---
title: "\"МУК 4.1.2592-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пропиконазола в ягодах винограда и виноградном соке, зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2592-10"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2592-10"
---

## "МУК 4.1.2592-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пропиконазола в ягодах винограда и виноградном соке, зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2592-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств пропиконазола в ягодах винограда и виноградном соке, зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 26.03.2010)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 26 марта 2010 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

26 марта 2010 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРОПИКОНАЗОЛА В ЯГОДАХ**
**ВИНОГРАДА И ВИНОГРАДНОМ СОКЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ**
**РАПСА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2592-10**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

26 марта 2010 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским НИИ защиты растений.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 03.12.2009 N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 26 марта 2010 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 26 марта 2010 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100011"></a>Вводная часть



#### <a id="p100012"></a>1.1 Краткая характеристика препарата


<a id="p100013"></a>Действующее вещество: пропиконазол (смесь диастереомеров).
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по номенклатуре ИЮПАК: (+/-)-1-[2-(2,4-дихлорофенил)-4-пропил-1,3-диоксалан-2-улметил]-1H-1,2,4-триазол.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: C  H  Cl N O .
                           15 17  2 3 2
<a id="p100017"></a>    Молекулярная масса: 342,2.
<a id="p100018"></a>    Химически чистое вещество: вязкая желтоватая жидкость без запаха.
<a id="p100019"></a>    Температура плавления: -23 °C.
<a id="p100020"></a>    Давление пара при 20 °C: 0,027 мПа. K   log P = 3,72 (pH 6,6, 25 °C).
                                         ow
<a id="p100021"></a>    Растворимость  в  воде  (20  °C)  - 100 мг/куб. дм. В н-гексане - 47, в
ацетонитриле  -  168  г/куб.  дм.  Растворим  в  этаноле, ацетоне, толуоле,
хлористом  метилене  (25 °C), этилацетате (25 °C) и н-октаноле. Стабилен до
320 °C без значительного гидролиза. Слабое основание, pK  1,09.
                                                        а


#### <a id="p100022"></a>1.2 Краткая токсикологическая характеристика


<a id="p100023"></a>    ЛД    для крыс 1517, мышей 1490 мг/кг (орально). При подкожном введении
      50
ЛД        для крыс > 4000, для кроликов > 6000 мг/кг.
  50 дерм
<a id="p100024"></a>    ЛК    (96  ч): для карпа 6,8, ушастого окуня 6,4, радужной форели 4,3 -
      50
5,3 мг/куб. дм. Не раздражает глаза и кожу кроликов.


#### <a id="p100025"></a>1.3 Область применения препарата


<a id="p100026"></a>Системный фунгицид широкого спектра действия.


## 2. <a id="p100027"></a>Методика определения пропиконазола в ягодах винограда и виноградном соке, зеленой массе, семенах и масле рапса методом ВЭЖХ



### <a id="p100028"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100029"></a>2.1.1 Область применения и принцип метода

<a id="p100030"></a>Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств пропиконазола в ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1 мг/кг, зеленой массе, семенах и масле рапса в диапазоне концентраций 0,025 - 0,250 мг/кг.
<a id="p100031"></a>Методика основана на определении пропиконазола методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора после его извлечения из образцов водно-ацетонитрильной смесью или ацетонитрилом с последующей очисткой жидкостной экстракцией и на концентрирующих патронах.

##### <a id="p100032"></a>2.1.2 Метрологические характеристики

<a id="p100033"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100034"></a>Таблица 1

<a id="p100035"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="18%"><col width="19%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="14%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td>Объект анализа</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Ягоды винограда</td><td>0,01 - 0,05</td><td>50</td><td>5,6</td><td>15,7</td><td>24,3</td></tr>
<tr><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>5,2</td><td>14,6</td><td>22,6</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Сок винограда</td><td>0,01 - 0,05</td><td>50</td><td>5,5</td><td>15,4</td><td>23,9</td></tr>
<tr><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>5,1</td><td>14,3</td><td>22,2</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зеленая масса рапса</td><td>0,025 - 0,1</td><td>50</td><td>5,3</td><td>14,8</td><td>22,9</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,25</td><td>25</td><td>5,2</td><td>14,6</td><td>22,6</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Семена рапса</td><td>0,025 - 0,1</td><td>50</td><td>4,2</td><td>11,8</td><td>12,9</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,25</td><td>25</td><td>4,6</td><td>12,9</td><td>15,5</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Масло рапса</td><td>0,025 - 0,1</td><td>50</td><td>3,6</td><td>10,1</td><td>12,1</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,25</td><td>25</td><td>3,8</td><td>10,6</td><td>12,7</td></tr>
</table>


<a id="p100042"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100043"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100044"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ПРОПИКОНАЗОЛА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

ДЛЯ n = 20, P = 0,95


| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Ягоды винограда | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 94,10 | 4,6 | 4,2 |
| Сок винограда | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 91,90 | 4,8 | 4,4 |
| Зеленая масса рапса | 0,025 | 0,025 - 0,25 | 98,75 | 4,4 | 4,0 |
| Семена рапса | 0,025 | 0,025 - 0,25 | 91,25 | 5,2 | 4,7 |
| Масло рапса | 0,025 | 0,025 - 0,25 | 95,70 | 4,3 | 3,9 |



##### <a id="p100051"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100052"></a>Избирательность метода определения пропиконазола достигается условиями подготовки проб и хроматографического анализа.


### <a id="p100053"></a>2.2. Реактивы и материалы


<a id="p100054"></a>Ацетон, ос.ч.                                       ТУ 6-09-3513-86
<a id="p100055"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ, "В-200нм",
сорт 5 или х.ч.                                     ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100056"></a>Бумажные фильтры "красная лента"                    ТУ 6.091678-86
<a id="p100057"></a>Вода бидистиллированная, деионизированная ГОСТ 6709-79
<a id="p100058"></a>Пропиконазол смесь стереоизомеров,
аналитический стандарт с содержанием
д.в. 98,6% (HPLC)
<a id="p100059"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч., 0,005 М
водный раствор ГОСТ 6552-80
<a id="p100060"></a>н-Гексан, х.ч., свежеперегнанный                    ТУ 2631-003-05807999-98
<a id="p100061"></a>Метилен хлористый, х.ч.                             ТУ 2631-44493179-98
<a id="p100062"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: 1 - смесь
ацетонитрила и 0,005 М H PO  в соотношении 55:45;
                        3  4
2 - смесь ацетонитрила и 0,005 М H PO
                                  3  4
в соотношении 45:55
<a id="p100063"></a>Концентрирующие патроны, заполненные
силикагелем 60 (0,040 - 0,063 mm), Merck
<a id="p100064"></a>Концентрирующие патроны Диапак C16 (0,4 г),
БиоХимМак


### <a id="p100065"></a>2.3. Приборы и посуда


<div align="center">

<a id="p100066"></a>Жидкостный хроматограф "ACQUITY" фирмы

</div>

"Waters" с быстросканирующим УФ-детектором,
снабженным дегазатором, автоматическим
пробоотборником и термостатом колонки
или "Breeze" фирмы "Waters" или аналогичный
Аналитические колонки ACQUITY UPLC BEH C18
(100 x 2,1) мм, 1,7 мкм (Waters) (колонка 1)
и Spherisorb Phenyl (4,6 x 150) мм, 3 мкм
(Waters) (колонка 2)
<a id="p100067"></a>Баня ультразвуковая "Серьга" или аналогичная               ТУ 3.836.008
<a id="p100068"></a>Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные ГОСТ 24104-2001
<a id="p100069"></a>Воронка Бюхнера                                            ГОСТ 0147
<a id="p100070"></a>Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная
зерновая ЛМЗ                                               ТУ 1-01-0593-79
<a id="p100071"></a>Насос водоструйный                                         ГОСТ 10696-75
<a id="p100072"></a>Центрифуга ОПн-8УХЛ4.2                                     ТУ 5.375-4261-76
<a id="p100073"></a>Бидистиллятор
<a id="p100074"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума
(для работы с концентрирующими патронами)
<a id="p100075"></a>Шприц медицинский с разъемом Льюера ГОСТ 22090
<a id="p100076"></a>pH-метр универсальный ЭВ-74 ГОСТ 22261-76
<a id="p100077"></a>Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС                ГОСТ 10384-72
<a id="p100078"></a>Колбы круглодонные на шлифах КШ50 29/32 ТС                 ГОСТ 10384-72
<a id="p100079"></a>Воронки лабораторные В-75-110 ГОСТ 25336-82
<a id="p100080"></a>Цилиндры мерные на 100, 250 и 1000 куб. см [ГОСТ 1774-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100081"></a>Колбы мерные на 25, 50, 100 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100082"></a>Пипетки на 1, 2, 5, 10 куб. см                             ГОСТ 22292-74
<a id="p100083"></a>Микродозаторы Ленпипет переменного объема
от 200 до 1000 куб. мм и от 1 до 5 куб. см


### <a id="p100084"></a>2.4. Отбор и хранение проб


<a id="p100085"></a>Отбор проб винограда производится в соответствии с [ГОСТ 25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый. Технические условия". Пробы ягод винограда хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше -18 °C в течение 6 месяцев. Пробы виноградного сока хранят в холодильнике при температуре 0 - 4 °C в течение недели.
<a id="p100086"></a>Отбор проб семян и масла рапса производится в соответствии с [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб". Отобранные пробы семян рапса хранят в холодильнике при 4 °C не более 10-ти дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят в морозильной камере при -18 °C. Перед анализом образцы семян измельчают.


### <a id="p100087"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100088"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100089"></a>    Органические растворители,  при  необходимости,  перед  началом  работы
очищают,  сушат  и  перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан
встряхивают  с  небольшими  порциями  концентрированной  серной  кислоты до
прекращения  окрашивания свежей порции кислоты, затем промывают водой, 2%-м
раствором  гидроксида  натрия  и  снова  водой,  после  чего  его сушат над
гидроксидом натрия и перегоняют. Ацетон перегоняют над перманганатом  калия
и  поташом (на 1 куб. дм ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ). Ацетонитрил сушат
                                          4        2  3
над  пентоксидом  фосфора и  перегоняют;  отогнанный  растворитель повторно
перегоняют над углекислым калием.

##### <a id="p100090"></a>2.5.2 Кондиционирование колонки

<a id="p100091"></a>Перед началом анализа аналитические колонки кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 куб. см/мин.) до стабилизации нулевой линии в течение 1 ч.

##### <a id="p100092"></a>2.5.3 Приготовление растворов

<a id="p100093"></a>Для приготовления 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты 0,5 г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 куб. дм, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.
<a id="p100094"></a>Приготовление стандартного и градуировочных растворов
<a id="p100095"></a>Точную навеску пропиконазола (50 мг) помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см, растворяют в ацетонитриле и доводят до метки. (Стандартный раствор с концентрацией 0,5 мг/куб. см.) Градуировочные растворы с концентрациями 0,1, 0,2, 0,5, 0,75 и 1,0 мкг/куб. см готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы.
<a id="p100096"></a>Стандартный раствор можно хранить в холодильнике в силанизированном или тефлоновом флаконе при температуре 0 - 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы используют в течение рабочего дня.
<a id="p100097"></a>При изучении полноты извлечения пропиконазола используют ацетонитрильные растворы вещества.

##### <a id="p100098"></a>2.5.4 Построение градуировочного графика

<a id="p100099"></a>Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация пропиконазола в растворе) в хроматограф вводят по 10 куб. мм градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации пропиконазола в градуировочном растворе.

##### <a id="p100100"></a>2.5.5 Подготовка приборов и средств измерения

<a id="p100101"></a>Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями технической документации.

##### <a id="p100102"></a>2.5.6 Подготовка концентрирующих патронов для очистки экстракта

<a id="p100103"></a>2.5.6.1. Кондиционирование патронов, заполненных гексадецилсиликагелем - Диапак C16 (0,4 г), предназначенных для очистки экстрактов ягод и сока винограда, а также зеленой массы и семян рапса, осуществляют, пропуская через них последовательно по 1 куб. см метанола и воды. Патроны для очистки проб масла рапса кондиционируют пропусканием 2 куб. см ацетонитрила. Элюаты отбрасывают.
<a id="p100104"></a>2.5.6.2. Кондиционирование патронов для повторной очистки экстрактов ягод и сока винограда, зеленой массы, семян и масла рапса, заполненных силикагелем 60 (0,5 г), осуществляют пропусканием 2,5 куб. см гексана.


### <a id="p100105"></a>2.6. Проведение определения



##### <a id="p100106"></a>2.6.1 Определение пропиконазола в ягодах и соке винограда

<a id="p100107"></a>Гомогенизированную пробу ягод винограда массой 50 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, прибавляют 10 куб. см воды и 40 куб. см ацетона. Пропиконазол экстрагируют на ультразвуковой бане в течение 10 мин. Суспензию фильтруют в вакууме через воронку Бюхнера с фильтром "красная лента", промывая массу на фильтре 10 куб. см ацетона. Экстракцию повторяют и объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C до полного удаления ацетона. Водный остаток (50 - 60 куб. см) фильтруют через бумажный фильтр "красная лента" и пропускают через концентрирующий патрон Диапак C16, откондиционированный по [п. 2.5.6.1](#p100103). Фильтрат отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 куб. см ацетона в чистую круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C).
<a id="p100108"></a>Пробу виноградного сока объемом 50 куб. см фильтруют через воронку Бюхнера с фильтром "красная лента", фильтрат пропускают через концентрирующий патрон Диапак C16, откондиционированный по [п. 2.5.6.1](#p100103). Патрон промывают 5 куб. см воды. Фильтрат и промывку отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 куб. см ацетона в круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C).
<a id="p100109"></a>Сухой остаток проб ягод или сока винограда растворяют в 2,5 куб. см гексана и полученный раствор количественно вносят в подготовленный концентрирующий патрон, заполненный силикагелем 60. Патрон промывают 5 куб. см гексана. Фильтрат и промывку отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 куб. см смеси гексан-ацетон (80:20). Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C), сухой остаток растворяют в 5 куб. см подвижной фазы и 10 куб. мм образца вводят в жидкостный хроматограф.

##### <a id="p100110"></a>2.6.2 Определение пропиконазола в зеленой массе, семенах и масле рапса

<a id="p100111"></a>Навеску размолотых на лабораторной мельнице семян или измельченной зеленой массы (20 г) помещают в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, прибавляют 75 куб. см ацетонитрила, содержащего 20% воды (по объему). Пропиконазол экстрагируют на ультразвуковой бане в течение 15 мин. Суспензию фильтруют в вакууме через воронку Бюхнера с фильтром "красная лента". Экстракцию повторяют. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе (40 °C) до полного удаления ацетонитрила.
<a id="p100112"></a>Водный остаток экстракта семян рапса фильтруют через бумажный фильтр "красная лента" и пропускают через концентрирующий патрон Диапак C16, откондиционированный по [п. 2.5.6.1](#p100103). Фильтрат отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 куб. см ацетона в круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C). Дальнейшую очистку проб проводят по [п. 2.6.3](#p100115).
<a id="p100113"></a>Водный остаток экстракта зеленой массы доводят до 100 куб. см водой, фильтруют через бумажный фильтр "красная лента" и экстрагируют 25 куб. см гексана. Экстракцию повторяют дважды. Объединенный гексановый экстракт промывают два раза водой по 20 куб. см. Промывки отбрасывают, а гексановый раствор сушат безводным сульфатом натрия и упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C). Дальнейшую очистку проб проводят по [п. 2.6.3](#p100115).
<a id="p100114"></a>К 10 г масла рапса прибавляют 50 куб. см гексана и экстрагируют в делительной воронке вместимостью 100 куб. см ацетонитрилом трижды по 10 куб. см. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе до объема 1 куб. см и пропускают через два соединенных последовательно концентрирующих патрона Диапак C16 (0,4 г), подготовленных соответственно по [п. 2.5.6.1](#p100103). Промывают 2 куб. см ацетонитрила. Фильтрат и промывку отбрасывают. Пропиконазол элюируют 3 куб. см ацетонитрила. Элюат упаривают досуха на ротационном испарителе (40 °C). Дальнейшую очистку проб проводят по пункту 2.6.3.

##### <a id="p100115"></a>2.6.3 Очистка на концентрирующем патроне, заполненном силикагелем 60 (0,5 г)

<a id="p100116"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 2.6.2](#p100110), растворяют в 2,5 куб. см гексана и количественно вносят в подготовленный по [п. 2.5.6.2](#p100104) концентрирующий патрон, заполненный силикагелем 60. Патрон промывают 5 куб. см гексана и для проб масла дополнительно 5 куб. см хлористого метилена. Фильтрат и промывки отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 куб. см смеси гексан-ацетон (80:20). Полученный раствор упаривают на ротационном испарителе (40 °C), сухие остатки семян и зеленой массы растворяют в 2 куб. см, а масла - в 1 куб. см подвижной фазы и 10 куб. мм образца вводят в жидкостный хроматограф.

##### <a id="p100117"></a>2.6.4 Условия хроматографирования

<a id="p100118"></a>Ультраэффективный жидкостный хроматограф "ACQUITY" фирмы Waters с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Для анализа проб ягод и сока винограда, зеленой массы и семян рапса используют колонку 1.
<a id="p100119"></a>Температура колонки (30 +/- 1) °C.
<a id="p100120"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,005 М ортофосфорная кислота в соотношении 55:45.
<a id="p100121"></a>Скорость потока элюента: 0,2 куб. см/мин.
<a id="p100122"></a>Рабочая длина волны 220 нм.
<a id="p100123"></a>Объем вводимой пробы 10 куб. мм.
<a id="p100124"></a>Время удерживания пропиконазола (5,15 +/- 0,05) мин. (изомер 1) и (5,30 +/- 0,05) мин. (изомер 2).
<a id="p100125"></a>Пробы, полученные из масла рапса, анализируют на колонке 2.
<a id="p100126"></a>Температура колонки (30 +/- 1) °C.
<a id="p100127"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,005 М ортофосфорная кислота в соотношении 45:55.
<a id="p100128"></a>Скорость потока элюента: 0,8 куб. см/мин.
<a id="p100129"></a>Рабочая длина волны 220 нм.
<a id="p100130"></a>Объем вводимой пробы 10 куб. мм.
<a id="p100131"></a>Время удерживания совокупного пика пропиконазола (5,1 +/- 0,1) мин.


## 3. <a id="p100132"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100133"></a>Содержание пропиконазола в образцах ягод винограда и виноградном соке, зеленой массе, семенах и масле рапса (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                                  S  x C x V
                                   2
<a id="p100134"></a>                              X = ----------,
                                    S  x P
                                     1

<a id="p100135"></a>    где:
<a id="p100136"></a>    S  - площадь пика пропиконазола в стандартном растворе, (мВ x с);
     1
<a id="p100137"></a>    S  - площадь пика пропиконазола в анализируемой пробе, (мВ x с);
     2
<a id="p100138"></a>    V  -  объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб.
см;
<a id="p100139"></a>    P - навеска анализируемого образца, г;
<a id="p100140"></a>    C - концентрация стандартного раствора пропиконазола, мкг/куб. см.
<a id="p100141"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор пропиконазола 1 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


## 4. <a id="p100142"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100143"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 |X  - X | x 100
                             1    2
<a id="p100144"></a>                         ----------------- <= r,                        (1)
                             (X  + X )
                               1    2

<a id="p100145"></a>    где:
<a id="p100146"></a>    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
<a id="p100147"></a>    r  - значение предела повторяемости (r = 2,8 сигма ).
                                                      r
<a id="p100148"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100144) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 5. <a id="p100149"></a>Оформление результатов


<a id="p100150"></a>Результат анализа представляют в виде:

<div align="center">

<a id="p100151"></a>(X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,

</div>


<a id="p100152"></a>где:
<a id="p100153"></a>X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
<a id="p100154"></a>ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100155"></a>ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

</div>


<a id="p100156"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100157"></a>В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100158"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,01 мг/кг*, где * - 0,01 мг/кг - предел обнаружения).


## 6. <a id="p100159"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100160"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100161"></a>6.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100162"></a>6.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100163"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д


<a id="p100164"></a>                       С  = ДЕЛЬТА    + ДЕЛЬТА    ,
                        д         л,X         л,X'

<a id="p100165"></a>    где +/- ДЕЛЬТА     (+/- ДЕЛЬТА    )   -   характеристика    погрешности
                  л,X             л,X'
(абсолютная погрешность)  результатов  анализа, соответствующая  содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100166"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 x ДЕЛЬТА,
                              л

<a id="p100167"></a>где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

<div align="center">

<a id="p100168"></a>ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

</div>


<a id="p100169"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
<a id="p100170"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

<a id="p100171"></a>                             К  = X' - X - С ,
                              к             д

<a id="p100172"></a>    где  X',  X,  С   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 4](#p100142)) содержания компонента в
образце    с   добавкой,    испытуемом   образце,   концентрация   добавки,
соответственно, мг/кг.
<a id="p100173"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100174"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА     + ДЕЛЬТА   .
                                   л,X'         л,X

<a id="p100175"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100176"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100177"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к
процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100178"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100177) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

#### <a id="p100179"></a>6.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100180"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 |X  - X | x 100
                             1    2
<a id="p100181"></a>                         ----------------- <= R,                        (3)
                             (X  + X )
                               1    2

<a id="p100182"></a>    где:
<a id="p100183"></a>    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
<a id="p100184"></a>    R   -   предел   воспроизводимости   (в   соответствии   с   диапазоном
концентраций), %.


## 7. <a id="p100185"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100186"></a>При проведении работы необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005-88).
<a id="p100187"></a>При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.
<a id="p100188"></a>Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.


## 8. <a id="p100189"></a>Требования к квалификации оператора


<a id="p100190"></a>Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации жидкостного хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по [п. 6](#p100159).



<a id="p100191"></a>

---