---
title: "\"МУК 4.1.2407-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах, масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2407-08"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2407-08"
---

## "МУК 4.1.2407-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах, масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2407-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах, масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 17.07.2008)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 сентября 2008 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

17 июля 2008 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЕТКОНАЗОЛА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ, СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ, СЕМЕНАХ, МАСЛЕ РАПСА**
**МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2407-08**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 сентября 2008 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 03.07.2008 N 2).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 17 июля 2008 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 1 сентября 2008 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах и масле рапса в диапазонах 0,003 - 0,03 мг/куб. дм; 0,01 - 1,0 мг/кг; 0,05 - 0,5 мг/кг; 0,01 - 1,0 мг/кг и 0,075 - 0,75 мг/кг соответственно.
<a id="p100012"></a>(1RS,5RS;1RS,5SR)-5-(4-хлорбензил)-2,2-диметил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)циклопентанол (IUPAC).
<a id="p100013"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100014"></a>    C  H  ClN O.
     17 22   3
<a id="p100015"></a>    Мол. масса: 319,8.
<a id="p100016"></a>    Смесь  цис-  и транс-изомеров. Кристаллический порошок белого цвета без
запаха. Технический продукт представляет собой смесь цис- и транс-изомеров,
в  которой  преобладает  цис-метконазол  (80:20). Плотность 1,4 (при 0 °С).
                                                             -2
Температура  плавления 100 - 108 °С. Давление паров 1,23 х 10   мПа (при 20
°С).  Растворимость в воде 30,4 мг/куб. см (при 20 °С, pH 7,5). Коэффициент
распределения  н-октанол - вода K   log Р = 3,85 (при 25 °С). Растворимость
                                 ow
в  органических  растворителях  (г/куб.  дм,  при  24  °С): этилацетат-260,
метанол-403,   ацетон-363,  дихлорметан-481.  Термически  и  гидролитически
стабилен.
<a id="p100017"></a>    Краткая токсикологическая характеристика:
<a id="p100018"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для  крыс - 660 мг/кг; острая
                                         50
дермальная  токсичность (LD  ) для крыс - 2000 мг/кг, острая  ингаляционная
                           50
токсичность (LD  ) для крыс > 5,6 мг/куб. дм (4 ч).
               50
<a id="p100019"></a>Область применения:
<a id="p100020"></a>Метконазол - высокоэффективный системный фунгицид, проявляющий активность против фузариума, септорий, альтернарий, церкос-пореллы, мучнистой росы, применяемый на озимом рапсе, озимой пшенице и яровом ячмене путем наземного опрыскивания в период вегетации.
<a id="p100021"></a>Рекомендуемые гигиенические нормативы:
<a id="p100022"></a>ПДК в воде водоемов - 0,006 мг/куб. дм (общ.)
<a id="p100023"></a>ОДК в почве - 0,2 мг/кг
<a id="p100024"></a>    ВМДУ в зерне зерновых - 0,1 мг/кг
<a id="p100025"></a>         в семенах и масле рапса - 0,15 мг/кг.


## 1. <a id="p100026"></a>Погрешность измерений


<a id="p100027"></a>При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100028"></a>Таблица 1

<a id="p100029"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="26%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Вода</td><td>от 0,003 до 0,01 вкл.</td><td>100</td><td>4,9</td><td>13,3</td><td>15,9</td></tr>
<tr><td>более 0,01 до 0,03 вкл.</td><td>50</td><td>4,8</td><td>13,2</td><td>15,7</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>более 0,1 до 1,0 вкл.</td><td>25</td><td>6,1</td><td>16,8</td><td>20,0</td></tr>
<tr><td>Солома зерновых</td><td>более 0,1 до 1,0 вкл.</td><td>25</td><td>7,7</td><td>21,2</td><td>25,3</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зерно зерновых</td><td>от 0,05 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>8,1</td><td>22,4</td><td>26,7</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,5 вкл.</td><td>25</td><td>7,0</td><td>19,4</td><td>23,0</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Семена рапса</td><td>от 0,075 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>7,7</td><td>21,2</td><td>25,4</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,75 вкл.</td><td>25</td><td>9,5</td><td>26,3</td><td>31,3</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Масло рапса</td><td>от 0,075 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>4,8</td><td>13,5</td><td>16,1</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,75 вкл.</td><td>25</td><td>7,5</td><td>20,9</td><td>24,8</td></tr>
</table>


<a id="p100041"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

<a id="p100042"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="17%"><col width="19%"><col width="17%"><col width="16%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,003</td><td>0,003 - 0,03</td><td>87,39</td><td>3,7</td><td>2,0</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,1</td><td>0,1 - 1,0</td><td>86,29</td><td>3,8</td><td>2,1</td></tr>
<tr><td>Солома зерновых</td><td>0,1</td><td>0,1 - 1,0</td><td>87,13</td><td>5,0</td><td>2,7</td></tr>
<tr><td>Зерно зерновых</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>90,69</td><td>6,1</td><td>3,3</td></tr>
<tr><td>Семена рапса</td><td>0,075</td><td>0,075 - 0,75</td><td>88,33</td><td>6,8</td><td>3,9</td></tr>
<tr><td>Масло рапса</td><td>0,075</td><td>0,075 - 0,75</td><td>90,5</td><td>4,8</td><td>2,5</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100050"></a>Метод измерений


<a id="p100051"></a>Методика основана на определении метконазола с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД) после экстракции из анализируемых проб семян и масла рапса ацетонитрилом, почвы, зерна и соломы зерновых - смесью ацетон - гексан, воды - дихлорметаном, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с силикагелем.
<a id="p100052"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100053"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100054"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100055"></a>Газовый хроматограф "Кристалл-2000М",             Номер в Государственном
снабженный термоионным детектором с               реестре средств измерений
пределом детектирования по азоту в                14516-95
                 -13
азобензоле 5 х 10    г/с, предназначенный
для работы с капиллярной колонкой
<a id="p100056"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100057"></a>Меры массы ГОСТ 7328
<a id="p100058"></a>Микрошприц типа МШ-1М вместимостью 1 куб. мм      ТУ 2.833.105
<a id="p100059"></a>Колбы мерные 2-100-2 и 2-500-2 вместимостью [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
100 и 500 куб. см
<a id="p100060"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 куб. см
<a id="p100061"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
вместимостью 25, 50, 100, 250 и 1000 куб. см
<a id="p100062"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100063"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100064"></a>транс-Метконазол, аналитический стандарт с содержанием
действующего вещества 99,1% (фирма "BASF")
<a id="p100065"></a>цис-Метконазол, аналитический стандарт с содержанием
действующего вещества 99,3% (фирма "BASF")
<a id="p100066"></a>Азот особой чистоты из баллона ГОСТ 9293
<a id="p100067"></a>Ацетонитрил, осч "УФ-210 нм"                             ТУ 6-09-14-2167-84
<a id="p100068"></a>Вода бидистиллированная, деионизованная или              ГОСТ 6790
перегнанная над KMnO
                    4
<a id="p100069"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), хч [ГОСТ 12794](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100070"></a>Метиловый спирт (метанол), хч [ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)
<a id="p100071"></a>Натрий сернокислый безводный, хч [ГОСТ 4166-78](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100072"></a>Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233
<a id="p100073"></a>н-Гексан, хч                                             ТУ 6-09-4521-77
<a id="p100074"></a>Силикагель "Silica gel 60" для колоночной
хроматографии (0,2 - 0,5 мм)
<a id="p100075"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты ректификованный [ГОСТ 22300](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
<a id="p100076"></a>Эфир диэтиловый (для наркоза)                            Фармакопея СССР.
<a id="p100077"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


### <a id="p100078"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100079"></a>Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с                        ТУ 64-1-2851-78
<a id="p100080"></a>Баня водяная
<a id="p100081"></a>Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)
<a id="p100082"></a>Бумажные фильтры "красная лента" обеззоленные или           ТУ 6-09-2678-77
фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ
<a id="p100083"></a>Воронка Бюхнера                                             ГОСТ 0147
<a id="p100084"></a>Воронки делительные вместимостью 100, 250, 500 и [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
1000 куб. см
<a id="p100085"></a>Воронки конусные диаметром 40 - 45 мм ГОСТ 25336
<a id="p100086"></a>Генератор водорода
<a id="p100087"></a>Груша резиновая
<a id="p100088"></a>Колба Бунзена                                               ГОСТ 56145
<a id="p100089"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100090"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100, [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
250 и 500 куб. см
<a id="p100091"></a>Колонка стеклянная для препаративной хроматографии
длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм
<a id="p100092"></a>Компрессор
<a id="p100093"></a>Мельница лабораторная электрическая                         ТУ 46-22-236-79
<a id="p100094"></a>Насос водоструйный вакуумный                                ГОСТ 10696
<a id="p100095"></a>Ректификационная колонна с числом
теоретических тарелок не менее 50
<a id="p100096"></a>Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,
Швейцария
<a id="p100097"></a>Стаканы химические с носиком вместимостью 100 и 150 ГОСТ 25336
куб. см
<a id="p100098"></a>Сито с диаметром отверстий 1 мм
<a id="p100099"></a>Стекловата
<a id="p100100"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100101"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100102"></a>Хроматографическая колонка капиллярная ZB-50
длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина
пленки сорбента 0,5 мкм.
<a id="p100103"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.


## 4. <a id="p100104"></a>Требования безопасности


<a id="p100105"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100106"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


## 5. <a id="p100107"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100108"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100109"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100110"></a>Условия измерений


<a id="p100111"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100112"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100113"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100114"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100115"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов и растворов внесения, установление градуировочных характеристик, подготовка колонки с силикагелем, проверка хроматографического поведения метконазола на колонке.


### <a id="p100116"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100117"></a>7.1.1 Очистка гексана

<a id="p100118"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

##### <a id="p100119"></a>7.1.2 Очистка этилацетата

<a id="p100120"></a>Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

##### <a id="p100121"></a>7.1.3 Очистка ацетонитрила

<a id="p100122"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.


### <a id="p100123"></a>7.2. Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100124"></a>7.2.1. Исходный раствор цис-метконазола для градуировки (концентрация 250 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,025 г цис-метконазола, растворяют в 50 - 60 куб. см этилацетата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100125"></a>7.2.2. Исходный раствор транс-метконазола для градуировки (концентрация 250 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,025 г транс-метконазола, растворяют в 50 - 60 куб. см этилацетата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100126"></a>Растворы хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца.
<a id="p100127"></a>7.2.3. Раствор N 1 цис-метконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 4 куб. см исходного раствора цис-метконазола с концентрацией 250 мкг/куб. см ([п. 7.2.1](#p100124)), разбавляют этилацетатом до метки.
<a id="p100128"></a>7.2.4. Раствор N 2 транс-метконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 4 куб. см исходного раствора транс-метконазола с концентрацией 250 мкг/куб. см ([п. 7.2.2](#p100125)), разбавляют этилацетатом до метки.
<a id="p100129"></a>Градуировочный раствор N 1 и 2 хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца. Эти растворы используют для установления времени удерживания каждого изомера при хроматографировании.
<a id="p100130"></a>7.2.5. Раствор N 3 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки (концентрация по 25 мкг/куб. см каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 50 куб. см помещают по 5 куб. см исходных растворов цис- и транс-метконазола с концентрацией 250 мкг/куб. см ([пп. 7.2.1](#p100124) и [7.2.2](#p100125)), разбавляют этилацетатом до метки.
<a id="p100131"></a>Раствор N 3 хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение 30-ти дней.
<a id="p100132"></a>7.2.6. Рабочие растворы N 4 - 7 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки и внесения (концентрация по 2,5 - 0,25 мкг/куб. см каждого изомера). В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,0; 4,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 3 с концентрацией 25 мкг/куб. см ([п. 7.2.5](#p100130)), доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 4 - 7 с концентрацией цис- и транс-метконазола по 0,25, 0,5, 1,0 и 2,5 мкг/куб. см каждого изомера соответственно.
<a id="p100133"></a>Растворы хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 14-ти дней.


### <a id="p100134"></a>7.3. Приготовление растворов внесения


<a id="p100135"></a>7.3.1. Исходные растворы цис- и транс-метконазола для внесения (концентрация 100 мкг/куб. см каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают по 0,01 г цис- и транс-метконазола, растворяют в 50 - 60 куб. см метанола (этилацетата), доводят метанолом (этилацетатом) до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100136"></a>Растворы хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца.
<a id="p100137"></a>7.3.2. Растворы N 1 и 2 цис-метконазола и транс-метконазола для внесения (концентрация 5 мкг/куб. см каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 5 куб. см исходного раствора цис- и транс-метконазола с концентрацией 100 мкг/куб. см каждого изомера ([пп. 7.3.1](#p100135)), разбавляют метанолом (этилацетатом) до метки.
<a id="p100138"></a>Растворы N 1 и 2 хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца.
<a id="p100139"></a>Раствор в метаноле (N 1) используют для приготовления проб воды, почвы, зерна и соломы зерновых с внесением при оценке полноты извлечения метконазола методом "внесено - найдено", а также контроле качества результатов измерений методом добавок.
<a id="p100140"></a>Раствор в этилацетате (N 2) используют для приготовления проб семян и масла рапса с внесением при оценке полноты извлечения метконазола методом "внесено - найдено", а также контроле качества результатов измерений методом добавок.


### <a id="p100141"></a>7.4. Установление градуировочных характеристик


<a id="p100142"></a>Градуировочные характеристики, выражающие линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика (мВ х сек.) от концентраций цис- и транс-изомеров метконазола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
<a id="p100143"></a>В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100184). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков двух изомеров метконазола.
<a id="p100144"></a>Градуировочные графики проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более чем на 16% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.


### <a id="p100145"></a>7.5. Приготовление 7,5% раствора хлорида натрия


<a id="p100146"></a>В мерную колбу вместимостью 500 куб. см помещают 40,5 г хлористого натрия, растворяют в 250 - 300 куб. см деионизованной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.


### <a id="p100147"></a>7.6. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстрактов


<a id="p100148"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г силикагеля в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия массой 1 г. Колонка готова к работе.


### <a id="p100149"></a>7.7. Проверка хроматографического поведения метконазола на колонке с силикагелем


<a id="p100150"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,5 куб. см раствора N 1 метконазола для внесения с концентрацией 5 мкг/куб. см каждого изомера (п. 7.3.6 или 7.3.6), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, помещают на ультразвуковую баню на 1 мин., добавляют 5 куб. см гексана, перемешивают и наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.6](#p100147). Колбу обмывают 2,0 куб. см смеси гексан - этилацетат, которые также наносят на колонку. Промывают колонку последовательно 40 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), 30 куб. см смеси гексан - этилацетат (1:1, по объему), элюаты отбрасывают.
<a id="p100151"></a>Затем колонку промывают 60 куб. см этилацетата и 30 куб. см смеси этилацетат - метанол (3:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек. Фракционно (по 15 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см этилацетата, анализируют содержание метконазола [9.5](#p100184).
<a id="p100152"></a>Фракции, содержащие метконазол, объединяют и вновь анализируют.
<a id="p100153"></a>Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100154"></a>Примечание: Проверку хроматографического поведения метконазола следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.


## 8. <a id="p100155"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100156"></a>Отбор проб проводят в соответствии с требованиями: вода - [ГОСТ Р 51592-2000](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) "Вода. Общие требования к отбору проб", почва - [ГОСТ 1743.01-83](https://bukva.ai/docs/gost-17-4-3-01-83) "Почва, общие требования к отбору проб", ГОСТ 26950-89 "Почвы. Отбор проб", зерно - [ГОСТ 13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83) "Зерно. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ Р 50436-92](https://bukva.ai/docs/gost-r-50436-92) "Зерновые. Отбор проб зерна", солома - [ОСТ 27262-87](https://bukva.ai/docs/gost-27262-87) "Корма растительного происхождения. Методы отбора проб", рапс - [ГОСТ 10583-76](https://bukva.ai/docs/gost-10583-76-gosstandart-sssr) "Рапс. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 8988-2002](https://bukva.ai/docs/standart-gost-8988-2002) "Масло рапсовое. Технические условия" и Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100157"></a>Отобранные пробы воды, почвы, зерна и соломы зерновых, семян рапса хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.
<a id="p100158"></a>Пробы масла хранят в закрытой стеклянной таре при температуре 4 - 6 °С в темноте.
<a id="p100159"></a>Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр, почвы - просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому зерновых, семена рапса измельчают на лабораторной мельнице.


## 9. <a id="p100160"></a>Выполнение определения



### <a id="p100161"></a>9.1. Вода



##### <a id="p100162"></a>9.1.1 Экстракция

<a id="p100163"></a>Образец отфильтрованной воды объемом 250 куб. см помещают в делительную воронку на 500 куб. см, добавляют 75 куб. см хлористого метилена, интенсивно встряхивают в течение 5 мин. После разделения фаз нижний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 500 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют дважды, используя по 75 куб. см хлористого метилена.
<a id="p100164"></a>Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С и подвергают дополнительной очистке по п. 9.1.2.

##### <a id="p100165"></a>9.1.2 Очистка экстракта на колонке с силикагелем

<a id="p100166"></a>Остаток, полученный по [п. 9.1.1](#p100162), [9.2.2](#p100172) или [9.3.2](#p100178), находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин., добавляют 5 куб. см гексана, перемешивают. Затем раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.6](#p100147). Колбу обмывают дважды гексаном порциями по 2,5 куб. см, которые также наносят на колонку. Промывают колонку последовательно 50 куб. см гексана, 20 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему), элюаты отбрасывают.
<a id="p100167"></a>Метконазол элюируют с колонки 60 куб. см этилацетата и 30 куб. см смеси этилацетат - метанол (3:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 - 250 куб. см, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 1,5 куб. см этилацетата (исследование воды), 4 куб. см этилацетата (исследование почвы), 2 куб. см этилацетата (исследование зерна зерновых), 1 куб. см этилацетата (исследование соломы зерновых), 3 куб. см этилацетата (исследование семян и масла рапса) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100184).


### <a id="p100168"></a>9.2. Почва, зерно, солома



##### <a id="p100169"></a>9.2.1 Экстракция

<a id="p100170"></a>Образцы почвы, измельченного зерна массой 20 г, соломы массой 5 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, вносят 50 куб. см (для соломы - 75 куб. см) смеси ацетон - гексан (1:1, по объему), помещают на встряхиватель на 1 час. Полученный экстракт (надосадочная жидкость) осторожно декантируют, фильтруют на воронке Бюхнера через двойной бумажный фильтр "красная лента" под вакуумом. Осадок на фильтре возвращают в колбу и повторяют экстракцию дополнительной порцией смеси объемом 30 куб. см (для соломы 50 куб. см), выдерживая на встряхивателе 20 мин. Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через бумажный фильтр "красная лента", осадок на фильтре промывают 10 куб. см этой же смеси.
<a id="p100171"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делительную воронку на 500 куб. см (для соломы - 1000 куб. см) и проводят очистку экстракта по п. 9.2.2.

##### <a id="p100172"></a>9.2.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100173"></a>К экстракту, полученному по [п. 9.2.1](#p100169) и помещенному в делительную воронку, добавляют 120 куб. см (солома - 160 куб. см) 7,5% раствора хлорида натрия и 50 куб. см этилацетата, интенсивно встряхивают в течение 2 - 3 мин. После разделения фаз верхний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 250 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют, используя 50 куб. см этилацетата. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С и подвергают дополнительной очистке по [п. 9.1.2](#p100165).
<a id="p100174"></a>Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют при исследовании проб почвы в 4 куб. см этилацетата, зерна - 2 куб. см, соломы - 1 куб. см и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100184).


### <a id="p100175"></a>9.3. Семена рапса



##### <a id="p100176"></a>9.3.1 Экстракция

<a id="p100177"></a>Образец измельченных семян массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, вносят 50 куб. см ацетонитрила и помещают на встряхиватель на 1 ч. Полученный экстракт (надосадочная жидкость) фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной бумажный фильтр "красная лента". Осадок возвращают в коническую колбу и повторяют экстракцию дополнительной порцией ацетонитрила объемом 30 куб. см, выдерживая на встряхивателе 20 мин. Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через бумажный фильтр "красная лента", осадок на фильтре промывают 10 куб. см ацетонитрила. Объединенный отфильтрованный экстракт подвергают очистке по п. 9.3.2.

##### <a id="p100178"></a>9.3.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100179"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт, полученный по [п. 9.3.1](#p100176) или [9.4.1](#p100181), переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см, добавляют 25 куб. см гексана (насыщенного ацетонитрилом), интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой отделяют, перенося в коническую колбу. Верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильную фазу вновь переносят в делительную воронку и повторяют операцию промывки, используя 25 куб. см гексана (насыщенного ацетонитрилом). Ацетонитрильный раствор переносят в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см, упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С и подвергают очистке на колонке с силикагелем по [п. 9.1.2](#p100165). Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют в 3 куб. см этилацетата и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100184).


### <a id="p100180"></a>9.4. Масло рапса



##### <a id="p100181"></a>9.4.1 Экстракция и очистка экстракта в системе несмешивающихся растворителей

<a id="p100182"></a>Образец масла массой 10 г растворяют в 70 куб. см гексана и помещают в делительную воронку на 500 куб. см, вносят 30 куб. см ацетонитрила (насыщенного гексаном) и интенсивно встряхивают в течение 5 мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в коническую колбу вместимостью 150 - 200 куб. см. Экстракцию пробы масла повторяют дважды дополнительными порциями ацетонитрила (насыщенного гексаном) объемом 25 куб. см.
<a id="p100183"></a>Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делительную воронку на 250 куб. см, добавляют 25 куб. см гексана (насыщенного ацетонитрилом) и подвергают очистке по последовательно [п. п. 9.3.2](#p100178) и [9.1.2](#p100165). Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют в 1,5 куб. см этилацетата и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.


### <a id="p100184"></a>9.5. Условия хроматографирования


<a id="p100185"></a>Хроматограф газовый "Кристалл-2000М" с термоионным детектором.
<a id="p100186"></a>Колонка капиллярная ZB-50 длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм.
<a id="p100187"></a>    Температура детектора: 350 °С;
<a id="p100188"></a>               испарителя: 280 °С.
<a id="p100189"></a>Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка - 1,3 мин., нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 280 °С, выдержка - 13,1 мин.
<a id="p100190"></a>Скорость газа 1 (азот): 22,3 см/сек., давление 80 кПа, поток 0,67 куб. см/мин.
<a id="p100191"></a>Газ 2: деление потока 1:13,4; сброс 8,9 куб. см/мин.
<a id="p100192"></a>Водород: 12,5 куб. см/мин.
<a id="p100193"></a>Воздух: 200 куб. см/мин.
<a id="p100194"></a>Хроматографируемый объем: 1 куб. мм.
<a id="p100195"></a>Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площади пиков, с помощью градуировочных графиков определяют концентрацию цис- и транс-изомеров метконазола в хроматографируемом растворе.
<a id="p100196"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы цис-, транс-метконазола с концентрацией 2,5 мкг/куб. см, разбавляют этилацетатом, но не более чем в 50 раз.


## 10. <a id="p100197"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100198"></a>Содержание метконазола в пробах воды, почвы, зерна, соломы зерновых, семян и масла рапса (Х, мг/куб. дм, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                (С  + С ) х V
                                  1    2
<a id="p100199"></a>                            Х = -------------,
                                      m

    где:
    Х  -  содержание  метконазола  в  пробах  воды,  почвы,  зерна,  соломы
зерновых, семян и масла рапса, мг/куб. дм и мг/кг;
    С    и  С   -  концентрации  цис-  и  транс-метконазола,  найденные  по
     1       2
градуировочным    графикам    в    соответствии   с   величинами   площадей
хроматографических пиков, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - объем (масса) анализируемого образца, куб. см (г).


## 11. <a id="p100200"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100201"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100202"></a>                         ------------------- <= r,
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/куб. дм, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости ([таблица 1](#p100029)), при этом r = 2,8
сигма .
     r
<a id="p100203"></a>При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100204"></a>Оформление результатов


<a id="p100205"></a>Результат анализа представляют в виде:

        _
<a id="p100206"></a>       (Х +/- ДЕЛЬТА) мг/куб. дм или мг/кг при вероятности Р = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/куб. дм или мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/куб. дм или мг/кг:

<div align="center">

<a id="p100207"></a>ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

</div>


<a id="p100208"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100029)), %.
<a id="p100209"></a>Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100210"></a>"содержание метконазола в пробе воды менее 0,003 мг/куб. дм, почвы, соломы зерновых - менее 0,1 мг/кг, зерна зерновых - 0,05 мг/кг, семян и масла рапса - менее 0,075 мг/кг" <*>.

<a id="p100211"></a>

---

<a id="p100212"></a><*> 0,003 мг/куб. дм, 0,1 мг/кг, 0,05 мг/кг и 0,075 мг/кг - пределы обнаружения в воде, почве, соломе зерновых, зерне зерновых, семенах и масле рапса соответственно.


## 13. <a id="p100213"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100214"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100215"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100216"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100217"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100218"></a>                       С  >= ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  __,
                        д          л,Х         л,Х'

    где   +/-   ДЕЛЬТА  _ (+/-  ДЕЛЬТА  __)  -  характеристика  погрешности
                      л,Х             л,Х'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/куб. дм или мг/кг, при этом:

<a id="p100219"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

<a id="p100220"></a>где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/куб. дм или мг/кг:

<div align="center">

<a id="p100221"></a>ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

</div>


<a id="p100222"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100029)), %.
<a id="p100223"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  __   _
<a id="p100224"></a>                             К  = Х' - Х - С ,
                              к             д

         __   _
    где  Х',  Х,  С   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100200)) содержания компонента в
образце    с    добавкой,    испытуемом   образце,   концентрация   добавки
соответственно, мг/куб. дм или мг/кг.
<a id="p100225"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100226"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА  __ + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,Х'         л,Х

<a id="p100227"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100228"></a>    Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100229"></a>                                |К | <= К,                              (1)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100230"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100229) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении [условия (1)](#p100229) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100231"></a>13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
<a id="p100232"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100233"></a>                         ------------------- <= R,
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х ,  Х   -  результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/куб. дм
     1    2
или мг/кг;
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[таблица 1](#p100029)), %.



<a id="p100234"></a>

---