---
title: "\"МУК 4.1.2684-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2684-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2684-10"
---

## "МУК 4.1.2684-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2684-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 02.08.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 октября 2010 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

2 августа 2010 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**МЕТОДИКА**
**ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ ОСТАТОЧНОГО СОДЕРЖАНИЯ**
**ТЕБУКОНАЗОЛА В БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ**
**МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="right">

**МУК 4.1.2684-10**

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 октября 2010 года

1. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 N 1).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 августа 2010 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100009"></a>Назначение и область применения


<a id="p100010"></a>    Настоящий  документ  устанавливает  процедуру  измерений  массовой доли
                                                                -1
тебуконазола в ботве сахарной свеклы в диапазоне  0,1 - 1,0 млн.   (мг/кг),
                                                         -1
в корнеплодах сахарной свеклы в диапазоне 0,05 - 0,5 млн.   (мг/кг) методом
капиллярной газожидкостной хроматографии.
<a id="p100011"></a>Название вещества по ИСО: Тебуконазол.
<a id="p100012"></a>Название по ИЮПАК: (RS)-1-п-хлорфенил-4,4-диметил-3-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)пентан-3-ол.
<a id="p100013"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100014"></a>    Эмпирическая формула: C  H  ClN O.
                           16 22   3
<a id="p100015"></a>    Молекулярная масса: 307,8.
<a id="p100016"></a>    Бесцветное  кристаллическое  вещество.  Температура  плавления: 105 °C.
                                        -3
Давление  паров  при  20  °C: 1,7  x  10    мПа.  Коэффициент распределения
н-октанол/вода:  K   log P  =  3,7.  Растворимость  (г/куб. дм)  при 20 °C:
                  ow
дихлорметан  -  более  200,  изопропанол, толуол - 50 - 100, гексан - менее
0,1, вода - 0,036.
<a id="p100017"></a>Вещество устойчиво к гидролизу при pH 5 - 9 и фотолизу.
<a id="p100018"></a>Тебуконазол медленно разрушается в почве и слабо передвигается по почвенному профилю.
<a id="p100019"></a>Краткая токсикологическая характеристика
                                                                         -1
<a id="p100020"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  ) для крыс и мышей - 3000 млн.
                                         50                              -1
(мг/кг);  острая дермальная токсичность (LD  ) для крыс - более 5000 млн.
                                           50
(мг/кг);  острая ингаляционная токсичность (LC  ) для крыс - 5100 мг/куб. м
                                              50
воздуха.  Тебуконазол вызывает слабое раздражение слизистой оболочки глаз у
кроликов. LC   для рыб 5,7 мг/куб. дм (96 ч).
            50
<a id="p100021"></a>Фунгицид нетоксичен для птиц, пчел, дождевых червей и водорослей.
<a id="p100022"></a>В России установлены следующие гигиенические нормативы:
                      -1
<a id="p100023"></a>    ДСД  -  0,01  млн.    (мг/кг)  массы  тела  человека; МДУ в корнеплодах
                           -1
сахарной свеклы - 0,05 млн.   (мг/кг).
<a id="p100024"></a>Область применения препарата
<a id="p100025"></a>Тебуконазол - системный фунгицид широкого спектра действия с защитным, лечебным и искореняющим эффектом. Активен против возбудителей мучнистой росы, ржавчины, септориоза, фузариоза, ринхоспориоза на зерновых злаках, альтернариоза и склеротиниоза на рапсе. Применяется для обработки вегетирующих растений зерновых злаков и рапса в дозах до 250 г д.в. на 1 га, а также для протравливания семян в дозах до 30 г д.в. на 1 тонну. Используется также в качестве составного компонента смесевых препаратов.


## 2. <a id="p100026"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в табл. 1.

<a id="p100028"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон измерений содержания тебуконазола, -1 млн. (мг/кг)</td><td>Показатель точности (границы относительной погрешности), +/- дельта, %, при P = 0,95</td><td>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма , % r</td><td>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), сигма , % R</td><td>Предел повторяемости, r, %, P = 0,95, n = 2</td><td>Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, CD , % 0,95 (n = n = 2) 1 2 P = 0,95</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Ботва сахарной свеклы</td><td>От 0,10 до 0,5 вкл.</td><td>55</td><td>10</td><td>15</td><td>28</td><td>37</td></tr>
<tr><td>Св. 0,5 до 1,0 вкл.</td><td>38</td><td>7</td><td>11</td><td>19</td><td>27</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Корнеплоды сахарной свеклы</td><td>От 0,05 до 0,2 вкл.</td><td>55</td><td>9</td><td>14</td><td>25</td><td>35</td></tr>
<tr><td>Св. 0,20 до 0,5 вкл.</td><td>37</td><td>5</td><td>8</td><td>14</td><td>20</td></tr>
</table>



## 3. <a id="p100034"></a>Метод измерений


<a id="p100035"></a>Метод основан на экстракции тебуконазола из ботвы и корнеплодов раствором водного ацетона, очистке экстрактов, содержащих тебуконазол, от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем с последующим измерением содержания тебуконазола в очищенных экстрактах методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) при программировании температуры с термоионным детектором (ТИД) и обработкой хроматограмм методом абсолютной градуировки.
<a id="p100036"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.


## 4. <a id="p100037"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100038"></a>4.1. Средства измерений


<a id="p100039"></a>Газовый хроматограф "Кристалл 2000М"
с ТИД на азотсодержащие вещества с пределом
                                -14
детектирования не выше 2,82 x 10    г/с
(СКБ "Хроматэк", Россия)
<a id="p100040"></a>Весы лабораторные общего назначения модели
ВЛА-200 с наибольшим пределом взвешивания 200 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100041"></a>Весы лабораторные общего назначения
с наибольшим пределом взвешивания 500 г ГОСТ 24104-2001
<a id="p100042"></a>Набор гирь ГОСТ 7328-2001
<a id="p100043"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100044"></a>Пипетки градуированные 1-1-2-1; 1-1-2-2;
1-2-2-5; 1-2-2-10 [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100045"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной
пробкой П-2-5-0,1; П-2-10-0,2 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100046"></a>Цилиндры мерные 1-25; 1-50; 1-100; 1-500; 1-1000 [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100047"></a>Шприц для ввода образцов для газового
хроматографа вместимостью 1 - 10 куб. мм
(Hamilton, США)


### <a id="p100048"></a>4.2. Реактивы


<a id="p100049"></a>Аналитический стандарт тебуконазола с содержанием
основного вещества 99,8% (Байер, Германия)
<a id="p100050"></a>Ацетон квалификации ч.д.а. ГОСТ 2603-79
<a id="p100051"></a>Гелий очищенный марки "А" (или азот)                          ТУ 51-940-80
<a id="p100052"></a>Вода дистиллированная или деионизованная ГОСТ 6709-72
н-Гексан                                                      ТУ 6-09-3375
<a id="p100053"></a>Натрия хлорид квалификации х.ч. ГОСТ 4233-77
<a id="p100054"></a>Натрия сульфат безводный квалификации х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100055"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат)
квалификации ч. [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)


### <a id="p100056"></a>4.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100057"></a>Гомогенизатор "Omni-mixer" ("Sorvall", США)
или гомогенизатор                                           МРТУ 42-1505
<a id="p100058"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50,
фирма "Branson Instr. Co." (США)
<a id="p100059"></a>Колонка кварцевая капиллярная ZB-1, длиной 20 м,
внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки
0,5 мкм, неподвижная фаза SE-30,
фирма "Phenomenex" (США)
<a id="p100060"></a>Воронки делительные вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100061"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 мм ГОСТ 25336-82
<a id="p100062"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью
50, 100 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100063"></a>Колонка хроматографическая стеклянная, длиной
25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100064"></a>Компрессор (СКБ "Хроматэк", Россия)
<a id="p100065"></a>Насос водоструйный вакуумный                                ГОСТ 10696-75
<a id="p100066"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М                      ТУ 25-11-917-74
или ротационный вакуумный испаритель B-169
фирмы "Buchi" (Швейцария)
<a id="p100067"></a>Генератор водорода, модель SPE,
фирма "General Electric" (США)
<a id="p100068"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100069"></a>Силикагель (0,063 - 0,2 мм) для адсорбционной
хроматографии ("Мерк", Германия) I степени активности
<a id="p100070"></a>Стекловата
<a id="p100071"></a>Установка для перегонки растворителей с дефлегматором [ГОСТ 9737-93](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
                                                            (ИСО 641-75)
<a id="p100072"></a>Фильтры бумажные "красная лента", обеззоленные              ТУ 6-09-2678-77
или фильтры из хроматографической бумаги
<a id="p100073"></a>Ватман 3ММ
<a id="p100074"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
<a id="p100075"></a>Колба Бунзена, вместимостью 250 куб. см ГОСТ 25336-82
<a id="p100076"></a>*Примечание.* Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не хуже приведенных в разделе 4.


## 5. <a id="p100077"></a>Требования безопасности, охраны окружающей среды


<a id="p100078"></a>5.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, ГОСТ 12.1.005-88.
<a id="p100079"></a>5.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.
<a id="p100080"></a>5.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
<a id="p100081"></a>5.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.


## 6. <a id="p100082"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100083"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100084"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 7. <a id="p100085"></a>Условия измерений



#### <a id="p100086"></a>7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия.

<a id="p100087"></a>Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в следующих условиях:
- <a id="p100088"></a>температура воздуха (20 +/- 5) °C;
- <a id="p100089"></a>атмосферное давление 84 - 106 кПа;
- <a id="p100090"></a>относительная влажность воздуха не более 80%.

#### <a id="p100091"></a>7.2 Условия хроматографического анализа:

<a id="p100092"></a>температура термостата испарителя 270 °C;
<a id="p100093"></a>температура детектора 300 °C.
<a id="p100094"></a>Режим программирования температуры колонки:
<a id="p100095"></a>начальная температура 170 °C (1 мин.), скорость подъема температуры до 235 °C (0 мин.) 20 °C/мин.;
<a id="p100096"></a>от 235 до 245 °C (0 мин.) скорость подъема температуры 3 °C/мин.;
<a id="p100097"></a>от 245 до 270 °C (10 мин.) скорость подъема температуры 25 °C/мин.
<a id="p100098"></a>Расход газов:
<a id="p100099"></a>газа-носителя (гелий, азот) - 2,2 куб. см/мин.;
<a id="p100100"></a>водорода к ТИД - 12,5 куб. см/мин.;
<a id="p100101"></a>воздуха к ТИД 170 куб. см/мин.
<a id="p100102"></a>Деление потока 1:1.
<a id="p100103"></a>Объем вводимой пробы 1 куб. мм.
<a id="p100104"></a>Время удерживания тебуконазола: 6 мин. 15 с +/- 0,2 мин.
<a id="p100105"></a>Линейный диапазон детектирования 0,2 - 2,0 нг.


## 8. <a id="p100106"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100107"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, градуировка хроматографа, подготовка колонки с силикагелем.


### <a id="p100108"></a>8.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100109"></a>8.1.1 Очистка н-гексана


<a id="p100110"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.


##### <a id="p100111"></a>8.1.2 Очистка этилацетата


<a id="p100112"></a>Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%. Навеску (5 +/- 0,1) г натрия углекислого растворяют в конической колбе в 40 - 60 куб. см дистиллированной воды. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.
<a id="p100113"></a>Срок хранения раствора 1 неделя.
<a id="p100114"></a>Этилацетат промывают последовательно раствором натрия углекислого с массовой долей 5%, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.


##### <a id="p100115"></a>8.1.3 Очистка ацетона


<a id="p100116"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом  калия  и  поташом (на 1 куб. дм
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3


##### <a id="p100117"></a>8.1.4 Очистка силикагеля


<a id="p100118"></a>Силикагель I степени активности встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °C в течение 3 часов.


### <a id="p100119"></a>8.2. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта


<a id="p100120"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 3 г силикагеля I степени активности в 15 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 куб. см гексана со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.


### <a id="p100121"></a>8.3. Определение объема элюента, необходимого для полного вымывания тебуконазола из колонки с силикагелем


<a id="p100122"></a>При отработке методики или поступлении новой партии силикагеля проводят определение объема элюента, необходимого для полного вымывания тебуконазола из колонки с силикагелем.
<a id="p100123"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора тебуконазола с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см в этилацетате [(8.5.2)](#p100131). Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по [8.2](#p100119). Промывают колонку 50 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Затем колонку с силикагелем промывают 60 куб. см смеси гексан-этилацетат (2:8, по объему), отбирая последовательно фракции элюента по 10 куб. см. Каждую фракцию упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., а затем хроматографируют. Условия хроматографирования - в соответствии с [7.2](#p100091).
<a id="p100124"></a>По результатам обнаружения тебуконазола в каждой из фракций определяют объем элюента, необходимый для полного вымывания тебуконазола из колонки.


### <a id="p100125"></a>8.4. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100126"></a>Капиллярную кварцевую колонку ZB-1 (типа SE-30) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280 °C и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 - 10 часов.


### <a id="p100127"></a>8.5. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100128"></a>8.5.1 Исходный градуировочный раствор тебуконазола

с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см

<a id="p100129"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают (0,010 +/- 0,0001) г тебуконазола, растворяют в (40 - 50) куб. см этилацетата, доводят объем этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100130"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение 3-х месяцев.


##### <a id="p100131"></a>8.5.2 Градуировочный раствор тебуконазола с массовой

концентрацией 10 мкг/куб. см (раствор N 1)

<a id="p100132"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного градуировочного раствора тебуконазола с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см [(8.5.1)](#p100128), разбавляют этилацетатом и доводят объем раствора до метки. Этот раствор используют для приготовления градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100133"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение месяца.


##### <a id="p100134"></a>8.5.3 Градуированные растворы тебуконазола с массовой

<div align="center">

концентрацией 0,2 - 2,0 мкг/куб. см

</div>

(растворы N 2 - 5)

<a id="p100135"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 2,0, 4,0, 10,0 и 20,0 куб. см градуировочного раствора N 1 тебуконазола с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см [(8.5.2)](#p100131), доводят объем раствора до метки этилацетатом, тщательно перемешивают, получают градуировочные растворы N 2 - 5 с массовой концентрацией тебуконазола 0,2, 0,4, 1,0 и 2,0 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100136"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


### <a id="p100137"></a>8.6. Градуировка хроматографа


<a id="p100138"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ x с) от концентрации тебуконазола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки по 4 градуировочным растворам.
<a id="p100139"></a>В инжектор хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора [(8.5.3)](#p100134) и анализируют при условиях хроматографирования по [7.2](#p100091). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предел повторяемости r.
<a id="p100140"></a>По полученным данным строят градуировочную характеристику.


### <a id="p100141"></a>8.7. Контроль стабильности градуированной характеристики


<a id="p100142"></a>Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.
<a id="p100143"></a>Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.
<a id="p100144"></a>Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

                         |S    - S  |
                           изм    гр
<a id="p100145"></a>                         ------------ x 100 <= K  ,                     (1)
                              S                 гр
                               гр

<a id="p100146"></a>    где:
<a id="p100147"></a>    S   , S   - значение  площади пика тебуконазола в образце для контроля,
     изм   гр
измеренное  и  найденное  по  градуировочной характеристике соответственно,
усл. ед.;
<a id="p100148"></a>    K   - норматив контроля, K   = 0,5 x дельта,
     гр                       гр
<a id="p100149"></a> где +/- дельта - границы относительной погрешности, % [(табл. 1)](#p100028).
<a id="p100150"></a>Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.
<a id="p100151"></a>Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.


## 9. <a id="p100152"></a>Отбор, подготовка и хранение проб


<a id="p100153"></a>Отбор проб производят в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными [ГОСТ 17421-82](https://bukva.ai/docs/gost-17421-82) "Свекла сахарная для промышленной переработки. Требования при заготовках".
<a id="p100154"></a>Пробы ботвы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в холодильнике при температуре 0 - 4 °C не более суток; для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C до анализа. Перед проведением анализа ботву и корнеплоды измельчают.


### <a id="p100155"></a>9.1. Экстракция тебуконазола


<a id="p100156"></a>Приготовление водного раствора ацетона с объемной долей 70%. В мерную колбу вместимостью 500 куб. см помещают 350 куб. см ацетона и доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой.
<a id="p100157"></a>Срок хранения раствора 1 неделя.
<a id="p100158"></a>Навеску измельченного растительного материала массой 20 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, приливают 100 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 70% и гомогенизируют 3 мин. при 8000 об./мин. Гомогенат фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 50 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 70%. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/4 его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Далее проводят очистку экстракта по 9.2.


### <a id="p100159"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100160"></a>Приготовление насыщенного раствора хлорида натрия. В коническую колбу вместимостью 200 куб. см вносят навеску (50 +/- 2) г хлорида натрия, приливают (100 +/- 2) куб. см дистиллированной воды, перемешивают в течение 5 мин., полученный раствор фильтруют. Фильтрат является насыщенным раствором хлорида натрия. Срок годности раствора - 1 неделя.
<a id="p100161"></a>Экстракт, полученный по [9.1](#p100155) и помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка 5 - 7 куб. см при температуре не выше 40 °C. К водному остатку прибавляют 20 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см хлористого метилена, интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз нижний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя 30 и 20 куб. см хлористого метилена. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °C и подвергают дополнительной очистке на колонке с силикагелем по 9.3.


### <a id="p100162"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем


<a id="p100163"></a>Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по [9.2](#p100159), растворяют в 0,6 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,4 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [8.2](#p100119). Колбу обмывают 3 куб. см смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 40 куб. см смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Тебуконазол элюируют с колонки 50 куб. см смеси гексан-этилацетат (2:8, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C. Сухие остатки экстрактов корнеплодов и ботвы растворяют соответственно в 1,25 и 2,5 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и раствор анализируют на содержание тебуконазола по [10.1](#p100166).
<a id="p100164"></a>Полнота извлечения тебуконазола при проведении всех операций подготовки пробы не менее 86%.


## 10. <a id="p100165"></a>Выполнение измерений


<a id="p100166"></a>10.1. В испаритель хроматографа вводят 1 куб. мм очищенного экстракта анализируемой пробы ([9.1](#p100155) - 9.3), анализируют при условиях [7.2](#p100091) и регистрируют хроматограмму. Каждый экстракт хроматографируют дважды.
<a id="p100167"></a>10.2. Для каждого образца повторяют операции по [9.1](#p100155) - 9.3, [10.1](#p100166).


## 11. <a id="p100168"></a>Обработка результатов измерений


<a id="p100169"></a>11.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используют программу сбора и обработки хроматографической информации "Хроматэк Аналитик", версия 1.20.
<a id="p100170"></a>Альтернативная обработка результатов
                                         -1
<a id="p100171"></a>    Массовую  долю тебуконазола  X,  млн.  , в ботве и корнеплодах сахарной
свеклы рассчитывают по формуле (2):

                                  S  x A x V
                                   1
<a id="p100172"></a>                             X = -------------,                         (2)
                                 0,86 x S  x m
                                         0
<a id="p100173"></a>    где:
<a id="p100174"></a>    S  - площадь пика тебуконазола в образце, мВ x с;
     1
<a id="p100175"></a>    S  - площадь пика тебуконазола в градуировочном растворе, мВ x с;
     0
<a id="p100176"></a>    A   -  массовая  концентрация  градуировочного  раствора  тебуконазола,
мкг/куб. см;
<a id="p100177"></a>    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100178"></a>    m  - масса анализируемой части образца, соответствующая доле экстракта,
использованной   для  очистки  на  колонке  с  силикагелем  и  последующего
хроматографического определения, г.
<a id="p100179"></a>11.2. За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (3):

                         2 x |X  - X | x 100
                               1    2
<a id="p100180"></a>                         ------------------- <= r,                      (3)
                              (X  + X )
                                1    2

<a id="p100181"></a>    где:
<a id="p100182"></a>    X ,   X    -   результаты   параллельных   определений   массовой  доли
     1     2      -1
тебуконазола, млн.  ;
<a id="p100183"></a> r - значение предела повторяемости, % [(табл. 1)](#p100028).
<a id="p100184"></a>Если [условие (3)](#p100180) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями МВИ.

#### <a id="p100185"></a>11.3 Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

                  _                     _
<a id="p100186"></a>                  X +/- 0,01 x дельта x X, при P = 0,95,

<a id="p100187"></a>    где:
    _
<a id="p100188"></a>    X   -   среднее  арифметическое  значение  результатов  n  определений,
                                    -1
признанных приемлемыми по [11.2](#p100179), млн. ;
<a id="p100189"></a> +/- дельта - границы относительной погрешности измерений, % [(табл. 1)](#p100028).
<a id="p100190"></a>    В  случае,  если  полученный  результат  измерений  ниже  нижней  (выше
верхней)  границы  диапазона  измерений,  то  производят следующую запись в
журнале:                                                     -1
<a id="p100191"></a>    "массовая  доля  тебуконазола  в  ботве  менее  0,1  млн.    (более 1,0
    -1
млн.  )";                                                     -1
<a id="p100192"></a>    "массовая  доля тебуконазола в корнеплодах менее 0,05 млн.   (более 0,5
    -1
млн.  )".
<a id="p100193"></a>Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал тебуконазола, превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуировочного раствора с массовой концентрацией 2,0 мкг/куб. см, разбавляют этилацетатом, но не более чем в 10 раз, и анализируют в соответствии с данной методикой. При расчете содержания тебуконазола учитывают разбавление.


## 12. <a id="p100194"></a>Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости



#### <a id="p100195"></a>12.1 Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

<a id="p100196"></a>а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;
<a id="p100197"></a>б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).
<a id="p100198"></a>12.2. Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.
<a id="p100199"></a>    12.3.   Приемлемость   результатов   измерений,   полученных   в   двух
лабораториях, оценивают  сравнением разности этих результатов с критической
разностью CD     по формуле (4):
            0,95

                    2 x |X    - X   | x 100
                          ср1    ср2
<a id="p100200"></a>                    ----------------------- <= CD    ,                  (4)
                         (X    + X   )           0,95
                           ср1    ср2

<a id="p100201"></a>    где:
<a id="p100202"></a>    X   ,  X    - средние значения массовой доли тебуконазола, полученные в
     ср1    ср2                   -1
первой и второй лабораториях, млн.  ;
<a id="p100203"></a> CD - значение критической разности, % [(табл. 1)](#p100028).
      0,95
<a id="p100204"></a>Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.3)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100287).
<a id="p100205"></a>При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 [(5.3.4)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100294).


## 13. <a id="p100206"></a>Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории


<a id="p100207"></a>Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002), используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по [6.2.2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100341) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и показателя правильности по [6.2.4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100518) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта.
<a id="p100208"></a>Периодичность контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.
<a id="p100209"></a>Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.
<a id="p100210"></a>При неудовлетворительных результатах контроля, например при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.


## 14. <a id="p100211"></a>Разработчики


<a id="p100212"></a>ГНУ ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы.



<a id="p100213"></a>

---