---
title: "\"МУК 4.1.2384-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пропаргита в семенах и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2384-08"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2384-08"
---

## "МУК 4.1.2384-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пропаргита в семенах и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2384-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Пропаргита в семенах и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 02.07.2008)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 5 сентября 2008 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
2 июля 2008 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРОПАРГИТА В СЕМЕНАХ**
**И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2384-08**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения<br>
5 сентября 2008 года

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА имени К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" (Калинин В.А., Калинин А.В., Третьякова О.А., Разумихин М.В.).
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 3 апреля 2008 г. N 1).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 июля 2008 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 5 сентября 2008 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Пропаргита в семенах и масле сои в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг.
<a id="p100012"></a>Пропаргит
<a id="p100013"></a>2-(4-трет-Бутилфенокси)циклогексил проп-2-инил сульфит (ИЮПАК).
<a id="p100014"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100015"></a>    Эмпирическая формула: C  H  O S.
                           19 26 4
<a id="p100016"></a>Молекулярная масса: 350,5.
<a id="p100017"></a>Агрегатное состояние: жидкость.
<a id="p100018"></a>Цвет, запах: бесцветный, маслянистый, без запаха.
<a id="p100019"></a>Давление насыщенного пара при 25 °С - 0,04 мПа.
<a id="p100020"></a>Температура кипения: разрушается при 210 °С (атмосферное давление).
<a id="p100021"></a>    Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 25 °С: K   log P =
                                                                 ow
5,70.
<a id="p100022"></a>Растворимость в воде: 0,215 мг/куб. дм при 25 °С.
<a id="p100023"></a>Растворимость в органических растворителях: полностью смешивается с гексаном, дихлорметаном, метанолом и ацетоном.
<a id="p100024"></a>    Гидролитически стабилен, под действием УФ-излучения быстро разрушается.
В  воде  гидролизуется  с DT   - (pH 7) - 66,3 дня при 25 °С, 9 дней при 40
                            50
°С;  DT    -  (pH  9)  -  1,1  дня при 25 °С, 0,2 дня при 40 °С; при pH = 4
       50
стабилен.
<a id="p100025"></a>    Краткая   токсикологическая   характеристика:   Пропаргит  относится  к
веществам  малоопасным  по  оральной  (ЛД    для крыс - более 2800 мг/кг) и
                                         50
дермальной  (ЛД    для кроликов - 4000 мг/кг) токсичности, но к чрезвычайно
               50
опасным  веществам  по  ингаляционной  (LC    для  крыс (4 часа) - более 50
                                          50
мг/куб.   м)   токсичности.   Сильно  раздражает  глаза  и  кожу  кроликов.
Способствует пролиферации клеток при канцерогенезе.
<a id="p100026"></a>В России установлен ВМДУ в семенах и масле сои - 0,1 мг/кг.
<a id="p100027"></a>Область применения препарата:
<a id="p100028"></a>Пропаргит - несистемный акарицид с преимущественно контактным действием. Оказывает небольшое ингаляционное воздействие. Ингибирует митохондриальную АТФ-азу, что приводит к прекращению роста и нарушению дыхания у клещей.
<a id="p100029"></a>Рекомендуется для опрыскивания растений против клещей в посадках плодовых, ягодных и цитрусовых культур, на виноградниках, в посевах сои, на плантациях хмеля, а также на декоративных культурах с рекомендуемой нормой расхода 0,8 - 1,8 кг д.в./га.

1. <a id="p100030"></a>Метрологическая характеристика метода

<a id="p100031"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="right">

<a id="p100032"></a>Таблица 1

</div>


<a id="p100033"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ПРОПАРГИТА**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="19%"><col width="22%"><col width="16%"><col width="12%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r,%</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Семена сои</td><td>0,1 - 0,5</td><td>25</td><td>4,8</td><td>13</td><td>16</td></tr>
<tr><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>5,0</td><td>14</td><td>17</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Масло сои</td><td>0,1 - 0,5</td><td>25</td><td>5,3</td><td>15</td><td>19</td></tr>
<tr><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>6,1</td><td>17</td><td>21</td></tr>
</table>


<a id="p100039"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

<a id="p100040"></a>Таблица 2


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="15%"><col width="19%"><col width="14%"><col width="18%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td></tr>
<tr><td>Семена сои</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>84,7</td><td>3,2</td><td>1,28</td></tr>
<tr><td>Масло сои</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>78,9</td><td>4,1</td><td>2,31</td></tr>
</table>


2. <a id="p100045"></a>Метод измерения

<a id="p100046"></a>Метод основан на определении Пропаргита методом капиллярной ГЖХ с использованием детектора по захвату электронов или пламенно-фотометрического детектора после экстракции его из матрицы органическим растворителем, очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и последующей очисткой экстракта на колонках с Флоризилом и при необходимости патронах Диапак-нитрил.
<a id="p100047"></a>Идентификация проводится по времени удерживания. Количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100048"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.

<div align="center">

3. <a id="p100049"></a>Средства измерений, реактивы,<br>
вспомогательные устройства и материалы

</div>



#### <a id="p100050"></a>3.1 Средства измерений


<a id="p100051"></a>Весы аналитические "OHAUS", SUM 11140.
<a id="p100052"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г, "ACCULAB", V600.
<a id="p100053"></a>Колбы мерные на 25, 50, 100 куб. см, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100054"></a>Микрошприц на 10 куб. мм, ТУ 2.833.106.
<a id="p100055"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100056"></a>    Хроматограф газовый "Кристалл 2000м" с детектором по захвату электронов
                                                         -14
(ЭЗД)  с  пределом  детектирования  по  Линдану  4  х  10     г/куб. см или
пламенно-фотометрическим  детектором  с  пределом  детектирования по сере в
                  -12
метафосе  5  х  10    г/куб. см и приспособлениями для капиллярной колонки.
Номер в Государственном реестре средств измерений 14516-95.
<a id="p100057"></a>Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100058"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100059"></a>3.2 Реактивы


<a id="p100060"></a>Пропаргит, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 96,1%
<a id="p100061"></a>Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
<a id="p100062"></a>Ацетон, х.ч., ТУ 6-09-3513-86.
<a id="p100063"></a>Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-87.
<a id="p100064"></a>Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100065"></a>н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100066"></a>Гелий очищенный марки "А", ТУ 51-940-80.
<a id="p100067"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100068"></a>Натрия хлорид, х.ч., ГОСТ 4233-77.
<a id="p100069"></a>Концентрирующие патроны Диапак-нитрил, ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100070"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100071"></a>3.3 Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100072"></a>Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак.
<a id="p100073"></a>Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1".
<a id="p100074"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. N 3120-0250, NALGENE.
<a id="p100075"></a>Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4.
<a id="p100076"></a>Воронки химические для фильтрования стеклянные, ГОСТ 8613-75.
<a id="p100077"></a>Воронки делительные на 250 куб. см, ГОСТ 10054-75.
<a id="p100078"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней.
<a id="p100079"></a>Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 куб. см, КПШ-100, КПШ-250, ГОСТ 10394-72.
<a id="p100080"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая НР-5 (5% Фенил и 95% метилсилоксана), длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирмы Хьюлетт Паккард.
<a id="p100081"></a>Концентраторы грушевидные и круглодонные объемом 100 и 250 куб. см, ГОСТ 10394-75.
<a id="p100082"></a>Насос диафрагменный FT.19 фирмы KNF Neu Laboport.
<a id="p100083"></a>Стаканы стеклянные объемом 100 - 500 куб. см, ГОСТ 25366-80Е.
<a id="p100084"></a>Установка для перегонки растворителей.
<a id="p100085"></a>Фильтры бумажные "красная лента", ТУ-6-09-1678-86.
<a id="p100086"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. <a id="p100087"></a>Требования безопасности

<a id="p100088"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100089"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. <a id="p100090"></a>Требования к квалификации операторов

<a id="p100091"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100092"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. <a id="p100093"></a>Условия измерений

<a id="p100094"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100095"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100096"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. <a id="p100097"></a>Подготовка к выполнению определений

<a id="p100098"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на патронах, построение калибровочной кривой.


#### <a id="p100099"></a>7.1 Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100100"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100101"></a>Ацетонитрил перегоняют.


##### <a id="p100102"></a>7.1.2 Очистка гексана

<a id="p100103"></a>Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 441).


##### <a id="p100104"></a>7.1.3 Очистка ацетона

<a id="p100105"></a>Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 438 - 439).


#### <a id="p100106"></a>7.2 Приготовление рабочих растворов



##### <a id="p100107"></a>7.2.1 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100108"></a>0,0100 г Пропаргита (аналитического стандарта) вносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют навеску в 50 - 60 куб. см гексана и затем доводят объем до метки гексаном (стандартный раствор N 1, концентрация 100 мкг/куб. см). Раствор хранится в холодильнике.
<a id="p100109"></a>Методом последовательного разбавления исходного раствора N 1 гексаном готовят стандартный раствор N 2 с концентрацией 10,0 мкг/куб. см.
<a id="p100110"></a>Из раствора N 2 готовят рабочие растворы Пропаргита в гексане с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 мкг/куб. см для построения калибровочного графика и для внесения в образцы, которые могут храниться в холодильнике не более 10 суток.


##### <a id="p100111"></a>7.2.2 Приготовление элюирующей смеси для работы на колонках с Флоризилом и патронами Диапак-нитрил

1. <a id="p100112"></a>В мерную колбу на 100 куб. см наливают около 50 куб. см ацетона, добавляют 0,1 куб. см ледяной уксусной кислоты и доводят объем в колбе до метки ацетоном, и хорошо перемешивают.
2. <a id="p100113"></a>В колбу на 250 куб. см наливают 100 куб. см гексана и 10 куб. см подкисленного ацетона (по [п. 1](#p100112)). Смесь хорошо перемешивают.


#### <a id="p100114"></a>7.3 Построение градуировочного графика


<a id="p100115"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Пропаргита в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 мкг/куб. см (ЭЗД) и 1,0; 5,0; 10; 20,0 мкг/куб. см (ПФД).
<a id="p100116"></a>В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм (ЭЗД) или 3 куб. мм (ПФД) каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.3](#p100161). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.
<a id="p100117"></a>По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ от концентрации Пропаргита в растворе в мкг/куб. см (рисунок 1 - не приводится).


#### <a id="p100118"></a>7.4 Подготовка колонки, заполненной Флоризилом,

<div align="center">

для очистки экстракта и проверка хроматографического

</div>

поведения Пропаргита


##### <a id="p100119"></a>7.4.1 Подготовка колонки с Флоризилом

<a id="p100120"></a>В носик пластиковой хроматографической колонки (высота 15 см, диаметр 1,5 см) помещают стекловату и заполняют колонку 5 г Флоризила, уплотняя его периодическим постукиванием по колонке. На слой Флоризила насыпают слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
<a id="p100121"></a>Колонку промывают 10 куб. см ацетона, 15 куб. см гексана и просушивают.


##### <a id="p100122"></a>7.4.2 Проверка хроматографического поведения Пропаргита на колонках с Флоризилом

<a id="p100123"></a>При поступлении новой партии Флоризила проводят изучение поведения Пропаргита на колонке. В концентратор вносят 1 см стандартного раствора Пропаргита в гексане с концентрацией 1 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе. Добавляют 5 куб. см гексана, растворяют содержимое концентратора и наносят на колонку, подготовленную, как описано в [пункте 7.4.1](#p100119).
<a id="p100124"></a>В концентратор добавляют 5 куб. см гексана, ополаскивают стенки и снова наносят на колонку. Затем промывают колонку 5 куб. см гексана, смесью гексан - ацетон в соотношении 9:1 и весь элюат отбрасывают. Пропаргит элюируют с колонки последовательно 2-мя порциями элюирующей смеси [(п. 7.2.2)](#p100111) по 5 куб. см каждая. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха при температуре водяной бани не выше 25 - 30 °С.
<a id="p100125"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 куб. см гексана и 1 куб. мм (ЭЗД) или 3 куб. мм (ПФД) пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100126"></a>Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.


#### <a id="p100127"></a>7.5 Подготовка концентрирующего патрона Диапак-нитрил

<div align="center">

для очистки экстракта и проверка хроматографического

</div>

поведения Пропаргита

<a id="p100128"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 мл/мин.


##### <a id="p100129"></a>7.5.1 Подготовка концентрирующего патрона Диапак-нитрил

<a id="p100130"></a>Патрон Диапак-нитрил устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100131"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см ацетона, затем 10 куб. см гексана. Элюат отбрасывают. Патрон сушат под вакуумом 1 - 2 мин.


##### <a id="p100132"></a>7.5.2 Проверка хроматографического поведения Пропаргита на концентрирующем патроне Диапак-нитрил

<a id="p100133"></a>В концентратор вносят 1 куб. см стандартного раствора Пропаргита в гексане с концентрацией 1 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе. Добавляют 5 куб. см гексана, растворяют содержимое концентратора. Затем этот объем пропускают с помощью медицинского шприца через предварительно подготовленный в соответствии с [п. 7.5.1](#p100129) патрон Диапак-нитрил со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Элюат собирают.
<a id="p100134"></a>Пропаргит элюируют с колонки последовательно 2-мя порциями элюирующей смеси [(п. 7.2.2)](#p100111) по 5 куб. см каждая (первой порцией омывают концентратор). Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха при температуре водяной бани не выше 25 - 30 °С.
<a id="p100135"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 куб. см гексана и 1 куб. мм (для ЭЗД) пробы вводят в хроматограф (при анализе на ЭЗД).
<a id="p100136"></a>Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.

8. <a id="p100137"></a>Отбор проб и хранение

<a id="p100138"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб", [ГОСТ 17109-88](https://bukva.ai/docs/gost-17109-88) "Соя. Требования при заготовках и поставках" и [ГОСТ 7825-96](https://bukva.ai/docs/standart-gost-7825-96) "Масло соевое. ТУ".
<a id="p100139"></a>Пробы семян сои, доведенных до стандартной влажности, хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов. Перед анализом семена сои размалывают на лабораторной мельнице.
<a id="p100140"></a>Пробы масла хранят в герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 0 - 4 °С не более 30 дней.
<a id="p100141"></a>Для исследовательских целей допускается получение масла в лаборатории из проб семян методом экстракции горячим растворителем при температуре не выше 40 °С.

<div align="center">

9. <a id="p100142"></a>Проведение определений

</div>



#### <a id="p100143"></a>9.1 Семена сои



##### <a id="p100144"></a>9.1.1 Экстракция и очистка экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями

<a id="p100145"></a>Навеску измельченных семян сои массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции, заливают смесью ацетона и гексана в соотношении 1 к 7 (далее - смесь для экстракции) объемом 75 куб. см и ставят на 30 мин. на встряхиватель. Далее банку переносят в ультразвуковую ванну на 10 мин. Экстракт фильтруют в концентратор через фильтр "красная лента".
<a id="p100146"></a>Экстракцию повторяют еще дважды смесью для экстракции порциями по 50 куб. см, встряхивая образец по 15 мин. и помещая в ультразвуковую ванну на 5 мин.
<a id="p100147"></a>Объединенные порции экстракта выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С.
<a id="p100148"></a>Далее масляный остаток в колбе переносят ацетонитрилом в делительную воронку тремя порциями по 20 куб. см и промывают ацетонитрильный экстракт тремя порциями гексана по 40 куб. см. Очищенный ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С.
<a id="p100149"></a>В чистую делительную воронку пробу переносят тремя порциями ацетонитрила по 3 куб. см и добавляют 50 куб. см дистиллированной воды, предварительно омыв ею концентратор. Пропаргит переэкстрагируют в гексан тремя порциями по 40 куб. см каждая. Гексан собирают в концентратор, пропуская его через слой безводного сернокислого натрия. Водную фазу отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С.


##### <a id="p100150"></a>9.1.2 Очистка пробы на колонках с Флоризилом

<a id="p100151"></a>К сухому остатку в концентраторе, полученному после упаривания гексанового экстракта, добавляют 5 мл гексана. Содержимое колбы интенсивно перемешивают и полученный раствор наносят на подготовленную колонку согласно [пункту 7.4.1](#p100119). В концентратор добавляют 5 куб. см гексана, ополаскивают стенки и снова наносят на колонку. Затем промывают колонку последовательно 5 куб. см гексана, 5 куб. см смеси гексан - ацетон в соотношении 9:1 и весь элюат отбрасывают.
<a id="p100152"></a>Пропаргит элюируют с колонки в чистый концентратор 10 куб. см элюирующей смеси [(п. 7.2.2)](#p100111). Растворитель выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не более 35 °С досуха. Если такой очистки окажется недостаточно, то пробу очищают на патроне Диапак-нитрил.


##### <a id="p100153"></a>9.1.3 Очистка пробы на концентрирующем патроне Диапак-нитрил

<a id="p100154"></a>Сухой остаток в концентраторе, полученный после упаривания элюата с колонки с Флоризилом, растворяют в 5 куб. см гексана. Содержимое колбы наносят на подготовленный согласно [п. 7.5.1](#p100129) патрон Диапак-нитрил. Элюат с патрона отбрасывают.
<a id="p100155"></a>В концентратор добавляют 5 - 10 куб. см элюирующей смеси (точный объем элюирующей смеси определяют по [п. 7.5.2](#p100132)), ополаскивают стенки и наносят на патрон. Собранный в чистый концентратор элюат выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не более 35 °С досуха.


#### <a id="p100156"></a>9.2 Масло сои


<a id="p100157"></a>Образец масла сои массой 10 г помещают в химический стакан объемом 100 куб. см, прибавляют 30 куб. см ацетонитрила, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и переносят в сухую делительную воронку объемом 500 куб. см. Затем химический стакан обмывают двумя порциями ацетонитрила объемом по 30 куб. см и объединяют с раствором в делительной воронке. В воронку с ацетонитрильной суспензией масла приливают 40 куб. см гексана, предварительно обмыв им стаканчик, и осторожно встряхивают воронку в течение 1 мин. После разделения слоев в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в коническую колбу объемом 250 куб. см, а гексан отбрасывают. Повторяют операцию еще дважды, используя также по 40 куб. см гексана.
<a id="p100158"></a>Ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не более 35 °С досуха.
<a id="p100159"></a>Затем пробу переносят в чистую делительную воронку тремя порциями ацетонитрила по 3 куб. см и добавляют 50 куб. см дистиллированной воды, предварительно омыв ею концентратор. Пропаргит переэкстрагируют в гексан тремя порциями по 40 куб. см каждая. Гексан собирают в концентратор, пропуская его через слой безводного сернокислого натрия. Водную фазу отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С.
<a id="p100160"></a>Далее пробу очищают на хроматографических колонках с Флоризилом и на патроне Диапак-нитрил, как описано в [пунктах 9.1.2](#p100150) и [9.1.3](#p100153).


#### <a id="p100161"></a>9.3 Условия хроматографирования


<a id="p100162"></a>    Высокоэффективный  газовый хроматограф "Кристалл 2000м" с детектором по
                                                                        -14
захвату  электронов  (ЭЗД)  с  пределом детектирования по Линдану 4 х 10
г/куб. см и приспособлениями для капиллярной колонки.
<a id="p100163"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая НР-5 (5% фенил - 95% метилсилоксана), длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
<a id="p100164"></a>Температура детектора - 320 °С, испарителя - 250 °С, программированный нагрев колонки со 160 °С (выдержка 1 минута) по 10 град./мин. до 220 °С, с 220 °С по 15 град./мин. до 250 °С.
<a id="p100165"></a>Газ 1 - тип регулятора расхода газа РРГ 11, режим нормальный, скорость 20 см/с, давление 89,45 кПа.
<a id="p100166"></a>Газ 2 (гелий) - сброс 1:10, расход 0,5 куб. см/мин.
<a id="p100167"></a>Газ 3 (азот, поддув детектора) - 45 куб. см/мин.
<a id="p100168"></a>Продувка: температура колонки 270 °С, газ 2 - 60 куб. см/мин., газ 3 - 60 куб. см/мин., время 5 минут.
<a id="p100169"></a>Абсолютное время удерживания Пропаргита - 12 мин. 53 сек. +/- 2%.
<a id="p100170"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах - 0,5 - 5,0 нг.
<a id="p100171"></a>Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100172"></a>Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор с концентрацией Пропаргита 5,0 мкг/куб. см, соответственно разбавляют.
<a id="p100173"></a>Количественное определение Пропаргита проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Пропаргита с концентрацией 0,5 - 5,0 мкг/куб. см.
<a id="p100174"></a>    Альтернативные условия. Высокоэффективный газовый хроматограф "Кристалл
2000м"  с  пламенно-фотометрическим детектором с пределом детектирования по
                      -12
сере в метафосе 5 х 10     г/куб. см  и  приспособлениями  для  капиллярной
колонки.
<a id="p100175"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая НР-1 (100% метилсилоксана), длина 7,5 м, внутренний диаметр 0,543 мм.
<a id="p100176"></a>Температура детектора - 240 °С, испарителя - 230 °С, программированный нагрев колонки со 190 °С по 10 град./мин. до 220 °С, с 220 °С по 25 град./мин. до 275 °С.
<a id="p100177"></a>Газ 1 (азот) - тип регулятора расхода газа РРГ 11, режим нормальный, скорость 66 см/с, давление 15,0 кПа.
<a id="p100178"></a>Газ 2 (азот) - деление потока 1:1, расход 9,6 куб. см/мин.
<a id="p100179"></a>Абсолютное время удерживания Пропаргита - 5 мин. 50 сек. +/- 2%.
<a id="p100180"></a>Объем вводимой пробы - 3 куб. мм.
<a id="p100181"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах - 3,0 - 30,0 нг.
<a id="p100182"></a>Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100183"></a>Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор с концентрацией Пропаргита 10,0 мкг/куб. см, соответственно разбавляют.
<a id="p100184"></a>Количественное определение Пропаргита проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Пропаргита с концентрацией 1,0 - 10,0 мкг/куб. см.

10. <a id="p100185"></a>Обработка результатов

<a id="p100186"></a>Для обработки результатов хроматографического анализа используется программа сбора и обработки хроматографической информации "Хроматэк Аналитик", версия 1.20.
<a id="p100187"></a>Альтернативная обработка результатов.
<a id="p100188"></a>Содержание Пропаргита рассчитывают по формуле:

                               Sпр х А х V
<a id="p100189"></a>                          Х = ------------- х Р,
                              100 х Sст х m

<a id="p100190"></a>где:
<a id="p100191"></a>Х - содержание Пропаргита в пробе, мг/кг;
<a id="p100192"></a>Sст - высота (площадь) пика стандарта, мм;
<a id="p100193"></a>Sпр - высота (площадь) пика образца, мм;
<a id="p100194"></a>А - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
<a id="p100195"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100196"></a>m - масса анализируемого образца, г;
<a id="p100197"></a>Р - содержание Пропаргита в аналитическом стандарте, %.

11. <a id="p100198"></a>Контроль погрешности измерений

<a id="p100199"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100200"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений:
<a id="p100201"></a>за результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100202"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(таблица 1)](#p100033), при этом r =
2,8 сигма .
         r
<a id="p100203"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100202) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. <a id="p100204"></a>Оформление результатов

<a id="p100205"></a>Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100206"></a>              (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг при вероятности Р = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100207"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

<a id="p100208"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100033)), %.
<a id="p100209"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100210"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,05 мг/кг" <*>.

<a id="p100211"></a>

---

<a id="p100212"></a><*> 0,05 мг/кг - предел обнаружения.

13. <a id="p100213"></a>Контроль качества результатов измерений

<a id="p100214"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100215"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100216"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100217"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100218"></a>                       С  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,Х         л,Х'

    где:
    +/- ДЕЛЬТА  _ (+/- ДЕЛЬТА  _ ) - характеристика погрешности (абсолютная
              л,Х            л,Х'
погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию компонента в
испытуемом  образце  (расчетному значению содержания компонента в образце с
добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100219"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где:
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                                          _
<a id="p100220"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100033)), %.
<a id="p100221"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100222"></a>                             К  = Х' - Х - С ,
                              к             д

         _      _
    где  Х'  -  Х,  С   -  среднее  арифметическое результатов параллельных
                     д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100198)), содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100223"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                             ____________________
                            /     2           2
<a id="p100224"></a>                      К = \/ДЕЛЬТА    + ДЕЛЬТА   .
                                    _           _
                                  л,Х'        л,Х

<a id="p100225"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100226"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100227"></a>                              |К | <= К,                                (2)
                                к
процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100228"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100227) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100229"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100230"></a>расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100231"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,

<div align="center">

[таблица 1](#p100033)), %.

</div>


14. <a id="p100232"></a>Разработчики

<a id="p100233"></a>Калинин В.А., профессор; Калинин А.В., мл. н. сотр.; Разумихин М.В., н. сотр.; Третьякова О.А., инженер.
<a id="p100234"></a>Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". 127550, Москва, Тимирязевская ул., 53/1. Телефон (495)976-37-68, факс (495)976-43-26.



<a id="p100235"></a>

---