--- title: "\"МУК 4.1.2209-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерения концентраций бентазона в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.2209-07" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2209-07" --- ## "МУК 4.1.2209-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерения концентраций бентазона в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания" # "МУК 4.1.2209-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерения концентраций бентазона в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания" (утв. Роспотребнадзором 25.05.2007) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32). > Документ [введен](#p100002) в действие с 15 августа 2007 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
25 мая 2007 года #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ БЕНТАЗОНА В АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ** **НАСЕЛЕННЫХ МЕСТ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ** **ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2209-07**
Дата введения
15 августа 2007 года 1. Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. 2. Рекомендованы к утверждению комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 1 от 29.03.2007). 3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 25 мая 2007 г. 4. Введены впервые. Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерения массовой концентрации бентазона в атмосферном воздухе в диапазоне 0,005 - 0,1 мг/куб. м. Бентазон - антидот в составе препарата КОРСАР, ВРК (480 г/л), производитель ЗАО "Фирма "Август", Россия. 3-изопропил-1Н-2,1,3-бензотиадиазин-4(3Н)-он, 2,2-диоксид (IUPAC). Структурная формула (не приводится). C H N O S. 10 12 2 3 Мол. масса 240,3. Бесцветное кристаллическое вещество. Температура плавления - 139,4 - 141 °С. Плотность при 20 °С - 1,41. Давление паров при 25 °С: 0,17 мПа. Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм, 20 °С): ацетон - 1387, метанол - 1061, этилацетат - 582, дихлорметан - 206, н-гептан - 0,5 х -3 10 . Растворимость в воде при 20 °С - 570 мг/куб. дм (рН 7). Растворимость 3 в воде натриевой соли бентазона - 2,3 х 10 г/куб. дм. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log P = 0,77 (рН 5), -0,46 (рН 7), ow -0,55 (рН 9). Устойчив к гидролизу в кислой и щелочной средах. Разрушается на свету. рКа 3,3 (24 °С). Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль и пары. Краткая токсикологическая характеристика: Острая оральная токсичность (LD ) для крыс - более 1000 мг/кг, собак 50 - более 500 мг/кг, кроликов - 750 мг/кг, кошек - 500 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ) для крыс - более 2500 мг/кг; острая 50 ингаляционная токсичность (LC ) для крыс - более 5,1 мг/куб. дм (4 часа). 50 Область применения препарата Бентазон - селективный контактный гербицид класса бензотиадиазинона. Препарат КОРСАР, ВРК (480 г/л), д.в. бентазон рекомендован в качестве гербицида для борьбы с однолетними двудольными сорняками в посевах зерновых, бобовых и других культур. ОБУВ в атмосферном воздухе населенных мест - 0,01 мг/куб. м. 1. Погрешность измерений Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25% при доверительной вероятности 0,95. 2. Метод измерений Измерения концентраций бентазона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Концентрирование бентазона из воздуха осуществляют на последовательно соединенные фильтр "синяя лента" и фильтр из пенополиуретана, экстракцию с фильтров проводят смесью ацетон - вода. Метод включает определение бентазона, присутствующего в воздухе в свободном виде и в виде солей. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 91,5%. Определению не мешают компоненты препаративной формы.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
реактивы и материалы #### 3.1 Средства измерений Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым Номер Госреестра 15945-97 детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США) Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО "ОПТЭК", [ГОСТ Р 51945-2002](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51945-2002) г. Санкт-Петербург) Номер Госреестра 18860-05 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена ТУ 215-73Е деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см Пробирки градуированные вместимостью 5 или 10 [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) куб. см
Цилиндры мерные 2-го класса точности [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
вместимостью 500 и 1000 куб. см Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. #### 3.2 Реактивы Бентазон, аналитический стандарт с содержанием ГСО 7713-99 действующего вещества 99,8% (ф. "Riedel-de Haen") Ацетон, осч ГОСТ 2306 Ацетонитрил для хроматографии, хч ТУ-6-09-4326-76 Вода бидистиллированная, деионизованная или ГОСТ 6709 перегнанная над KMnO 4 Кислота орто-фосфорная, ч., 85% ГОСТ 6652 Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией. #### 3.3 Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с ТУ 64-1-2851-78 Бумажные фильтры "синяя лента" обеззоленные ТУ 6-09-2678-77 Воронка Бюхнера ГОСТ 9147 Воронки конусные диаметром 40 - 45 мм ГОСТ 25336 Груша резиновая Колба Бунзена ГОСТ 25336 Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 150 куб. [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) см Ломтерезка механическая бытовая Мембранные фильтры капроновые диаметром 47 мм Набор для фильтрации растворителей через мембрану Насос водоструйный ГОСТ 25336 Пинцет Пенополиуретан ППУ ПЕНОР-301 ТУ 2254-018-329-57768-2002 Пробирки центрифужные ГОСТ 25336 Стаканы химические с носиком вместимостью 150 ГОСТ 25336 куб. см Стекловата Стеклянные палочки Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50 Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария Установка для перегонки растворителей Фильтродержатель Холодильник водяной обратный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93) Хроматографическая колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18 зернением 8 мкм Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 - 100 куб. мм Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. 4. Требования безопасности 4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф. 4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004. 5. Требования к квалификации операторов К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе. К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории. 6. Условия измерений При выполнении измерений соблюдают следующие условия: - процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%; - выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору. 7. Подготовка к выполнению измерений Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров для отбора проб, отбор проб. #### 7.1 Очистка растворителей ##### 7.1.1 Ацетон Ацетон перегоняют над небольшим количеством KMnO и прокаленным 4 карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50. ##### 7.1.2 Ацетонитрил Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия. #### 7.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 400 куб. см ацетонитрила, добавляют 600 куб. см деионизованной воды, вносят 0,5 куб. см орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют. #### 7.3 Кондиционирование хроматографической колонки Промывают колонку подвижной фазой [(п. 7.2)](#p100096) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1,0 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии. #### 7.4 Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения ##### 7.4.1 Исходный раствор бентазона для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см) В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г бентазона, растворяют в 40 - 50 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 3-х месяцев. ##### 7.4.2 Раствор N 1 бентазона для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/куб. см) В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора бентазона с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.4.1)](#p100101), разбавляют ацетонитрилом до метки. Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца. Этот раствор бентазона используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено". 7.4.3. Рабочие растворы N 2 - 5 бентазона для градуировки и внесения (концентрация 0,05 - 1 мкг/куб. см) В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 бентазона с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.4.2)](#p100104), доводят до метки подвижной фазой (приготовленной по [п. 7.2](#p100096)), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией бентазона 0,05; 0,1; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно. Растворы хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 2-х недель. #### 7.5 Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от концентрации бентазона в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки. В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 7.5.1](#p100115). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика действующего вещества. Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более чем на 10% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки. ##### 7.5.1 Условия хроматографирования Измерения выполняют при следующих режимных параметрах: Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором. Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18 зернением 8 мкм. Температура колонки: комнатная. Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - орто-фосфорная кислота (40:60:0,05, по объему). Скорость потока элюента: 1,0 куб. см/мин. Рабочая длина волны: 214 нм или 230 нм. Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу. Объем вводимой пробы: 20 куб. мм. Ориентировочное время выхода бентазона: 9,9 - 10,2 мин. Линейный диапазон детектирования: 1 - 20 нг. #### 7.6 Подготовка фильтров для отбора проб воздуха Из пенополиуретана с помощью автоматической ломтерезки нарезают фильтры толщиной 2 - 2,5 мм, диаметром 48 - 50 мм, соответствующим внутреннему диаметру фильтродержателя. Диаметр бумажного фильтра "синяя лента" также должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя. Фильтры из пенополиуретана и бумаги последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, ацетоном, затем ацетонитрилом порциями 25 - 30 куб. см, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре. 8. Отбор и хранение проб воздуха Отбор проб проводят в соответствии с требованиями [ГОСТ 17.2.4.02-81](https://bukva.ai/docs/gost-17-2-4-02-81) "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест". Воздух с объемным расходом 4 куб. дм/мин. аспирируют через пробоотборную систему - последовательно соединенные бумажный фильтр "синяя лента" и фильтр из пенополиуретана, помещенные в фильтродержатель. Для измерения концентрации бентазона на уровне 0,8 ОБУВ для атмосферного воздуха необходимо отобрать 12,5 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре +4 - 6 °С - 20 дней. 9. Выполнение измерений Экспонированные фильтры ("синяя лента" + пенополиуретан) переносят в химический стакан вместимостью 150 куб. см, заливают 30 куб. см смесью ацетон - вода (9:1, по объему), помещают на встряхиватель на 15 минут. Растворитель сливают, фильтры еще дважды обрабатывают новыми порциями смеси ацетон - вода объемом 20 куб. см, выдерживая на встряхивателе по 5 минут. Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы (приготовленной по [п. 7.2](#p100096)) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в [п. 7.5.1](#p100115). Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию бентазона в хроматографируемом растворе. Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз). Перед анализом опытных образцов проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированных фильтров. 10. Обработка результатов анализа Массовую концентрацию бентазона в пробе атмосферного воздуха Х, мг/куб. м, рассчитывают по формуле: Х = C х W / V , t где: С - концентрация бентазона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/куб. см; W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см; V - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к t нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °С), куб. дм. V = 0,357 х Р х ut / (273 + Т), t где: Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град. С, Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст. u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин., t - длительность отбора пробы, мин. _ За результат анализа (Х) принимается среднее арифметическое результатов _ двух параллельных определений Х и Х (Х = (Х + Х ) / 2), расхождение 1 2 1 2 между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d): |Х - Х | <= d; 1 2 _ d = d х Х / 100, мг/куб. м, отн. где: d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м; d - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 12%). отн. Примечание: Идентификация и расчет концентрации бентазона в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему. 11. Оформление результатов измерений Результат количественного анализа представляют в виде: _ - результат анализа Х в мг/куб. м, характеристика погрешности дельта, % ( +/- 25%), Р = 0,95 или: _ Х +/- ДЕЛЬТА, мг/куб. м, Р = 0,95, где ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность. _ дельта х Х ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м. 100 Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность. Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание бентазона в пробе атмосферного воздуха - менее 0,005 мг/м" <*>. --- <*> 0,005 мг/куб. м - предел обнаружения при отборе 20 куб. дм атмосферного воздуха. 12. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений". 13. Разработчики ФГУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора". ---