--- title: "\"МУК 4.1.2773-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовых концентраций летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, изомасляная, масляная, валериановая, изокапроновая, капроновая) в биосредах (кровь) газохроматографическим методом. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.2773-10" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2773-10" --- ## "МУК 4.1.2773-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовых концентраций летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, изомасляная, масляная, валериановая, изокапроновая, капроновая) в биосредах (кровь) газохроматографическим методом. Методические указания" # "МУК 4.1.2773-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовых концентраций летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, изомасляная, масляная, валериановая, изокапроновая, капроновая) в биосредах (кровь) газохроматографическим методом. Методические указания" (утв. Роспотребнадзором 22.11.2010) > [!IMPORTANT] > Документ [введен](#p100002) в действие с 22 ноября 2010 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
22 ноября 2010 года #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ** **КИСЛОТ (УКСУСНАЯ, ПРОПИОНОВАЯ, ИЗОМАСЛЯНАЯ, МАСЛЯНАЯ,** **ВАЛЕРИАНОВАЯ, ИЗОКАПРОНОВАЯ, КАПРОНОВАЯ) В БИОСРЕДАХ** **(КРОВЬ) ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **МУК 4.1.2773-10**
Дата введения:
с момента утверждения 1. Разработаны Федеральным государственным учреждением науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" Роспотребнадзора. 2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 14.10.2010 N 2). 3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 22 ноября 2010 г. 4. Введены впервые. 1. Общие положения и область применения 1.1. Методические указания по определению массовых концентраций летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, изомасляная, масляная, валериановая, изокапроновая, капроновая) в биосредах (кровь) предназначены для использования территориальными органами и подведомственными организациями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, осуществляющими деятельность в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды. 1.2. Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием летучих жирных кислот в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды. Методические указания метрологически аттестованы (свидетельство N 223.1.11.11.98/2009.) #### 1.3 Уксусная кислота (CH COOH), мол. масса 60,05. 3 Уксусная кислота - бесцветная жидкость с характерным запахом. T = 118,1 °C. Растворяется в воде и органических растворителях. кип Плотность уксусной кислоты (15 °C) 1,0553 г/куб. см. Обладает сильным раздражающим действием. Вызывает гипертрофические и атрофические фарингиты, ларингиты, а также конъюнктивиты и бронхиты [[пункт 1](#p100223) Приложения настоящих МУК] <*>. --- <*> Далее по тексту ссылка на номер пункта [Приложения](#p100222) указывается одним номером в квадратных скобках. #### 1.4 Пропионовая кислота (CH CH COOH), мол. масса 74,08. 3 2 Пропионовая кислота - бесцветная жидкость с характерным запахом. T = кип 141,3 °C. Смешивается в любых соотношениях с водой. Растворяется в органических растворителях. Плотность пропионовой кислоты (20 °C) 0,993 г/куб. см. Вызывает изменения функционального состояния центральной и вегетативной нервной систем, а также функций печени, изменения интенсивности тканевого дыхания [[1]](#p100223). #### 1.5 Изомасляная кислота (CH CH CH COOH), мол. масса 88,00. 3 2 2 Изомасляная кислота - бесцветная жидкость с характерным запахом. T = 163,5 °C. Растворяется в органических растворителях. Плотность кип изомасляной кислоты (20 °C) 0,958 г/куб. см. Раздражает кожу и слизистые оболочки [[1]](#p100223). #### 1.6 Масляная кислота (CH CH CH COOH), мол. масса 80,10. 3 2 2 Масляная кислота - бесцветная жидкость с характерным запахом. T = 163,5 °C. Растворяется в органических растворителях. Плотность кип масляной кислоты (20 °C) 0,958 г/куб. см. Раздражает кожу и слизистые оболочки [[1]](#p100223). #### 1.7 Валериановая кислота (CH (CH ) COOH), мол. масса 102,14. 3 2 3 Валериановая кислота - бесцветная прозрачная жидкость с характерным запахом. T = 185,4 °C. Плотность валериановой кислоты (25 °C) 0,9391 кип г/куб. см. Вызывает изменения функций печени [[1]](#p100223). #### 1.8 Капроновая кислота (CH (CH ) COOH), мол. масса 116,16. 3 2 4 Капроновая кислота - бесцветная прозрачная жидкость с резким неприятным запахом. T = 205,3 °C. Плотность капроновой кислоты (25 °C) 0,929 г/куб. кип *см.* Вызывает патологические сдвиги в центральной и периферической нервных системах, печени и миокарде [[1]](#p100223). 1.9. Диапазон измерений массовых концентраций летучих жирных кислот приведен в табл. 1. Таблица 1 **НАИМЕНОВАНИЕ ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ ВЕЩЕСТВ И ДИАПАЗОНЫ ИЗМЕРЕНИЙ** | Наименование определяемого вещества | Диапазон измерений, мкг/куб. см | | --- | --- | | 1. Уксусная кислота | От 1,56 до 16 включ. | | 2. Пропионовая кислота | -"- 1 -"- 10 -"- | | 3. Изомасляная кислота | -"- 1 -"- 10 -"- | | 4. Масляная кислота | -"- 1 -"- 10 -"- | | 5. Валериановая кислота | -"- 0,5 -"- 5 -"- | | 6. Капроновая кислота | -"- 0,5 -"- 5 -"- | 2. Приписанные характеристики погрешности измерений Методика обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 2. Таблица 2
**ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ТОЧНОСТИ,**
**ПОВТОРЯЕМОСТИ, ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ПРЕЦИЗИОННОСТИ,**
**ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ**
Диапазон измерений, мкг/куб. смПоказатель повторяемости (относительное значение среднеквадратического отклонения повторяемости), сигма , % rПоказатель внутрилабораторной прецизионности (относительное значение среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности), сигма , % R лПоказатель воспроизводимости (относительное значение среднеквадратического отклонения воспроизводимости), сигма , % RПоказатель точности <*> (границы относительной погрешности при вероятности P = 0,95), +/- дельта, %
От 0,5 до 1 включ.9101122
Св. 1 до 16 включ.67816
<*> Соответствует относительной расширенной неопределенности измерений при коэффициенте охвата 2
3. Сущность метода Методика основана на экстракции летучих жирных кислот из крови изобутиловым спиртом в кислой среде и последующем газохроматографическом анализе экстракта. Выполнение измерений массовой концентрации летучих жирных кислот выполняют методом газовой хроматографии с использованием пламенно-ионизационного детектора. Длительность анализа, включая экстракцию пробы, - 60 мин.
4. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы и реактивы При подготовке проб крови и измерении концентраций летучих жирных кислот в анализируемом растворе применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы. #### 4.1 Средства измерений Хроматограф газовый "Кристалл 2000М" с пламенно-ионизационным детектором Секундомер "Агат" ТУ 25-1894.003-90 Микрошприцы МШ-10 ТУ 2.833.106-2000 Весы аналитические ВЛР-200 ГОСТ 24104-2001 Разновесы Г -210 ГОСТ 7328-82 2 Колбы мерные вместимостью 100, 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Пипетки вместимостью 5, 10 куб. см [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) Бюксы стеклянные ГОСТ 25336-82 Пробирки конические вместимостью 10 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Дозаторы [ГОСТ 28311-89](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89) Уксусная кислота ГСО 8462-2003 #### 4.2 Вспомогательные устройства
Хроматографическая капиллярная колонка
HP-FFAP - 50 м x 0,32 мм x 0,5 мкм Редуктор кислородный ТУ 26-05-236-73 Миницентрифуга СМ-4, 6000 об./мин. #### 4.3 Материалы
Газообразный азот в баллоне ТУ 6-027376-65
Водород технический [ГОСТ 3022-80](https://bukva.ai/docs/usloviya-gost-3022-80) Воздух в баллоне ГОСТ 17433-80 Бумага индикаторная универсальная pH 1,0 - 10,0 в упаковке 100 штук ПНД 50-975-84 (перечень нормативных документов) (Чешская Республика) #### 4.4 Реактивы Пропионовая кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich Buchs Switzerland) Изомасляная кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich USA) Масляная кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich USA) Валериановая кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich Buchs Switzerland) Изокапроновая кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich Buchs Switzerland)) Капроновая кислота для газовой хроматографии с содержанием основного вещества >= 99,9% (Sigma-Aldrich Buchs Switzerland) Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72 Изобутиловый спирт, ч.д.а. [ГОСТ 6016-77](https://bukva.ai/docs/gost-6016-77) Серная кислота, ос.ч. [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78) Калий двухромовокислый, ч.д.а. ГОСТ 4220-75 Натрий гидроксид, х.ч. ГОСТ 4328-77 Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования и химреактивов с аналогичными или лучшими метрологическими и техническими характеристиками. 5. Требования безопасности 5.1. При выполнении работ соблюдаются меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004-91 [[2]](#p100224), имеются средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83 [[3]](#p100225) и соблюдаются правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79* 2001 [[4]](#p100226). 5.2. При работе необходимо соблюдать "Правила по технике безопасности и производственной санитарии при работе в химических лабораториях" (Утверждены МЗ СССР 20.12.82), М., 1981, и "[Правила](https://bukva.ai/docs/pravila-ustroystva-i-bezopasnoy-ekspluatatsii) устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением" (Утверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87), М.: Недра, 1989. 5.3. При работе с реактивами следует соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76 [[5]](#p100227) и 12.1.005-88 [[6]](#p100228). Помещение должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. 5.4. При работе с биологическими средами необходимо соблюдать правила в соответствии с требованиями СП 1.3.2322-08 [[7]](#p100229). 5.5. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79* 2001 [[4]](#p100226) и инструкции по эксплуатации прибора.
6. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и опыт работы на газовом хроматографе и в химической лаборатории, прошедшие соответствующий инструктаж, освоившие метод в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.
7. Условия измерений
#### 7.1 При приготовлении растворов и подготовке проб к анализу соблюдают следующие условия: - температура воздуха (20 +/- 5) °C; - атмосферное давление 630 - 800 мм рт. ст.; - влажность воздуха не более 80% при температуре 25 °C. 7.2. Выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией к прибору.
8. Подготовка к выполнению измерений
Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, приготовление стандартных смесей, установление градуировочной характеристики. #### 8.1 Подготовка посуды Посуду для анализа замочить на 1 час в свежеприготовленном 3%-ном растворе двухромовокислого калия в серной кислоте (5,70 г двухромовокислого калия на 100 куб. см концентрированной серной кислоты), отмыть в проточной водопроводной воде, ополоснуть дистиллированной водой и просушить при температуре 120 °C. #### 8.2 Подготовка хроматографической колонки Хроматографическая капиллярная колонка протестирована на заводе-изготовителе: образец MN-Test температурный режим: колонка - от 80 °C до 320 °C при скорости нагрева колонки 8 °C/мин., детектор ионизации в пламени - 280 °C. Колонку подключают к детектору, записывают нулевую линию в рабочем режиме. При отсутствии шумовых сигналов колонка готова к работе. #### 8.3 Приготовление стандартных растворов Для построения градуировочного графика готовят серию стандартных растворов. Для этого применяют стандартные образцы. 8.3.1. Исходный стандартный раствор летучих жирных кислот. В мерную пробирку вместимостью 10 куб. см вносят 3 куб. см изобутилового спирта, добавляют 15 куб. мм уксусной кислоты, по 10 куб. мм пропионовой, изомасляной, масляной кислот и по 5 куб. мм валериановой, изокапроновой и капроновой кислот. Раствор доводят до 5 куб. см изобутиловым спиртом, перемешивают. Концентрация компонентов в исходной стандартной смеси (с учетом плотности и содержания основного вещества) составляет для уксусной кислоты - 3120 мкг/куб. см, пропионовой - 1996 мкг/куб. см, изомасляной кислоты - 1916 мкг/куб. см, масляной кислоты - 1918 мкг/куб. см, валериановой кислоты - 930 мкг/куб. см, изокапроновой кислоты - 923 мкг/куб. см, капроновой кислоты - 923 мкг/куб. см. Срок хранения раствора 12 ч при комнатной температуре. 8.3.2. 1%-ный раствор серной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 куб. см вносят 20 куб. см дистиллированной воды, добавляют 1 куб. см серной кислоты. Объем раствора в колбе доводят до метки после охлаждения дистиллированной водой, перемешивают. 8.3.3. 0,4%-ный раствор натрия гидроксида. В мерную колбу объемом 100 куб. см вносят 0,4 г натрия гидроксида и доводят до метки после охлаждения дистиллированной водой, перемешивают. #### 8.4 Установление градуировочной характеристики 8.4.1. Приготовление градуировочных растворов для калибровки. Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной калибровки. По 5 стандартным смесям строят зависимость площади пика на хроматограмме (кв. мм) от концентрации кислоты (мкг/куб. см). Растворы готовят в мерных пробирках вместимостью 10 куб. см из исходного стандартного раствора, в соответствии с табл. 3 объем раствора в каждой пробирке доводят до 2 куб. см изобутиловым спиртом.
Таблица 3
**РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ**
**ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ В КРОВИ ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ДИАПАЗОНЕ**
**КОНЦЕНТРАЦИЙ 0,5 - 1 МКГ/КУБ. СМ И 1 - 16 МКГ/КУБ. СМ**
| Градуировочный раствор | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Объем исходного стандартного раствора, куб. мм | 1 | 3 | 5 | 7 | 10 | | Концентрация уксусной кислоты, мкг/куб. см | 1,560 | 4,680 | 7,800 | 10,920 | 15,600 | | Концентрация пропионовой кислоты, мкг/куб. см | 0,998 | 2,990 | 4,990 | 6,990 | 9,980 | | Концентрация изомасляной кислоты, мкг/куб. см | 0,960 | 2,870 | 4,790 | 6,710 | 9,580 | | Концентрация масляной кислоты, мкг/куб. см | 0,960 | 2,880 | 4,790 | 6,710 | 9,590 | | Концентрация валериановой кислоты, мкг/куб. см | 0,470 | 1,390 | 2,330 | 3,260 | 4,650 | | Концентрация изокапроновой кислоты, мкг/куб. см | 0,460 | 1,390 | 2,310 | 3,230 | 4,620 | | Концентрация капроновой кислоты, мкг/куб. см | 0,460 | 1,390 | 2,310 | 3,230 | 4,620 | 8.4.2. Приготовление рабочих растворов. Для построения градуировочного графика используют цельную кровь, не содержащую исследуемые компоненты. В пробирки со стандартными смесями, приготовленными по [п. 8.4.1](#p100116), добавляют по 2 куб. см крови, подкисляют 0,5 куб. см 1%-ного раствора серной кислоты до pH 2 - 3 (pH среды контролируется по индикаторной бумаге), экстрагируют 2 куб. см изобутилового спирта в течение 5 - 10 мин. Для отделения денатурированных белков экстракты центрифугируют при 6000 об./мин. в течение 10 мин., надосадочную жидкость переносят в бюкс. Прибавляют по 0,1 куб. см 0,4%-ного раствора щелочи (pH среды контролируется по индикаторной бумаге), растворы упаривают досуха при температуре 50 - 55 °C (экстракты упариваются под ИК-лампой). Добавляют 0,05 куб. см 1%-ного раствора серной кислоты, 0,1 куб. см изобутанола, перемешивают. 8.4.3. Хроматографирование растворов. В хроматографическую колонку через испаритель вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях: температура термостата колонок 70 - 160 - 180 - 280 °C при скорости нагревания 10 - 5 - 25 °C/мин.; расход газа-носителя (азот) - 30 куб. см/мин.; деление потока 1:10. Время удерживания: - уксусной кислоты - 21 мин. (47 +/- 23) с; - пропионовой кислоты - 23 мин. (47 +/- 23) с; - изомасляной кислоты - 24 мин. (9 +/- 23) с; - масляной кислоты - 25 мин. (43 +/- 23) с; - валериановой кислоты - 29 мин. (46 +/- 23) с; - изокапроновой кислоты - 32 мин. (22 +/- 23) с; - капроновой кислоты - 34 мин. (29 +/- 23) с. Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле: n SUM C / S i=1 i i K = -----------, n C - концентрация вещества в градуировочной смеси, мкг/куб. см; i S - среднее значение пяти измерений площади пика i-ой концентрации, i расхождение между минимальным и максимальным значением которых не должно превышать 4% сигнала милливольт (Мв); n - количество градуировочных смесей (n = 5). ##### 8.4.4 Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация летучих жирных кислот соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики. Градуировка признается стабильной при выполнении условия: |X - C| <= 0,10 x C, где: C - заданная концентрация кислоты в градуировочном растворе; X - результат измерения массовой концентрации кислоты в градуировочном растворе. При невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики. #### 8.5 Отбор проб Отбор проб венозной крови объемом не менее 4 куб. см производят в тщательно вымытую стеклянную пробирку с притертой пробкой. Анализ крови проводят в течение суток. Возможно хранение пробы крови в морозильной камере не более пяти дней. 9. Выполнение измерений Отбирают 2 куб. см крови и помещают в химически чистую центрифужную пробирку вместимостью 10 куб. см, добавляют 0,5 куб. см 1%-ного раствора серной кислоты до достижения pH 2 - 3 и экстрагируют 2 куб. см изобутанола в течение 10 мин. Экстракт центрифугируют при 6000 об./мин. в течение 10 мин., надосадочную жидкость переносят в бюкс, прибавляют 0,1 куб. см 0,4%-ного раствора щелочи. Раствор упаривают досуха, добавляют 0,05 куб. см 1%-ного раствора серной кислоты, 0,1 куб. см изобутанола и проводят количественное определение кислот в подготовленной пробе газохроматографическим методом. Для каждого образца делают по три ввода подготовленной пробы. Условия выполнения измерений по [п. 8.4.3](#p100129). 10. Обработка (вычисление) результатов измерений #### 10.1 Концентрацию анализируемых кислот в крови C, мкг/куб. см, рассчитывают по формуле: V x A 1 C = K ------, (1) V x B 2 где: V - объем рабочего раствора, куб. см; 1 V - объем вводимой пробы, куб. мм; 2 A - количество компонента в объеме вводимой пробы, найденное по калибровочному графику, мкг; B - объем крови, куб. см; K - коэффициент пересчета, учитывающий степень экстракции кислот из крови. Коэффициент устанавливается в результате расчета отношения площадей хроматографических пиков, полученных при анализе стандартного образца до и после экстракции: K = 2,100; уксусная кислота K = 1,500; пропионовая кислота K = 1,140; изомасляная кислота K = 1,220; масляная кислота K = 1,095; валериановая кислота K = 1,050; изокапроновая кислота K = 1,140. капроновая кислота _ За результат измерения принимают среднее арифметическое значение C двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости C , C max min (параллельных определений), для которых выполняется условие: C + C 1 2 |C - C | <= 0,01 x r x -------, (2) 1 2 2 где r - предел повторяемости. Значения предела повторяемости приведены в табл. 4. Таблица 4
**ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛОВ ПОВТОРЯЕМОСТИ, ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ**
**И КРИТИЧЕСКОГО ДИАПАЗОНА ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ**
P = 0,95 | Диапазон измерений, мкг/куб. см | Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях повторяемости), r, % | Предел внутрилабораторной прецизионности (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях внутрилабораторной прецизионности), R , % л | Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, % | | --- | --- | --- | --- | | От 0,5 до 1 включ. | 25 | 28 | 31 | | Св. 1 до 16 включ. | 17 | 20 | 22 | При невыполнении [условия (2)](#p100172) получают дополнительно еще два результата измерений. За результат измерений принимают среднее арифметическое четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие: C + C + C + C 1 2 3 4 |C - C | <= 0,01 x CR (4) x -----------------, (3) max,4 min,4 0,95 4 где CR (4) - критический диапазон. Значения предела повторяемости 0,95 приведены в [табл. 4](#p100175). #### 10.3 Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости: C + C _ _ 1 2 |C - C | <= 0,01 x R x -------, (4) 1 2 2 _ _ где C и C - результаты измерений массовых концентраций летучих жирных 1 2 кислот, полученные в разных лабораториях, - средние арифметические двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется [условие (4)](#p100183). В случае, если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание уксусной кислоты в пробе менее 3,0 мкг/куб. см, где 3,0 мкг/куб. см - предел обнаружения". При выполнении [условия (4)](#p100183) приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их среднее арифметическое значение. Значения предела воспроизводимости приведены в [табл. 4](#p100175). 10. Оформление результатов измерений _ Результат измерения представляют в виде (C +/- ДЕЛЬТА) мкг/куб. см, где ДЕЛЬТА - характеристика погрешности, мкг/куб. см, при P = 0,95, значение ДЕЛЬТА рассчитывают по формуле: _ дельта x C ДЕЛЬТА = ----------, 100 где значение дельта приведено в [табл. 2](#p100044). *Примечание.* При представлении результата измерений в документах, выдаваемых лабораторией, указывают: - количество результатов параллельных определений, использованных для расчета результата измерений; - способ определения результата измерений (среднее арифметическое значение или медиана результатов параллельных определений).
12. Контроль стабильности результатов измерений
в пределах лаборатории Контроль стабильности результатов измерений в пределах лаборатории организуют и проводят в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) [[8]](#p100230) и рекомендациями по межгосударственной стандартизации [РМГ 76-2004 ГСИ](https://bukva.ai/docs/rmg-76-2004) [[9]](#p100231). Периодичность получения результатов контрольных процедур и формы их регистрации приводят в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории.
13. Алгоритм оперативного контроля процедуры измерений
с использованием метода добавок Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры K с нормативом контроля к K. Результат контрольной процедуры K рассчитывают по формуле: к _ _ K = |C' - C - C |, к д где: _ C' - результат измерений массовой концентрации кислоты в пробе с известной добавкой - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет [условию (2)](#p100172); _ C - результат измерений массовой концентрации кислоты в исходной пробе - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет [условию (2)](#p100172). Норматив контроля K рассчитывают по формуле: _________________________ / 2 2 K = \/ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА , л,C' л,C ср ср 2 2 где ДЕЛЬТА , ДЕЛЬТА - значения характеристики погрешности л,C' л,C ср ср результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, соответствующие массовой концентрации кислоты в пробе с известной добавкой и в исходной пробе соответственно. Примечание. Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения: ДЕЛЬТА = 0,84 x ДЕЛЬТА, с последующим уточнением по мере накопления л информации в процессе контроля стабильности результатов измерений. Процедуру измерений признают удовлетворительной, при выполнении условия: K <= K. (5) к При невыполнении [условия (5)](#p100209) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (5) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
14. Алгоритм проведения контрольной процедуры при контроле
внутрилабораторной прецизионности Контрольные процедуры при контроле промежуточной прецизионности получают с использованием рабочих проб крови. При реализации контрольной процедуры получают два результата контрольных измерений (первичного C и повторного C ) массовой концентрации 1 2 летучих жирных кислот в условиях внутрилабораторной прецизионности. Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении следующего условия: _ _ C + C _ _ 1 2 |C - C | <= 0,01 x R x -------. 1 2 n 2 Значения предела внутрилабораторной прецизионности приведены в табл. 5. Таблица 5
**ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛА ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ПРЕЦИЗИОННОСТИ**
**ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ P = 0,95** | Диапазон измерений, мкг/куб. см | Предел внутрилабораторной прецизионности (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях внутрилабораторной прецизионности), R , % л | | --- | --- | | От 0,5 до 1 включ. | 28 | | Св. 1 -"- 16 -"- | 20 | Приложение **СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ** 1. Вредные вещества в промышленности. Органические вещества. Справочник для химиков, инженеров и врачей/ Н.В. Лазарев, Э.Н. Левина. Издательство "Химия", 1976. 2. ГОСТ 12.1.004-91. Пожарная безопасность. Общие требования. Дата введения 01.07.92. 3. ГОСТ 12.4.009-83. Пожарная техника для защиты объектов. Межгосударственный стандарт. Дата введения 01.01.1985.
4. ГОСТ 12.1.019-79* 2001. Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты. Дата введения 01.07.1980.
5. ГОСТ 12.1.007-76. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. Дата введения 1977-01-01.
6. ГОСТ 12.1.005-88. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны. Дата введения 01.01.1989.
7. СП 1.3.2322-08. Безопасность работы с микроорганизмами третьей, четвертой групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней.
8. [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
9. [РМГ 76-2004](https://bukva.ai/docs/rmg-76-2004) "ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
---