---
title: "\"МУК 4.1.2686-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Бета-цифлутрина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2686-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2686-10"
---

## "МУК 4.1.2686-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Бета-цифлутрина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2686-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Бета-цифлутрина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 02.08.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 октября 2010 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

2 августа 2010 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ БЕТА-ЦИФЛУТРИНА**
**В БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ**
**КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2686-10**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 октября 2010 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским НИИ защиты растений.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 N 1).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 августа 2010 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 1 октября 2010 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100011"></a>Назначение и область применения


<a id="p100012"></a>    Настоящий  документ  устанавливает  процедуру  измерений  массовой доли
                                                                         -1
Бета-цифлутрина  в  ботве  сахарной  свеклы в диапазоне (0,05 - 0,5) млн.
                                                                         -1
(мг/кг),  в  корнеплодах  сахарной  свеклы  в диапазоне (0,02 - 0,2) млн.
(мг/кг) методом капиллярной газожидкостной хроматографии.
<a id="p100013"></a>Название вещества по ИСО: Бета-цифлутрин.
<a id="p100014"></a>Название вещества по ИЮПАК: (RS)-альфа-циано-4-фтор-3-феноксибензил(1RS, 3RS; 1RS, 3SR)-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-диметилцикло-пропанкарбоксилат.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: C  H  C  FNO .
                           22 18 12   3
<a id="p100017"></a>    Молекулярная масса: 434,3.
<a id="p100018"></a>    Химически   чистый   Бета-цифлутрин   представляет   собой   бесцветный
кристаллический   порошок.    Состоит   из   4-х   диастереоизомерных   пар
энантиомеров,  среди  которых  преобладают  наиболее  биологически активные
диастереоизомеры  II  (35 - 36%)  и  IV (63 - 64%).  Температура плавления:
                                                                  -10
II - 81 °C, IV - 106 °C. Давление паров при  20 °C:  II - 1,1 x 10    мбар,
             -10
IV - 2,9 x 10    мбар.  Коэффициент  распределения  н-октанол/вода: II и IV
K   log P = 6,18. Растворимость (г/куб. дм) при  20 °C:  в  дихлорметане  и
 ow
толуоле > 200  для  обоих  изомеров;  в  гексане 2 - 5 и 1 - 2 для II и IV,
                               -6           -6
соответственно; в воде 1,2 x 10   и 2,2 х 10   для II и IV, соответственно.
<a id="p100019"></a>    Вещество    стабильно   при   комнатной   температуре,   гидролитически
нестабильно в  щелочной и нейтральной средах (DT   для II составляет 20 и 6
                                                50
дней при pH 7 и 9, для IV - 11 и 5 дней при pH 7 и 9).
<a id="p100020"></a>В биологически активных почвах в аэробных условиях Бета-цифлутрин быстро разрушается, при этом само вещество и его метаболиты относительно слабо передвигаются по почвенному профилю.
<a id="p100021"></a>Краткая гигиеническая характеристика
<a id="p100022"></a>    Бета-цифлутрин  относится  к  веществам   опасным  по острой пероральной
                       -1
(LD   для крыс 500 млн.  (мг/кг)), малоопасным по дермальной (LD   для крыс
   50                                                           50
               -1
более 5000 млн.  (мг/кг)) и чрезвычайно опасным по ингаляционной (LC    для
                                                                    50
крыс  0,1  -  0,53  мг/куб. дм)  токсичности.  Не  оказывает  раздражающего
действия на кожу и слизистые оболочки глаз.
<a id="p100023"></a>    В России установлены следующие гигиенические нормативы:
                    -1
<a id="p100024"></a>    ДСД - 0,01  млн.   (мг/кг)  массы  тела  человека;  МДУ  в  корнеплодах
                          -1
сахарной свеклы - 0,5 млн.   (мг/кг).
<a id="p100025"></a>Область применения
<a id="p100026"></a>Бета-цифлутрин - инсектицид контактного и кишечного действия из группы синтетических пиретроидов. Он эффективно подавляет развитие вредителей из отряда жесткокрылых, перепончатокрылых, прямокрылых, двукрылых и чешуекрылых (имаго и личинки) в посевах зерновых и овощных культур, кукурузы, хлопчатника, сахарной свеклы, технических и плодовых культур.
<a id="p100027"></a>Применяется в России в качестве инсектицида на посевах зерновых колосовых культур, гороха, рапса, пастбищных трав, в посадках капусты и картофеля, в яблоневых садах при норме расхода 10 - 15 г д.в./га, а также используется в качестве составного компонента комбинированных протравителей.


## 2. <a id="p100028"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100029"></a>При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов.

<a id="p100030"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="9%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="15%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон измерений массовой доли Бета-цифлутрина -1 млн. (мг/кг)</td><td>Показатель точности (границы относительной погрешности), +/- дельта, % при P = 0,95</td><td>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма , % r</td><td>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), сигма , % R</td><td>Предел повторяемости, r, %, P = 0,95, n = 2</td><td>Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, CD , % 0,95 (n = n = 2) 1 2</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Ботва</td><td>От 0,05 до 0,10 вкл.</td><td>58</td><td>14</td><td>21</td><td>39</td><td>51</td></tr>
<tr><td>Св. 0,10 до 0,5 вкл.</td><td>47</td><td>8</td><td>12</td><td>22</td><td>29</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Корнеплоды</td><td>От 0,02 до 0,05 вкл.</td><td>68</td><td>12</td><td>18</td><td>33</td><td>72</td></tr>
<tr><td>Св. 0,05 до 0,20 вкл.</td><td>42</td><td>9</td><td>14</td><td>25</td><td>40,5</td></tr>
</table>



## 3. <a id="p100036"></a>Метод измерений


<a id="p100037"></a>Метод основан на экстракции Бета-цифлутрина из растительного материала водным раствором ацетона, очистке экстрактов, содержащих Бета-цифлутрин, от коэкстрактивных компонентов перераспределением их в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с флоризилом, с последующим измерением содержания Бета-цифлутрина в очищенных экстрактах методом капиллярной газожидкостной хроматографии с электронозахватным детектором и обработкой хроматограмм методом абсолютной градуировки.
<a id="p100038"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.


## 4. <a id="p100039"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100040"></a>4.1. Средства измерений


Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" с ЭЗД                 Номер Госреестра
(СКБ "Хроматэк", Россия)                                   14516-95
<a id="p100041"></a>Весы лабораторные общего назначения модели ВЛА-200
с наибольшим пределом взвешивания 200 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100042"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом
взвешивания до 500 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100043"></a>Набор гирь ГОСТ 7328-2001
<a id="p100044"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100045"></a>Пипетки градуированные 1-1-2-1; 1-1-2-2; 1-2-2-5;
1-2-2-10 [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100046"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой
П-2-5-0,1; П-2-10-0,2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100047"></a>Цилиндры мерные 1-25; 1-50; 1-100; 1-500; 1-1000 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100048"></a>Шприц для ввода образцов для газового хроматографа
вместимостью 1 - 10 куб. мм (Hamilton, США)
<a id="p100049"></a>Бета-цифлутрин, с содержанием основного вещества 98,7%
(Байер, Германия)


### <a id="p100050"></a>4.2. Реактивы


<a id="p100051"></a>Ацетон, квалификации ч.д.а. ГОСТ 2603-79
<a id="p100052"></a>Вода дистиллированная или деионизованная ГОСТ 6709-72
н-Гексан, квалификации х.ч.                                 ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100053"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), квалификации х.ч. [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100054"></a>Натрий сернокислый, безводный, квалификации х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100055"></a>Натрий хлористый, квалификации х.ч. ГОСТ 4233-77
<a id="p100056"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, квалификации ч. [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)


### <a id="p100057"></a>4.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100058"></a>Азот газообразный (баллон), квалификации о.с.ч. ГОСТ 9293-74
<a id="p100059"></a>Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с                        ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100060"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50, Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100061"></a>Воронки химические для фильтрования, стеклянные             ГОСТ 8613-75
<a id="p100062"></a>Воронки делительные вместимостью 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100063"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100064"></a>Гомогенизатор Omni-mixer (Sorvall, США) или аналогичный
<a id="p100065"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82
<a id="p100066"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100067"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100 куб. см [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100068"></a>Колонка хроматографическая, капиллярная кварцевая ZB-1
(типа SE-30), длина 25 м, внутренний диаметр 0,32 мм,
толщина пленки 0,5 мкм, фирма "Phenomenex" (США) или
аналогичная
<a id="p100069"></a>Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см,
внутренним диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100070"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный
вакуумный испаритель В-169 фирмы "Buchi" (Швейцария)        ТУ 25-11-917-76
<a id="p100071"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100072"></a>Стекловата
<a id="p100073"></a>Фильтры бумажные "красная лента", обеззоленные              ТУ 6-09-2678-77
<a id="p100074"></a>Флоризил для колоночной хроматографии с размером частиц
60 - 80 меш (Мерк, Германия)
<a id="p100075"></a>Примечание: Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не хуже приведенных в разделе 4.


## 5. <a id="p100076"></a>Требования безопасности


<a id="p100077"></a>5.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, ГОСТ 12.1.005-88.
<a id="p100078"></a>5.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.
<a id="p100079"></a>5.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
<a id="p100080"></a>5.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.


## 6. <a id="p100081"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100082"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100083"></a>К подготовке проб допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 7. <a id="p100084"></a>Условия измерений



#### <a id="p100085"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия

<a id="p100086"></a>Процессы приготовления растворов и подготовку проб к анализу проводят в следующих условиях:
- <a id="p100087"></a>температура воздуха (20 +/- 5) °C,
- <a id="p100088"></a>атмосферное давление (84 - 106) кПа,
- <a id="p100089"></a>относительная влажность воздуха не более 80%.

#### <a id="p100090"></a>7.2 Условия хроматографического анализа

<a id="p100091"></a>Температура термостата колонки программированная: от 150 °C (2 мин.) со скоростью 25°/мин. до 260 °C (0 мин.); со скоростью 5°/мин. до 275 °C (15 мин.).
<a id="p100092"></a>Температура испарителя - 270 °C, детектора - 320 °C.
<a id="p100093"></a>Расход газов: газа-носителя (азот) - 2,1 куб. см/мин.; поддувочного газа через детектор - 25 куб. см/мин.
<a id="p100094"></a>Деление потока: 1:1,8.
<a id="p100095"></a>Время удерживания Бета-цифлутрина: 13 мин. 30 с (+/- 2)%.
<a id="p100096"></a>Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
<a id="p100097"></a>Минимально детектируемое количество Бета-цифлутрина: 0,01 нг.
<a id="p100098"></a>Линейный диапазон детектирования: (0,01 - 0,25) нг.


## 8. <a id="p100099"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100100"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, градуировка хроматографа, подготовка колонки с флоризилом.


### <a id="p100101"></a>8.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100102"></a>8.1.1 Очистка н-гексана

<a id="p100103"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

##### <a id="p100104"></a>8.1.2 Очистка ацетона

<a id="p100105"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом  калия  и  поташом (на 1 куб. дм
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3

##### <a id="p100106"></a>8.1.3 Очистка этилацетата

<a id="p100107"></a>Приготовление водного раствора карбоната натрия с массовой долей 5%.
<a id="p100108"></a>Для этого навеску (2,5 +/- 0,1) г карбоната натрия в конической колбе растворяют в (200 - 250) куб. см дистиллированной воды, раствор переносят в мерную колбу вместимостью 500 куб. см и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.
<a id="p100109"></a>Срок хранения раствора - 1 неделя.
<a id="p100110"></a>Этилацетат промывают последовательно водным раствором карбоната натрия с массовой долей 5%, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

##### <a id="p100111"></a>8.1.4 Очистка флоризила

<a id="p100112"></a>Флоризил встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Сорбент на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °C в течение 3 часов.


### <a id="p100113"></a>8.2. Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта


<a id="p100114"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм помещают тампон из стекловаты и затем в нее выливают суспензию 5 г флоризила в 10 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего слоя сорбента и помещают на него слой безводного сернокислого натрия высотой 1 см. Колонку промывают 15 куб. см гексана, после чего она готова к работе.


### <a id="p100115"></a>8.3. Определение объема элюента, необходимого для полного вымывания Бета-цифлутрина из колонки с флоризилом


<a id="p100116"></a>При отработке методики или поступлении новой партии флоризила проводят определение объема элюента, необходимого для полного вымывания Бета-цифлутрина из колонки с флоризилом.
<a id="p100117"></a>В стакан вместимостью 50 куб. см помещают 1 куб. см градуировочного раствора Бета-цифлутрина в гексане с массовой концентрацией 1 мкг/куб. см, добавляют 3 куб. см гексана, перемешивают содержимое и наносят на колонку с флоризилом, подготовленную по [8.2](#p100113). Промывают колонку 30 куб. см гексана и 10 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Затем через колонку пропускают 30 куб. см смеси гексан-этилацетат (85:15, по объему), отбирая последовательно по 5 куб. см элюата. Каждую фракцию выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C досуха, остатки растворяют в 1 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., а затем хроматографируют. Условия хромтографирования - в соответствии с [7.2](#p100090).
<a id="p100118"></a>По результатам обнаружения Бета-цифлутрина в каждой из фракций определяют объем смеси гексан-этилацетат (85:15, по объему), необходимый для полного вымывания инсектицида с колонки.


### <a id="p100119"></a>8.4. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100120"></a>Капиллярную кварцевую колонку ZB-1 (типа SE-30) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280 °C и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 - 10 часов.


### <a id="p100121"></a>8.5. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100122"></a>8.5.1 Приготовление исходного раствора Бета-цифлутрина для градуировки с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см

<a id="p100123"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают (0,010 +/- 0,0002) г Бета-цифлутрина, растворяют в (40 - 50) куб. см гексана, доводят объем раствора этим же растворителем до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100124"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше (-18) °C. Срок хранения не более 3-х месяцев.

##### <a id="p100125"></a>8.5.2 Приготовление градуировочного раствора Бета-цифлутрина с массовой концентрацией 1 мкг/куб. см (раствор N 1)

<a id="p100126"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см исходного градуировочного раствора Бета-цифлутрина с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см, разбавляют гексаном до метки. Этот раствор используют для приготовления градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100127"></a>Для приготовления проб ботвы и корнеплодов с внесением при оценке полноты извлечения Бета-цифлутрина из исследуемых образцов используют ацетоновый раствор инсектицида с концентрацией 1 мкг/куб. см.
<a id="p100128"></a>Градуировочный раствор N 1 и ацетоновый раствор Бета-цифлутрина хранят в морозильной камере при температуре не выше (-18) °C. Срок хранения не более 1 месяца.
<a id="p100129"></a>8.5.3. Приготовление градуировочных растворов Бета-цифлутрина с массовой концентрацией (0,01 - 0,1) мкг/куб. см (растворы N 2 - 5)
<a id="p100130"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 Бета-цифлутрина с массовой концентрацией 1 мкг/куб. см, доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают растворы N 2 - 5 с массовой концентрацией инсектицида 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 мкг/куб. см, соответственно.
<a id="p100131"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


### <a id="p100132"></a>8.6. Градуировка хроматографа


<a id="p100133"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ x с) от массовой концентрации Бета-цифлутрина в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки по 4-м градуировочным растворам [(8.5.3)](#p100129).
<a id="p100134"></a>В испаритель (инжектор) хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют при условиях [7.2](#p100090). Каждый раствор хроматографируют дважды. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предела повторяемости r.
<a id="p100135"></a>По полученным данным строят градуировочную характеристику.


### <a id="p100136"></a>8.7. Контроль стабильности градуировочной характеристики


<a id="p100137"></a>Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.
<a id="p100138"></a>Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.
<a id="p100139"></a>Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

                        |S    - S  |
                          изм    гр
<a id="p100140"></a>                        ------------ x 100 <= К  ,                      (1)
                            S                  гр
                             гр

<a id="p100141"></a>    где:
<a id="p100142"></a>    S   , S    -  значение  площади  пика  Бета-цифлутрина  в  образце  для
     изм   гр
контроля,  измеренное  и   найденное   по   градуировочной   характеристике
соответственно, усл. ед.;
<a id="p100143"></a>    К   - норматив контроля,
     гр

<a id="p100144"></a>                            К   = 0,5 x дельта,
                             гр

<a id="p100145"></a> где +/- дельта - границы относительной погрешности, %, [(табл. 1)](#p100030).
<a id="p100146"></a>Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.
<a id="p100147"></a>Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.


## 9. <a id="p100148"></a>Отбор, подготовка и хранение проб


<a id="p100149"></a>Отбор проб производят в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными [ГОСТ 17421-82](https://bukva.ai/docs/gost-17421-82) "Свекла сахарная для промышленной переработки. Требования при заготовках".
<a id="p100150"></a>Пробы ботвы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в холодильнике при температуре (0 - 4) °C не более суток; для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре (-18) °C до анализа. Перед проведением анализа ботву и корнеплоды измельчают ножницами, ножом или с помощью терки.


### <a id="p100151"></a>9.1. Экстракция Бета-цифлутрина


<a id="p100152"></a>Приготовление водного раствора ацетона с объемной долей 70%
<a id="p100153"></a>350 куб. см ацетона, измеренного мерным цилиндром вместимостью 500 куб. см, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 куб. см и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой. Срок хранения раствора - 1 неделя.
<a id="p100154"></a>Навеску измельченного растительного материала (ботва - 20 г, корнеплоды - 25 г) помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, приливают 100 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 70% и гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. Гомогенат фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 50 куб. см раствором водного ацетона с объемной долей 70%. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/5 часть экстракта корнеплодов (эквивалентна 5 г образца) и 1/10 часть экстракта ботвы (эквивалентна 2 г образца) переносят в делительные воронки вместимостью 100 куб. см. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.


### <a id="p100155"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100156"></a>Приготовление насыщенного раствора хлорида натрия
<a id="p100157"></a>В коническую колбу вместимостью 200 куб. см вносят навеску хлорида натрия (50 +/- 2) г хлорида натрия, приливают (100 +/- 2) куб. см дистиллированной воды, перемешивают в течение 5 мин., полученный раствор фильтруют. Фильтрат является насыщенным раствором хлорида натрия. Срок годности раствора - 1 неделя.
<a id="p100158"></a>К экстракту, полученному по [9.1](#p100151) и помещенному в делительную воронку, прибавляют 15 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия и перемешивают. В воронку вносят 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Экстракцию водной фазы повторяют еще два раза, используя 30 и 20 куб. см гексана. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой безводного сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °C и подвергают дополнительной очистке на колонке с флоризилом по 9.3.


### <a id="p100159"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с флоризилом


<a id="p100160"></a>Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по [9.2](#p100155), растворяют в 3 куб. см гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и раствор наносят на колонку с флоризилом, подготовленную по [8.2](#p100113). Колбу обмывают 5 куб. см гексана, который также наносят на колонку. Промывают колонку 25 куб. см гексана и 10 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Бета-цифлутрин элюируют с колонки 20 куб. см смеси гексан-этилацетат (85:15, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C. Сухой остаток экстракта растворяют в 10 куб. см гексана и анализируют на содержание Бета-цифлутрина по 10.
<a id="p100161"></a>Полнота извлечения Бета-цифлутрина при проведении всех операций подготовки пробы не менее 85%.


## 10. <a id="p100162"></a>Выполнение измерений


<a id="p100163"></a>10.1. В инжектор хроматографа вводят 1 куб. мм очищенного экстракта анализируемой пробы ([9.1](#p100151) - 9.3), анализируют при условиях [(7.2)](#p100090) и регистрируют хроматограмму. Каждый экстракт хроматографируют дважды.
<a id="p100164"></a>10.2. Для каждого образца ботвы и корнеплодов повторяют операции по ([9.1](#p100151) - 9.3), [10.1](#p100163).


## 11. <a id="p100165"></a>Обработка результатов измерений


<a id="p100166"></a>11.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используют программу сбора и обработки хроматографической информации "Хроматэк Аналитик", версия 1.20.
<a id="p100167"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100168"></a>По градуировочной характеристике находят значение массовой концентрации Бета-цифлутрина в экстрактах, C, мкг/куб. см.
                                          -1
<a id="p100169"></a>    Массовую  долю Бета-цифлутрина X, млн.  , в ботве,  корнеплодах  свеклы
рассчитывают по формуле (2):

                                  C x V
                                       экстр
<a id="p100170"></a>                              X = ----------,                           (2)
                                   0,85 x m

<a id="p100171"></a>    где:
<a id="p100172"></a>    C  -  значение  массовой  концентрации  Бета-цифлутрина  в   экстракте,
мкг/куб. см;
<a id="p100173"></a>    V       - объем  экстракта,  подготовленного  для  хроматографирования,
     экстр
куб. см;
<a id="p100174"></a>    m - масса анализируемой части образца, соответствующая доле  экстракта,
использованной  для  очистки  на  колонке  с  флоризилом   и   последующего
хроматографического определения, г;
<a id="p100175"></a>    0,85   -   коэффициент   извлечения  Бета-цифлутрина,  учитывающий  все
процедуры подготовки пробы.
<a id="p100176"></a>11.2. За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (3):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100177"></a>                         ------------------- <= r,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100178"></a>    где:
<a id="p100179"></a>    X ,  X    -   результаты   параллельных   определений   массовой   доли
     1    2
                     -1
Бета-цифлутрина, млн.  ;
<a id="p100180"></a> r - значение предела повторяемости, % [(табл. 1)](#p100030).
<a id="p100181"></a>Если [условие (3)](#p100177) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями МВИ.

#### <a id="p100182"></a>11.3 Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:


                  _                     _
<a id="p100183"></a>                  X +/- 0,01 x дельта x X, при P = 0,95,

<a id="p100184"></a>    где:
    _
<a id="p100185"></a>    X  -  среднее   арифметическое   значение  результатов  n  определений,
                                    -1
признанных приемлемыми по [11.2](#p100176), млн. ;
<a id="p100186"></a> +/- дельта - границы относительной погрешности измерений, % [(табл. 1)](#p100030).
<a id="p100187"></a>    В  случае,  если  полученный  результат  измерений  ниже  нижней  (выше
верхней)  границы  диапазона  измерений,  то  производят следующую запись в
журнале:
                                                                 -1
<a id="p100188"></a>    "массовая  доля  Бета-цифлутрина  в  ботве  менее  0,05  млн.    (более
        -1
0,5 млн.  )";
                                                                  -1
<a id="p100189"></a>    "массовая  доля  Бета-цифлутрина в корнеплодах менее 0,02 млн.   (более
        -1
0,2 млн.  )".
<a id="p100190"></a>Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал Бета-цифлутрина, превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуировочного раствора с массовой концентрацией 0,1 мкг/куб. см, разбавляют, но не более чем в 10 раз, и анализируют в соответствии с данной методикой. При расчете содержания Бета-цифлутрина учитывают разбавление.


## 12. <a id="p100191"></a>Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости



#### <a id="p100192"></a>12.1 Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

<a id="p100193"></a>а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;
<a id="p100194"></a>б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).
<a id="p100195"></a>12.2. Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.
<a id="p100196"></a>    12.3.  Приемлемость   результатов   измерений,   полученных    в   двух
лабораториях,  оценивают сравнением разности этих результатов с критической
разностью CD     по формуле (4):
            0,95

                      2 x |C    - C   | x 100
                            ср1    ср2
<a id="p100197"></a>                      ----------------------- <= CD    ,                (4)
                          (C    + C   )            0,95
                            ср1    ср2

<a id="p100198"></a>    где:
<a id="p100199"></a>    C   , C    - средние  значения массовой доли,  полученные  в  первой  и
     ср1   ср2
                         -1
второй лабораториях, млн.  ;
<a id="p100200"></a> CD - значение критической разности, % [(табл. 1)](#p100030).
      0,95
<a id="p100201"></a>Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.3)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100287).
<a id="p100202"></a>При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.4)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100294).


## 13. <a id="p100203"></a>Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории


<a id="p100204"></a>Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002) ("Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений"), используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по [6.2.2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100341) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и показателя правильности по [6.2.4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100518) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта.
<a id="p100205"></a>Периодичность контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.
<a id="p100206"></a>Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.
<a id="p100207"></a>При неудовлетворительных результатах контроля, например при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.


## 14. <a id="p100208"></a>Разработчики


<a id="p100209"></a>ГНУ ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы.



<a id="p100210"></a>

---