---
title: "\"МУК 4.1.2273-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фосэтил алюминия в ягодах и соке винограда методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2273-07"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2273-07"
---

## "МУК 4.1.2273-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фосэтил алюминия в ягодах и соке винограда методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2273-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фосэтил алюминия в ягодах и соке винограда методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 24.09.2007)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 10 декабря 2007 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

24 сентября 2007 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФОСЭТИЛ АЛЮМИНИЯ**
**В ЯГОДАХ И СОКЕ ВИНОГРАДА МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2273-07**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

10 декабря 2007 года

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны Всероссийским научно-исследовательским институтом фитопатологии (Л.В. Дубовая, А.М. Макеев).
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 2 от 21.06.2007).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 24 сентября 2007 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены в действие с 10 декабря 2007 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации фосэтил алюминия в ягодах и соке винограда в диапазоне 0,4 - 4,0 мг/кг.
<a id="p100012"></a>Название по ИСО: Фосэтил алюминий.
<a id="p100013"></a>Название по ИЮПАК: Этилгидрофосфонат алюминия.

                                     O
                                     ||
<a id="p100014"></a>                            (CH CH O-P-O) Al
                               3  2  |   3
                                     H

<a id="p100015"></a>    C H  AlO P
     6 18   9 3
<a id="p100016"></a>    Мол. масса: 354,1.

<a id="p100017"></a>    Бесцветный порошок. Температура плавления -> 200 °С. Давление паров при
25 °С - < 0,013 мПа.  Коэффициент  распределения  н-октанол/вода: K   log P
                                                                   ow
=  2,7.  Растворимость (мг/куб.  дм) при 20 °С: метанол - 920, ацетон - 13,
этилацетат  -  5, ацетонитрил - 5, н-гексан - 5; растворимость в воде - 120
г/куб. дм.
<a id="p100018"></a>    Фосэтил  алюминий  гидролизуется  в сильно кислых или щелочных условиях
(DT  = 5 дней при рН 3 и 13,4 дня при рН 13).
   50
<a id="p100019"></a>    В биологически активных почвах в аэробных и анаэробных условиях фосэтил
алюминий  быстро  разлагается  со средним значением DT   от 20 минут до 1,5
                                                      50
часа.
<a id="p100020"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100021"></a>    Острая  пероральная  токсичность (LD  ) для крыс - > 2000 мг/кг; острая
                                        50
дермальная токсичность (LD  ) для крыс - > 2000 мг/кг; острая ингаляционная
                          50
токсичность (LC  ) для крыс - > 1,73 мг/куб. дм  воздуха.  LC    для  рыб -
               50                                            50
> 100 мг/куб. дм  (96 час.). Вещество не токсично для птиц, пчел и дождевых
червей.
<a id="p100022"></a>В России установлены следующие гигиенические нормативы:
<a id="p100023"></a>ДСД - 3,0 мг/кг/сутки;
<a id="p100024"></a>МДУ в винограде - 0,8 мг/кг.
<a id="p100025"></a>Область применения
<a id="p100026"></a>Фосэтил алюминий - системный фунгицид защитного и искореняющего действия. Высокоэффективен против возбудителей болезней плодовых, овощных и декоративных культур и виноградной лозы, вызываемых грибами из класса Phycomycetes. Вещество ингибирует прорастание спор или подавляет развитие мицелия и споруляцию. Проявляет также активность против некоторых бактериальных патогенов растений. Применяется в России в качестве фунгицида на огурцах открытого грунта, луке и винограде с нормой расхода до 2 кг д.в./га и трехкратной обработкой за сезон.

1. <a id="p100027"></a>Метрологические характеристики метода

<a id="p100028"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100029"></a>Таблица 1

<a id="p100030"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Ягоды винограда | более 0,1 до 1,0 | 25 | 3,4 | 9,5 | 14,6 |
| Сок винограда | более 0,1 до 1,0 | 25 | 2,6 | 7,3 | 11,3 |


<a id="p100034"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

<a id="p100035"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100036"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА,**<br>
**СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ, ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ**

</div>

**ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА ДЛЯ N = 20, Р = 0,95**


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="11%"><col width="18%"><col width="18%"><col width="16%"><col width="24%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/- %</td></tr>
<tr><td>Ягоды винограда</td><td>0,4</td><td>0,4 - 4,0</td><td>84,2</td><td>3,7</td><td>+/- 3,4</td></tr>
<tr><td>Сок винограда</td><td>0,4</td><td>0,4 - 4,0</td><td>84,1</td><td>2,7</td><td>+/- 2,5</td></tr>
</table>


2. <a id="p100040"></a>Метод измерений

<a id="p100041"></a>Методика основана на определении вещества с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД). Контроль фосэтил алюминия в матрицах осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из ягод водным метанолом и последующей дериватизации диазометаном. Виноградный сок анализируют после разбавления водой. Идентификация проводится по времени удерживания пика вещества, количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100042"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры колонки.

<div align="center">

3. <a id="p100043"></a>Средства измерений, вспомогательные

</div>

устройства, реактивы и материалы


#### <a id="p100044"></a>3.1 Средства измерений


<a id="p100045"></a>Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" с ТИД                 Номер Госреестра
<a id="p100046"></a>(СКБ "Хроматэк", Россия)                                   N 14516-95
<a id="p100047"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100048"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим ГОСТ 7328
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,036 г
<a id="p100049"></a>Колбы мерные вместимостью 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100050"></a>Меры массы ГОСТ 7328
<a id="p100051"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
<a id="p100052"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
вместимостью 5 см
<a id="p100053"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).

<div align="center">

25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см

</div>

<a id="p100054"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100055"></a>3.2 Реактивы


<a id="p100056"></a>Фосэтил алюминий, аналитический стандарт фирмы
<a id="p100057"></a>Байер (Германия) с содержанием д.в. 96,2%
<a id="p100058"></a>Вода дистиллированная                                    ГОСТ 7602
<a id="p100059"></a>Калия гидроксид, ч. [ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80)
<a id="p100060"></a>Кислота серная концентрированная, х.ч. ГОСТ 4204-77
<a id="p100061"></a>N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамид (Мерк,             ТУ 6-09-11-1643-82
Германия) или N-нитрозо-метил-мочевина
<a id="p100062"></a>Спирт изопропиловый, ч. [ГОСТ 9805-84](https://bukva.ai/docs/gost-9805-84)
<a id="p100063"></a>Спирт метиловый, х.ч. [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77)
<a id="p100064"></a>Эфир диэтиловый медицинский                              ГОСТ 6265-74.
<a id="p100065"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


#### <a id="p100066"></a>3.3 Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100067"></a>Азот газообразный (баллон), осч ГОСТ 9293
<a id="p100068"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма
Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100069"></a>Воронки конусные диаметром 60 мм ГОСТ 25336
<a id="p100070"></a>Гомогенизатор                                               МРТУ 42-1505
<a id="p100071"></a>Генератор водорода, модель SPE, фирма
General Electric (США) или аналогичный
<a id="p100072"></a>Дефлегматор елочный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100073"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100074"></a>Колбы грушевидные на шлифе вместимостью [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
50 и 100 куб. см
<a id="p100075"></a>Колонка кварцевая капиллярная ZB-50 (типа OV-17),
длина 30 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки
0,5 мкм, фирма Phenomenex (США) или аналогичная
<a id="p100076"></a>Компрессор (СКБ "Хроматэк", Россия)
<a id="p100077"></a>Насос водоструйный вакуумный                                ГОСТ 10696
<a id="p100078"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М                      ТУ 25-11-917
или ротационный вакуумный испаритель В-169
фирмы Buchi (Швейцария)
<a id="p100079"></a>Стаканы химические вместимостью 250 и 500 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100080"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100081"></a>Фильтры бумажные "красная лента", обеззоленные ТУ 6-09-1678-86
или фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3 ММ
<a id="p100082"></a>Центрифуга Т-23 (Janetzki, Германия) или аналогичная
<a id="p100083"></a>Шприц для ввода образцов для газового хроматографа
вместимостью 1 - 10 куб. мм (Hamilton, США).
<a id="p100084"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

<div align="center">

4. <a id="p100085"></a>Требования безопасности

</div>


<a id="p100086"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100087"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

<div align="center">

5. <a id="p100088"></a>Требования к квалификации операторов

</div>


<a id="p100089"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
<a id="p100090"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

<div align="center">

6. <a id="p100091"></a>Условия измерений

</div>


<a id="p100092"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100093"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 + 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100094"></a>выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

<div align="center">

7. <a id="p100095"></a>Подготовка к выполнению измерений

</div>


<a id="p100096"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.


#### <a id="p100097"></a>7.1 Очистка органических растворителей



##### <a id="p100098"></a>7.1.1 Очистка диэтилового эфира

<a id="p100099"></a>Растворитель предварительно встряхивают со свежеприготовленным раствором железного купороса, а затем последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют. Перегнанный эфир хранят над гидроксидом калия.


#### <a id="p100100"></a>7.2 Приготовление рабочих растворов



##### <a id="p100101"></a>7.2.1 Приготовление 40%-ного водного раствора гидроксида калия

<a id="p100102"></a>Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.
<a id="p100103"></a>В химический стакан вместимостью 250 куб. см помещают 40 г гидроксида калия, приливают 60 куб. см дистиллированной воды и осторожно перемешивают до полного растворения осадка.


##### <a id="p100104"></a>7.2.2 Приготовление 1%-ного раствора серной кислоты

<a id="p100105"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 50 - 60 куб. см дистиллированной воды, вносят 1,05 куб. см концентрированной серной кислоты, перемешивают, доводят водой до метки и вновь перемешивают.


##### <a id="p100106"></a>7.2.3 Приготовление эфирного раствора диазометана

<a id="p100107"></a>Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.
<a id="p100108"></a>В двугорлой круглодонной колбе вместимостью 100 куб. см, снабженной капельной воронкой, растворяют 5 г N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамида в 30 куб. см смеси диэтилового эфира и метанола (1:1, по, объему). Колбу присоединяют к холодильнику, нижний конец которого снабжен аллонжем с отводом, погруженным в слой эфира (100 куб. см) в приемной колбе, охлаждаемой смесью льда и соли. В воронку помещают 15 куб. см 40%-ного раствора гидроксида калия. Реакцию начинают добавлением в реакционный сосуд раствора гидроксида калия по каплям, избегая бурного вскипания реакционной массы. Об окончании реакции судят по прекращению выделения диазометана в диэтиловый эфир. Раствор диазометана хранят в колбе с притертой пробкой в холодильнике не более пяти дней.


#### <a id="p100109"></a>7.3 Подготовка и кондиционирование

<div align="center">

хроматографической колонки

</div>


<a id="p100110"></a>Капиллярную кварцевую колонку ZB-50 (типа OV-17) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 270 °С и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 - 10 часов.


#### <a id="p100111"></a>7.4 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100112"></a>7.4.1. Исходный раствор фосэтил алюминия для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см).
<a id="p100113"></a>В мерную колбу вместимостью 50 куб. см помещают 0,052 г аналитического стандарта фосэтил алюминия, растворяют в 40 куб. см дистиллированной воды, доводят объем раствора этим же растворителем до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100114"></a>Раствор хранится в холодильнике не более 3-х месяцев.
<a id="p100115"></a>7.4.2. Раствор фосэтил алюминия N 1 для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см).
<a id="p100116"></a>    В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного
раствора фосэтил алюминия с концентрацией 1 мг/куб. см [(п. 7.4.1)](#p100112),
разбавляют  смесью  изопропанол  - 1% H SO  (9:1, по объему) до метки. Этот
                                       2  4
раствор  используют  для  приготовления градуировочных растворов метильного
производного фосэтил алюминия.
<a id="p100117"></a>Для приготовления проб ягод и сока с внесением при оценке полноты извлечения фосэтил алюминия из исследуемых образцов используют водный раствор с концентрацией 10 мкг/куб. см.
<a id="p100118"></a>Градуировочный раствор N 1 и водный раствор фосэтил алюминия хранятся в холодильнике в течение месяца.
<a id="p100119"></a>7.4.3. Приготовление градуировочных растворов метильного производного фосэтил алюминия.
<a id="p100120"></a>Стандартные растворы метильного производного фосэтил алюминия используют для построения градуировочного графика. В грушевидную колбу вместимостью 50 куб. см отбирают 1 куб. см градуировочного раствора N 1, приливают 7 куб. см эфирного раствора диазометана [(п. 7.2.3)](#p100106) и колбу закрывают пробкой. Колбу периодически встряхивают. Через 15 минут к раствору в колбе приливают 1 куб. см изопропанола и содержимое упаривают на роторном вакуумном испарителе при температуре 30 °С до объема 2 - 3 куб. см. Раствор метильного производного фосэтил алюминия переносят в мерную колбу вместимостью 50 куб. см. Грушевидную колбу обмывают трижды порциями по 10 куб. см изопропанола, которые также переносят в мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят изопропанолом до метки и получают градуировочный раствор N 2 с концентрацией 2,0 мкг/куб. см (по кислоте). Из него последовательным разбавлением в изопропаноле готовят рабочие растворы для градуировки с концентрациями (по кислоте): 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см.
<a id="p100121"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


#### <a id="p100122"></a>7.5 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100123"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х с) от концентрации фосэтил алюминия в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 рабочим растворам метильного производного вещества для градуировки.
<a id="p100124"></a>В инжектор хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого рабочего градуировочного раствора [(п. 7.4.3)](#p100119) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.3](#p100134). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

<div align="center">

8. <a id="p100125"></a>Отбор и хранение проб

</div>


<a id="p100126"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными [ГОСТом 25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый".
<a id="p100127"></a>Пробы ягод анализируют в день отбора или замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре не выше -18 °С.

<div align="center">

9. <a id="p100128"></a>Выполнение определения

</div>



#### <a id="p100129"></a>9.1 Экстракция


<a id="p100130"></a>9.1.1. Ягоды. Образец растительного материала массой 20 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, добавляют 80 куб. см смеси метанол - вода (1:1, по объему) и гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. Суспензию центрифугируют при 6000 g в течение 5 минут. Надосадочную жидкость декантируют через бумажный фильтр в конусной воронке в мерный цилиндр. Остаток повторно гомогенизируют с 30 куб. см смеси метанол - вода (1:1) в течение 1 мин. Суспензию центрифугируют при 6000 g в течение 3 минут и надосадочную жидкость фильтруют в этот же мерный цилиндр. Измеряют объем раствора, отбирают 1/40 объема этой фракции (эквивалентна 0,5 г образца) и переносят в грушевидную колбу вместимостью 50 куб. см. Далее проводят метилирование экстракта по [п. 9.2](#p100132).
<a id="p100131"></a>9.1.2. Сок. К образцу сока массой 20 г приливают 20 куб. см дистиллированной воды, перемешивают. Отбирают 1/40 объема раствора (эквивалентна 0,5 г образца) и переносят в грушевидную колбу вместимостью 50 куб. см. Далее проводят метилирование по п. 9.2.


#### <a id="p100132"></a>9.2 Метилирование


<a id="p100133"></a> Аликвоты экстрактов ягод и сока, полученных по [п. п. 9.1.1](#p100130) и [9.1.2](#p100131) и
помещенных   в   грушевидные  колбы,  упаривают  на  ротационном  вакуумном
испарителе  при  температуре  35 °С  до объема 0,1 - 0,2 куб. см. К остатку
приливают 1 куб. см смеси изопропанол -  1%  H SO  (9:1, по объему) и смесь
                                              2  4
помещают  в  ультразвуковую  ванну на 2 минуты. Затем к образцу приливают 7
куб. см эфирного раствора диазометана [(п. 7.2.3)](#p100106) и колбу закрывают пробкой.
Колбу периодически встряхивают. Через 15 минут к раствору в колбе приливают
1  куб.  см  изопропанола  и  содержимое  упаривают  на  роторном вакуумном
испарителе  при  температуре  30 °С  до  объема  2 - 2,5  куб. см.  Раствор
переносят    в   градуированную   пробирку.   Колбу   обмывают  1  куб.  см
изопропанола,   который  также  переносят  в  пробирку.  Объем  раствора  в
градуированной пробирке доводят до 4 см изопропанолом.


#### <a id="p100134"></a>9.3 Условия хроматографирования


<a id="p100135"></a>    Газовый  хроматограф  "Кристалл  2000М"  с  термоионным  детектором  на
                                                                        -14
фосфорсодержащие  вещества  с  пределом детектирования не выше 2,82 х 10
г/куб. см.
<a id="p100136"></a>Колонка капиллярная кварцевая ZB-50 (типа OV-17), длина 30 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,5 мкм, фирма Phenomenex (США).
<a id="p100137"></a>Температура термостата испарителя - 230 °С, детектора - 300 °С, термостата колонки (программа: от 85 °С (3 мин.) со скоростью 2°/мин. до 100 °С (0 мин.); со скоростью 25°/мин. до 260 °С (5 мин.)
<a id="p100138"></a>Расход газов: газа-носителя (азот) - 3,1 куб. см/мин.; водорода и воздуха к ТИД - 11,2 и 200 куб. см/мин. соответственно.
<a id="p100139"></a>Деление потока: 1:2.
<a id="p100140"></a>Время удерживания метального производного фосэтил алюминия: 5 мин. 00 сек. - 5 мин. 05 сек.
<a id="p100141"></a>Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
<a id="p100142"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,05 - 1,0 нг.
<a id="p100143"></a>Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю площадь хроматографического пика метального производного фосэтил алюминия.
<a id="p100144"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют изопропанолом.

10. <a id="p100145"></a>Обработка результатов анализа

<a id="p100146"></a>Содержание фосэтил алюминия рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                 Н  х А х V
                                  1
<a id="p100147"></a>                             Х = ----------,
                                   Н  х m
                                    0

    где:
    Х - содержание фосэтил алюминия в пробе, мг/кг;
    Н  - площадь пика образца, мВ х с;
     1
    Н  - площадь пика стандарта, мВ х с;
     0
    А - концентрация стандартного раствора фосэтил алюминия, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m -  масса  анализируемой части образца (г) (для ягод и  сока - 0,5 г).

<div align="center">

11. <a id="p100148"></a>Проверка приемлемости

</div>

результатов параллельных определений

<a id="p100149"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                          2 х |Х  - Х | х 100
                                1    2
<a id="p100150"></a>                          ------------------- <= r,                     (1)
                                (Х  + Х )
                                  1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(таблица 1)](#p100030), при этом r = 2,8
сигма .
     r
<a id="p100151"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100150) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. <a id="p100152"></a>Оформление результатов

<a id="p100153"></a>Результат анализа представляют в виде:

                _
<a id="p100154"></a>               (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности Р = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

<a id="p100155"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100030)), %.
<a id="p100156"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100157"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" менее 0,4 мг/кг для ягод и сока винограда <*>.

<a id="p100158"></a>

---

<div align="center">

<a id="p100159"></a><*> 0,4 мг/кг - предел обнаружения для ягод и сока винограда.

</div>


13. <a id="p100160"></a>Контроль качества результатов измерений

<a id="p100161"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6.2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100162"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100163"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:

<a id="p100164"></a>                      C  => ДЕЛЬТА   _ + ДЕЛЬТА   __,
                       д          л, X         л, X'

    где: +/- ДЕЛЬТА   _ (+/- ДЕЛЬТА   __)   -  характеристика   погрешности
                   л, Х            л, Х'
(абсолютная погрешность) результатов  анализа,  соответствующая  содержанию
компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания  компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100165"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              д

    где: ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100166"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100030)), %.
<a id="p100167"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                   __   _
<a id="p100168"></a>                              К  = Х' - Х - С ,
                               к             д

    где:
    __  _
    Х', Х, С  - среднее арифметическое результатов параллельных определений
            д
(признанных приемлемыми по [п. 11](#p100148)) содержания компонента в образце с
добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки  соответственно,  мг/кг.
<a id="p100169"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                             _______________________
                            /     2             2
<a id="p100170"></a>                      K = \/ДЕЛЬТА   __ + ДЕЛЬТА   _.
                                  л, X'         л, X

<a id="p100171"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100172"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100173"></a>                               |К | <= К,                               (2)
                                 к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100174"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100173) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100175"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100176"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                          2 х |Х  - Х | х 100
                                1    2
<a id="p100177"></a>                          ------------------- <= R,                     (3)
                               (Х  + Х )
                                 1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,

<div align="center">

[таблица 1](#p100030)), %.

</div>


14. <a id="p100178"></a>Разработчики

<a id="p100179"></a>Дубовая Л.В., науч. сотр.; Макеев А.М., зав. лаб., канд. биол. наук.
<a id="p100180"></a>ГНУ ВНИИ фитопатологии, 143050, Моск. обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.



<a id="p100181"></a>

---