---
title: "\"МУК 4.1.2481-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств иодосульфурон-метил-натрия в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2481-09"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2481-09"
---

## "МУК 4.1.2481-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств иодосульфурон-метил-натрия в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2481-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств иодосульфурон-метил-натрия в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 09.02.2009)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 29 апреля 2009 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
9 февраля 2009 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИОДОСУЛЬФУРОН-МЕТИЛ-НАТРИЯ**
**В МАСЛЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2481-09**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

29 апреля 2009 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским НИИ защиты растений.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г. N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 9 февраля 2009 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 29 апреля 2009 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации иодосульфурон-метил-натрия в масле кукурузы в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг.
<a id="p100012"></a>Название вещества по ИСО: 4-Иодосульфурон-метил-натрий.
<a id="p100013"></a>Название вещества по ИЮПАК: Метил 4-иодо-2-[3-(4-метокси-6-метил-1,3,5-триазин-2-ил)уреидосульфонил]бензоат, натриевая соль.
<a id="p100014"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100015"></a>    C  H  JN NaO S.
     14 13  5   6
<a id="p100016"></a>    Мол. масса: 529,3.
<a id="p100017"></a>    Бесцветное  кристаллическое  вещество.  Температура  плавления: 152 °С.
                                        -6
Давление  паров  при  25  °С  6,7  х  10    мПа.  Коэффициент распределения
н-октанол/вода:  K    х  log  P  =  1,7 (pH 5), -0,7 (pH 7), -1,22  (pH 9).
                  ow
Растворимость   (в  г/куб.  дм  растворителя)  при  20  °С  ацетон  >  380,
дихлорметан  >  500, гексан - 0,001, метанол - 12, ацетонитрил - 52; вода -
0,16 (pH 5), 25 (pH 7), 65 (pH 9).
<a id="p100018"></a>    Нестабилен  в  кислой  среде: период полураспада в воде при pH 5, 7 и 9
составляет 31, > 365 и 362 дня соответственно.
<a id="p100019"></a>    В     биологически     активных     почвах    в    аэробных    условиях
иодосульфурон-метил-натрий  быстро  разлагается со средним значением DT   =
                                                                       50
1  -  5 дней. Вещество и его метаболиты относительно слабо передвигаются по
почвенному профилю.
<a id="p100020"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100021"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для крыс - 2678 мг/кг; острая
                                         50
дермальная  токсичность  (LD  ) для крыс - 2000 мг/кг; острая ингаляционная
                            50
токсичность  (LC  )  для  крыс - 2810 мг/куб. м воздуха. LC   для рыб - 100
                50                                         50
мг/куб. дм, EC   для зеленых водорослей - 0,02 мг/куб. дм.
              50
<a id="p100022"></a>Гигиенические нормативы для иодосульфурон-метил-натрия в России:
<a id="p100023"></a>ДСД - 0,03 мг/кг массы тела человека; МДУ в масле кукурузы - 0,1 мг/кг.
<a id="p100024"></a>Область применения
<a id="p100025"></a>Иодосульфурон-метил-натрий - послевсходовый гербицид системного действия из класса сульфонилмочевин. Механизм его действия связан с подавлением синтеза аминокислот с разветвленной цепью (валин и изолейцин), приводящего к прекращению клеточного деления и роста. Он эффективно уничтожает однолетние и многолетние двудольные сорные растения в посевах зерновых культур (пшеница, ячмень) и кукурузы. Избирательность действия иодосульфурон-метил-натрия в отношении злаковых культур обусловлена его быстрой детоксикацией в этих видах. Применяется в России в качестве гербицида в составе смесевых препаратов на посевах зерновых колосовых культур и кукурузы с нормой расхода 1,25 - 2,5 г д.в./га.


### 1. <a id="p100026"></a>Метрологическая характеристика метода


<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100028"></a>Таблица 1

<a id="p100029"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="18%"><col width="18%"><col width="17%"><col width="14%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Кукуруза (масло)</td><td>от 0,05 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>3,4</td><td>9,5</td><td>14,7</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>3,2</td><td>9,0</td><td>13,9</td></tr>
</table>


<a id="p100033"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100034"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100035"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

ДЛЯ n = 20, P = 0,95


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="12%"><col width="20%"><col width="14%"><col width="18%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, %</td></tr>
<tr><td>Кукуруза (масло)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,7</td><td>4,0</td><td>+/- 3,8</td></tr>
</table>



### 2. <a id="p100038"></a>Метод измерений


<a id="p100039"></a>Методика основана на определении иодосульфурон-метил-натрия с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Контроль иодосульфурон-метил-натрия в образцах кукурузного масла осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из масла ацетонитрилом, очистки экстракта путем распределения действующего вещества между несмешивающимися растворителями при щелочном и кислом значениях pH и на колонке с силикагелем.
<a id="p100040"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
<a id="p100041"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора колонки, состава подвижной фазы и условий хроматографирования.


### 3. <a id="p100042"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



#### <a id="p100043"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100044"></a>Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны                       Номер Госреестра
(фирма Knauer, Германия)                                   16848-03
<a id="p100045"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100046"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г ГОСТ 7328
<a id="p100047"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100048"></a>Меры массы ГОСТ 7328
<a id="p100049"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью
1,0; 2,0; 5,0; 10,0 куб. см [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100050"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой
вместимостью 5 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100051"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25,
50, 100, 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100052"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100053"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100054"></a>Иодосульфурон-метил-натрий, аналитический стандарт с
содержанием действующего вещества 98,0% (Байер, Германия)
<a id="p100055"></a>Ацетон, чда ГОСТ 2603-79
<a id="p100056"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч
<a id="p100057"></a>Вода бидистиллированная или деионизованная                  ГОСТ 6702
<a id="p100058"></a>н-Гексан, хч                                                ТУ 6-09-3375
<a id="p100059"></a>Калий фосфорнокислый двузамещенный, чда [ГОСТ 2493](https://bukva.ai/docs/standart-gost-2493-75)
<a id="p100060"></a>Кислота ортофосфорная, хч, 85,6% ГОСТ 6552
<a id="p100061"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), хч [ГОСТ 12794](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100062"></a>Метиловый спирт (метанол), хч [ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)
<a id="p100063"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


#### <a id="p100064"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100065"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50,
фирма Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100066"></a>Вата медицинская
<a id="p100067"></a>Воронки делительные вместимостью 100 и 250 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100068"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 мм ГОСТ 25336
<a id="p100069"></a>Дефлегматор елочный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100070"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25 и 100 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100071"></a>Колонка хроматографическая стеклянная длиной 25 см и
внутренним диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100072"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 15 см,
внутренним диаметром 4 мм, содержащая
Диасфер 110-С18 (5 мкм)                                     ТУ 4215-001-
(ЗАО "БиоХимМак СТ", Москва)                                05451931-94
<a id="p100073"></a>Насос водоструйный вакуумный                                ГОСТ 10696
<a id="p100074"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный
вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi (Швейцария)          ТУ 25-11-917-74
<a id="p100075"></a>Силикагель 60 (0,063 - 0,2 мм) для колоночной
хроматографии (Мерк, Германия) I степени активности
<a id="p100076"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100077"></a>Стекловата
<a id="p100078"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100079"></a>Фильтры бумажные "красная лента" обеззоленные или
фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ
<a id="p100080"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа
вместимостью 100 куб. мм,
модель Microliter # 1710 (Hamilton, США)
<a id="p100081"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.


### 4. <a id="p100082"></a>Требования безопасности


<a id="p100083"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими веществами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
<a id="p100084"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


### 5. <a id="p100085"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100086"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
<a id="p100087"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


### 6. <a id="p100088"></a>Условия измерений


<a id="p100089"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100090"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100091"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


### 7. <a id="p100092"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100093"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем.


#### <a id="p100094"></a>7.1. Очистка органических растворителей


<a id="p100095"></a>7.1.1. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
<a id="p100096"></a>7.1.2. Очистка н-гексана. Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания ее в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.
<a id="p100097"></a>7.1.3. Очистка силикагеля. Силикагель 60 (0,063 - 0,20 мм) для колоночной хроматографии встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °С в течение 5 часов.


#### <a id="p100098"></a>7.2. Приготовление 2 М и 0,005 М растворов ортофосфорной кислоты


<a id="p100099"></a>    Для получения  2 М раствора H PO  в мерную колбу вместимостью 1000 куб.
                                 3  4
*см* вносят 137 куб. см 85,6%-ной  ортофосфорной кислоты, добавляют 500 - 600
куб. см деионизованной воды, перемешивают и доводят объем водой до метки.
<a id="p100100"></a>    Для   получения   0,005   М   раствора   H PO   отбирают  2,5  куб.  см
                                              3  4
приготовленного  2  М  раствора  ортофосфорной  кислоты, переносят в мерную
колбу вместимостью 1000 куб. см, добавляют деионизованную  воду  до метки и
перемешивают.


#### <a id="p100101"></a>7.3 Приготовление 0,1 М раствора K HPO  х 3H O

                                                2   4     2

<a id="p100102"></a>    22,8  г  K HPO   х  3H O  растворяют  в  химическом  стакане  в  400 мл
              2   4       2
деионизованной  воды,  раствор  переносят  в мерную колбу вместимостью 1000
куб. см, добавляют деионизованную воду до метки и перемешивают.


#### <a id="p100103"></a>7.4. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта


<a id="p100104"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию: 5 г силикагеля I степени активности в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 куб. см смеси гексан - ацетон (1:9, по объему) и 30 куб. см смеси гексан - ацетон (2:3, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.


#### <a id="p100105"></a>7.5. Проверка хроматографического поведения иодосульфурон-метил-натрия на колонке с силикагелем


<a id="p100106"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора N 1 иодосульфурон-метил-натрия с концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле [(п. 7.8.2)](#p100116), раствор упаривают досуха, остаток растворяют в 3 куб. см смеси гексан - ацетон (2:3, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.4](#p100103). Промывают колонку 30 куб. см смеси гексан - ацетон (2:3, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 100 куб. см смеси гексан - ацетон (1:9, по объему). Фракционно (по 10 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 2 куб. см подвижной фазы, подготовленной по [п. 7.6](#p100108), перемешивают и анализируют на содержание иодосульфурон-метил-натрия по [п. 9.4](#p100136). Фракции, содержащие иодосульфурон-метил-натрий, объединяют и вновь анализируют по п. 9.4. Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100107"></a>*Примечание.* Профиль вымывания иодосульфурон-метил-натрия может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.


#### <a id="p100108"></a>7.6. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100109"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 480 куб. см ацетонитрила, 20 куб. см метанола и 500 куб. см 0,005 М водного раствора ортофосфорной кислоты [(п. 7.2)](#p100098), перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.


#### <a id="p100110"></a>7.7. Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100111"></a>Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 7.6](#p100108)) при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. не менее часа до установления стабильной базовой линии.


#### <a id="p100112"></a>7.8. Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100113"></a>7.8.1. Исходный раствор иодосульфурон-метил-натрия для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см).
<a id="p100114"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,010 г иодосульфурон-метил-натрия, растворяют в 40 - 50 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100115"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.
<a id="p100116"></a>7.8.2. Раствор иодосульфурон-метил-натрия N 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см).
<a id="p100117"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора иодосульфурон-метил-натрия с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.8.1)](#p100113), разбавляют ацетонитрилом до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100118"></a>Для приготовления проб масла с внесением при оценке полноты извлечения иодосульфурон-метил-натрия из исследуемых образцов используют ацетоновый раствор иодосульфурон-метил-натрия с концентрацией 5 мкг/куб. см.
<a id="p100119"></a>Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.
<a id="p100120"></a>7.8.3. Рабочие растворы N 2 - 5 иодосульфурон-метил-натрия для градуировки (концентрация 0,025 - 0,25 мкг/куб. см).
<a id="p100121"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,25; 0,5; 1,25 и 2,5 куб. см градуировочного раствора N 1 иодосульфурон-метил-натрия с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.8.2)](#p100116), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.6](#p100108), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией иодосульфурон-метил-натрия 0,025; 0,05; 0,125 и 0,25 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100122"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


#### <a id="p100123"></a>7.9. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100124"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации иодосульфурон-метил-натрия в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
<a id="p100125"></a>В инжектор хроматографа вводят по 50 куб. мм каждого градуировочного раствора [(п. 7.8.3)](#p100120) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.4](#p100136). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.


### 8. <a id="p100126"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100127"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N [2051-79](https://bukva.ai/docs/2051-79) от 21.08.79) и правилами, определенными [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100128"></a>Масло хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более 3-х месяцев. В некоторых случаях масло получают из зерна кукурузы экстракцией органическими неполярными растворителями (петролейный и диэтиловый эфиры) непосредственно перед проведением анализа.


### 9. <a id="p100129"></a>Выполнение определения



#### <a id="p100130"></a>9.1. Экстракция иодосульфурон-метил-натрия


<a id="p100131"></a>Образец масла массой 10 г вносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, добавляют 30 куб. см ацетонитрила и содержимое интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз ацетонитрильный слой собирают в делительную воронку вместимостью 250 куб. см. Операцию экстракции масляной фазы повторяют еще два раза, используя по 25 куб. см ацетонитрила. Дальнейшую очистку объединенной ацетонитрильной фазы проводят по пп. 9.2 и [9.3](#p100134).


#### <a id="p100132"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100133"></a> К ацетонитрильному экстракту, полученному по [п. 9.1](#p100130) и помещенному в
делительную  воронку,  прибавляют  30  куб. см гексана и воронку интенсивно
встряхивают   в  течение  2  мин.  После  разделения  фаз  гексановый  слой
отбрасывают,  а  ацетонитрильную  фазу  повторно  обрабатывают  30  куб. см
гексана  при  встряхивании,  гексановый  слой  отбрасывают. Ацетонитрильную
фракцию  переносят  в круглодонную колбу емкостью 100 мл и упаривают досуха
на  ротационном  вакуумном  испарителе при температуре 40 °С. Сухой остаток
растворяют  в  45  куб.  см  0,1  М  раствора  K HPO .  Раствор переносят в
                                                2   4
делительную  воронку  вместимостью  100  куб.  см,  приливают  15  куб.  см
хлористого   метилена,  интенсивно  встряхивают  в  течение  2  мин.  После
расслоения  органическую  фазу  отбрасывают,  а  водную  фракцию еще дважды
обрабатывают  хлористым  метиленом  порциями  по 15 куб. см. Водную фракцию
переносят в химический стакан, подкисляют 2 М  ортофосфорной кислотой до pH
3, контролируя кислотность раствора с помощью иономера. Раствор переносят в
делительную  воронку  вместимостью  100  куб.  см,  приливают  15  куб.  см
хлористого   метилена,  интенсивно  встряхивают  в  течение  2  мин.  После
разделения слоев органическую фазу фильтруют через 1 см слой хлопковой ваты
в  мерный цилиндр вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции водной фазы
повторяют еще дважды, используя по 15 куб. см хлористого метилена. Измеряют
объем  объединенной  органической  фазы  и 1/10 его часть (эквивалентна 1 г
образца)  переносят  в  круглодонную колбу вместимостью 25 куб. см. Раствор
упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С.
Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 9.3.


#### <a id="p100134"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем


<a id="p100135"></a>Сухой остаток в колбе, полученный по [п. 9.2](#p100132), растворяют в 1,8 куб. см ацетона, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 1,2 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по [п. 7.4](#p100103). Колбу обмывают 5 куб. см смеси гексан - ацетон (2:3, по объему), которые также наносят на колонку. Колонку промывают 25 куб. см смеси гексан - ацетон (2:3, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Иодосульфурон-метил-натрий элюируют с колонки 100 куб. см смеси гексан - ацетон (1:9, по объему), отбрасывая первые 20 куб. см элюата и собирая последующие 80 куб. см элюата непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ, подготовленной по [п. 7.6](#p100108), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание иодосульфурон-метил-натрия по п. 9.4.


#### <a id="p100136"></a>9.4. Условия хроматографирования


<a id="p100137"></a>Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирма Knauer, Германия)
<a id="p100138"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Диасфер 110-С18, зернением 5 мкм
<a id="p100139"></a>Температура колонки                       комнатная
<a id="p100140"></a>Подвижная фаза                            ацетонитрил - метанол - 0,005 М
                                          ортофосфорная кислота (48:2:50)
<a id="p100141"></a>Скорость потока элюента                   0,6 куб. см/мин.
<a id="p100142"></a>Рабочая длина волны                       233 нм
<a id="p100143"></a>Чувствительность                          0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100144"></a>Объем вводимой пробы                      50 куб. мм
<a id="p100145"></a>Время удерживания
иодосульфурон-метил-натрия                8,4 мин.
<a id="p100146"></a>Линейный диапазон детектирования          1,25 - 12,5 нг
<a id="p100147"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,25 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
<a id="p100148"></a>Альтернативная неподвижная фаза: Hipersil ODS, колонка длиной 25 см и внутренним диаметром 4,6 мм.
<a id="p100149"></a>Время выхода иодосульфурон-метил-натрия около 10 мин.


### 10. <a id="p100150"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100151"></a>Содержание иодосульфурон-метил-натрия рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                  H  х A х V
                                   1
<a id="p100152"></a>                              X = ----------,
                                    H  х m
                                     0

    где:
    X - содержание иодосульфурон-метил-натрия, мг/кг;
    H  - высота пика образца, мм;
     1
    H  - высота пика стандарта, мм;
     0
    A  -  концентрация  стандартного  раствора  иодосульфурон-метил-натрия,
мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемой части образца, г (для масла - 1 г).


### 11. <a id="p100153"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100154"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                          2 х |X  - X | х 100
                                1    2
<a id="p100155"></a>                          ------------------- <= r,                     (1)
                               (X  + X )
                                 1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100029), при этом r = 2,8 сигма .
                                                                         r
<a id="p100156"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100155) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


### 12. <a id="p100157"></a>Оформление результатов


<a id="p100158"></a>Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100159"></a>              (X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг при вероятности P = 0,95,
        _
    где X  -  среднее  арифметическое  результатов  определений, признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                             X
<a id="p100160"></a>                          ДЕЛЬТА = дельта х ---,
                                            100

<a id="p100161"></a>где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100029)), %.
<a id="p100162"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100163"></a>содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" < 0,05 мг/кг для кукурузного масла <*>.

<a id="p100164"></a>

---

<div align="center">

<a id="p100165"></a><*> 0,05 мг/кг - предел обнаружения для масла кукурузы.

</div>



### 13. <a id="p100166"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100167"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100168"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100169"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100170"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100171"></a>                       C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,X         л,X'

    где   +/-  ДЕЛЬТА  _ (+/-   ДЕЛЬТА  _ )  -  характеристика  погрешности
                     л,X              л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100172"></a>                         ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                               л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                              X
<a id="p100173"></a>                           ДЕЛЬТА = дельта х ---,
                                             100

    где  дельта  -  граница  относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100029)), %.
<a id="p100174"></a>    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  К

                                  _    _
<a id="p100175"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              К             д

         _    _
    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100153)) содержания компонента в
образце    с    добавкой,   испытуемом   образце,   концентрация    добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100176"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100177"></a>                       K = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

<a id="p100178"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            К
контроля (К).
<a id="p100179"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

<a id="p100180"></a>                               |K | <= K,                               (2)
                                 К

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100181"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100180) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100182"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100183"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                          2 х |X  - X | х 100
                                1    2
<a id="p100184"></a>                          ------------------- <= R,                     (3)
                               (X  + X )
                                 1    2

    где:
    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[таблица 1](#p100029)), %.





<div align="right">

<a id="p100185"></a>Приложение

</div>


<a id="p100186"></a>Таблица

<div align="center">

<a id="p100187"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИОДОСУЛЬФУРОН-МЕТИЛ-НАТРИЯ**

</div>

В МОДЕЛЬНЫХ МАТРИЦАХ (n = 5)


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="23%"><col width="23%"><col width="38%"></colgroup>
<tr><td>Матрица</td><td>Внесено, мг/кг</td><td>Открыто, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Масло кукурузы</td><td>0,05</td><td>81,0</td><td>+/- 3,9</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>83,2</td><td>+/- 3,8</td></tr>
<tr><td>0,25</td><td>84,0</td><td>+/- 3,6</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>86,6</td><td>+/- 2,6</td></tr>
</table>




<a id="p100193"></a>

---