---
title: "\"МУК 4.1.2593-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Флурохлоридона в почве, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2593-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2593-10"
---

## "МУК 4.1.2593-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Флурохлоридона в почве, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2593-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Флурохлоридона в почве, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 26.03.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 26.03.2010.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
26 марта 2010 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУРОХЛОРИДОНА В ПОЧВЕ,**
**СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2593-10**

<a id="p100002"></a>Дата введения
26 марта 2010 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 3 от 03.12.2009).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 26 марта 2010 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 26 марта 2010 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в почве, семенах и масле подсолнечника массовой концентрации Флурохлоридона в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.
<a id="p100012"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: (3RS, 4RS; 3RS, 4SR)-3-хлоро-4-хлорометил-1-( $\alpha$ , $\alpha$ , $\alpha$ -трифторо-m-толил)-2-пирролидинон (соотношение стереоизомеров 3:1).
<a id="p100013"></a>Структурная формула:
<a id="p100221"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/1wO4oUhs/img_0.png) 
<a id="p100014"></a>Эмпирическая формула: C12H10Cl2F3NO.
<a id="p100015"></a>Молекулярная масса: 312,1.
<a id="p100016"></a>Агрегатное состояние: порошок.
<a id="p100017"></a>Цвет, запах: бежевый, без запаха.
<a id="p100018"></a>Температура плавления: 40,9 °C (цис-изомер); 69,5 °C (трансизомер).
<a id="p100019"></a>Летучесть (давление паров): 0,44 мПа (при 25 °C).
<a id="p100020"></a>Растворимость в воде при 25 °C: 35,1 (дистиллированная вода); 20,4 (pH 9) мг/л; в органических растворителях: этаноле - 100, керосине - < 5 г/л при 20 °C; растворим в ацетоне, хлорбензоле и ксилоле.
<a id="p100021"></a>Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 25 °C: Kow log P = 3,36.
<a id="p100022"></a>Флурохлоридон стабилен к гидролизу при pH 5, 7 и 9 (25 °C); в кислой среде и при повышении температуры разлагается с DT50 (при температуре до 60 °C) - 7 дней (pH 4), 18 дней (pH 7). В водной среде он подвергается фотолизу с DT50 (при pH 7, 25 °C) - 4,3 дня (цис-/трансизомеры). В почве вещество сохраняется относительно долго с DT50 (в лабораторных условиях) до 70 дней.
<a id="p100023"></a>Краткая токсикологическая характеристика. Флурохлоридон относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 для крыс - 4000 мг/кг) и острой дермальной токсичности (ЛД50 для кроликов > 5000 мг/кг), но к чрезвычайно опасным по ингаляционной токсичности (ЛС50 (4 часа) для кроликов > 121 мг/м3). Препарат Рейсер, кэ, 250 г/л отнесен к 3-му классу опасности.
<a id="p100024"></a>В Российской Федерации для Флурохлоридона установлены следующие гигиенические нормативы:
<a id="p100025"></a>ДСД - 0,04 мг/кг/сут.
<a id="p100026"></a>ОДК в почве - 0,03 мг/кг.
<a id="p100027"></a>ПДК в воде - 0,04 (с.-т.) мг/дм3.
<a id="p100028"></a>МДУ в семенах и масле подсолнечника - 0,1 мг/кг.
<a id="p100029"></a>Флурохлоридон - предвсходовый гербицид, ингибирует синтез каротиноидов, которые препятствуют фотоокислению хлорофилла. В растения проникает через корни, стебли и точки роста. Применяется для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорняками при возделывании озимой пшеницы, ржи, кукурузы и подсолнечника при нормах расхода 250 - 750 г д.в./га путем опрыскивания почвы до всходов культуры.
<a id="p100030"></a>Препарат на основе Флурохлоридона применяется в посевах моркови и посадках картофеля - 2 - 3 л/га, а также подсолнечника - 3 - 4 л/га, однократно до всходов культуры.


## 1. <a id="p100031"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100032"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100033"></a>Таблица 1

<a id="p100034"></a>Метрологические параметры


| <a id="p100035"></a>Анализируемый объект | <a id="p100222"></a>Диапазон определяемых концентраций,<br>мг/кг | <a id="p100223"></a>Показатель точности (граница относительной погрешности),<br>$\pm \delta$ , %, P = 0,95 | <a id="p100224"></a>Стандартное отклонение повторяемости, $\sigma_{r}$ , % | <a id="p100225"></a>Предел повторяемости, r, % | <a id="p100226"></a>Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100036"></a>Почва | <a id="p100227"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100228"></a>50 | <a id="p100229"></a>4 | <a id="p100230"></a>11 | <a id="p100231"></a>13 |
| <a id="p100037"></a>Семена подсолнечника | <a id="p100232"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100233"></a>50 | <a id="p100234"></a>5 | <a id="p100235"></a>14 | <a id="p100236"></a>17 |
| <a id="p100038"></a>Масло подсолнечника | <a id="p100237"></a>0,01 - 0,1 | <a id="p100238"></a>50 | <a id="p100239"></a>6 | <a id="p100240"></a>17 | <a id="p100241"></a>20 |


<a id="p100039"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100040"></a>Таблица 2

<a id="p100041"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="16%"><col width="16%"><col width="16%"><col width="16%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100042"></a>Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td><a id="p100242"></a>Предел обнаружения,<br>мг/кг</td><td><a id="p100243"></a>Диапазон определяемых концентраций,<br>мг/кг</td><td><a id="p100244"></a>Среднее значение определения,<br>%</td><td><a id="p100245"></a>Стандартное отклонение,<br>S, %</td><td><a id="p100246"></a>Доверительный интервал среднего результата,<br>+/-, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100043"></a>Почва</td><td><a id="p100247"></a>0,01</td><td><a id="p100248"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100249"></a>80,8</td><td><a id="p100250"></a>3,8</td><td><a id="p100251"></a>+/- 1,48</td></tr>
<tr><td><a id="p100044"></a>Семена подсолнечника</td><td><a id="p100252"></a>0,01</td><td><a id="p100253"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100254"></a>81,7</td><td><a id="p100255"></a>4,5</td><td><a id="p100256"></a>+/- 1,74</td></tr>
<tr><td><a id="p100045"></a>Масло подсолнечника</td><td><a id="p100257"></a>0,01</td><td><a id="p100258"></a>0,01 - 0,1</td><td><a id="p100259"></a>81,7</td><td><a id="p100260"></a>5,7</td><td><a id="p100261"></a>+/- 1,29</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100046"></a>Метод измерения


<a id="p100047"></a>Метод основан на определении Флурохлоридона методом капиллярной ГЖХ с использованием детектора по захвату электронов после извлечения его из почвы, семян подсолнечника и гексанового раствора масла ацетонитрилом, переэкстракции в гексан, очистки полученного экстракта от мешающих анализу веществ на концентрирующем патроне Диапак C16 и колонке с Флоризилом.
<a id="p100048"></a>Идентификацию вещества проводят по времени удерживания путем сравнения с аналитическим стандартом, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100049"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.


## 3. <a id="p100050"></a>Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы



### <a id="p100051"></a>3.1. Средства измерений



| <a id="p100052"></a>Высокоэффективный газовый хроматограф "Кристалл 2000м" с детектором по захвату электронов (ДЭЗ) с пределом детектирования по Линдану 4 x 10-14 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колонки |  |
| --- | --- |
| <a id="p100053"></a>Весы аналитические ВЛА-200 | <a id="p100262"></a>ГОСТ 24104-2001 |
| <a id="p100054"></a>Весы лабораторные технические ВЛТК-500 | <a id="p100263"></a>ГОСТ 24104-2001 |
| <a id="p100055"></a>Колбы мерные вместимостью 10, 50 и 100 см3 | <a id="p100264"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100056"></a>Микрошприц Гамильтон серия 701, вместимостью 10 мм3 и погрешностью < 1%, компания Элсико, кат. N 80100 + 200399 |  |
| <a id="p100057"></a>Пипетки градуированные вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 | <a id="p100265"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) |
| <a id="p100058"></a>Термометр стеклянный, жидкостный ТП-22, цена деления 0,5 °C и диапазоном -30 - +30 °C |  |


<a id="p100059"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100060"></a>3.2. Реактивы



| <a id="p100061"></a>Флурохлоридон, CAS 61213-25-0 - аналитический стандарт чистотой не менее 98,0% |  |
| --- | --- |
| <a id="p100062"></a>Азот особой чистоты | <a id="p100266"></a>ГОСТ 9293-74 |
| <a id="p100063"></a>Ацетонитрил, х.ч. | <a id="p100267"></a>ТУ 6-09-06-1092-83 |
| <a id="p100064"></a>Ацетон, ч.д.а. | <a id="p100268"></a>ГОСТ 2603-79 |
| <a id="p100065"></a>Вода бидистиллированная (бидистиллят), деионизированная или перегнанная над KMnO4 | <a id="p100269"></a>ГОСТ 6709-72 |
| <a id="p100066"></a>Вода дистиллированная | <a id="p100270"></a>ГОСТ 6709-72 |
| <a id="p100271"></a>н-Гексан, ч. | <a id="p100272"></a>ТУ 6-09-3375-78 |
| <a id="p100067"></a>Гелий, очищенный марки "А" | <a id="p100273"></a>ТУ-51-940-80 |
| <a id="p100068"></a>Натрий сернокислый (сульфат), безводный, х.ч. | <a id="p100274"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) |
| <a id="p100069"></a>Натрия хлорид, х.ч. | <a id="p100275"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100070"></a>Патроны концентрирующие Диапак C16, фирма БиоХимМак | <a id="p100276"></a>ТУ 4215-002-05451931-94 |
| <a id="p100071"></a>Флоризил(R) (Магния силикат, 99%, CAS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш, фирмы Флюка |  |


<a id="p100072"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


### <a id="p100073"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы



| <a id="p100074"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1" |  |
| --- | --- |
| <a id="p100075"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак |  |
| <a id="p100076"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 см3, полипропилен, кат. N 3120-0250, NALGENE |  |
| <a id="p100077"></a>Вата стеклянная для хроматографии (Glasswool), кат. N 20410, Supelco |  |
| <a id="p100078"></a>Воронки лабораторные, стеклянные | <a id="p100277"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100079"></a>Воронки делительные на 250 см3 | <a id="p100278"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100080"></a>Испаритель ротационный Rotavapor R110 Buchi с водяной баней В-480, фирма Буши |  |
| <a id="p100081"></a>Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100 и 250 см3 | <a id="p100279"></a>ТС ТУ 92-891.029-91 |
| <a id="p100082"></a>Колбы конические, плоскодонные 250 см3 | <a id="p100280"></a>ГОСТ 25336-82 |
| <a id="p100083"></a>Колонка хроматографическая, капиллярная кварцевая DB-1701 (14% цианопропилфенил - 86% метилсиликон), длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирма J&W Scientific |  |
| <a id="p100084"></a>Насос диафрагменный FT. 19 фирмы KNF Neu Laboport |  |
| <a id="p100281"></a>Фильтры бумажные "красная лента" | <a id="p100282"></a>ТУ 6-09-2678-77 |
| <a id="p100085"></a>Центрифуга MPW-350e с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3 |  |


<a id="p100086"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100087"></a>Требования безопасности


<a id="p100088"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100089"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.


## 5. <a id="p100090"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100091"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100092"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100093"></a>Условия измерений


<a id="p100094"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100095"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100096"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100097"></a>Подготовка к определению



### <a id="p100098"></a>7.1. Подготовка патрона Диапак C16, для очистки проб семян и масла подсолнечника


<a id="p100099"></a>Патроны промывают последовательно 10 см3 ацетонитрила и 10 см бидистиллированной воды, не допуская высыхания поверхности патрона.


### <a id="p100100"></a>7.2. Проверка хроматографического поведения Флурохлоридона на патронах Диапак C16


<a id="p100101"></a>В концентратор вносят 1 см3 стандартного раствора Флурохлоридона в ацетоне с концентрацией 0,1 мкг/см3, выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C. Добавляют в концентратор 1 см3 ацетонитрила и 9 см3 бидистиллированной воды, перемешивают содержимое концентратора, наносят на патрон и пропускают со скоростью не более 2 см3/мин., не допуская высыхания поверхности патрона, смыв отбрасывают. Промывают патрон 20 мл бидистиллированной воды, смыв отбрасывают. Элюируют Флурохлоридон, пропуская через патрон 4 - 5 порций смеси ацетонитрил:вода - 1:1, по 5 см3 каждая, и собирая их в отдельные концентраторы емкостью 100 см3. Собранные фракции выпаривают досуха. Сухой остаток в концентраторах разводят в 1 см3 ацетона и вводят в хроматограф 1 мм3. После введения проб в хроматограф рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смыва с колонки и необходимый объем элюата.


### <a id="p100102"></a>7.3. Подготовка колонки, заполненной Флоризилом, для очистки проб почвы, семян и масла подсолнечника


<a id="p100103"></a>На дно пластиковой хроматографической колонки (высота 15 см, диаметр 1,5 см) помещают пробочку из стекловаты и заполняют колонку Флоризилом на высоту 10 см. На слой Флоризила насыпают слой безводного сернокислого натрия толщиной 1,0 см. За день до очистки экстракта колонку промывают последовательно 20 см3 ацетона и 10 см3 гексана, смывы отбрасывают. После промывки колонка готова к работе.


### <a id="p100104"></a>7.4. Проверка хроматографического поведения Флурохлоридона на колонках с Флоризилом


<a id="p100105"></a>При отработке методики или поступлении новой партии Флоризила проводят изучение поведения Флурохлоридона на колонке. В концентратор вносят 1 см3 стандартного раствора Флурохлоридона в ацетоне с концентрацией 0,1 мкг/см3, выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C, добавляют 5 см3 гексана, растворяют содержимое концентратора и наносят на колонку. Промывают колонку 15 см3 гексана, смыв отбрасывают. Наносят на колонку 10 см3 смеси гексан:ацетон - 4:1, смыв отбрасывают. Пропускают через колонку 20 см3 смеси гексан:ацетон - 1:1, отбирая последовательно по 5 см3 элюента. Каждую фракцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха.
<a id="p100106"></a>Сухой остаток в концентраторах растворяют в 1 см3 ацетона и вводят в хроматограф 1 мм3. По результатам обнаружения Флурохлоридона в каждой фракции определяют объем смеси гексан:ацетон - 1:1, необходимый для полного вымывания Флурохлоридона.


### <a id="p100107"></a>7.5. Приготовление рабочих растворов



##### <a id="p100108"></a>7.5.1 Приготовление смесей растворителей

для колоночной хроматографии


###### <a id="p100109"></a>7.5.1.1 Приготовление смеси ацетонитрил: вода - 1:1.

<a id="p100110"></a>В коническую колбу объемом 250 см3 отмеряют мерным цилиндром 100 см3 бидистиллированной воды и прибавляют в нее 100 см3 ацетонитрила. Полученную смесь тщательно перемешивают и используют для очистки экстракта на патронах.

###### <a id="p100111"></a>7.5.1.2 Приготовление смеси гексан: ацетон - 1:1.

<a id="p100112"></a>В коническую колбу объемом 250 см3 отмеряют мерным цилиндром 100 см3 гексана и прибавляют в нее 100 см3 ацетона. Полученную смесь тщательно перемешивают и используют для очистки экстракта на колонке с Флоризилом.

###### <a id="p100113"></a>7.5.1.3 Приготовление смеси гексан: ацетон - 4:1.

<a id="p100114"></a>В коническую колбу объемом 250 см3 отмеряют мерным цилиндром 200 см3 гексана и прибавляют в нее 50 см3 ацетона. Полученную смесь тщательно перемешивают и используют для очистки экстракта на колонке с Флоризилом.


##### <a id="p100115"></a>7.5.2 Приготовление стандартных растворов


<a id="p100116"></a>50 мг Флурохлоридона (аналитического стандарта) вносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор N 1, концентрация 1 мг/см3). Раствор хранится в холодильнике около 120 суток.
<a id="p100117"></a>Затем 1,0 см3 стандартного раствора N 1 с концентрацией 1,0 мг/см3 отбирают пипеткой в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании (стандартный раствор N 2 с концентрацией Флурохлоридона 10,0 мкг/см3).
<a id="p100118"></a>Далее 1,0 см3 стандартного раствора N 2 с концентрацией 10,0 мкг/см3 отбирают пипеткой в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании (стандартный раствор N 3 с концентрацией Флурохлоридона 0,1 мкг/см3).
<a id="p100119"></a>Методом последовательного разбавления в мерных колбах раствора N 3 ацетоном готовят рабочие растворы Флурохлоридона с концентрацией 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 мкг/см3, которые могут храниться в холодильнике не более 30 суток.


### <a id="p100120"></a>7.6. Построение градуировочного графика


<a id="p100121"></a>Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят 1 мм3 рабочего раствора Флурохлоридона с концентрацией 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 мкг/см3. Проводят не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение площади хроматографического пика для каждой концентрации.
<a id="p100122"></a>По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ от концентрации Флурохлоридона в растворе в мкг/см3 (рис. 1 - не приводится).


## 8. <a id="p100123"></a>Отбор проб и хранение


<a id="p100124"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ 1743.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почвы. Общие требования к отбору проб", ГОСТ 26950-89 "Почвы. Отбор проб", [ГОСТ 22391](https://bukva.ai/docs/gost-22391-89) "Подсолнечник", [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 1129-93](https://bukva.ai/docs/gost-1129-93) "Масло подсолнечное. ТУ" и ГОСТ 5471-83 "Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100125"></a>Пробы почвы хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °C в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение 1 года. Допускается высушивание почвы при комнатной температуре в затемненном месте до воздушно-сухой влажности и последующее хранение в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу не более 6 месяцев.
<a id="p100126"></a>Семена подсолнечника, подсушенные до стандартной влажности, хранят в тканевых мешочках, в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6-ти месяцев. Влажные семена замораживают и хранят в морозильной камере при -14 °C до 2-х лет. Пробы масла подсолнечника хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение 10 суток.


## 9. <a id="p100127"></a>Выполнение определения



### <a id="p100128"></a>9.1. Почва



##### <a id="p100129"></a>9.1.1 Экстракция


<a id="p100130"></a>Навеску почвы 10 г помещают в центрифужные банки объемом 250 см3, смачивают 5 см3 дистиллированной воды, заливают 50 см3 ацетонитрила и встряхивают в течение 30 мин. По окончании встряхивания пробу центрифугируют 15 минут при скорости 4000 об./мин. Фильтруют экстракт в концентратор емкостью 250 см3 через воронку с бумажным фильтром. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 50 см3 ацетонитрила и встряхивая смесь в течение 15 мин. Экстракты объединяют в концентраторе. Растворитель выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха.

##### <a id="p100131"></a>9.1.2 Очистка экстракта на колонке с Флоризилом.

<a id="p100132"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 5 см3 гексана и наносят на колонку с Флоризилом, подготовленную, как указано в [разделе 7.3](#p100102). Промывают колонку 15 см3 гексана, смыв отбрасывают. Наносят на колонку 10 см3 смеси гексан:ацетон - 4:1, смыв отбрасывают. Пропускают через колонку 10 см3 смеси гексан:ацетон - 1:1, собирая элюат в концентратор емкостью 100 см3. Содержимое концентратора выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха.
<a id="p100133"></a>Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 см3 ацетона и вводят в хроматограф 1 мм3.


### <a id="p100134"></a>9.2. Семена подсолнечника


<a id="p100135"></a>9.2.1. Экстракция и предварительная очистка. Навеску семян подсолнечника 10 г помещают в полипропиленовую банку объемом 250 см3, смачивают 10 см3 дистиллированной воды, заливают 50 см3 ацетонитрила и встряхивают в течение 30 мин. По окончании встряхивания пробу центрифугируют 15 мин. при скорости 4000 об./мин. Фильтруют экстракт в концентратор емкостью 250 см3 через воронку с бумажным фильтром. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 50 см3 ацетонитрила и встряхивая смесь в течение 15 мин.
<a id="p100136"></a>Экстракты отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 250 см3. К объединенному экстракту добавляют 30 см3 гексана и встряхивают содержимое делительной воронки. После разделения слоев нижний слой сливают в стаканчик, а гексан отбрасывают. Экстракт из стаканчика возвращают в делительную воронку и промывают тем же объемом гексана еще раз.
<a id="p100137"></a>Нижний слой сливают в концентратор емкостью 250 см3. Растворитель выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха (Выпаривание проводить осторожно, так как возможно вспенивание ацетонитрила!).
<a id="p100138"></a>Сухой остаток в концентраторе разводят в 5 см3 гексана и очищают пробу на колонке с Флоризилом (см. [раздел 9.1.2](#p100131)), а затем на патроне Диапак C16.

##### <a id="p100139"></a>9.2.2 Очистка экстракта на патроне Диапак C16.

<a id="p100140"></a>Сухой остаток после очистки на колонке с Флоризилом в концентраторе разводят в 1 см3 ацетона, добавляют 9 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое, обмывая стенки концентратора, и наносят на патрон, подготовленный, как указано в [разделе 7.1](#p100098). Промывают патрон 20 см3 дистиллированной воды, смыв отбрасывают. Пропускают через колонку 15 см3 смеси ацетонитрил:вода - 1:1, собирая элюент в концентратор, и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C досуха.
<a id="p100141"></a>Сухой остаток разводят в 10 см3 гексана и вводят в хроматограф 1 мм3 пробы.


### <a id="p100142"></a>9.3. Масло подсолнечника


<a id="p100143"></a>9.3.1. Экстракция и предварительная очистка. Навеску масла 5 г помещают в стеклянный стаканчик емкостью 100 см3 и разводят в 50 см3 гексана. Содержимое стаканчика переносят в делительную воронку емкостью 250 см3. Добавляют в воронку 50 см3 ацетонитрила и встряхивают 2 мин. После разделения фаз нижний ацетонитрильный слой сливают в коническую колбу, а верхний слой оставляют в делительной воронке, приливают туда 50 см3 ацетонитрила и встряхивают 2 мин. Ацетонитрильный экстракт сливают в ту же колбу. Экстракцию повторяют еще раз тем же объемом новой порции ацетонитрила.
<a id="p100144"></a>Объединенный ацетонитрильный экстракт переносят в чистую сухую делительную воронку, добавляют туда 20 см3 гексана и промывают ацетонитрил, встряхивая воронку 1 - 2 мин. После разделения фаз нижний ацетонитрильный слой сливают в стаканчик, а гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и промывают еще раз 20 см3 гексана. После разделения фаз ацетонитрил сливают в концентратор емкостью 250 см3 и выпаривают его при температуре не выше 35 °C досуха.
<a id="p100145"></a>Пробу в концентраторе разводят в 30 см3 гексана, переносят в делительную воронку. Добавляют туда 30 см3 ацетонитрила и проводят переэкстракцию Флурохлоридона в ацетонитрил, встряхивая воронку в течение 2 мин. После разделения фаз нижний слой ацетонитрила сливают в концентратор. Повторяют переэкстракцию еще два раза тем же объемом ацетонитрила. Объединенный экстракт выпаривают при температуре не выше 35 °C досуха.
<a id="p100146"></a>Сухой остаток в концентраторе разводят в 5 см3 гексана и очищают пробу на колонке с Флоризилом (см. [раздел 9.1.2](#p100131)), а затем на патроне Диапак C16 (см. [раздел 9.2.2](#p100139)).
<a id="p100147"></a>Сухой остаток разводят в 5 см3 гексана и вводят в хроматограф 1 мм3 пробы.


### <a id="p100148"></a>9.4. Условия хроматографирования

<a id="p100149"></a>Хроматограф "Кристалл 2000м" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов 63Ni с пределом детектирования по Линдану не выше 4 x 10-14 или другой с аналогичными характеристиками.
<a id="p100150"></a>Капиллярная кварцевая колонка DB-1701 (14% цианопропилфенил - 86% метилсиликон), длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
<a id="p100151"></a>Температура термостата колонки программированная: начальная температура - 170 °C, выдержка - 4 мин.; нагрев колонки по 10 °C/мин., до 220 °C; выдержка 5 мин.
<a id="p100152"></a>Продувка детектора после анализа азотом - 65 см3/мин. в течение 3 мин. Нагрев колонки до 280 °C.
<a id="p100153"></a>Температура испарителя - 250 °C, детектора - 340 °C.
<a id="p100154"></a>Регулятор расхода гелия - РРГ-11; режим - Split less.
<a id="p100155"></a>Газ 1 - гелий, линейная скорость - 23 см/сек., давление на входе - 32,11 кПа.
<a id="p100156"></a>Газ 2 - гелий (продувка испарителя), расход - 1,0 см3/мин.; сброс 1:50.
<a id="p100157"></a>Газ 3 - азот (поддув в детектор), расход во время анализа - 45 см3/мин.
<a id="p100158"></a>Абсолютное время удерживания Флурохлоридона - 11 мин. 2 сек. - 11 мин. 9 сек.
<a id="p100159"></a>Минимально детектируемое количество Флурохлоридона в анализируемом объеме - 0,01 нг.
<a id="p100160"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,01 - 0,2 нг.
<a id="p100161"></a>Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100162"></a>Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор с концентрацией Флурохлоридона 0,2 мкг/см3 соответственно, разбавляют.
<a id="p100163"></a>Количественное определение Флурохлоридона проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Флурохлоридона с концентрацией 0,01 - 0,2 мкг/см3.


## 10. <a id="p100164"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100165"></a>Для определения содержания Флурохлоридона в пробах методом ГЖХ используют следующую формулу:

<a id="p100166"></a> $X = \frac{S\text{пр} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S\text{ст} \cdot m} \times P$ , где

<a id="p100168"></a>X - содержание Флурохлоридона в пробе, мг/кг;
<a id="p100169"></a>Sст - площадь пика стандарта, мВ;
<a id="p100170"></a>Sпр - площадь пика образца, мВ;
<a id="p100171"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
<a id="p100172"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
<a id="p100173"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100174"></a>P - содержание Флурохлоридона в аналитическом стандарте, %.


## 11. <a id="p100175"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100176"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

<a id="p100177"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r$ , где (1)

<a id="p100179"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты параллельных определений, мг/кг;
<a id="p100180"></a>r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100034), при этом $r = 2,8\sigma_{r}$ .
<a id="p100181"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100177) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100182"></a>Оформление результатов


<a id="p100183"></a>Результат анализа представляют в виде:
<a id="p100184"></a> $(\overline{X} \pm \Delta)$ мг/кг при вероятности P = 0,95, где
<a id="p100186"></a> $\overline{X}$ - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100187"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100188"></a> $\Delta = \delta \cdot \overline{X}/100$ ,

<a id="p100189"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100034)), %.
<a id="p100190"></a>В случае, если содержание компонента ниже нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100191"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100192"></a>

---

<a id="p100193"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.


## 13. <a id="p100194"></a>Контроль качества результатов измерения


<a id="p100195"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100196"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100197"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100198"></a>Величина добавки $C_{\text{д}}$ должна удовлетворять условию:

<a id="p100199"></a> $C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime}$ , где

<a id="p100200"></a> $\pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime})$ - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/кг, при этом:

<a id="p100201"></a> $\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta$ , где

<a id="p100202"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100203"></a> $\Delta = \delta \cdot \overline{X}/100$ ,

<a id="p100204"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100034)), %.
<a id="p100205"></a>Результат контроля процедуры (Кк) рассчитывают по формуле:

<a id="p100206"></a> $K_{\text{к}} = \overline{X\prime} - \overline{X} - C_{\text{д}}$ , где

<a id="p100207"></a> $\overline{X\prime}$ , $\overline{X}$ , $C_{\text{д}}$ - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100175)) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
<a id="p100208"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

<a id="p100209"></a> $K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}}$ 

<a id="p100210"></a>Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
<a id="p100211"></a>Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100212"></a> $|K_{\text{к}}| \leq K$ , (2)

<a id="p100283"></a>процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100213"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100212) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100214"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100215"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

<a id="p100216"></a> $\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R$ , где (3)

<a id="p100218"></a>X<sub>1</sub>, X<sub>2</sub> - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
<a id="p100219"></a>R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, [таблица 1](#p100034)), %.



<a id="p100220"></a>

---