---
title: "\"МУК 4.1.2483-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение непищевых красителей Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red в пищевых продуктах и биологически активных добавках к пище. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2483-09"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2483-09"
---

## "МУК 4.1.2483-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение непищевых красителей Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red в пищевых продуктах и биологически активных добавках к пище. Методические указания"

# "МУК 4.1.2483-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение непищевых красителей Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red в пищевых продуктах и биологически активных добавках к пище. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 05.02.2009)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности пищевой продукции" (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 880).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 5 февраля 2009 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

5 февраля 2009 года

</div>




#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕПИЩЕВЫХ КРАСИТЕЛЕЙ**
**СУДАН I, СУДАН II, СУДАН III, СУДАН IV И PARA RED**
**В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВКАХ К ПИЩЕ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2483-09**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

<div align="center">

с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Методические указания разработаны ГУ НИИ питания РАМН (академик РАМН В.А. Тутельян, к.т.н. В.Г. Байков, к.х.н. В.В. Бессонов, Ю.В. Ведищева, к.ф.н. О.И. Передеряев, Е.П. Хромченкова).
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 3 от 25.12.2008).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 05.02.2009.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с момента утверждения.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## <a id="p100011"></a>Введение


<a id="p100012"></a>Красители Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red (Пара Ред) (далее - Судан I - IV и Para Red) в сферах экономики используются при производстве дизельного топлива, в легкой промышленности для окрашивания тканей, а также при проведении биохимических исследований для окрашивания препаратов и относятся к непищевым красителям.
<a id="p100013"></a>Необходимость определения непищевых красителей Судан I - IV и Para Red (Пара Ред) обусловлена их использованием при фальсификации специй и пряностей, а также продуктов их переработки, БАД к пище, изготовленных с использованием специй и пряностей, и других пищевых продуктов, в состав которых входят специи и пряности, с целью придания им более интенсивной окраски.


## 1. <a id="p100014"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100015"></a>1.1. Настоящие Методические указания устанавливают методику определения возможного присутствия непищевых красителей Судан I - IV и Para Red в пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в специях, пряностях и продуктах их переработки, а также в биологически активных добавках к пище (БАД) и других пищевых продуктах (в состав которых входят специи и пряности).
<a id="p100016"></a>1.2. Методические указания предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, находящихся в обращении на территории Российской Федерации, в т.ч. импортируемых в Российскую Федерацию, а также могут быть использованы другими лабораторными центрами, осуществляющими контроль качества и безопасности пищевых продуктов и аккредитованными в установленном порядке.
<a id="p100017"></a>1.3. Присутствие непищевых красителей Судан I - IV и Para Red в пищевых продуктах в пределах обнаружения данным методом является основанием для запрещения продукции к реализации.


## 2. <a id="p100018"></a>Краткая характеристика красителей Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red (Пара Ред)


<a id="p100019"></a>Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV и Para Red (Пара Ред) являются синтетическими непищевыми красителями, практически нерастворимыми в воде, хорошо растворимыми в органических растворителях (хлороформе, ацетоне, эфире), и имеющими интенсивную окраску от оранжевого до ярко-красного цвета. Структура непищевых красителей Судан I - IV и Para Red приведена на [рис. 1](#p100026).
<a id="p100020"></a>Структурная формула (не приводится).

                            R           R            R
                             1           2            3
<a id="p100021"></a>Судан I                     H           H            H
<a id="p100022"></a>Судан II                    H           CH           H
                                          3
<a id="p100023"></a>Судан III                   H           H            Ph-N=N-
<a id="p100024"></a>Судан IV                    CH          H            0-CH -Ph-N=N-
                              3                          3
<a id="p100025"></a>Para Red (Пара Ред)         H           H            NO
                                                       2

<div align="center">

<a id="p100026"></a>Рис. 1. Структура не пищевых красителей

</div>

Судан I - IV и Para Red (Пара Ред)


## 3. <a id="p100027"></a>Принцип метода определения красителей Судан I - IV и Para Red


<a id="p100028"></a>Обнаружение и определение содержания непищевых красителей Судан I - IV и Para Red (Пара Ред) проводится методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с диодно-матричным детектированием (при длине волны 504 нм). В качестве арбитражного метода используют метод ВЭЖХ с масс-детектированием (по молекулярным и дочерним ионам, см. таблицу 1).

<a id="p100029"></a>Таблица 1

<a id="p100030"></a>**ПАРАМЕТРЫ МАСС-ДЕТЕКТИРОВАНИЯ ПРЕДСТАВЛЕНЫ**


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="35%"><col width="17%"><col width="9%"><col width="9%"><col width="9%"></colgroup>
<tr><td>Наименование</td><td>Молекулярные ионы, m/z</td><td>Энергия разрушения</td><td colspan="3">Основные дочерние ионы, m/z</td></tr>
<tr><td>Para Red</td><td>+ 294 (М+Н )</td><td>0,9</td><td>277</td><td>156</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Судан-I</td><td>+ 249 (М+Н )</td><td>1,0</td><td>232</td><td>156</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Судан-II</td><td>+ 277 (М+Н )</td><td>1,2</td><td>260</td><td>156</td><td>120</td></tr>
<tr><td>Судан-III</td><td>+ 352 (М+Н )</td><td>1,2</td><td>197</td><td>336</td><td>156</td></tr>
<tr><td>Судан-IV</td><td>+ 382 (М+Н )</td><td>1,2</td><td>224</td><td>364</td><td>156</td></tr>
</table>



## 4. <a id="p100037"></a>Средства измерения, материалы и реактивы


- <a id="p100038"></a>Высокоэффективный жидкостной хроматограф.
- <a id="p100039"></a>Хроматографическая колонка С18, 5 мю, 4,6 х 250 мм.
- <a id="p100040"></a>Ультразвуковая баня.
- <a id="p100041"></a>Весы лабораторные общего назначения с пределом взвешивания 100 г и погрешностью + 0,0001 г.
- <a id="p100042"></a>Дистиллятор.
- <a id="p100043"></a>Установка для фильтрования и дегазирования подвижной фазы.
- <a id="p100044"></a>рН-метр лабораторный.
- <a id="p100045"></a>Центрифуга лабораторная ОПН-8, 8000 об./мин.
- <a id="p100046"></a>Мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
- <a id="p100047"></a>Пипетки 2-1-2-1 или 1-1-2-1, 2-1-2-10 или 2-2-2-10 или 3-2-2-10 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91).
- <a id="p100048"></a>Колбы мерные К 1-50-1, К 1-50-2 по [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
- <a id="p100049"></a>Вода дистиллированная.
- <a id="p100050"></a>Ацетонитрил для жидкостной хроматографии.
- <a id="p100051"></a>Тетрагидрофуран для жидкостной хроматографии.
- <a id="p100052"></a>Трифторуксусная кислота квалификации "ОСЧ".

<div align="center">

- <a id="p100053"></a>Ацетон квалификации "ХЧ".

</div>



## 5. <a id="p100054"></a>Определение содержания Суданов I - IV и Para Red методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100055"></a>5.1. Подготовка стандартных растворов


<a id="p100056"></a>Навеску стандартного вещества около 0,02 г (с точностью 0,0001 г) помещают в мерную колбу на 100 мл, добавляют 30 мл 95% этанола, интенсивно встряхивают, при необходимости озвучивают на ультразвуковой бане до полного растворения вещества. После этого объем доводят до метки 95% этанолом (основной раствор). В мерную колбу на 50 мл помещают 1 мл основного раствора и доводят объем до метки 95% этанолом (рабочий раствор). Полученный рабочий раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
<a id="p100057"></a>Приготовленные стандартные растворы хранят в прохладном месте в течение 1 месяца.


### <a id="p100058"></a>5.2. Подготовка проб для анализа


<a id="p100059"></a>Около 1,0 г (точная навеска) образца помещают во флакон объемом 20 мл с завинчивающейся крышкой, добавляют 10 мл ацетона, интенсивно встряхивают в течение 2 минут и озвучивают на ультразвуковой бане в течение 5 минут. После озвучивания образец снова встряхивают и центрифугируют на 6000 об./мин. После центрифугирования супернатант отбирают и исследуют. При необходимости отобранный супернатант фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
<a id="p100060"></a>При подготовке контрольных образцов указанным способом извлекается более 95% добавленного количества каждого из исследуемых красителей.


### <a id="p100061"></a>5.3. Приготовление подвижной фазы


<a id="p100062"></a>При постоянном перемешивании к бидистиллированной воде добавляют по каплям трифторуксусную кислоту до рН = 2,4 и фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
<a id="p100063"></a>Подвижная фаза хранится в холодильнике при температуре 2 - 8 °С не более 3 месяцев.


### <a id="p100064"></a>5.4. Проведение анализа ВЭЖХ


<a id="p100065"></a>Идентификацию компонентов на хроматограмме осуществляют путем сравнения со временем удерживания стандарта красителя, УФ и видимого спектра. Для подтверждения рекомендуется сравнивать также молекулярные массы каждого компонента и его дочерних ионов.
<a id="p100066"></a>Идентификация красителей Судан I - IV и Para Red только по времени удерживания не будет являться достоверной ввиду сложного матрикса исследуемых объектов и наличия природных компонентов, обладающих сходными спектральными характеристиками и хроматографическим поведением.


### <a id="p100067"></a>5.5. Условия хроматографического анализа


<a id="p100068"></a>Колонка 5u С18(2), 5 мю, 4,6 х 250 мм.
<a id="p100069"></a>Приготовление подвижной фазы: бидистиллированную воду доводят трифторуксусной кислотой до рН 2,4 (мл на 1 л бидистиллированной воды).
<a id="p100070"></a>Подвижная фаза: смесь ацетонитрила (А) и бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до рН = 2,4 (Б). Оптимальным является градиентное элюирование смесью ацетонитрила (А) и бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до рН = 2,4 (Б): 0 мин. - 80% (А), 10 мин. - 98% (А) (градиент линейный), 20 мин. - 98% (А), 21 мин. - 80% (А). Регенерация колонки занимает не менее 9 мин. Общее время анализа составляет 30 минут.
<a id="p100071"></a>В случае использования только диодно-матричного детектора вместо бидистиллированной воды, подкисленной трифторуксусной кислотой до рН = 2,4, допускается использование бидистиллированной воды. Также возможно использование изократического элюирования смесью ацетонитрила - бидистиллированной воды с содержанием ацетонитрила 90 - 95% (в зависимости от параметров колонки).
<a id="p100072"></a>Для полной регенерации колонки следует использовать подвижную фазу на основе тетрагидрофурана, обладающего такой же элюирующей силой, как и ацетон.
<a id="p100073"></a>Скорость подачи подвижной фазы: 1,0 куб. см/мин.
<a id="p100074"></a>Детектирование: лямбда = 504 нм.
<a id="p100075"></a>Объем вводимой пробы 5 мкл.
<a id="p100076"></a>Порядок выхода и параметры количественного определения непищевых красителей Судан I - IV и Para Red приведены в таблице 2. Пример хроматограммы смеси стандартов Судан I - IV и Para Red представлен на рисунке 2 (не приводится).

<a id="p100077"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100078"></a>**ПРЕДЕЛЫ ОБНАРУЖЕНИЯ НЕПИЩЕВЫХ**<br>
**КРАСИТЕЛЕЙ СУДАН I - IV И ПАРА РЕД В СПЕЦИЯХ,**

</div>

**ПРЯНОСТЯХ, ПРОДУКТАХ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ И БАД К ПИЩЕ**


| N | Наименование красителя | Предел обнаружения на диодной матрице, мг/кг | Предел обнаружения на масс-детекторе, мг/кг |
| --- | --- | --- | --- |
| 1 | Para Red | 0,5 | 0,5 |
| 2 | Судан-I | 0,5 | 0,5 |
| 3 | Судан-II | 0,5 | 0,5 |
| 4 | Судан-III | 0,5 | 0,5 |
| 5 | Судан-IV | 0,5 | 0,5 |


<a id="p100085"></a>Проведение количественного определения красителей Судан I - IV и Para Red не является обязательным, т.к. их применение в пищевых продуктах не допускается, поскольку они являются непищевыми веществами, и их присутствие в пределах обнаружения данного метода является основанием для запрещения продукции к реализации. Пределы обнаружения красителей Судан 1 - 4 и Пара Ред приведены в [таблице 2](#p100078).

<div align="center">

<a id="p100086"></a>Количественное определение <*>

</div>



<a id="p100087"></a>

---

<a id="p100088"></a><*> Проведение количественного определения красителей Судан I - IV и Para Red не является обязательным, т.к. их применение в пищевых продуктах не допускается.

<a id="p100089"></a>Количественное определение проводят абсолютной градуировкой.
<a id="p100090"></a>Содержание красителей Судан I - IV и Para Red проводят по следующей формуле:

                                     S2 х C1 х V
<a id="p100091"></a>                          C, мг/кг = -----------,
                                       S1 х m

<a id="p100092"></a>где:
<a id="p100093"></a>C, мг/кг - содержание красителя, мг/кг;
<a id="p100094"></a>C1 - концентрация красителя в стандартном растворе, мкг/мл;
<a id="p100095"></a>S1 - площадь пика красителя в стандартном растворе;
<a id="p100096"></a>S2 - площадь пика красителя в определяемом образце;
<a id="p100097"></a>V - объем раствора образца, мл;
<a id="p100098"></a>m - масса навески, г.

<a id="p100099"></a>Таблица 3

<div align="center">

<a id="p100100"></a>**ОСНОВНЫЕ МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ**

</div>



| N | Наименование | Граница относительной погрешности (+/- дельта) в % при Р = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости (сигма ), % r |
| --- | --- | --- | --- |
| 1 | Para Red | 2,1 | 3,2 |
| 2 | Судан-I | 3,6 | 3,5 |
| 3 | Судан-II | 2,8 | 3,8 |
| 4 | Судан-III | 3,3 | 4,9 |
| 5 | Судан-IV | 3,9 | 4,3 |


<div align="right">

<a id="p100107"></a>Таблица 4

</div>


<div align="center">

<a id="p100108"></a>**ПАРАМЕТРЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ**<br>
**НЕПИЩЕВЫХ КРАСИТЕЛЕЙ СУДАН I - IV И PARA RED**

</div>



| N | Наименование | Время удерживания, мин. |
| --- | --- | --- |
| 1 | Para Red | 6,2 |
| 2 | Судан-I | 7,5 |
| 3 | Судан-II | 10,9 |
| 4 | Судан-III | 12,9 |
| 5 | Судан-IV | 15,5 |




<a id="p100115"></a>

---