МУК 4.1.2688-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств азоксистробина в зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
Актуально на 02.11.2026.
Как цитировать: "МУК 4.1.2688-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств азоксистробина в зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания". МУК 4.1.2688-10. https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2688-10
(утв. Роспотребнадзором 02.08.2010)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ введен в действие с 1 октября 2010 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
2 августа 2010 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЗОКСИСТРОБИНА В ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ РАПСА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.2688-10
1 октября 2010 года
1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 августа 2010 г.
4. Введены в действие с 1 октября 2010 г.
Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств азоксистробина в семенах и масле рапса в диапазоне концентраций 0,02 — 0,2 мг/кг.
Действующее вещество: Азоксистробин.
Структурная формула (не приводится).
Брутто формула: C H № O . 22 17 3 5
Метил(Е)-2-{2-[6-(2-цианофенокси)пиримидин-4-илокси]фенил}-3-метоксиакрилат (IUPAC).
Химически чистое вещество представляет собой бесцветный кристаллический порошок без запаха.
Температура плавления 116 °C. -7
Давление пара 1,1 x 10 мРа. Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода K lg P = 2,5
ow
(20 °C).
Растворимость в воде 6 мг/куб. дм.
Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 20 °C): дихлорметан — 400, ацетонитрил — 340, этилацетат — 130, ацетон — 86, толуол — 55, метанол — 20, н-октанол — 1,40.
Гидролитически стабилен. Фотолиз протекает с образованием Z-изомера. Для водных растворов DT составляет две недели.
50
Краткая токсикологическая характеристика: острая оральная токсичность для крыс и мышей: LD > 5000 мг/кг; дермальная - LD > 2000 мг/кг 50 50 (крысы), ингаляционная - LC 0,69 - 0,96 мг/куб. дм (интраназально,
50
4 часа, крысы). Не обладает генотоксичным, канцерогенным и нейротоксичным эффектами. Может вызвать слабое раздражение при попадании на кожу или
слизистую оболочку глаз.
Область применения: фунгицид системного и контактного действия с длительным защитным эффектом. Ингибирует образование спор и мицеллярный рост. Эффективен против широкого набора патогенов, в том числе возбудителей ложной и настоящей мучнистой росы.
В России для Азоксистробина установлены следующие гигиенические нормативы:
- ПДК в воде — 0,01 мг/куб. дм;
- ПДК в почве — 0,4 мг/кг;
- МДУ в винограде, огурцах, томатах — 0,2 мг/кг;
- ВМДУ в зерне хлебных злаков — 0,2 мг/кг.
R-230310 — Z-геометрический изомер Азоксистробина.
Структурная формула (не приводится).
Метил(2)-2-{2-[6-(2-цианофенокси)-пиримидин-4-илокси]фенил}-3-метоксиакрилат (IUPAC).
Химически чистое вещество представляет собой кристаллический порошок желтого цвета.
По физико-химическим свойствам R-230310 близок к Азоксистробину.
1. Метрологическая характеристика метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
| Объект анализа | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Норматив точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, % | Относительное стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Семена рапса | 0,02 — 0,10 0,10 — 0,20 | <= 50 <= 25 | 5 3 | 14 8 | 42 25 |
| Зеленая масса рапса | 0,02 — 0,10 0,10 — 0,20 | <= 50 <= 25 | 5 3 | 14 8 | 42 25 |
| Масло рапса | 0,02 — 0,10 0,10 — 0,20 | <= 50 <= 25 | 5 3 | 14 8 | 42 25 |
ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ АЗОКСИСТРОБИНА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,
ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА
ДЛЯ n = 20, P = 0,95
| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Семена рапса | 0,02 | 0,02 — 0,20 | 100,0 | 7,7 | 16 |
| Зеленая масса рапса | 0,02 | 0,02 — 0,20 | 95,3 | 8,8 | 18 |
| Масло рапса | 0,02 | 0,02 — 0,20 | 94,7 | 6,5 | 14 |
Методика основана на определении азоксистробина и его геометрического изомера методом ВЭЖХ с использованием УФ детектора после его извлечения из образцов ацетонитрилом в присутствии ацетатного буфера, насыщенного сульфатом магния, и обеспечивающего разделение водной и органической фаз и очистки ацетонитрильного экстракта силикагелем с помощью дисперсионной твердофазной экстракции при одновременном удалении воды безводным сульфатом магния.
Идентификация E- и Z- азоксистробина проводится по времени удерживания, количественное определение — методом абсолютной калибровки.
Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.
вспомогательные устройства и материалы
3.1 Средства измерений
Жидкостный хроматограф «ACQUITY» фирмы «Waters» с быстросканирующим УФ детектором, снабженным дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-2001
Весы технические ВЛКТ-500 ГОСТ 24104-2001
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100 куб. см ГОСТ 1770-74
Микродозаторы Ленпипет переменного объема от 200 до 1000 куб. мм и от 1 до 5 куб. см
Пипетки градуированные ГОСТ 29227-91
Цилиндры мерные на 50 и 100 куб. см ГОСТ 1770-74
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
Ацетонитрил для ВЭЖХ, "В-230НМ" или х.ч. ТУ 6-09-3534-87 Гексан, х.ч. ТУ 2631-003-05807999-98 Ацетон, о.с.ч. ТУ 6-09-3513-86
Вода бидистиллированная, деионизированная ГОСТ 6709-79
Азоксистробин с содержанием основного вещества 99,7% (Zeneca)
Метаболит азоксистробина (Z-изомер) с содержанием основного вещества 96,0% (Zeneca)
Кислота ортофосфорная, х.ч. ГОСТ 6552-80
Кислота уксусная, ледяная ГОСТ 61-69 Магний сернокислый безводный, х.ч. ГОСТ 4523-67
Натрий уксуснокислый, ч. ГОСТ 199-68
Силикагель, Merck 1.09385.1000
Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и
0,005 М H PO в соотношении 50:50
3 4
Элюент 1: смесь гексана и ацетона в соотношении 75:25 (по объему)
Элюент 2: смесь гексана и ацетона в соотношении 65:35 (по объему)
Допускается использование реактивов квалификацией не ниже указанных.
3.3 Вспомогательные устройства и материалы
Аналитическая колонка ACQUITY UPLC BEH C18 (100 x 2,1) мм, 1,7 мкм (Waters)
Воронки лабораторные В-75-110 ГОСТ 25336-82
Концентрирующие патроны, заполненные силикагелем 60
Пробирки с притертыми пробками на 10, 20 куб. см ГОСТ 25336-82
Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6.091678-86 Центрифуга ОПн-8УХЛ4.2 ТУ 5.375-4261-76
Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже указанных.
4.1. При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.
При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.
4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».
5. Требования к квалификации операторов
Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.
При выполнении измерений выполняют следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха 20 +/- 5 °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7.1 Кондиционирование колонки
Перед началом анализа колонку (Acquity BEH C18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 — 0,2 куб. см/мин.) до стабилизации нулевой линии.
7.2 Приготовление растворов
7.2.1. 0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: 0,5 +/- 0,01 г 98%-ной ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 куб. дм, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
7.2.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50 по объему, используя мерные цилиндры.
7.2.3. Приготовление элюента 1. В коническую колбу с притертой пробкой помещают 75 куб. см гексана и 25 куб. см ацетона. Перемешивают. Элюент хранят в вытяжном шкафу и используют свежеприготовленным.
7.2.4. Приготовление элюента 2. В коническую колбу с притертой пробкой помещают 65 куб. см гексана и 35 куб. см ацетона. Перемешивают. Элюент хранят в вытяжном шкафу и используют свежеприготовленным.
7.3 Приготовление основного и градуировочных растворов
7.3.1. Основной раствор с концентрациями изомеров по 0,5 мг/куб. см: точные навески азоксистробина и его метаболита (50 +/- 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
Градуировочные растворы с концентрациями по каждому аналиту 0,02, 0,05, 0,1, 0,15 и 0,2 мкг/куб. см готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50).
7.3.2. Раствор № 1 с концентрациями изомеров по 0,2 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 100 куб. см вносят 1 куб. см основного раствора и доводят до метки подвижной фазой (5 мкг/куб. см). 4,0 куб. см полученного раствора переносят пипеткой в другую мерную колбу вместимостью 100 куб. см. Объем вновь доводят до метки подвижной фазой (0,2 мкг/куб. см).
7.3.3. Раствор № 2 с концентрациями изомеров по 0,15 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см вносят пипеткой 7,5 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.4. Раствор № 3 с концентрациями изомеров по 0,1 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см вносят пипеткой 5 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.5. Раствор № 4 с концентрациями изомеров по 0,05 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см вносят пипеткой 2,5 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
7.3.6. Раствор № 5 с концентрациями изомеров по 0,02 мкг/куб. см: в мерную колбу вместимостью 10 куб. см вносят пипеткой 1 куб. см раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.
Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 — 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы — в течение суток.
При изучении полноты определения изомеров азоксистробина в семенах, зеленой массе и масле рапса используют ацетонитрильные растворы вещества. Например, раствор внесения с концентрацией изомеров азоксистробина по 0,1 мкг/куб. см готовят из основного раствора с концентрацией изомеров азоксистробина по 0,5 мг/куб. см методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом аналогично п. 7.3.4.
7.4.1 Построение градуировочного графика
Для установления градуировочной характеристики (площадь пика — концентрация изомеров азоксистробина в растворе) в хроматограф вводят по 10 куб. мм градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации азоксистробина в градуировочном растворе.
Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (K) в уравнении линейной регрессии:
где S — площадь пика градуировочного раствора.
Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.
Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.
Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:
|C - C |
K
-------- x 100 <= лямбда , C контр.
C — аттестованное значение массовой концентрации азоксистробина в градуировочном растворе;
C — результат контрольного измерения массовой концентрации K азоксистробина в градуировочном растворе;
лямбда — норматив контроля градуировочного коэффициента, %. контр. (лямбда = 10% при P = 0,95). контр.
Отбор проб семян рапса для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб». Семена хранят при комнатной температуре в полотняных мешочках, перед анализом доводят до стандартной влажности и измельчают. Растительное масло хранят в холодильнике при температуре 0 — 4 °C в герметично закрытой стеклянной таре в течение 6 месяцев.
9.1 Определение азоксистробина и его метаболита
в семенах и зеленой массе рапса
(10 +/- 0,01) г семян рапса или измельченной зеленой массы помещают в тефлоновую центрифужную пробирку вместимостью 50 куб. см, прибавляют 10 куб. см воды, 10 куб. см ацетонитрила, 0,1 куб. см ледяной уксусной кислоты, 4 г безводного магния сернокислого и 1 г натрия уксуснокислого. Пробирку плотно закрывают пробкой, встряхивают на аппарате в течение 15 мин. и центрифугируют при скорости 8000 об./мин. в течение 10 мин. Супернатант декантируют и количественно переносят в другую тефлоновую центрифужную пробирку. Если супернатант декантировать не удается, то массу фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр «красная лента». Измеряют объем супернатанта или фильтрата и прибавляют к нему силикагель и безводный магний из расчета 50 мг силикагеля, 150 мг магния сернокислого на 1 куб. см супернатанта. При работе с образцами зеленой массы к супернатанту также прибавляют активированный уголь из расчета 7,5 мг на 1 куб. см супернатанта. Пробирку плотно закрывают пробкой, встряхивают на аппарате 15 мин. и центрифугируют при скорости 8000 об./мин. в течение 10 мин. Количественно отбирают с помощью шприца верхний ацетонитрильный слой, переносят его в мерную колбу вместимостью 10 куб. см и доводят объем до метки водой. 10 куб. мм полученного раствора вводят в хроматограф.
9.2 Определение азоксистробина
и его метаболита в масле рапса
10 г масла растворяют в 50 куб. см гексана и пропускают через патрон, заполненный силикагелем 60 и предварительно откондиционированный 2,5 куб. см гексана. Промывают последовательно 25 куб. см гексана и 2 куб. см элюента 1. Фильтрат и промывку отбрасывают. Азоксистробин элюируют 4 куб. см элюента 2. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C). Остаток растворяют в 10 куб. см смеси ацетонитрил:вода в соотношении 8:2, переносят в центрифужную пробирку и прибавляют 0,1 куб. см ледяной уксусной кислоты, 4 г безводного магния сернокислого и 1 г натрия уксуснокислого. Дальнейшую обработку проводят так, как это описано для семян в п. 9.1.
9.3 Условия хроматографирования
Ультраэффективный жидкостный хроматограф «ACQUITY» фирмы Waters с быстросканирующим УФ детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 x 100) мм, 1,7 мкм (Waters). Температура колонки 30 +/- 1 °C. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50:50. Скорость потока элюента: 0,2 куб. см/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 245 нм. Объем вводимой пробы 10 куб. мм.
Время удерживания Z-азоксистробина (метаболита) 3,9 +/- 0,1 мин.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в интервале концентраций 0,02 — 0,2 мкг/куб. см.
10. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание E-азоксистробина в семенах, зеленой массе и масле рапса (X, мг/кг), вычисляют по формуле:
S x K x V
x 100
S — площадь пика азоксистробина или его метаболита на хроматограмме x испытуемого образца, кв. мм (AU);
K — градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;
V — объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см;
P — навеска анализируемого образца, г;
f — полнота извлечения азоксистробина, приведенная в табл. 2, (%).
При проявлении на хроматограмме пика Z-азоксистробина (метаболита) его содержание в пробе рассчитывают по этой же формуле. Общее содержание азоксистробина суммируют.
Содержание остаточных количеств азоксистробина или его метаболита в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор азоксистробина с концентрацией 0,2 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 x |X - X | x 100
1 2
(X + X )
1 2
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг; 1 2
r — значение предела повторяемости (r = 2,8 сигма ). r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
Результат анализа представляют в виде:
_
(X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,
X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе „менее нижней границы определения“ (например: менее 0,01 мг/кг <*>).»
<*> 0,01 мг/кг — предел обнаружения азоксистробина или его метаболита в семенах, зеленой массе или масле рапса.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002. «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки C должна удовлетворять условию: д
C = ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА , д л,X л,X' где +/- ДЕЛЬТА (+/- ДЕЛЬТА ) - характеристика погрешности л,X л,X' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/кг, при этом: ДЕЛЬТА = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
л
где ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
Результат контроля процедуры К рассчитывают по формуле: к
К = X' - X - C , к д где X', X, C - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
_____________________
/ 2 2 К = \/ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА . (1) л,X' л,X Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
к
контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг; 1 2 R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном
концентраций), %.
ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.