---
title: "\"МУК 4.1.2452-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты (малеинового гидразида) в клубнях картофеля и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2452-09"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2452-09"
---

## "МУК 4.1.2452-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты (малеинового гидразида) в клубнях картофеля и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2452-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты (малеинового гидразида) в клубнях картофеля и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 02.02.2009)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 29 апреля 2009 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

2 февраля 2009 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГИДРАЗИДА**
**МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (МАЛЕИНОВОГО ГИДРАЗИДА) В КЛУБНЯХ**
**КАРТОФЕЛЯ И ЛУКЕ-РЕПКЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2452-09**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

29 апреля 2009 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны: Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г. N 3).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 февраля 2009 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 29 апреля 2009 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации малеинового гидразида в диапазоне 4 - 40 мг/кг в клубнях картофеля и луке-репке.
<a id="p100012"></a>Гидразид малеиновой кислоты
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИСО: Малеиновый гидразид.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 6-гидрокси-2H-пирадизин-3-он.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    C H N O .
     4 4 2 2
<a id="p100017"></a>    Мол. масса: 112,1.
<a id="p100018"></a>    Агрегатное состояние при комнатной температуре: твердое.
<a id="p100019"></a>    Цвет, запах: белый порошок.
                           -2
<a id="p100020"></a>    Давление паров < 1 x 10   Pa (при 25 °C).
<a id="p100021"></a>    Коэффициент распределения октанол-вода: K   log P = 1,97  (pH 7) - 0,56
                                             ow
(неионизированный при 25 °C).
<a id="p100022"></a>Температура плавления: 298 - 300 °C.
<a id="p100023"></a>Температура кипения: не достижима.
<a id="p100024"></a>Плотность: 1,61 г/мл.
<a id="p100025"></a>Растворимость в воде: 4,417 г/л (pH 4,3; 25 °C), 144 г/л (pH 7; 20 °C), 145,8 г/л (pH 9; 20 °C).
<a id="p100026"></a>Растворимость в органических растворителях: в метаноле 4,179 г/л, в толуоле менее 1 мг/л, в гексане менее 1 мг/л, в ацетоне 188 мг/л, этилацетате 35,9 мг/л, 1,2-дихлорэтане менее 4 мг/л.
<a id="p100027"></a>Устойчив к гидролизу при pH 3,6 и 9 (45 °C).
<a id="p100028"></a>    Разлагается светом ДТ   = 58 дней (pH 5,7; 25 °C).
                         50
<a id="p100029"></a>    Разлагается окислителями и сильными кислотами, при хранении в  упаковке
при комнатной температуре стабилен более 1 года.
<a id="p100030"></a>    Слабая кислота рКа - 5,62 (20 °C).
<a id="p100031"></a>    Краткая токсикологическая характеристика: малеиновый гидразид относится
к  малоопасным  веществам  по  острой  пероральной  (ЛД    для  крыс  более
                                                       50
5000 мг/кг) и дермальной токсичности  (ЛД   для кроликов более 5000  мг/кг)
                                         50
и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛС   для  крыс
                                                               50
составляет 4 мг/куб. м).  Класс токсичности WHO (a.i.) U, EPA (formulation)
**III.**
<a id="p100032"></a>Область применения: малеиновый гидразид регулирует рост растений, проникает в растения через листья и корни, переходя в ксилему и флоэму. Эффективен как ингибитор деления клеток в меристематических тканях, но не препятствует росту клеток. Также обладает небольшой гербицидной активностью.
<a id="p100033"></a>Ингибирует прорастание картофеля, лука, свеклы, брюквы и моркови при хранении. Предлагается для предуборочной обработки плантаций лука-репки и картофеля с нормой расхода 3 - 4 кг д.в./га.
<a id="p100034"></a>В России для гидразида малеиновой кислоты установлены следующие гигиенические нормативы: МДУ в клубнях картофеля, корнеплодах моркови, свеклы сахарной и столовой, луке-репке, чесноке, томатах, арбузах, табаке - 8,0.

1. <a id="p100035"></a>Метрологическая характеристика метода

<a id="p100036"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100037"></a>Таблица 1

<a id="p100038"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ МАЛЕИНОВОГО ГИДРАЗИДА**


| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, % P = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Клубни картофеля | 4 - 40 | 50 | 5,0 | 13,1 | 16,0 |
| Лук-репка | 4 - 40 | 50 | 5,0 | 11,2 | 15,4 |


<a id="p100042"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

<a id="p100043"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100044"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

**ДЛЯ МАЛЕИНОВОГО ГИДРАЗИДА**


<table>
<colgroup><col width="23%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определямых концентраций, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td>Клубни картофеля</td><td>4</td><td>4 - 40</td><td>77,4</td><td>2,6</td><td>2,2</td></tr>
<tr><td>Лук-репка</td><td>4</td><td>4 - 40</td><td>87,6</td><td>2,4</td><td>1,68</td></tr>
</table>


2. <a id="p100048"></a>Метод измерений

<a id="p100049"></a>Метод основан на определении малеинового гидразида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта на концентрирующих патронах Диапак С16.
<a id="p100050"></a>Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100051"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы, использованием специфической длины волны спектра поглощения и выбором колонок различной полярности.

<div align="center">

3. <a id="p100052"></a>Средства измерений, реактивы,

</div>

вспомогательные устройства и материалы


#### <a id="p100053"></a>3.1 Средства измерений


<a id="p100054"></a>Весы аналитические "OHAUS", СИГМА 11140
<a id="p100055"></a>Весы лабораторные общего назначения с
наибольшим пределом взвешивания до 600 г
и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г
**"ACCULAB" V600**
<a id="p100056"></a>Колбы мерные на 25, 50 и 100 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100057"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100058"></a>Хроматограф жидкостной Ажилент 1200
с ультрафиолетовым диодно-матричным детектором
с изменяемой длиной волны и чувствительностью
не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу             Номер госрегистрации
                                                    1693-06
<a id="p100059"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100060"></a>Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100061"></a>3.2 Реактивы


<a id="p100062"></a>Малеиновый гидразид, аналитический стандарт
с содержанием д.в. 99,7%
<a id="p100063"></a>Ацетонитрил, ос.ч., УФ-200 нм                       ТУ 6-09-2167-84
<a id="p100064"></a>Метанол, CHROMASOLV [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)
<a id="p100065"></a>Вода бидистиллированная, деионизированная           ГОСТ 7602-72
<a id="p100066"></a>Кислота соляная, х.ч. ГОСТ 857-88
<a id="p100067"></a>Натрий углекислый кислый, х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100068"></a>Муравьиная кислота, ос.ч., Panreac
<a id="p100069"></a>Концентрирующие патроны Диапак С16 (0,6 г)          ТУ 4215-002-05451931-94
<a id="p100070"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100071"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100072"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума для работы
с концентрирующими патронами
<a id="p100073"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1"
<a id="p100074"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4
<a id="p100075"></a>Воронки химические для фильтрования, стеклянные     ГОСТ 8613-75
<a id="p100076"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R 110 Buchi
или ИР-1М с водяной баней                           ТУ 25-11-917-74
<a id="p100077"></a>Колбы конические плоскодонные на
100 и 250 куб. см, КПШ-100, КПШ-250                 ГОСТ 10394-72
<a id="p100078"></a>Колонка хроматографическая стальная,
длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм,
Spherisorb ODS2, зернение 5 мкм, фирма Уотерс
<a id="p100079"></a>Предколонка хроматографическая стальная,
Zorbax Eclipse XDB-C8, длиной 30 мм,
внутренним диаметром 2,1 мм, зернение 3,5 мкм,
фирма Ажилент Технолоджис
<a id="p100080"></a>Колбы конические, плоскодонные объемом 250,
500 и 1000 куб. см                                  ГОСТ 9737-70
<a id="p100081"></a>Концентраторы грушевидные и круглодонные,
объемом 100 и 250 куб. см                           ГОСТ 10394-75
<a id="p100082"></a>Микрошприц для жидкостного хроматографа
на 50 - 100 куб. мм
<a id="p100083"></a>Насос диафрагменный FT 19 фирмы KNF Neu Laboport
<a id="p100084"></a>Стаканы стеклянные объемом 100 - 500 куб. см        ГОСТ 25366-80Е
<a id="p100085"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100086"></a>Фильтры бумажные, "красная лента" ТУ-6-09-1678-86
<a id="p100087"></a>Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм
с отверстиями пор 20 мкм, фирма Ажилент Технолоджис
<a id="p100088"></a>Фильтр-патроны для шприцев Cromafil-PET 20/25
с размером пор 0,20 мкм или аналогичные
<a id="p100089"></a>Центрифуга MPW-350e
<a id="p100090"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. <a id="p100091"></a>Требования безопасности

<a id="p100092"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100093"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

<div align="center">

5. <a id="p100094"></a>Требования к квалификации операторов

</div>


<a id="p100095"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
<a id="p100096"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

<div align="center">

6. <a id="p100097"></a>Условия измерений

</div>


<a id="p100098"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100099"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100100"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. <a id="p100101"></a>Подготовка к выполнению определений

<a id="p100102"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак С16 для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на патронах, построение калибровочной кривой.


#### <a id="p100103"></a>7.1 Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100104"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил перегоняют.

<a id="p100105"></a>7.1.2. Очистка метанола. Метанол сушат над безводным поташом и перегоняют.
<a id="p100106"></a>7.1.3. Очистка бидистиллированной воды. Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/л и затем перегоняют.


#### <a id="p100107"></a>7.2 Приготовление растворов для проведения анализа


<a id="p100108"></a>7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ. Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду, а также муравьиную кислоту.
<a id="p100109"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 куб. дм помещают 990 куб. см очищенной воды и 10 куб. см ацетонитрила, добавляют 4 мл муравьиной кислоты. pH должен быть 2 - 2,2. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см/мин. в течение 5 мин., после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

##### <a id="p100110"></a>7.2.2 Приготовление градуировочных растворов.

<a id="p100111"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор с концентрацией малеинового гидразида 1,0 мг/куб. см. Взвешивают 50 мг малеинового гидразида в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в подвижной фазе и доводят объем до метки.
<a id="p100112"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор с концентрацией малеинового гидразида 400, 200, 100, 80, 50, 40, 20, 10, 5 мкг/куб. см. Методом последовательного разведения подвижной фазой готовят растворы, содержащие по 400, 200, 80, 40 мкг/куб. см и используют эти растворы для внесения в образцы, и растворы концентрацией 100, 50, 20, 10, 5 для хроматографического исследования и построения калибровочной кривой.


#### <a id="p100113"></a>7.3 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100114"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации малеинового гидразида в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по пяти растворам для градуировки с концентрацией 100; 50; 20, 10 и 5 мкг/куб. см.
<a id="p100115"></a>В инжектор хроматографа вводят по 5 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.2](#p100131). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.


#### <a id="p100116"></a>7.4 Подготовка концентрирующего патрона Диапак С1

<div align="center">

для очистки экстрактов

</div>


<a id="p100117"></a>7.4.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта. Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин.
<a id="p100118"></a>Патрон Диапак С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100119"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 куб. см подвижной фазы. Элюат отбрасывают.
<a id="p100120"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
<a id="p100121"></a>7.4.2. Проверка хроматографического поведения малеинового гидразида на концентрирующем патроне Диапак С16. Из стандартного раствора малеинового гидразида в подвижной фазе, содержащего 40 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в плоскодонную колбу объемом 100 куб. см, прибавляют 5 куб. см подвижной фазы, тщательно перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 5 куб. см подвижной фазы и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см подвижной фазы и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, сухой остаток растворяют в 5 куб. см ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие малеиновый гидразид и полноту смывания с колонки.


#### <a id="p100122"></a>7.5 Подготовка и кондиционирование колонки

<div align="center">

для жидкостной хроматографии

</div>


<a id="p100123"></a>Хроматографическую колонку Waters Spherisorb OSD2 с предколонкой Zorbax Eclipse XDB C8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °C и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 ч.

8. <a id="p100124"></a>Отбор проб и хранение

<a id="p100125"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N [2051-79](https://bukva.ai/docs/2051-79) от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ 7176-85](https://bukva.ai/docs/gost-7176-85) "Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый. ТУ" и [ГОСТ Р 51783-2001](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-r-51783-2001) "Лук репчатый свежий, реализуемый в розничной торговой сети. ТУ". Пробы картофеля и лука хранят в морозильной камере при температуре -18 °C.

9. <a id="p100126"></a>Проведение определений


#### <a id="p100127"></a>9.1 Клубни картофеля и лук-репка


<a id="p100128"></a>9.1.1. Экстракция. Образец измельченных клубней картофеля (или лука-репки) массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 куб. см, прибавляют 30 куб. см метанола и помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 30 мин. на механический встряхиватель. Экстракт декантируют в коническую колбу объемом 250 куб. см через ватный тампон. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 30 куб. см метанола и помещая на 5 мин. в ультразвуковую ванну, а затем на 30 мин. на механический встряхиватель.
<a id="p100129"></a>Экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 куб. см и объединенный экстракт фильтруют через фильтр "красная лента" в концентратор 250 куб. см. Полученный раствор упаривают на роторном испарителе до водного остатка (2 - 2,5 мл). К водному остатку добавляют 6 мл подвижной фазы и фильтруют через плотный ватный тампон в цилиндр на 10 мл.
<a id="p100130"></a>9.1.2. Очистка на патроне Диапак С16. Полученный раствор вносят на патрон, подготовленный, как указано в [п. 7.4.1](#p100117). Элюат собирают в чистый концентратор. Исходный концентратор обмывают 10 куб. см подвижной фазы, которую вносят на патрон. Элюат объединяют с первым элюатом в концентраторе объемом 100 куб. см и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 10 куб. см подвижной фазы, фильтруют от механических примесей на фильтр-патроне для шприцев Cromafil-PET 20/25 с размером пор 0,20 мкм. 20 мкл пробы вводят в хроматограф.


#### <a id="p100131"></a>9.2 Условия хроматографирования


<a id="p100132"></a>Хроматограф "Agilent Technologies 1200" или другой с аналогичными характеристиками с диодно-матричным детектором или ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.
<a id="p100133"></a>Колонка стальная Waters Spheresorb OSD2, 4,6 мм x 25 см, зернением 5 мкм.
<a id="p100134"></a>Предколонка Zorbax Eclipse XDB C8, 2,1 мм x 30 мм, зернением 3,5 мкм.
<a id="p100135"></a>Температура колонки: 30 °C.
<a id="p100136"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил-вода в соотношении 1:99, 0,4% HCOOH.
<a id="p100137"></a>Длина волны 300 нм.
<a id="p100138"></a>Время удерживания малеинового гидразида 5,4 +/- 0,12 мин.
<a id="p100139"></a>Чувствительность 100 милли ед. абсорбции (mAU) на шкалу.
<a id="p100140"></a>Объем вводимой пробы 5 куб. мм.
<a id="p100141"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 200 - 2000 нг.

10. <a id="p100142"></a>Обработка результатов

<a id="p100143"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа "Agilent Chemstation".
<a id="p100144"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100145"></a>Содержание малеинового гидразида рассчитывают по формуле:

                              S   x A x V
                               пр
<a id="p100146"></a>                         X = ------------- x P,
                             100 x S   x m
                                    ст

<a id="p100147"></a>    где:
    X - содержание малеинового гидразида в пробе, мг/кг;
    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
<a id="p100148"></a>A - концентрация стандартного раствора, мкг/см;
<a id="p100149"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100150"></a>m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
<a id="p100151"></a>P - содержание малеинового гидразида в аналитическом стандарте, %.

11. <a id="p100152"></a>Проверка приемлемости результатов

<div align="center">

параллельных определений

</div>


<a id="p100153"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                            2 x |X  - X | x 100
                                  1    2
<a id="p100154"></a>                            ------------------- <= r,                   (1)
                                 (X  + X )
                                   1    2

<a id="p100155"></a>    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(табл. 1)](#p100038), при этом r = 2,8 сигма .
                                                                        r
<a id="p100156"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100154) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. <a id="p100157"></a>Оформление результатов

<a id="p100158"></a>Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100159"></a>              (X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,

<a id="p100160"></a>    где:
    _
    X - среднее   арифметическое   результатов   определений,    признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                             X
<a id="p100161"></a>                          ДЕЛЬТА = дельта x ---,
                                            100

<a id="p100162"></a>где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100038)), %.
<a id="p100163"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100164"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

<a id="p100165"></a>

---

<a id="p100166"></a><*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.

<div align="center">

13. <a id="p100167"></a>Контроль качества результатов измерений

</div>


<a id="p100168"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100169"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100170"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100171"></a>    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100172"></a>                       C  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,X         л,X'

<a id="p100173"></a>    где   +/- ДЕЛЬТА  _ (+/- ДЕЛЬТА  _ )  -   характеристика    погрешности
                    л,X            л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов анализа,  соответствующая содержанию
компонента в испытуемом образце  (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

<a id="p100174"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

<a id="p100175"></a>    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                              X
<a id="p100176"></a>                           ДЕЛЬТА = дельта x ---,
                                             100

<a id="p100177"></a>    где  дельта - граница  относительной  погрешности методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [табл. 1](#p100038)), %.
<a id="p100178"></a>    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100179"></a>                             K  = X' - X - C ,
                              к             д

          _   _
<a id="p100180"></a>    где:  X', X, C  - среднее   арифметическое   результатов   параллельных
                  д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100152)), содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце  и   концентрация   добавки,
соответственно, мг/кг.
<a id="p100181"></a>    Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100182"></a>                       K = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,X'         л,X

<a id="p100183"></a>    Проводят сопоставление результата контроля процедуры  (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
<a id="p100184"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100185"></a>                               |K | <= K,                               (2)
                                 к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100186"></a> При невыполнении [условия (2)](#p100185) процедуру контроля повторяют. При
повторном  невыполнении   условия  (2)  выясняют   причины,   приводящие  к
неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100187"></a>13.3 Проверка   приемлемости   результатов  измерений,   полученных  в

условиях воспроизводимости:
<a id="p100188"></a>    Расхождение  между  результатами  измерений,  выполненных в двух разных
лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

                        2 x |X  - X | x 100
                              1    2
<a id="p100189"></a>                        ------------------- <= R,                       (3)
                             (X  + X )
                               1    2

<a id="p100190"></a>    где:
    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[табл. 1](#p100038)), %.



<a id="p100191"></a>

---