---
title: "\"МУК 4.1.2252-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций суммы стероидных сапонинов Юкки Шидигера в воздухе рабочей зоны методом хромато-масс-спектрометрии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2252-07"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2252-07"
---

## "МУК 4.1.2252-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций суммы стероидных сапонинов Юкки Шидигера в воздухе рабочей зоны методом хромато-масс-спектрометрии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2252-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций суммы стероидных сапонинов Юкки Шидигера в воздухе рабочей зоны методом хромато-масс-спектрометрии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 17.08.2007)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 17 августа 2007 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
17 августа 2007 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ СУММЫ СТЕРОИДНЫХ**
**САПОНИНОВ ЮККИ ШИДИГЕРА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ**
**МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2252-07**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

<div align="center">

с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Подготовлены: ГУ НИИ медицины труда РАМН.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 2 от 21.06.2007).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## <a id="p100010"></a>Введение


<a id="p100011"></a>Сборник методических указаний "Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" [(выпуск 49)](https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2259-07) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
<a id="p100012"></a>Включенные в данный сборник методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", [ГОСТ Р 8.563-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-329) "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений", [ГОСТ Р ИСО 5725 (части 1 - 6)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100013"></a>Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.1314-03 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и дополнениях к ним.
<a id="p100014"></a>Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров Госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.


## 1. <a id="p100015"></a>Область применения


<a id="p100016"></a>Настоящие Методические указания устанавливают методику количественного химического анализа воздуха рабочей зоны для определения в нем массовых концентраций суммы стероидных сапонинов Юкки Шидигера (далее по тексту - сапонины Юкки) методом хромато-масс-спектрометрии в диапазоне массовых концентраций от 2,0 до 34 мг/куб. м.


## 2. <a id="p100017"></a>Характеристика вещества



### <a id="p100018"></a>2.1. Название и структура


<a id="p100019"></a>Сапонины Юкки представляют собой сумму стероидных гликозидов ряда спиростана и фуростана, выделенных из растительного сырья. Растительным сырьем для получения сапонинов служит холодный экстракт различных частей растений, относящихся к виду Юкка Шидигера. Большая часть сапонинов выделена в чистом виде и охарактеризована.
<a id="p100020"></a>Состав экстракта сапонинов Юкки представлен в табл. 1.

<div align="right">

<a id="p100021"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100022"></a>**СОСТАВ ЭКСТРАКТА САПОНИНОВ ЮККИ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="20%"><col width="20%"><col width="27%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td>Сапонины N п/п</td><td>Эмпирическая формула</td><td>Молекулярная масса сапонина</td><td>Доля по отношению к общему количеству сапонинов в препарате, %</td><td>Молекулярная масса агликона (сапогенина)</td></tr>
<tr><td>1</td><td>C H O 44 69 18</td><td>886</td><td>24,0</td><td>432</td></tr>
<tr><td>2</td><td>C H O 39 63 13</td><td>739</td><td rowspan="2">66,0</td><td>417</td></tr>
<tr><td>3</td><td>C H O 44 71 17</td><td>871</td><td>417</td></tr>
<tr><td>4</td><td>C H O 45 70 19</td><td>915,5</td><td>0,1</td><td>416</td></tr>
<tr><td>5</td><td>C H O 39 63 14</td><td>755</td><td>3,1</td><td>433</td></tr>
<tr><td>6</td><td>C H O 45 75 19</td><td>919</td><td rowspan="3">6,8</td><td>435</td></tr>
<tr><td>7</td><td>C H O 50 81 23</td><td>1049,5</td><td>435</td></tr>
<tr><td>8</td><td>C H O 50 79 23</td><td>1047,5</td><td>433</td></tr>
</table>


<a id="p100032"></a>Название сапонинов Юкки по ИЮПАК:
<a id="p100033"></a>N 1. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-[бета-D-ксилопиранозил-(1->3)]-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25R)-спиростан-3 бета-ол-12-он.
<a id="p100034"></a>N 2. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25S)-спиростан-3 бета-ол.
<a id="p100035"></a>N 3. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-[бета-D-ксилопиранозил-(1->3)]-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25S)-спиростан-3 бета-ол.
<a id="p100036"></a>N 4. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-[бета-D-глюкопиранозил-(1->3)]-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25R)-спиростан-3 бета-ол-12-он.
<a id="p100037"></a>N 5. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-бета-D-галактопиранозил-5 бета(25S)-спиростан-2 бета,3 бета-диол.
<a id="p100038"></a>N 6. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25R)-фуростан-3 бета,22 альфа,26-триол 26-O-бета-D-глюкопиранозид.
<a id="p100039"></a>N 7. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-[бета-D-ксилопиранозил-(1->3)]-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25R)-фуростан-3 бета,22 альфа,26-триол 26-O-бета-D-глюкопиранозид.
<a id="p100040"></a>N 8. 3-O-бета-D-глюкопиранозил-(1->2)-[бета-D-ксилопиранозил-(1->3)]-бета-D-глюкопиранозил-5 бета(25R)-фурост20(22)-ен 3 бета,26-диол-12-он 26-O-бета-D-глюкопиранозид.
<a id="p100041"></a>Структурные формулы сапонинов Юкки (не приводятся).


### <a id="p100042"></a>2.2. Физико-химические свойства


<a id="p100043"></a>Сапонины Юкки представляют собой бесцветные или желтоватые кристаллические или аморфные вещества с высокой температурой плавления (плавятся с разложением); хорошо растворимы в воде, плохо - в этаноле, лучше - в метаноле, нерастворимы в бензоле, хлороформе и диэтиловом эфире. Отдельные свойства представлены в табл. 2.

<div align="right">

<a id="p100044"></a>Таблица 2

<a id="p100045"></a>**ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА САПОНИНОВ ЮККИ**

</div>



| Сапонины | Температура плавления, °С | Удельное вращение плоскости поляризации, 25 [альфа] (метанол, с = 0,1) D |
| --- | --- | --- |
| 1 | 197 - 198 | -15,2 |
| 2 | 260 - 261 | -48,0 |
| 3 | 298 - 299 | -40,6 |
| 4 | 234 - 236 | -7,8 |
| 5 | 273 - 274 | -45,8 |
| 6 | 207 - 208 | -38,8 |
| 7 | 235 - 236 | -43,3 |
| 8 | 193 - 195 | -3,6 |


<a id="p100055"></a>Экстракт сапонинов Юкки представляет собой вязкую жидкость темно-коричневого цвета (поглощение 10%-ного раствора при 520 нм - 1,63), pH = 4,0, удельный вес - 1,21 - 1,24, общее количество растворенных веществ - 45 - 48 брикс, содержание сапонинов Юкки - 10 - 12%.
<a id="p100056"></a>Агрегатное состояние в воздухе - в виде капельно-жидкого аэрозоля.


### <a id="p100057"></a>2.3. Токсикологическая характеристика


<a id="p100058"></a>Экстракт сапонинов Юкки не обладает кумулятивным и сенсибилизирующим действиями. Ввиду низкой токсичности вещества не подлежат нормированию.


## 3. <a id="p100059"></a>Метрологические характеристики


<a id="p100060"></a>При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, представленных в табл. 3 и [4](#p100132).

<div align="right">

<a id="p100061"></a>Таблица 3

</div>


<div align="center">

<a id="p100062"></a>**ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПОВТОРЯЕМОСТИ,**

</div>

**ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ, ПРАВИЛЬНОСТИ И ТОЧНОСТИ**


| Диапазон измерений, мг/куб. м | Показатель повторяемости (относительное среднеквадратичное отклонение повторяемости), сигма , % r | Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), сигма , % R | Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности методики при доверительной вероятности Р = 0,95), +/- дельта , % с | Показатель точности (границы относительной погрешности методики при доверительной вероятности Р = 0,95), +/- дельта, % |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| Сумма сапонинов Юкки от 2,0 до 34,0 | 11 | 14 | 11 | 32 |



## 4. <a id="p100065"></a>Метод измерений


<a id="p100066"></a>Измерение массовой концентрации суммы сапонинов Юкки в воздухе рабочей зоны выполняется методом хромато-масс-спектрометрии с предварительным улавливанием анализируемого вещества из воздуха на аэрозольные фильтры АФА-ХА-20, последующей экстракцией содержимого фильтров и кислотным гидролизом этого содержимого.
<a id="p100067"></a>В основе метода количественного определения суммы сапонинов Юкки лежит определение продуктов их кислотного гидролиза - агликонов (сапогенинов), гомологов спиростана, представленных тремя основными веществами - сарсасапогенином ((25S)-5 бета-спиростан-3 бета-ол), глориогенином ((25R)-5 бета-спиростан-3 бета-ол-12-он) и маркогенином ((25S)-5 бета-спиростан-2 бета,3 бета-диол), с предварительной масс-спектрометрической идентификацией этих и подобных им веществ. Три названные вещества составляют 93 - 94% от общего количества сапогенинов Юкки Шидигера.
<a id="p100068"></a>Нижний предел измерения концентрации суммы сапогенинов в градуировочном растворе пробы при доверительной вероятности Р = 0,95 составляет 5,9 мкг/куб. см.
<a id="p100069"></a>Нижний предел измерения массовых концентраций суммы сапонинов Юкки в воздухе составляет 2,0 мг/куб. м при отборе 150 куб. дм воздуха.
<a id="p100070"></a>Определению суммы сапонинов Юкки в воздухе не мешают ингредиенты, используемые при производстве органических биоразлагаемых продуктов (ОБП), - бензоат натрия, лимонная кислота, ПАВ, лимонен.


## 5. <a id="p100071"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы


<a id="p100072"></a>При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.


### <a id="p100073"></a>5.1. Средства измерений


<a id="p100074"></a>Хромато-масс-спектрометр "PolarisQ"
фирмы "ThermoFinnigan", включающий в себя:
масс-спектрометр с анализатором - ионной
ловушкой и внешним ионным источником;
газовый хроматограф "Trace GC";
колонку "Thermo TR-5ms" длиной 25 м,
внутренним диаметром 0,25 мм, толщиной
слоя фазы 0,25 мкм и жидкой фазой -
"(5% фенил)-диметилполисилоксан";                 N 28566-05
систему обработки данных "Xcalibur(тм)";          в Государственном реестре
библиотеку масс-спектров NIST 02                  средств измерений
<a id="p100075"></a>Весы аналитические ВЛР-200 ГОСТ 24104-2001
<a id="p100076"></a>Пробоотборное устройство ПУ-2П                    N 14531-03
                                                  в Государственном реестре
                                                  средств измерений
<a id="p100077"></a>Термометр лабораторный [ГОСТ 28498-90](https://bukva.ai/docs/gost-28498-90)
<a id="p100078"></a>Барометр ГОСТ 23696-79
<a id="p100079"></a>Колбы мерные 2-1000-2; 2-500-2; 2-200-2;
2-100-2; 2-50-2; 2-25-2 ГОСТ 25336-82
<a id="p100080"></a>Автоматическая пипетка-степпер 10 - 5000 мкл,
"TermoLabsystems" - "Ленпипет", с набором
комбитипов объема 1,25 и 5,0 куб. см [ГОСТ 28311-89](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89)
<a id="p100081"></a>Цилиндры мерные 3 - 10 и 3 - 25 куб. см [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100082"></a>Микрошприц МШ-10                                  ТУ 2.833.105


### <a id="p100083"></a>5.2. Вспомогательные устройства


<div align="center">

Насос вакуумный мембранный "ВН-3.0" ГОСТ 15150-69<br>
<a id="p100084"></a>Сушильный шкаф ШСС-80 [ГОСТ 20790-93](https://bukva.ai/docs/gost-20790-93)

</div>

<a id="p100085"></a>Мешалка магнитная ММ-5                            ТУ 25-11.834-80
<a id="p100086"></a>Аналитические аэрозольные фильтры АФА-ХА-20,
площадь поверхности 20 кв. см (производство -
ФГУП В/О "Изотоп")                                ТУ 95-1892-89
<a id="p100087"></a>Фильтродержатели открытые ИРА 20-2
(производство - ФГУП В/О "Изотоп")                ТУ 95-1021-82
<a id="p100088"></a>Колбы конические плоскодонные КП-1-100-14/23 ТС ГОСТ 25336-82
<a id="p100089"></a>Пинцет медицинский ГОСТ 21241-77
<a id="p100090"></a>Колба коническая КН-1-100-29/32                   ТУ 92-891.029-91
<a id="p100091"></a>Холодильник ХШ-1-300-29-14 ГОСТ 25336-82
<a id="p100092"></a>Флаконы из темного стекла с силиконовыми
пробками, тефлоновыми прокладками,
завинчивающимися пробками вместимостью
14 куб. см, "Supelco"
<a id="p100093"></a>Электроплитка с закрытой спиралью ГОСТ 14919-83
<a id="p100094"></a>Воронка делительная ВД-3-100 ГОСТ 25336-82


### <a id="p100095"></a>5.3. Материалы и реактивы


<div align="center">

<a id="p100096"></a>Метилен хлорид [ГОСТ 9968-86](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9968-86)<br>
<a id="p100097"></a>Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

</div>

<a id="p100098"></a>Соляная кислота, осч [ГОСТ 14261-77](https://bukva.ai/docs/gost-14261-77)
<a id="p100099"></a>Натрий сернокислый безводный, чда [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100100"></a>Стандартный образец - диосгенин                   Lot 1272227
(сарсапогенин), "Fluka" (99%)                     Filling code 40906254
<a id="p100101"></a>Гелий, спч (99,999%), марка "55"                  ТУ 2114-001-45905715-02
<a id="p100102"></a>Допускается применение других средств измерения и вспомогательных устройств, метрологические и технические характеристики которых не ниже вышеуказанных.


## 6. <a id="p100103"></a>Требования безопасности


<a id="p100104"></a>6.1. При выполнении анализов необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами ГОСТ 12.04.021-76.
<a id="p100105"></a>6.2. При работе с электроустановками необходимо соблюдать правила электробезопасности по ГОСТ 12.1.019-79 и требования, изложенные в технической документации на использование приборов.
<a id="p100106"></a>6.3. Организация обучения по безопасности труда осуществляется по ГОСТ 12.1.004-91.
<a id="p100107"></a>6.4. Помещение должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.0.004-90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.


## 7. <a id="p100108"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100109"></a>К выполнению измерений и обработке результатов допускают лиц, имеющих высшее инженерное, химическое специальное образование, владеющих методом хромато-масс-спектрометрии, знающих принцип действия, конструкцию и правила эксплуатации используемого оборудования.
<a id="p100110"></a>К выполнению работ по отбору проб и пробоподготовке допускают лиц, имеющих квалификацию техника-химика, обученных методике подготовки проб для выполнения последующего хромато-масс-спектрометрического анализа.


## 8. <a id="p100111"></a>Условия измерений


<a id="p100112"></a>При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:
<a id="p100113"></a>Температура воздуха, °С                            20 +/- 5
<a id="p100114"></a>Атмосферное давление, кПа (мм рт. ст.)             84,0 - 109,7 (630 - 800)
<a id="p100115"></a>Относительная влажность воздуха, %                 не более 80
<a id="p100116"></a>Напряжение в электросети, В                        220 +/- 10
<a id="p100117"></a>Частота переменного тока, Гц                       50 +/- 1.


## 9. <a id="p100118"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100119"></a>Перед проведением измерений проводят следующие работы: подготовка лабораторной посуды, проверка работоспособности хромато-масс-спектрометра, приготовление растворов (стандартного образца и градуировочных), установление градуировочной характеристики, отбор проб.


### <a id="p100120"></a>9.1. Подготовка посуды


<a id="p100121"></a>При выполнении измерений необходимо использовать чистую химическую посуду. Посуду обезжиривают ацетоном, после чего ее многократно ополаскивают дистиллированной водой и высушивают в сушильном шкафу при 120 °С.


### <a id="p100122"></a>9.2. Подготовка хромато-масс-спектрометра


<a id="p100123"></a>Подготовку хромато-масс-спектрометра и системы обработки данных проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора.


### <a id="p100124"></a>9.3. Приготовление растворов


<a id="p100125"></a>9.3.1. Приготовление основного раствора стандартного образца диосгенина от компании "Fluka" ([п. 5.3](#p100095) "Материалы и реактивы") с массовой концентрацией 594,0 мкг/куб. см
<a id="p100126"></a>Навеску диосгенина 59,40 мг, взятую на аналитических весах, переносят в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 куб. см. Навеску растворяют в хлористом метилене, доводя объем раствора до метки. Раствор хранят в колбе не более 7 суток в холодильнике при +4 °С.
<a id="p100127"></a>Абсолютная погрешность концентрации раствора стандартного образца по процедуре приготовления не превышает 0,6 мкг/куб. см (приложение, п. 1 - не приводится).

##### <a id="p100128"></a>9.3.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100129"></a>Градуировочные растворы с массовой концентрацией в диапазоне 5,94 - 237,6 мкг/куб. см готовят разведением основного раствора стандартного образца диосгенина с концентрацией 594,0 мкг/куб. см хлористым метиленом в 100, 40, 20, 10, 5 и 2,5 раза в мерных колбах на 25 куб. см с использованием пипетки-степпера 10 - 5000 куб. мм "TermoLabsystems" - "Ленпипет" (таблица 5).
<a id="p100130"></a>Градуировочные растворы могут храниться в течение 2-х суток при комнатной температуре в стеклянных колбах с притертой пробкой.

<div align="right">

<a id="p100131"></a>Таблица 4

</div>


<div align="center">

<a id="p100132"></a>**РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ**

</div>

**ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ САПОНИНОВ ЮККИ**


| N раствора | Объем основного стандартного раствора диосгенина с массовой концентрацией С = 594,0 мкг/куб. см, куб. см | Концентрация диосгенина без учета погрешности приготовления растворов, мкг/куб. см | Содержание диосгенина в хроматографируемом объеме пробы, мкг |
| --- | --- | --- | --- |
| 1 | 0,000 | 0,00 | 0,000 |
| 2 | 0,250 | 5,94 | 0,006 |
| 3 | 0,625 | 14,85 | 0,014 |
| 4 | 1,250 | 29,70 | 0,029 |
| 5 | 2,500 | 59,40 | 0,059 |
| 6 | 5,000 | 118,80 | 0,119 |
| 7 | 10,000 | 237,60 | 0,238 |



### <a id="p100141"></a>9.4. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100142"></a>9.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика диосгенина (в условных единицах) от его концентрации (мкг/куб. см), строят с использованием градуировочных растворов, приготовленных в соответствии с [таблицей 4](#p100132).
<a id="p100143"></a>Для установления градуировочной характеристики отбирают микрошприцем установленное количество каждого из градуировочных растворов, приготовленных по [п. 9.3.2](#p100128), и вводят в инжекторное устройство хромато-масс-спектрометра.

##### <a id="p100144"></a>9.4.2 Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

<a id="p100145"></a>Температурная программа        80 °С изотерма 2 мин., далее программируемый
                               нагрев до 320 °С со скоростью 20 °С/мин. и
                               изотерма 5 мин. при 320 °С
<a id="p100146"></a>Условия инжекции               инжектор без деления потока, температура
                               инжектора 275 °С
<a id="p100147"></a>Объем вводимой пробы           0,001 куб. см
<a id="p100148"></a>Газ-носитель                   гелий со скоростью 1 куб. см/мин.
<a id="p100149"></a>Время удерживания диосгенина   17,39 мин.
<a id="p100150"></a>Регистрация масс-спектров      в положительных ионах в диапазоне 30 - 600
                               m/z
<a id="p100151"></a>Тип ионизации                  электронный удар, стандартные условия
<a id="p100152"></a>Идентификация веществ          по библиотеке масс-спектров NIST 02
<a id="p100153"></a>Оценка площадей пиков          по полному ионному току.
<a id="p100154"></a>Для установления градуировочной характеристики каждый раствор и холостую пробу хроматографируют не менее 5 раз. Градуировочный график в этом случае строится с учетом усредненных значений площадей пика.
<a id="p100155"></a>9.4.3. Контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляют еженедельно, а также при использовании новых реактивов и растворов. Градуировочная характеристика считается стабильной при выполнении для каждого образца градуировочных растворов следующего условия:

<a id="p100156"></a>              |Х - С   | <= 1,96 х сигма   (гр.) х С    / 100,          (1)
                    гр.                 R           гр.
                                         л

    где:
    Х  -  результат  контрольного измерения массовой концентрации в образце
для градуировки, мкг/куб. см;
    С     -  аттестованное  значение  массовой  концентрации  диосгенина  в
     гр.
образце для градуировки, мкг/куб. см;
    сигма   (гр.)   -  среднеквадратичное   отклонение   внутрилабораторной
         R
          л
прецизионности   измерений,   установленное   при   реализации  методики  в
лаборатории, %.
<a id="p100157"></a>    Допустимо     среднеквадратическое     отклонение    внутрилабораторной
прецизионности измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать
на  основе  выражения:  сигма   (гр.) = 0,84 сигма  (гр.),   с  последующим
                             R                    R
                              л
уточнением  по  мере накопления информации в процессе контроля стабильности
результатов измерений.
<a id="p100158"></a>    Значение  сигма  (гр.) составляет 1,6 - 5,1%  в пределах градуировочной
                   R
характеристики.
<a id="p100159"></a>В случае невыполнения данного условия градуировочная характеристика строится заново.


### <a id="p100160"></a>9.5. Отбор проб воздуха


<a id="p100161"></a>9.5.1. Отбор проб воздуха следует проводить с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и Руководства Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное) "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны", п. 2 контроль соответствия максимальным ПДК.
<a id="p100162"></a>Воздух с объемным расходом 15 куб. дм/мин. аспирируют через фильтры АФА-ХА-20, помещенные в фильтродержатель ИРА 20-2. Для определения нижнего предела массовой концентрации сапонинов Юкки в воздухе рабочей зоны достаточно отобрать 150 куб. дм воздуха. После отбора пробы воздуха фильтр извлекают пинцетом и помещают на дно конической колбы КН-1-100-29/32 объемом 100 куб. см с пришлифованной пробкой.
<a id="p100163"></a>9.5.2. Срок хранения проб - не более 3 суток в защищенном от света месте при 4 +/- 1 °С.


## 10. <a id="p100164"></a>Выполнение измерений


<a id="p100165"></a>10.1. В колбу с фильтром [(п. 9.5.1)](#p100161) приливают 15 куб. см дистиллированной воды. Затем проводят экстракцию вещества с фильтра на магнитной мешалке со скоростью 150 об./мин. в течение 20 мин. Жидкость переносят в коническую колбу КН-1-100-29/32 вместимостью 100 куб. см с обратным холодильником и дважды проводят дополнительную обработку фильтра свежими порциями дистиллированной воды. Три порции дистиллированной воды по 15 куб. см объединяют в конической колбе КН-1-100-29/32 объемом 100 куб. см с обратным холодильником.
<a id="p100166"></a>10.2. Для проведения кислотного гидролиза в коническую колбу КН-1-100-29/32 с обратным холодильником добавляют 5 куб. см соляной кислоты и помещают на электроплитку с закрытой спиралью. Смесь в колбе кипятят с обратным холодильником 4 часа. Затем охлаждают до комнатной температуры и количественно переносят в делительную воронку. Добавляют в воронку 7 куб. см хлористого метилена и энергично встряхивают. После расслоения жидкости в воронке нижний органический слой сливают в мерную колбу на 25 куб. см и повторяют процедуру экстракции еще дважды, объединяя порции хлористого метилена в мерной колбе на 25 куб. см. Доводят объем содержимого колбы до 25 куб. см хлористым метиленом, затем добавляют в колбу 1 г безводного сульфата натрия для осушения экстракта и помещают колбу в темное место на 1 час. Через час содержимое колбы переносится для хранения во флаконы вместимостью 14 куб. см из темного стекла с герметично закрывающимися крышками, снабженными силиконовыми уплотнителями с тефлоновыми прокладками. Флаконы передают в лабораторию для хромато-масс-спектрометрического анализа. Срок хранения проб - не более 7 суток при 4 +/- 1 °С.
<a id="p100167"></a>Хромато-масс-спектрометрический анализ проб проводят в условиях, соответствующих [п. 9.4.2](#p100144).
<a id="p100168"></a>Для оценки общего количества сапогенинов в пробе вычисляется сумма площадей 3-х пиков. По градуировочной характеристике, [п. 9.4](#p100141), находят общее количество сапогенинов.
<a id="p100169"></a>10.3. Для перехода от содержания сапогенинов в пробе к сумме сапонинов в растворе, полученном в [п. 10.1](#p100165), применяется пересчетный коэффициент - К, учитывающий молекулярные массы сапогенинов и сапонинов Юкки и массовое соотношение отдельных сапонинов в экстракте Юкки:

                       __                                  __
              S         S             S          S          S
         0,24М   + 0,66М      + 0,001М   + 0,031М   + 0,068М
              N1        N2/N3         N4         N5         N6/N7/N8
<a id="p100170"></a>     К = -----------------------------------------------------------.   (2)
                       __                                  __
              а         а             а          а          а
         0,24М   + 0,66М      + 0,001М   + 0,031М   + 0,068М
              N1        N2/N3         N4         N5         N6/N7/N8

<a id="p100171"></a>    В   числителе   находится   средняя  молекулярная  масса  сапонинов,  в
знаменателе - средняя молекулярная масса сапогенинов с учетом нормировки по
содержанию сапонинов в пробе.
<a id="p100172"></a> С учетом данных, приведенных в [табл. 1](#p100022), К принимает значение, равное
1,99.

#### <a id="p100173"></a>10.4 Содержание суммы сапонинов Юкки Х    (мг) в растворе, полученном

                                            сап
в [п. 10.1](#p100165), вычисляют по формуле:

                 К х С    х 25   1,99 х С    х 25
                      спг                спг
<a id="p100174"></a>          Х    = ------------- = ---------------- = 0,05 х С   ,        (3)
           сап       1000               1000                спг

    где:
    С      -   концентрация   сапогенинов  в  минерализате,  полученная  по
     спг
градуировочной характеристике, мкг/куб. см;
    1000 - коэффициент пересчета мкг в мг.


## 11. <a id="p100175"></a>Вычисление результатов измерений



#### <a id="p100176"></a>11.1 Концентрацию суммы сапонинов Юкки "С (мг/куб. м)" в воздухе вычисляют по формуле:


                                 Х    х 1000
                                  сап
<a id="p100177"></a>                             С = -----------,                           (4)
                                     V
                                      20

    где:
 Х - содержание суммы сапонинов Юкки из [формулы (1)](#p100156), мг;
     сап
    1000 - коэффициент пересчета куб. дм в куб. м;
    V    - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным
     20
условиям, куб. дм (см. прилож. 1 - не приводится).

#### <a id="p100178"></a>11.2 За  результат  измерения  массовой концентрации суммы  сапонинов

                               _
Юкки  в  воздухе  рабочей зоны С принимают среднее арифметическое  значение
"n"   (двух)   результатов   измерений  С   и  С ,  полученных  в  условиях
                                         1      2
повторяемости:

                                   С  + С
                               _    1    2
<a id="p100179"></a>                               С = -------,                             (5)
                                      2

<a id="p100180"></a>    для которых выполняется следующее условие:

<a id="p100181"></a>                      |С  - С | <= r (С  + С ) / 200,                   (6)
                        1    2         1    2

 где r - предел повторяемости, значения которого приведены в [табл. 3](#p100062).
<a id="p100182"></a> При невыполнении [условия (6)](#p100181) необходимо дополнительно получить еще два
результата измерений.
<a id="p100183"></a>    Если  при этом размах (С    - С   ) четырех результатов измерений равен
                            max    min
или  меньше  по  значению  критического диапазона для уровня значимости 95%
CR       ,  то  в  качестве  окончательного  результата  принимают  среднее
  0,95(4)
арифметическое   значение   результатов   четырех  измерений.  Коэффициенты
критического диапазона f(n) представлены в [табл. 3](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100309) ГОСТ Р ИСО 5725-2002,
часть 6 и предназначены для использования в расчетах критического диапазона
согласно равенству:

<a id="p100184"></a>              CR        = f(n) сигма  (для n = 4, f(n) = 3,6).          (7)
                0,95(n)             r

<a id="p100185"></a>Если диапазон результатов четырех измерений больше критического диапазона для n = 4, то в качестве окончательного результата должна фиксироваться медиана результатов четырех измерений.


## 12. <a id="p100186"></a>Оформление результатов измерений


<a id="p100187"></a>Результаты измерений массовой концентрации суммы сапонинов Юкки оформляют протоколом в виде:

<a id="p100188"></a>                        С +/- 0,01 х дельта х С  ,                      (8)
                                               ср

    где:
    С   - среднее арифметическое значение результатов n (двух) определений,
     ср
признанных приемлемыми [(п. 11.2)](#p100178), мг/куб. м;
    дельта   -  границы  относительной  погрешности,  %,  значение  которой
приведено в [таблице 3](#p100062).
<a id="p100189"></a>В случае если содержание массовой концентрации суммы сапонинов Юкки в воздухе рабочей зоны ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, отчет представляют в форме "массовая концентрация суммы сапонинов Юкки в воздухе рабочей зоны ниже 2,0 мг/куб. м (выше 34,0 мг/куб. м)".


## 13. <a id="p100190"></a>Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории


<a id="p100191"></a>Периодичность контроля стабильности результатов выполненных измерений регламентируется в Руководстве по качеству лаборатории.
<a id="p100192"></a>Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002), используя метод контроля стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по [п. 6.2.2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100341) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и показателя правильности по [п. 6.2.4](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002#p100518) ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта.
<a id="p100193"></a>Рекомендуется устанавливать контрольный период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.
<a id="p100194"></a>При неудовлетворительных результатах контроля, например, превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.


## 14. <a id="p100195"></a>Нормы затрат времени на анализ


<a id="p100196"></a>Для проведения серии анализов из 5 проб воздуха с учетом дублирования каждой пробы согласно [п. 11.2](#p100178) при условии отсутствия этапа хранения проб и при технической возможности проведения параллельной пробоподготовки 10-ти проб ([п. 10.1](#p100165) и [п. 10.2](#p100166)) требуется 14 ч.
<a id="p100197"></a>Методические указания разработаны: Федеральное государственное учреждение науки "Научно-исследовательский центр токсикологии и гигиенической регламентации биопрепаратов" (ФГУН НИЦ ТБП ФМБА) и ЗАО "Научный Центр Экологической токсикологии".



<a id="p100198"></a>

---