---
title: "\"МУК 4.1.2204-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Обнаружение, идентификация и количественное определение охратоксина A в продовольственном сырье и пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2204-07"
issuer: "Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2204-07"
---

## "МУК 4.1.2204-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Обнаружение, идентификация и количественное определение охратоксина A в продовольственном сырье и пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2204-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Обнаружение, идентификация и количественное определение охратоксина A в продовольственном сырье и пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 20.05.2007)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Евразийского экономического союза "О безопасности алкогольной продукции" (ТР ЕАЭС 047/2018) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 17.05.2022 N 80).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ [введен](#p100005) в действие с 01.08.2007.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной службы<br>
по надзору в сфере защиты прав<br>
потребителей и благополучия человека,<br>
Главный государственный санитарный<br>
врач Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

20 мая 2007 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ОБНАРУЖЕНИЕ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ**
**ОХРАТОКСИНА A В ПРОДОВОЛЬСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2204-07**

<div align="right">

<a id="p100005"></a>Дата введения

</div>

1 августа 2007 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны: ГУ НИИ питания РАМН (академик РАМН, профессор В.А. Тутельян, д.х.н. К.И. Эллер, к.м.н. И.В. Аксенов).
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 20 мая 2007 г. и введены в действие с 1 августа 2007 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.

<div align="center">

<a id="p100010"></a>**1. НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ**

</div>


<a id="p100011"></a>Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) определения охратоксина A в продовольственном сырье и пищевых продуктах и предназначены для проведения лабораторных исследований учреждениями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, в организациях, осуществляющих контроль безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов.

<div align="center">

<a id="p100012"></a>**2. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ**

</div>


<a id="p100013"></a>Охратоксин A - микотоксин, продуцируемый микроскопическими грибами родов Aspergillus и Penicillium. Основными продуцентами охратоксина A являются A. ochraceus и P. verrucosum.
<a id="p100014"></a>Охратоксин A ( $\text{С}_{20}H_{18}ClNO_{6}$ ; молекулярная масса 403,8), представляющий собой по химической структуре 5-хлоризокумарин, связанный пептидной связью с L-фенилаланином, хорошо растворим в полярных органических растворителях и водном растворе гидрокарбоната натрия, малорастворим в воде. При фотометрировании раствора охратоксина A в толуол-уксусной кислоте (99:1) максимум поглощения наблюдается при длине волны, равной 333 нм, при этом относительный молярный коэффициент поглощения равен 544 м2/моль.
<a id="p100015"></a>В экспериментах in vivo показано нефротоксическое, канцерогенное, тератогенное, эмбриотоксическое, нейротоксическое и иммунотоксическое действие охратоксина A. Международное агентство по изучению рака классифицирует охратоксин A как соединение, потенциально канцерогенное для человека (Группа 2B). Комитетом экспертов ФАО/ВОЗ по пищевым добавкам и контаминантам установлена величина условно переносимого недельного поступления охратоксина A с пищей - 100 нг/кг массы тела.
<a id="p100016"></a>Охратоксин A выявляется повсеместно в качестве природного загрязнителя продовольственного и кормового зерна, кофе и какао-бобов, винограда и специй.

<div align="center">

<a id="p100017"></a>**3. ПРИНЦИП МЕТОДА**

</div>


<a id="p100018"></a>Метод включает следующие этапы:
- <a id="p100019"></a>экстракция охратоксина A из пробы смесью ацетонитрил-вода (60:40% об.);
- <a id="p100020"></a>очистка экстракта на иммуноаффинной колонке;
- <a id="p100021"></a>определение охратоксина A с помощью ВЭЖХ с флуориметрическим детектированием при длине волны возбуждения $(\lambda_{\text{возб}.})$ 333 нм и длине волны эмиссии $(\lambda_{\text{эмис}.})$ 466 нм.
<a id="p100022"></a>Диапазон определяемых концентраций: 0,0001 - 0,016 мг/кг.
<a id="p100023"></a>Предел количественного определения: 0,0005 мг/кг.

<a id="p100024"></a>Таблица

<div align="right">

<a id="p100025"></a>Метрологические характеристики метода, установленные

</div>

для разных концентраций охратоксина A в пробе


<table>
<colgroup><col width="55%"><col width="22%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100026"></a>Метрологические характеристики</td><td colspan="2"><a id="p100027"></a>Концентрация охратоксина A в пробе, мг/кг</td></tr>
<tr><td><a id="p100028"></a>0,0001 - 0,001</td><td><a id="p100029"></a>&gt; 0,001</td></tr>
<tr><td><a id="p100030"></a>Границы относительной погрешности (показатель точности) $( \pm \delta),%$ , P = 0,95</td><td><a id="p100031"></a>+/- 30,72</td><td><a id="p100032"></a>+/- 10,92</td></tr>
<tr><td><a id="p100033"></a>Стандартное отклонение повторяемости $(\sigma_{r}),%$</td><td><a id="p100034"></a>24,56</td><td><a id="p100035"></a>8,78</td></tr>
<tr><td><a id="p100036"></a>Предел повторяемости (r), %</td><td><a id="p100037"></a>68,77</td><td><a id="p100038"></a>24,58</td></tr>
<tr><td><a id="p100039"></a>Полнота извлечения веществ, %</td><td><a id="p100040"></a>88,80</td><td><a id="p100041"></a>86,28</td></tr>
</table>


<div align="center">

<a id="p100042"></a>**4. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, ПОСУДА,**<br>
**РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ**

</div>



#### <a id="p100043"></a>4.1 Средства измерений



| <a id="p100044"></a>Система ВЭЖХ, состоящая из насоса высокого давления, инжектора типа Rheodyne-7125 с объемом петли-дозатора 50 мкл, спектрофлуориметрического детектора, обеспечивающего возбуждение флуоресценции в спектральной области 330 - 340 нм и регистрацию эмиссии флуоресценции при длине волны 466 нм и системы для сбора и обработки данных типа |  |
| --- | --- |
| <a id="p100045"></a>Мультихром (Амперсенд, Россия) или аналогичной, хроматографической колонки (250 x 4,6 мм), заполненной силикагелем, химически связанным с октадецилсиланом с размером частиц 5 мкм (например, Kromasil C18 (MetaChem Texnologies, США) |  |
| <a id="p100046"></a>Весы аналитические |  |
| <a id="p100047"></a>Микрошприц на 100 мкл для ВЭЖХ |  |
| <a id="p100048"></a>Дозатор пипеточный, 1 - 5 см3 |  |
| <a id="p100049"></a>Дозатор пипеточный, 100 - 1000 мкл |  |
| <a id="p100050"></a>Дозатор пипеточный, 10 - 100 мкл |  |
| <a id="p100051"></a>Цилиндры мерные с притертой пробкой вместимостью 100 см3 тип 2-100 и 2-250 | <a id="p100052"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |



#### <a id="p100053"></a>4.2 Вспомогательное оборудование



| <a id="p100054"></a>Спектрофотометр |  |
| --- | --- |
| <a id="p100055"></a>Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С или аналогичный | <a id="p100056"></a>ТУ 64-1-2451 |
| <a id="p100057"></a>Ротационный испаритель ИР-1М с ловушкой или аналогичный | <a id="p100058"></a>ТУ 25-11917 |
| <a id="p100059"></a>Электрошкаф сушильный лабораторный с погрешностью поддержания температуры +/- 2,5 в интервале от 50 до 350 °C | <a id="p100060"></a>ТУ 16-531.639 |
| <a id="p100061"></a>Холодильник бытовой | <a id="p100062"></a>ГОСТ 16317 |
| <a id="p100063"></a>Мельница лабораторная электрическая ЭМ-3А или аналогичная | <a id="p100064"></a>ТУ 46-22-236-79 |
| <a id="p100065"></a>pH-метр |  |
| <a id="p100066"></a>Магнитная мешалка типа ММ 5 с перемешивающим стержнем | <a id="p100067"></a>ТУ 25-11.834-80 |
| <a id="p100068"></a>Колбы плоскодонные конические на 250 см3 с НШ 29, тип КнКШ 250-29/32 | <a id="p100069"></a>ГОСТ 10394-74 |
| <a id="p100070"></a>Флаконы стеклянные завинчивающиеся из темного стекла (вайл), объемом 7 см3 |  |
| <a id="p100071"></a>Колбы мерные, вместимостью 100, 500, 1000 см3 тип 2-100-2, 2-500-2 | <a id="p100072"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) |
| <a id="p100073"></a>Воронки лабораторные | <a id="p100074"></a>ГОСТ 25336 |
| <a id="p100075"></a>Колбы грушевидные на 10 см3 с НШ 14,5, тип ГрКШ-10-14/23 | <a id="p100076"></a>ГОСТ 10394-72 |



#### <a id="p100077"></a>4.3 Реактивы и материалы



| <a id="p100078"></a>Стандарт охратоксина A, фирма "Sigma", кат. N О-1877 |  |
| --- | --- |
| <a id="p100079"></a>Фильтры обеззоленные "синяя лента" | <a id="p100080"></a>ТУ 6-09-1678 |
| <a id="p100081"></a>Натрий фосфорнокислый двузамещенный,12-водный, ч.д.а. | <a id="p100082"></a>[ГОСТ 4172-76](https://bukva.ai/docs/gost-4172-76) |
| <a id="p100083"></a>Натрий фосфорнокислый однозамещенный, 2-водный, ч.д.а. | <a id="p100084"></a>[ГОСТ 245-76](https://bukva.ai/docs/gost-245-76) |
| <a id="p100085"></a>Натрий хлорид, х.ч. | <a id="p100086"></a>ГОСТ 4233-77 |
| <a id="p100087"></a>Ацетонитрил, ос.ч., сорт 0 |  |
| <a id="p100088"></a>Метанол, ос.ч. | <a id="p100089"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77) |
| <a id="p100090"></a>Кислота фосфорная, ос.ч. | <a id="p100091"></a>ТУ 2612-014-00203677-97 |
| <a id="p100092"></a>Кислота уксусная ледяная, х.ч. | <a id="p100093"></a>ГОСТ 61-75 |
| <a id="p100094"></a>Толуол, ч.д.а. | <a id="p100095"></a>[ГОСТ 5789-78](https://bukva.ai/docs/gost-5789-78) |
| <a id="p100096"></a>Иммуноаффинные колонки Ochraprep (R-Biopharm, Великобритания) |  |


<div align="center">

<a id="p100097"></a>**5. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ**

</div>



#### <a id="p100098"></a>5.1 Приготовление стандартных растворов охратоксина A


<a id="p100099"></a>Для приготовления стандартного раствора хранения (концентрация охратоксина A - 10 нг/мкл) навеску кристаллического охратоксина A массой 5 мг помещают в мерную колбу объемом 500 см3, приливают 50 см3 смеси толуол - уксусная кислота (98:2% об.), тщательно перемешивают до полного растворения вещества и доводят той же смесью растворителей до метки. Для установления точной концентрации раствора хранения измеряют его оптическую плотность при длине волны 333 нм $(\text{Д}_{333})$ . Концентрацию раствора вычисляют по формуле:

<a id="p100100"></a> $\text{с} = \frac{\text{Д}_{333} \cdot 403,8 \cdot 100}{544} ,\text{нг}/\text{мкл}$ 

<a id="p100101"></a>Далее 5 см3 стандартного раствора охратоксина A с концентрацией 10 нг/мкл разбавляют смесью толуол - уксусная кислота (98:2% об.) до объема 100 см3, получая рабочий раствор с концентрацией 0,5 нг/мкл.
<a id="p100102"></a>Для приготовления рабочих растворов охратоксина A с концентрацией 0,005; 0,05 и 0,1 нг/мкл отбирают соответственно 50, 500 и 1000 мкл раствора с концентрацией 0,5 нг/мкл, упаривают досуха и растворяют в 5 см3 подвижной фазы.
<a id="p100103"></a>Раствор хранения охратоксина A содержат в стеклянной посуде с притертой пробкой в темном прохладном месте (при температуре около 0 °C) до одного года и используют для приготовления рабочих стандартных растворов. Рабочие стандартные растворы хранят в вайлах из темного стекла в темном прохладном месте (при температуре около 0 °C) в течение 1 месяца.
<a id="p100104"></a>Перед использованием рабочих стандартных растворов их следует довести до комнатной температуры и только после этого следует открывать пробки.


#### <a id="p100105"></a>5.2 Приготовление фосфатного буферного раствора, pH = 7,4


<a id="p100106"></a>Навеску натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного массой 1,15 г, навеску натрия однозамещенного 2-водного массой 0,124 г и навеску натрия хлорида массой 1,74 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют 10 - 20 см3 дистиллированной воды. Перемешивают и доводят объем раствора в колбе до метки. Срок хранения - 1 месяц в холодильнике.


#### <a id="p100107"></a>5.3 Приготовление смесей растворителей


<a id="p100108"></a>Толуол-уксусная кислота (98:2% об.).
<a id="p100109"></a>В мерную колбу на 1000 см3 вносят 20 см3 уксусной кислоты и, перемешивая, доводят толуолом до метки. Срок хранения - 1 месяц в темном прохладном месте.
<a id="p100110"></a>Ацетонитрил - вода (60:40% об.).
<a id="p100111"></a>В мерную колбу на 1000 см3 вносят 600 см3 ацетонитрила и, перемешивая, доводят водой до метки. Срок хранения - 1 месяц в темном прохладном месте.

<div align="center">

<a id="p100112"></a>Ацетонитрил - вода (60:40% об.; pH = 3,0).

</div>

<a id="p100113"></a>В мерную колбу на 1000 см3 вносят 600 см3 ацетонитрила и, перемешивая, доводят бидистиллированной водой до метки. Внесением фосфорной кислоты подводят pH смеси до величины, равной 3,0. Срок хранения - 1 месяц в темном прохладном месте.
<a id="p100114"></a>Метанол-уксусная кислота (98:2% об.).
<a id="p100115"></a>В мерную колбу на 1000 см3 вносят 20 см3 уксусной кислоты и, перемешивая, доводят метанолом до метки. Срок хранения - 1 месяц в темном прохладном месте.

<div align="center">

<a id="p100116"></a>**6. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ ДЛЯ АНАЛИЗА**

</div>



#### <a id="p100117"></a>6.1 Отбор проб


<a id="p100118"></a>Для учета специфики отбора проб отдельных видов продуктов следует руководствоваться действующей нормативно-технической документацией:
- <a id="p100119"></a>"Зерно. Правила приемки и методы отбора проб" [ГОСТ 13586.3-83](https://bukva.ai/docs/gost-13586-3-83);
- <a id="p100120"></a>"Крупа. Правила приемки и методы отбора проб" [ГОСТ 26312.1-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26312-1-84);
- <a id="p100121"></a>"Мука и отруби. Приемка и методы отбора проб" [ГОСТ 27668-88](https://bukva.ai/docs/gost-27668-88);
- <a id="p100122"></a>"Продукты пищевые консервированные. Отбор проб и подготовка их к испытанию" [ГОСТ 8756.0-70](https://bukva.ai/docs/gost-8756-0-70).
<a id="p100123"></a>Пробы для анализа, представительные по концентрации микотоксинов для всей партии, следует отбирать из предварительно гомогенизированного среднего (исходного) образца массой 2 кг.


#### <a id="p100124"></a>6.2 Подготовка проб для анализа


<a id="p100125"></a>Отобранные пробы измельчают в течение 1 - 2 мин в лабораторной мельнице. При этом используют две параллельные пробы.

##### <a id="p100126"></a>6.2.1 Экстракция

<a id="p100127"></a>Навеску 25 г измельченной пробы помещают в плоскодонную коническую колбу на 250 см3, добавляют 100 см3 смеси ацетонитрил-вода (60:40% об.). Экстрагируют на аппарате для встряхивания проб в течение 30 мин. Полученную смесь фильтруют через бумажный складчатый фильтр "синяя лента". Отбирают 10 см3 фильтрата и добавляют 90 см3 фосфатного буферного раствора, pH = 7,4.

##### <a id="p100128"></a>6.2.2 Очистка экстракта

<a id="p100129"></a>На иммуноаффинную колонку наносят 100 мл полученной смеси со скоростью 1 - 2 капли в секунду, промывают 20 см3 фосфатного буферного раствора, pH = 7,4. Охратоксин A элюируют 3 см3 смеси метанол-уксусная кислота (98:2% об.).

<div align="center">

<a id="p100130"></a>**7. ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ**

</div>



#### <a id="p100131"></a>7.1 Приготовление тестового образца


<a id="p100132"></a>Элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 400 мкл подвижной фазы (раствор А).


#### <a id="p100133"></a>7.2 Условия хроматографирования


<a id="p100134"></a>Условия ВЭЖХ: подвижная фаза - ацетонитрил - вода (60:40% об.; pH = 3,0); скорость подвижной фазы - 1,5 см3/мин.
<a id="p100135"></a>Флуориметрический детектор устанавливают на длину волны возбуждающего излучения 333 нм, на линии эмиссии устанавливают эмиссионный фильтр с полосой пропускания 466 нм.
<a id="p100136"></a>Для анализа проб в инжектор хроматографа вводят с помощью микрошприца 50 мкл тестового образца (раствора А). При наличии пика, совпадающего по времени удерживания с охратоксином A, рассчитывают массу охратоксина A во вколе с помощью градуировочного графика.

<a id="p100137"></a>**8. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЯ**


#### <a id="p100138"></a>8.1 Построение градуировочной зависимости


<a id="p100139"></a>Для построения градуировочного графика проводят хроматографический анализ серии рабочих растворов стандартов. В инжектор с помощью микрошприца вводят 50 мкл рабочего раствора стандарта с концентрацией 0,005 нг/мкл, что соответствует 0,25 нг охратоксина A. Подобное делается для других стандартных растворов с концентрациями 0,05 и 0,10 нг/мкл, что в свою очередь соответствует 2,5 и 5,0 нг охратоксина A во вколе. В указанных условиях время удерживания находится для охратоксина A в диапазоне от 4 до 5 мин. На основании полученных данных строят градуировочный график (зависимость площади хроматографического пика от массы охратоксина A во вколе).


#### <a id="p100140"></a>8.2 Оформление результатов


<div align="center">

<a id="p100141"></a>Расчет концентрации охратоксина A в пробе проводится по формуле:

</div>


<a id="p100142"></a> $\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})} = \frac{m \cdot V_{1} \cdot V_{3}}{M \cdot V_{2} \cdot V_{4} \cdot 1000} ,$ где

<a id="p100143"></a> $\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})}$ - концентрация охратоксина A в пробе, мг/кг;

<div align="center">

<a id="p100144"></a>M - масса навески для анализа, г (25,0);

</div>

<a id="p100145"></a>m - масса охратоксина A, соответствующая введенному в хроматограф объему раствора А, нг;
<a id="p100146"></a> $V_{1}$ - объем раствора для экстракции, см3 (100);
<a id="p100147"></a> $V_{2}$ - объем экстракта, нанесенный на ИАК, см3 (10);

<div align="center">

<a id="p100148"></a> $V_{3}$ - общий объем раствора А, см3 (0,4);<br>
<a id="p100149"></a> $V_{4}$ - объем раствора А, введенный в хроматограф, см3 (0,05).

</div>

<a id="p100150"></a>При высоких уровнях загрязнения охратоксином A пробы необходимо увеличить объем раствора А $(V_{3})$ с внесением соответствующих изменений в формулу.
<a id="p100151"></a>За окончательный результат испытаний принимается среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений:

<a id="p100152"></a> $\overline{X} = (\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})1} + \text{С}_{(\text{охр}.\text{А})2})/2,\text{мг}/\text{кг}$ 

<a id="p100153"></a>Результат анализа представляют в виде (при вероятности P = 0,95):

<a id="p100154"></a> $(\overline{X} \pm \Delta),\text{мг}/\text{кг},$ где

<div align="center">

<a id="p100155"></a> $\Delta$ - граница абсолютной погрешности:

</div>


<a id="p100156"></a> $\Delta = \delta \cdot \overline{X}/100,\text{мг}/\text{кг}$ 

<a id="p100157"></a> $\delta$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности), % [(табл. 1)](#p100025).
<a id="p100158"></a>Если содержание охратоксина A в пробе менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100159"></a>"содержание охратоксина A в пробе зерна менее 0,0001 мг/кг" <*>

<a id="p100160"></a>

---

<a id="p100161"></a><*> 0,0001 мг/кг - предел обнаружения.


#### <a id="p100162"></a>8.3 Проверка приемлемости результатов

параллельных определений

<a id="p100163"></a>Допустимое расхождение между параллельными измерениями (R) определяют на основании предела повторяемости (r) [(табл. 1)](#p100025):

<a id="p100164"></a> $R = 0,01(r,\%) \cdot \overline{X},\text{мг}/\text{кг}$ 

<div align="center">

<a id="p100165"></a>Если расхождение между параллельными определениями не превышает допустимого:

</div>


<a id="p100166"></a> $|\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})1} - \text{С}_{(\text{охр}.\text{А})2}| \leq R,$ 

<a id="p100167"></a>то среднее арифметическое принимают за результат анализа.
<a id="p100168"></a>При превышении норматива R следует повторить измерения, используя резервные пробы.

<div align="center">

<a id="p100169"></a>**9. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ**

</div>


<a id="p100170"></a>Периодичность контроля погрешности измерений зависит от количества рабочих измерений за контролируемый период и определяется планами контроля.
<a id="p100171"></a>Образцами контроля являются рабочие пробы продовольственного сырья и пищевых продуктов. Отбирают пробу и разделяют ее на 2 равные части. Одну из них оставляют без изменений, а к другой добавляют такое количество раствора стандарта охратоксина A, чтобы его массовая доля в пробе по сравнению с исходным значением увеличилась на 50 - 100%. Добавка должна вводиться в пробу перед началом пробоподготовки.
<a id="p100172"></a>Обе пробы анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результаты анализа исходной пробы $(\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})})$ и пробы с добавкой $(\text{С}(\prime_{\text{охр}.\text{А}}))$ . Определение проводят в одинаковых условиях, а именно: анализ проводит одни аналитик, с использованием одного набора мерной посуды, реактивов, растворов и т.д.
<a id="p100173"></a>Алгоритм проведения оперативного контроля погрешности с использованием метода добавок состоит в сравнении результата контрольного определения, равного разности между результатом контрольного измерения пробы с добавкой $(\text{С}(\prime_{\text{охр}.\text{А}}))$ , пробы без добавки $(\text{С}_{(\text{охр}.\text{А})})$ и величиной добавки $(\text{С}_{\text{доб}.(\text{охр}.\text{А})})$ с нормативом оперативного контроля (K). Решение об удовлетворительной погрешности принимается при выполнении следующего условия (при P = 0,95):

<a id="p100174"></a> $|\text{С}(\prime_{\text{охр}.\text{А}}) - \text{С}_{(\text{охр }.\text{А})} - \text{С}_{\text{доб }.(\text{охр }.\text{А})}| \leq K$ 

<div align="center">

<a id="p100175"></a>Норматив оперативного контроля погрешности рассчитывают по формуле (P = 0,90):

</div>


<a id="p100176"></a> $K = 0,84 \cdot (\Delta^{2}\text{С}(\prime_{\text{охр}.\text{А}}) + \Delta^{2}\text{С}_{(\text{охр }.\text{А})})^{1/2}$ 

<a id="p100177"></a>При превышении норматива оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют с использованием другой пробы.

<div align="center">

<a id="p100178"></a>**10. ТРЕБОВАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ**

</div>


<a id="p100179"></a>При выполнении анализов необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.2.007.0 и [ГОСТ 4658](https://bukva.ai/docs/gost-4658-73). Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с органическими растворителями. Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционными системами по ГОСТ 12.4.021.

<a id="p100180"></a>**11. ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ИСПОЛНИТЕЛЯ**

<a id="p100181"></a>К выполнению анализа охратоксина A в зерне и зернопродуктах допускаются лица со специальным высшим образованием или средним специальным образованием, владеющие техникой ВЭЖХ-анализа, прошедшие соответствующую подготовку и имеющие опыт работы в химической лаборатории.

<a id="p100182"></a>**12. УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ**

<div align="center">

<a id="p100183"></a>Температура окружающего воздуха от 15 до 25 °C.<br>
<a id="p100184"></a>Относительная влажность воздуха не более 80% при 25 °C.<br>
<a id="p100185"></a>Атмосферное давление 730 - 760 мм рт. ст.<br>
<a id="p100186"></a>Напряжение электропитания: 210 - 220 В. Частота переменного тока: 45 - 50 ГЦ.

</div>




<a id="p100187"></a>

---