N 3120-0250, фирма "NALGENE"
<a id="p100090"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4
<a id="p100091"></a>Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная [ГОСТ 5556-81](https://bukva.ai/docs/gost-5556-81)
<a id="p100092"></a>Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100093"></a>Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
<a id="p100094"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной
баней В-480, фирма "Buchi"
<a id="p100095"></a>Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100096"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250
куб. см и 4000 куб. см ТС                                  ТУ 92-891.029-91
<a id="p100097"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм с
внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18,
зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100098"></a>Насос диафрагменный FT.19, фирма "KNF Neu Laboport"
<a id="p100099"></a>Предколонка хроматографическая стальная Simmetry С18,
20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100100"></a>Предколонка хроматографическая стальная, Zorbax Eclipse
XDB-C8, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм,
зернение 5 мкм, фирма "Agilent"
<a id="p100101"></a>Сито лабораторное с полотном из латуни или нержавеющей
стали с размером ячеек 1 мм ГОСТ 3826-82 и
 ГОСТ 6613-86
<a id="p100102"></a>Стаканы стеклянные термостойкие объемом 100 - 500
куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100103"></a>Установка для перегонки растворителей с круглодонной
колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой
объемом 1000 куб. см
<a id="p100104"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-1678-86
<a id="p100105"></a>Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с
отверстиями пор 20 мкм, фирма "Waters"
<a id="p100106"></a>Центрифуга MPW-350e с числом оборотов 4000 об./мин. и с
набором полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см
<a id="p100107"></a>Шприц инъекционный однократного применения объемом
10 куб. см                                                 ГОСТ 24861-91
                                                           (ИСО 7886-84).
<a id="p100108"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


### 4. <a id="p100109"></a>Требования безопасности


<a id="p100110"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100111"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100112"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100113"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.


### 6. <a id="p100114"></a>Условия измерений


<a id="p100115"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100116"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- <a id="p100117"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100118"></a>Подготовка к выполнению определений


<a id="p100119"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия, концентрирующих патронов Диапак Амин и Диапак С16 для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак Амин и Диапак С16, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100120"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100121"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100122"></a>Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей.
<a id="p100123"></a>Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

##### <a id="p100124"></a>7.7.2 Очистка ацетона

<a id="p100125"></a>Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм.
<a id="p100126"></a>Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

##### <a id="p100127"></a>7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды

<a id="p100128"></a>Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 часов.
<a id="p100129"></a>Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.


#### <a id="p100130"></a>7.2. Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100131"></a>7.2.1 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100132"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.
<a id="p100133"></a>В плоскодонную колбу объемом 1000 куб. см помещают 600 куб. см ацетонитрила и 400 куб. см очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту. Готовый раствор подвижной фазы хранят при комнатной температуре не более 7 суток.

##### <a id="p100134"></a>7.2.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100135"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией Пикоксистробина 1,0 мг/куб. см.
<a id="p100136"></a>Взвешивают 50 мг Пикоксистробина в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100137"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией Пикоксистробина 10,0 мкг/куб. см.
<a id="p100138"></a>Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 2 используется для внесения в контрольные образцы и для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100139"></a>7.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией Пикоксистробина 1,0 мкг/куб. см.
<a id="p100140"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 3 используется для установления градуировочной характеристики и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100141"></a>7.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией Пикоксистробина 0,5 мкг/куб. см.
<a id="p100142"></a>Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 4 используется для установления градуировочной характеристики и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 4 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100143"></a>7.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией Пикоксистробина 0,2 мкг/куб. см.
<a id="p100144"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 50 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 5 используется для установления градуировочной характеристики и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор N 5 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100145"></a>7.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией Пикоксистробина 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100146"></a>Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 6 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 6 хранится в холодильнике не более 30 суток.
<a id="p100147"></a>7.2.2.7. Стандартные растворы с концентрацией Пикоксистробина 5,0; 2,5; 2,0 и 0,4 мкг/куб. см для внесения в контрольные образцы.
<a id="p100148"></a>Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,5; 2,0 и 0,4 мкг/куб. см, и используют эти растворы с целью внесения в контрольные образцы. Стандартные растворы для внесения в контрольные образцы хранятся в холодильнике не более 30 суток.


#### <a id="p100149"></a>7.3. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100150"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Пикоксистробина в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100151"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100223). Осуществляют не менее 5-ти параллельных измерений.


#### <a id="p100152"></a>7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на ней



##### <a id="p100153"></a>7.4.1 Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта

<a id="p100154"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 куб. см ацетонитрила.

##### <a id="p100155"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на колонке с окисью алюминия

<a id="p100156"></a>В концентратор объемом 100 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Пикоксистробина в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100157"></a>Исходную колбу обмывают еще двумя порциями ацетонитрила объемом по 10 куб. см каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом по 100 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100158"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100159"></a>Определяют фракции, содержащие Пикоксистробин, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.
<a id="p100160"></a>Изучение поведения Пикоксистробина на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.


#### <a id="p100161"></a>7.5. Подготовка концентрирующих патронов Диапак Амин для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на них



##### <a id="p100162"></a>7.5.1 Подготовка концентрирующих патронов Диапак Амин для очистки экстракта

<a id="p100163"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100164"></a>Патрон Диапак Амин устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100165"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:9. Элюат отбрасывают.
<a id="p100166"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

##### <a id="p100167"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на патроне Диапак Амин

<a id="p100168"></a>В концентратор объемом 100 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Пикоксистробина в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, добавляют 9 куб. см гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят раствор на патрон. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100169"></a>Исходную колбу обмывают еще двумя порциями смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:9 объемом по 10 куб. см каждая и последовательно вносят их на патрон. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом по 100 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100170"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100171"></a>Определяют фракции, содержащие Пикоксистробин, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100172"></a>Изучение поведения Пикоксистробина на концентрирующих патронах Диапак Амин проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100173"></a>7.6. Подготовка концентрирующих патронов Диапак С16 для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на них



##### <a id="p100174"></a>7.6.1 Подготовка концентрирующих патронов Диапак С16 для очистки экстракта

<a id="p100175"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. (1 - 2 кап./с).
<a id="p100176"></a>Патрон Диапак С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100177"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см смеси ацетонитрила с водой соотношении 2:1, затем 20 куб. см воды. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100178"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

##### <a id="p100179"></a>7.6.2 Проверка хроматографического поведения Пикоксистробина на концентрирующих патронах Диапак С16

<a id="p100180"></a>Из стандартного раствора Пикоксистробина в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100181"></a>Исходный концентратор обмывают последовательно двумя порциями по 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:4, затем 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:2, затем двумя порциями по 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:1, полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100182"></a>Определяют фракции, содержащие Пикоксистробин, полноту смывания с патрона и необходимый объем элюента.
<a id="p100183"></a>Изучение поведения Пикоксистробина на концентрирующих патронах Диапак С16 проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов.


#### <a id="p100184"></a>7.7. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии


<a id="p100185"></a>Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Zorbax Eclipse XDB-С8 или Simmetry С18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 часа.


### 8. <a id="p100186"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100187"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" N 2051-79 от 21.08.1979, а также в соответствии с [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 17.4.3.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", [ГОСТ 28168-89](https://bukva.ai/docs/gost-28168-89) "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ 13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83) "Зерно. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ Р 50436-92](https://bukva.ai/docs/gost-r-50436-92) (ИСО 950-79) "Зерновые. Отбор проб зерна", [ГОСТ 27262-87](https://bukva.ai/docs/gost-27262-87) "Корма растительного происхождения. Методы отбора проб" и [ГОСТ Р 52647-2006](https://bukva.ai/docs/prikaz-gost-r-52647-2006) "Свекла сахарная. ТУ".
<a id="p100188"></a>Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С; пробы почвы - в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °С.
<a id="p100189"></a>Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
<a id="p100190"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
<a id="p100191"></a>Пробы зеленой массы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °С в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °С.


### 9. <a id="p100192"></a>Подготовка проб и выполнение измерений



#### <a id="p100193"></a>9.1. Вода



##### <a id="p100194"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100195"></a>Пробу воды объемом 100 куб. см помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см, прибавляют туда 5 г хлористого натрия и перемешивают до полного растворения соли. Пикоксистробин экстрагируют тремя порциями гексана объемом по 30 куб. см, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) объединяют в концентраторе объемом 250 куб. см, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100196"></a>9.1.2 Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия

<a id="p100197"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на заранее подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см. Исходную колбу обмывают 10 куб. см ацетонитрила и вносят на колонку. Элюаты объединяют в концентраторе и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100198"></a>Сухой остаток растворяют в 5 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100199"></a>9.2. Почва



##### <a id="p100200"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100201"></a>Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют туда 10 куб. см воды и выдерживают 10 минут при комнатной температуре. Пикоксистробин экстрагируют 75 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 в течение 10 минут на аппарате для встряхивания. Затем пробу центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 75 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и помещая каждый раз на 10 минут на аппарат для встряхивания. Пробы центрифугируют, фильтруют, экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 минут при комнатной температуре.
<a id="p100202"></a>Объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см (нерастворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний (водный) слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100203"></a>9.2.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100204"></a>К сухому остатку в концентраторе, полученному по [п. 9.2.1](#p100200), прибавляют 5 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки колбы, затем прибавляют 100 куб. см дистиллированной воды, 5 г хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см.
<a id="p100205"></a>Пикоксистробин экстрагируют тремя порциями гексана объемом по 30 куб. см, каждый раз встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) собирают в коническую колбу объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия.
<a id="p100206"></a>Затем гексановый экстракт переносят в чистую делительную воронку объемом 250 куб. см и экстрагируют Пикоксистробин тремя порциями ацетонитрила объемом по 30 куб. см, каждый раз встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний (ацетонитрильный) слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100207"></a>9.2.3 Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С16

<a id="p100208"></a>Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила и очищают на колонке с окисью алюминия, как указано в [п. 9.1.2](#p100196). Элюат выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С и подвергают дальнейшей очистке на концентрирующих патронах Диапак С16.
<a id="p100209"></a>Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см воды, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:4, затем 10 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:2. Растворы наносят на патрон и элюаты также отбрасывают. Пикоксистробин элюируют 20 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100210"></a>Сухой остаток растворяют в 10 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100211"></a>9.3. Зерно пшеницы



##### <a id="p100212"></a>9.3.1 Экстракция

<a id="p100213"></a>Образец измельченного зерна пшеницы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см дистиллированной воды, 40 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 40 куб. см ацетонитрила и помещая на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 минут при комнатной температуре.
<a id="p100214"></a>Затем объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку (нерастворившуюся соль оставляют в колбе) объемом 250 куб. см, оставляют до полного разделения слоев в делительной воронке. Нижний водный слой отбрасывают, а верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100215"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100203) "Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей" и [п. 9.2.3](#p100207) "Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С16".
<a id="p100216"></a>После очистки элюат выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100217"></a>9.4. Солома пшеницы



##### <a id="p100218"></a>9.4.1 Экстракция

<a id="p100219"></a>Образец измельченной соломы пшеницы массой 5 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см ацетонитрила и оставляют при комнатной температуре на 10 минут. Пикоксистробин экстрагируют 75 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1, помещая на 5 минут в ультразвуковую ванну. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 75 куб. см смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 и помещая каждый раз на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 минут при комнатной температуре.
<a id="p100220"></a>Затем объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см (нерастворившуюся соль оставляют в колбе), оставляют до полного разделения слоев и нижний водный слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100221"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100203) "Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей" и [п. 9.2.3](#p100207) "Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С16".
<a id="p100222"></a>После очистки элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100223"></a>9.5. Корнеплоды сахарной свеклы



##### <a id="p100224"></a>9.5.1 Экстракция

<a id="p100225"></a>Образец измельченных корнеплодов сахарной свеклы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, приливают туда 40 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 10 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 40 куб. см ацетонитрила и помещая на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 10 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 минут при комнатной температуре.
<a id="p100226"></a>Затем объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку (нерастворившуюся соль оставляют в колбе) объемом 250 куб. см, оставляют до полного разделения слоев в делительной воронке. Нижний водный слой отбрасывают, а верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100227"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100203) "Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей" и [п. 9.1.2](#p100196) "Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия".
<a id="p100228"></a>После очистки элюат выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100229"></a>9.6. Зеленая масса сахарной свеклы



##### <a id="p100230"></a>9.6.1 Экстракция

<a id="p100231"></a>Образец измельченной зеленой массы сахарной свеклы массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, приливают туда 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 10 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия через фильтр "красная лента". Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 куб. см ацетонитрила и помещая на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 10 минут на аппарат для встряхивания проб. Экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см с 5 г хлорида натрия, перемешивают и выдерживают 10 минут при комнатной температуре.
<a id="p100232"></a>Затем объединенный экстракт из колбы переносят в делительную воронку (нерастворившуюся соль оставляют в колбе) объемом 250 куб. см, оставляют до полного разделения слоев в делительной воронке. Нижний водный слой отбрасывают, а верхний ацетонитрильный слой собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100233"></a>Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2.2](#p100203) "Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей" и [п. 9.2.3](#p100207) "Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С16".
<a id="p100234"></a>При недостаточной степени очистки пробу очищают на концентрирующих патронах Диапак Амин.

##### <a id="p100235"></a>9.6.2 Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Амин

<a id="p100236"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 1 куб. см ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 куб. см гексана, перемешивают и вносят на подготовленный патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см. Исходную колбу обмывают 10 куб. см смеси ацетона с гексаном в соотношении 1:9 и вносят на патрон. Элюаты объединяют в концентраторе и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100237"></a>Сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100238"></a>9.7. Условия хроматографирования


<a id="p100239"></a>9.7.1. Хроматограф жидкостный Agilent 1200 LCMS с диодно-матричным детектором G1315B с изменяемой длиной волны, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С и стандартным автосамплером для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему (1200 Series Autosampler с дозирующим объемом от 0,1 до 100 куб. мм).
<a id="p100240"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм х 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100241"></a>Предколонка стальная Zorbax Eclipse XDB-С8, 12,5 мм х 2,1 мм, зернение 5 мкм, фирма "Agilent".
<a id="p100242"></a>Температура колонки: 30 °С.
<a id="p100243"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 60:40.
<a id="p100244"></a>Длина волны: 250 нм.
<a id="p100245"></a>Время удерживания Пикоксистробина: 11,5 мин. +/- 3%.
<a id="p100246"></a>Чувствительность не менее 10 mAU (миллиединиц абсорбции) на шкалу.
<a id="p100247"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100248"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.
<a id="p100249"></a>9.7.2. Хроматограф жидкостный Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации N 15311-02, или другой с аналогичными характеристиками.
<a id="p100250"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 250 мм х 4,6 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100251"></a>Предколонка стальная Simmetry С18, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".
<a id="p100252"></a>Температура колонки: 30 °С.
<a id="p100253"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 60:40.
<a id="p100254"></a>Длина волны: 250 нм.
<a id="p100255"></a>Время удерживания Пикоксистробина: 12,2 мин. +/- 3%.
<a id="p100256"></a>Чувствительность не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).
<a id="p100257"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100258"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.


### 10. <a id="p100259"></a>Обработка результатов


<a id="p100260"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Agilent Technologies ChemStation for LC 3D или Empower2.
<a id="p100261"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100262"></a>Содержание Пикоксистробина рассчитывают по формуле:

                               S   х А х V
                                пр
<a id="p100263"></a>                          Х = ------------- х P,
                              100 х S   х m
                                     ст

    где:
    Х - содержание Пикоксистробина в пробе, мг/кг;
    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
    А - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
    P - содержание Пикоксистробина в аналитическом стандарте, %.


### 11. <a id="p100264"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100265"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                          2 |Х  - Х | х 100
                              1    2
<a id="p100266"></a>                          ----------------- <= r,                       (1)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100035), при этом
r = 2,8 х сигма .
               r
<a id="p100267"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100266) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100268"></a>Оформление результатов


<a id="p100269"></a>Результат анализа представляют в виде:

              _
<a id="p100270"></a>             (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100271"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100035)), %.
<a id="p100272"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100273"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100274"></a>

---

<a id="p100275"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


### 13. <a id="p100276"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100277"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100278"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100279"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100280"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100281"></a>                       С  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,Х         л,Х'

    где   +/-  ДЕЛЬТА  _  (+/-  ДЕЛЬТА  _ )  -  характеристика  погрешности
                     л,Х              л,Х'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100282"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100283"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    где дельта - граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100035)), %.
<a id="p100284"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100285"></a>                             К  = Х' - Х - С ,
                              к             д

         _    _
    где  Х',  Х,  С   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100264)) содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100286"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100287"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,Х'         л,Х

<a id="p100288"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100289"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100290"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100291"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100290) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100292"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100293"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                          2 |Х  - Х | х 100
                              1    2
<a id="p100294"></a>                          ----------------- <= R,                       (3)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[табл. 1](#p100035)), %.





<div align="right">

<a id="p100295"></a>Приложение 1

<a id="p100296"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПИКОКСИСТРОБИНА**

</div>

<div align="center">

**ИЗ ВОДЫ, ПОЧВЫ, ЗЕРНА И СОЛОМЫ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР**<br>
**(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="17%"><col width="22%"><col width="35%"><col width="26%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено, мг/кг</td><td>Обнаружено, мг/кг</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,005</td><td>0,0047 +/- 0,0001</td><td>94,4</td></tr>
<tr><td>0,010</td><td>0,0095 +/- 0,0001</td><td>94,6</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,0192 +/- 0,0001</td><td>96,2</td></tr>
<tr><td>0,050</td><td>0,0469 +/- 0,0001</td><td>93,8</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,1</td><td>0,0815 +/- 0,0005</td><td>81,5</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,1593 +/- 0,0003</td><td>79,6</td></tr>
<tr><td>0,5</td><td>0,4062 +/- 0,0022</td><td>81,2</td></tr>
<tr><td>1,0</td><td>0,7788 +/- 0,0017</td><td>77,9</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно пшеницы</td><td>0,01</td><td>0,0074 +/- 0,0001</td><td>73,6</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0147 +/- 0,0001</td><td>73,7</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0370 +/- 0,0002</td><td>74,0</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0743 +/- 0,0004</td><td>74,3</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Солома пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,0388 +/- 0,0002</td><td>77,5</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0788 +/- 0,0004</td><td>78,8</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,1483 +/- 0,0007</td><td>74,2</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>0,3859 +/- 0,0025</td><td>77,2</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса</td><td>0,02</td><td>0,0166 +/- 0,0002</td><td>83,2</td></tr>
<tr><td rowspan="3">сахарной свеклы</td><td>0,05</td><td>0,0374 +/- 0,0003</td><td>74,8</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0753 +/- 0,0034</td><td>75,3</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,1559 +/- 0,0012</td><td>78,0</td></tr>
<tr><td>Корнеплоды сахарной</td><td>0,01</td><td>0,0085 +/- 0,0001</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td rowspan="3">свеклы</td><td>0,02</td><td>0,0167 +/- 0,0003</td><td>83,7</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0424 +/- 0,0007</td><td>84,9</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,0849 +/- 0,0012</td><td>84,9</td></tr>
</table>




<a id="p100322"></a>

---