---
title: "\"МУК 4.1.2174-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фамоксадона в плодах томатов, ягодах винограда, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2174-07"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2174-07"
---

## "МУК 4.1.2174-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фамоксадона в плодах томатов, ягодах винограда, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2174-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фамоксадона в плодах томатов, ягодах винограда, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 15.02.2007)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 мая 2007 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

15 февраля 2007 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФАМОКСАДОНА**
**В ПЛОДАХ ТОМАТОВ, ЯГОДАХ ВИНОГРАДА, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ,**
**СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2174-07**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 мая 2007 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

<div align="center">

4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.

</div>


<a id="p100010"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Фамоксадона в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг в плодах томатов и ягодах винограда и в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг в зеленой массе, семенах и масле подсолнечника.
<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Дюпон де Немур Интернэшнл С.А.
<a id="p100012"></a>Торговое название: Танос (смесевой препарат с Цимоксанилом).
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИСО: Фамоксадон.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 3-анилино-5-метил-5-(4-феноксифенил)-2,4-оксазолидиндион.
<a id="p100015"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: C  H  N O .
                           22 18 2 4
<a id="p100017"></a>    Молекулярная масса: 374,4.
<a id="p100018"></a>    Химически   чистый   Фамоксадон  представляет  собой  светлый  кремовый
порошок.
                            -7
<a id="p100019"></a>    Давление паров: 6,4 х 10   Па при 20 °С.
<a id="p100020"></a>    Температура плавления: 141,3 - 142,3 °С.
<a id="p100021"></a>    Коэффициент  распределения  н-октанол  - вода: 4,8 (pH 5); 4,65 (pH 7);
5,55 (pH 9).
<a id="p100022"></a>    Растворимость  в  воде зависит от кислотности среды и составляет  243 х
  -6                              -6
10   г/куб. дм при pH 5;  111 х 10   г/куб. дм при pH 7;  при pH 9 вещество
быстро гидролизуется.
<a id="p100023"></a>    Растворимость  в  органических  растворителях  (г/куб.  дм  при 20 °С):
ацетон  -  274,  ацетонитрил  -  125,  гексан  - 0,0476, дихлорметан - 239,
метанол - 10, толуол - 13,3, этилацетат - 124, н-октанол - 1,78.
<a id="p100024"></a>    Фамоксадон  нестабилен  в  водных  растворах.  Гидролиз  наблюдается  в
диапазоне  pH  5  -  9,  и время полураспада составляет 41 день, 2 дня и 93
минуты  при  pH  5,0;  7,0  и  9,0  соответственно.  Период полураспада при
фотолизе  составляет 4,6 дней и 3,9 часов при pH 5 и 7,75 соответственно. В
лабораторной  почве  период полуразложения DT   составлял 6 дней в аэробных
                                             50
условиях и 28 - в анаэробных.
<a id="p100025"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100026"></a>    Фамоксадон  относится  к  малоопасным  веществам  по острой пероральной
токсичности (ЛД   крысы - > 5000 мг/кг), по дермальной (ЛД   крысы - > 2000
               50                                         50
мг/кг)  токсичности,  но  к  умеренно  опасным по ингаляционной токсичности
(ЛД   крысы - > 5300 мг/куб. м). Не обладает генотоксичностью и онкогенными
   50
свойствами, не оказывает влияния на репродуктивную функцию.
<a id="p100027"></a>В винограде, томатах и картофеле остаточные количества Фамоксадона обнаруживаются до сбора урожая, в клубнях картофеля остатков не было обнаружено.
<a id="p100028"></a>В России для Фамоксадона установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,01 мг/кг массы тела человека; ОДК в почве - 0,1 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,01 (общ.) мг/куб. дм; МДУ в картофеле - 0,05 мг/кг. Для плодов томатов, ягод винограда, зерна хлебных злаков, семян и масла подсолнечника МДУ не установлен.
<a id="p100029"></a>Область применения: Фамоксадон - фунгицид контактного действия из группы оксазолидиндионов. Является ингибитором митохондриального дыхания, высокоэффективен против широкого спектра патогенных грибов с рекомендуемой нормой расхода 50 - 200 г/га.
<a id="p100030"></a>Зарегистрирован в России компанией Дюпон де Немур Интернэшнл С.А. под торговым названием Танос (смесевой препарат с Цимоксанилом) для борьбы против фитофтороза и альтернариоза на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, также разрешено применение препарата в личных подсобных хозяйствах против фитофтороза и альтернариоза на картофеле с нормой расхода 15 г/10 л воды.


## 1. <a id="p100031"></a>МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ


<a id="p100032"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

<div align="right">

<a id="p100033"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100034"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ФАМОКСАДОНА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="19%"><col width="19%"><col width="20%"><col width="12%"><col width="11%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r,%</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Плоды томатов</td><td>0,02 - 0,1</td><td>100</td><td>5,0</td><td>14,0</td><td>20,0</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,2</td><td>50</td><td>3,5</td><td>9,8</td><td>11,7</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Ягоды винограда</td><td>0,02 - 0,1</td><td>50</td><td>5,0</td><td>14,0</td><td>20,0</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,2</td><td>25</td><td>4,5</td><td>12,6</td><td>15,0</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Семена подсолнечника</td><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>5,5</td><td>15,4</td><td>18,3</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,5</td><td>25</td><td>4,0</td><td>11,2</td><td>13,4</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Масло подсолнечника</td><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>6,0</td><td>16,8</td><td>26,8</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,5</td><td>25</td><td>5,0</td><td>14,0</td><td>20,0</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Зеленая масса подсолнечника</td><td>0,05 - 0,1</td><td>50</td><td>5,5</td><td>15,4</td><td>18,3</td></tr>
<tr><td>0,1 - 0,5</td><td>25</td><td>4,0</td><td>11,2</td><td>13,4</td></tr>
</table>


<a id="p100046"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

<div align="right">

<a id="p100047"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100048"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА ДЛЯ ФАМОКСАДОНА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="18%"><col width="15%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Плоды томатов</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>85,1</td><td>2,1</td><td>0,85</td></tr>
<tr><td>Ягоды винограда</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>85,8</td><td>2,1</td><td>0,90</td></tr>
<tr><td>Семена подсолнечника</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>76,4</td><td>2,8</td><td>1,1</td></tr>
<tr><td>Масло подсолнечника</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>76,9</td><td>3,7</td><td>1,3</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса подсолнечника</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>74,2</td><td>2,2</td><td>0,9</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100055"></a>МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100056"></a>Методика основана на определении Фамоксадона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистке перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с Флоризилом и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак С, Диапак С16 и Диапак Амин).
<a id="p100057"></a>Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
<a id="p100058"></a>В предлагаемых условиях анализа метод специфичен и может применяться для определения остатков Фамоксадона в присутствии других пестицидов. Избирательность метода достигается за счет подбора колонки и состава подвижной фазы.


## 3. <a id="p100059"></a>СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ



### <a id="p100060"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100061"></a>Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа.
<a id="p100062"></a>Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001.
<a id="p100063"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г, ГОСТ 19491-74.
<a id="p100064"></a>Колбы мерные на 25, 50 и 100 куб. см, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100065"></a>Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50 - 100 куб. мм.
<a id="p100066"></a>Пипетки мерные на 1,0; 2,0 и 5,0 куб. см, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100067"></a>Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100068"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100069"></a>Фамоксадон, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 97,7% (фирма Дюпон де Немур Интернэшнл С.А).
<a id="p100070"></a>Ацетон, ос.ч., ТУ 2633-00-4-11291058-94.
<a id="p100071"></a>Ацетонитрил, ос.ч., УФ-205 нм, ТУ 6-09-2167-84.
<a id="p100072"></a>Вода бидистиллированная деионизированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100073"></a>Гексан, х.ч., для спектроскопии, ТУ 6-09-06-657-84.
<a id="p100074"></a>Калий марганцовокислый, ч.д.а., ГОСТ 20490-75.
<a id="p100075"></a>Кальций хлористый, х.ч., ГОСТ 4161-76.
<a id="p100076"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч., ГОСТ 6552-80.
<a id="p100077"></a>Метилен хлористый, х.ч., ТУ 6-09-2662-77.
<a id="p100078"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100079"></a>Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-77.
<a id="p100080"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а., [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100081"></a>Концентрирующие патроны Диапак С (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100082"></a>Концентрирующие патроны Диапак С16 (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100083"></a>Концентрирующие патроны Диапак Амин (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100084"></a>Флоризил для колоночной хроматографии, 60 - 100 меш, фирма Мерк.
<a id="p100085"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100086"></a>3.3. Вспомогательные устройства и материалы


<a id="p100087"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак С, Диапак С16 и Диапак Амин.
<a id="p100088"></a>Аппарат для встряхивания проб АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
<a id="p100089"></a>Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. N 3120-0250, NALGENE.
<a id="p100090"></a>Ванна ультразвуковая UM-4, фирма Unitra.
<a id="p100091"></a>Воронки делительные на 250 и 500 куб. см, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100092"></a>Воронки конические стеклянные диаметром 50 - 60 мм, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100093"></a>Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней В-480.
<a id="p100094"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма Уотерс.
<a id="p100095"></a>Колонки для адсорбционной хроматографии длиной 15 см, диаметр 1,5 см.
<a id="p100096"></a>Колбы конические плоскодонные на 500 и 1000 куб. см, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100097"></a>Концентраторы грушевидные и круглодонные объемом 100 и 250 куб. см, ГОСТ 10394-75.
<a id="p100098"></a>Насос вакуумный диафрагменный FT.19 фирмы KNF Neu Laboport.
<a id="p100099"></a>Предколонка хроматографическая стальная, Symmetry C18, длиной 20 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма Уотерс.
<a id="p100100"></a>Стаканы стеклянные на 100 - 500 куб. см, ГОСТ 25366-80Е.
<a id="p100101"></a>Установка для перегонки растворителей.
<a id="p100102"></a>Фильтры бумажные "красная лента", ТУ-6-09-1678-86.
<a id="p100103"></a>Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма Уотерс.
<a id="p100104"></a>Допускается использование оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.


## 4. <a id="p100105"></a>ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100106"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
<a id="p100107"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


## 5. <a id="p100108"></a>ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРОВ


<a id="p100109"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
<a id="p100110"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100111"></a>УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100112"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100113"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100114"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100115"></a>ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ОПРЕДЕЛЕНИЙ


<a id="p100116"></a>Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак С, Диапак С16 и Диапак Амин и колонок с Флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на патронах, колонках с Флоризилом, построение калибровочной кривой.


### <a id="p100117"></a>7.1. Подготовка органических растворителей



##### <a id="p100118"></a>7.1.1 Очистка ацетона.

<a id="p100119"></a>Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика. Москва, 1976, с. 438 - 439).

##### <a id="p100120"></a>7.1.2 Очистка ацетонитрила.

<a id="p100121"></a>Ацетонитрил перегоняют.

##### <a id="p100122"></a>7.1.3 Очистка гексана.

<a id="p100123"></a>Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика. Москва, 1976, с. 441).

##### <a id="p100124"></a>7.1.4 Очистка хлористого метилена.

<a id="p100125"></a>Хлористый метилен встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают водным раствором карбоната натрия, водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют над оксидом (V) фосфора (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика. Москва, 1976, с. 440).

##### <a id="p100126"></a>7.1.5 Очистка этилового эфира уксусной кислоты.

<a id="p100127"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты промывают равным объемом 5%-ного раствора соды, сушат над безводным хлористым кальцием (Беккер Г. и др. Органикум. Москва, 1979, с. 372), кипятят в течение 1 часа с прокаленным сульфатом магния и затем перегоняют.

##### <a id="p100128"></a>7.1.6 Очистка бидистиллированной воды.

<a id="p100129"></a>Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.


### <a id="p100130"></a>7.2. Приготовление растворов для проведения анализа



##### <a id="p100131"></a>7.2.1 Приготовление растворов для жидкостной хроматографии.

<a id="p100132"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.

###### <a id="p100133"></a>7.2.1.1 Приготовление 3,1 мМ раствора ортофосфорной кислоты.

<a id="p100134"></a>В мерную колбу объемом 2,0 куб. дм помещают 500 куб. см очищенной воды и 0,42 куб. см концентрированной (85%) ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки очищенной водой и еще раз перемешивают.

###### <a id="p100135"></a>7.2.1.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ.

<a id="p100136"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 куб. дм помещают 650 куб. см ацетонитрила и 350 куб. см 3,1 мМ раствора ортофосфорной кислоты в очищенной воде. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 куб. см в мин. в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту.

##### <a id="p100137"></a>7.2.2 Приготовление градуировочных растворов.

<a id="p100138"></a>7.2.2.1. Стандартный раствор с концентрацией Фамоксадона 1,0 мг/куб. см.
<a id="p100139"></a>Взвешивают 100 мг Фамоксадона в мерной колбе объемом 100 куб. см. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.
<a id="p100140"></a>7.2.2.2. Стандартный раствор с концентрацией Фамоксадона 10,0 мкг/куб. см.
<a id="p100141"></a>Из стандартного раствора Фамоксадона с концентрацией 1,0 мг/куб. см отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании.
<a id="p100142"></a>7.2.2.3. Стандартные растворы Фамоксадона с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см для построения калибровочной кривой и внесения в растительные образцы (за исключением масличных культур).
<a id="p100143"></a>Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см и используют эти растворы для хроматографического исследования.
<a id="p100144"></a>7.2.2.4. Стандартные растворы Фамоксадона с концентрацией 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/куб. см для внесения в образцы семян и масла подсолнечника.
<a id="p100145"></a>Для внесения в исследуемые образцы семян и масла подсолнечника готовят растворы Фамоксадона в ацетоне. Из раствора Фамоксадона в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мг/куб. см методом последовательного разведения ацетоном готовят растворы, содержащие 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/куб. см Фамоксадона.


### <a id="p100146"></a>7.3. Установление градуированной характеристики


<a id="p100147"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Фамоксадона в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по стандартным растворам с концентрациями 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см.
<a id="p100148"></a>Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и хроматографируют в условиях [п. 9.6](#p100241). Проводят не менее 3 параллельных измерений и находят среднее значение площади хроматографического пика для каждой концентрации. По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ от концентрации Фамоксадона в растворе в мкг/куб. см.


### <a id="p100149"></a>7.4. Подготовка концентрирующих патронов Диапак С, Диапак С16, Диапак Амин и колонок с Флоризилом для очистки экстрактов


<a id="p100150"></a>7.4.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С и Диапак Амин для очистки экстракта.
<a id="p100151"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин.
<a id="p100152"></a>Патрон Диапак С устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100153"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 10 куб. см смеси гексан - ацетон в соотношении 1:1 и 10 гексана. Элюат отбрасывают.
<a id="p100154"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
<a id="p100155"></a>7.4.1.1. Проверка хроматографического поведения Фамоксадона на концентрирующем патроне Диапак С и Диапак Амин.
<a id="p100156"></a>Из стандартного раствора Фамоксадона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см отбирают 1 куб. см, помещают в круглодонную колбу объемом 100 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, помещают на 10 секунд в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 куб. см гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100157"></a>Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси гексан - ацетон в соотношении 9:1 и двумя порциями по 5 куб. см смеси гексан - ацетон в соотношении 9:1 и последовательно вносят на патрон. Элюаты после прохождения каждой порции собирают в отдельные концентраторы, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Фамоксадон, и объединяют их.
<a id="p100158"></a>7.4.2. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта.
<a id="p100159"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин. При работе на патронах Диапак С16 используют очищенную воду.
<a id="p100160"></a>Патрон Диапак С16 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 куб. см (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100161"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:1 и 20 куб. см воды. Элюат отбрасывают.
<a id="p100162"></a>Нельзя допускать высыхания поверхности патрона!
<a id="p100163"></a>7.4.2.1. Проверка хроматографического поведения Фамоксадона на концентрирующем патроне Диапак С16.
<a id="p100164"></a>Из стандартного раствора Фамоксадона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/куб. см, отбирают 1 куб. см, помещают в круглодонную колбу объемом 100 куб. см и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетонитрила и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 куб. см воды, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100165"></a>Исходный концентратор обмывают 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:4 и смесь вносят на патрон. Элюат выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100166"></a>Исходный концентратор вновь обмывают 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:2 и смесь вносят на патрон. Элюат выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100167"></a>Тот же концентратор обмывают двумя порциями по 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:1 и вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 куб. см ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Фамоксадон, и объединяют их.

##### <a id="p100168"></a>7.4.3 Подготовка колонки с Флоризилом для очистки экстракта.


###### <a id="p100169"></a>7.4.3.1 Подготовка Флоризила.

<a id="p100170"></a>Для получения стандартизованного сорбента Флоризил выдерживают в сушильном шкафу при температуре +120 °С в течение 4 часов, а затем при постоянном перемешивании в стеклянной колбе с притертой пробкой к 95 г Флоризила (60 - 100 меш, Merck) добавляют постепенно 5 г очищенной воды.

###### <a id="p100171"></a>7.4.3.2 Подготовка колонки с Флоризилом.

<a id="p100172"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г стандартизованного Флоризила. Сверху на Флоризил насыпают 1 г безводного сульфата натрия. Перед использованием колонку промывают 10 куб. см смеси гексан - этилацетат в соотношении 3:1, избыток растворителя с колонки удаляют путем продавливания воздуха. Затем колонку дополнительно промывают 10 куб. см гексана. Перед внесением образца колонку увлажняют 5 куб. см гексана.
<a id="p100173"></a>7.4.3.3. Проверка хроматографического поведения Фамоксадона на колонке.
<a id="p100174"></a>В круглодонную колбу объемом 50 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Фамоксадона с концентрацией 1 мкг/куб. см и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, затем добавляют в колбу 5 куб. см гексана и полученную смесь вносят на колонку. Колонку промывают 15 куб. см смеси гексан - этилацетат 10:1 и элюат отбрасывают. Фамоксадон элюируют с колонки последовательно 6-ю порциями объемом 5 куб. см смеси гексана с этилацетатом в соотношении 3:1, каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100175"></a>Сухой остаток после упаривания каждой фракции растворяют в 1 куб. см ацетонитрила и 20 куб. мм пробы вводят в хроматограф. Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100176"></a>Примечание: Хроматографическое поведение Фамоксадона на колонке обязательно проверяют при отработке методики и каждый раз при использовании новой партии Флоризила.


### <a id="p100177"></a>7.5. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии


<a id="p100178"></a>Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколонкой Symmetry C18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1 куб. см/мин. 3 - 4 часа.


## 8. <a id="p100179"></a>ОТБОР ПРОБ И ХРАНЕНИЕ


<a id="p100180"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N [2051-79](https://bukva.ai/docs/2051-79) от 21.08.79), а также в соответствии с [ГОСТ 1725-85](https://bukva.ai/docs/gost-1725-85) "Томаты свежие. ТУ", [ГОСТ 25896-83](https://bukva.ai/docs/gost-25896-83) "Виноград свежий столовый. ТУ", [ГОСТ 22391-89](https://bukva.ai/docs/gost-22391-89) "Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках", [ГОСТ 1129-93](https://bukva.ai/docs/gost-1129-93) "Масло подсолнечника. ТУ", [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правило приемки и методы отбора проб".
<a id="p100181"></a>Пробы томатов, винограда и зеленой массы подсолнечника хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 - 4 °С в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °С.
<a id="p100182"></a>Пробы семян подсолнечника подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов, не более 6 месяцев. Влажные семена замораживают и хранят в морозильной камере при -18 °С до 1 года.
<a id="p100183"></a>Пробы масла подсолнечника хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 0 - 4 °С в течение 10 суток.


## 9. <a id="p100184"></a>ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЙ



### <a id="p100185"></a>9.1. Ягоды винограда



##### <a id="p100186"></a>9.1.1 Экстракция.

<a id="p100187"></a>Образец измельченных ягод винограда массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 30 куб. см ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Затем колбу выдерживают 5 минут на механическом встряхивателе при комнатной температуре, экстракт фильтруют в плоскодонную колбу объемом 250 куб. см с 5 г сухого хлорида натрия. Экстракцию повторяют еще 2 раза в тех же условиях, используя по 30 куб. см ацетонитрила. Экстракты объединяют в плоскодонной колбе объемом 250 куб. см с 5 г сухого хлорида натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 минут, переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см и отбрасывают нижний водный слой.
<a id="p100188"></a>9.1.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100189"></a>К ацетонитрильному экстракту в делительной воронке прибавляют 30 куб. см гексана и интенсивно встряхивают воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой помещают в химический стакан объемом 150 куб. см, верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и промывают еще двумя порциями гексана объемом по 30 куб. см. Гексан отбрасывают.
<a id="p100190"></a>Ацетонитрильный экстракт (нижний слой) собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Осушитель затем обмывают 10 куб. см ацетонитрила, смыв объединяют с основным экстрактом в концентраторе и ацетонитрильный экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Далее проводят очистку на концентрирующих патронах.

##### <a id="p100191"></a>9.1.3 Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак С16.

<a id="p100192"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.1.2](#p100188), растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и наносят на патрон Диапак С16. Элюат отбрасывают.
<a id="p100193"></a>Концентратор обмывают 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:4, смесь наносят на патрон и элюат отбрасывают.
<a id="p100194"></a>Обмывают концентратор 20 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:1, смесь наносят на патрон и элюат собирают в чистый концентратор. Жидкость выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100195"></a>9.1.4 Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак С.

<a id="p100196"></a>Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, помещают на 10 секунд в ультразвуковую ванну и обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 куб. см гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор наносят на патрон Диапак С. Элюат собирают в чистый концентратор. Концентратор еще раз тщательно обмывают двумя порциями смеси гексан - ацетон в соотношении 9:1 по 10 и 5 куб. см и элюат также вносят на патрон. Элюаты собирают, объединяют и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100197"></a>Сухой остаток растворяют в 4 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100198"></a>После хроматографирования каждой пробы следует промывать хроматографическую колонку в ВЭЖХ-системе не менее 10 минут.


### <a id="p100199"></a>9.2. Плоды томата



##### <a id="p100200"></a>9.2.1 Экстракция.

<a id="p100201"></a>Образец измельченных плодов томата массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 30 куб. см ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Затем колбу выдерживают 5 минут на механическом встряхивателе при комнатной температуре, фильтруют в плоскодонную колбу объемом 250 куб. см с 5 г сухого хлорида натрия. Далее экстракцию проводят, как описано в [п. 9.1.1](#p100186) (Ягоды винограда).
<a id="p100202"></a>9.2.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100203"></a>Очистку экстракта перераспределением проводят, как описано в [п. 9.1.2](#p100188).
<a id="p100204"></a>9.2.3. Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Амин и Диапак С16.
<a id="p100205"></a>Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетона, помещают на 10 секунд в ультразвуковую ванну и обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 куб. см гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон Диапак Амин. Концентратор тщательно обмывают двумя порциями смеси гексан - ацетон в соотношении 9:1 по 10 и 5 куб. см и также вносят на патрон. Элюаты собирают, объединяют, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100206"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.1.2](#p100188), растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и наносят на патрон Диапак С16. Элюат отбрасывают.
<a id="p100207"></a>Концентратор обмывают 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:4, смесь наносят на патрон и элюат отбрасывают.
<a id="p100208"></a>Концентратор еще раз обмывают 10 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:2, смесь наносят на патрон и элюат отбрасывают.
<a id="p100209"></a>Обмывают концентратор 20 куб. см смеси ацетонитрил - вода в соотношении 1:1, смесь наносят на патрон и элюат собирают в чистый концентратор. Жидкость выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100210"></a>Сухой остаток растворяют в 4 куб. см ацетонитрила и аликвоту 20 куб. мм вводят в хроматограф.
<a id="p100211"></a>После хроматографирования каждой пробы следует промывать хроматографическую колонку в ВЭЖХ-системе не менее 10 минут.


### <a id="p100212"></a>9.3. Семена подсолнечника



##### <a id="p100213"></a>9.3.1 Экстракция.

<a id="p100214"></a>Образец измельченных семян подсолнечника массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 75 куб. см смеси ацетонитрила с ацетоном в соотношении 9:1 и помещают в ультразвуковую ванну на 10 минут. Затем колбу выдерживают 5 минут на механическом встряхивателе при комнатной температуре и фильтруют в концентратор объемом 250 куб. см. Экстракцию повторяют еще два раза в тех же условиях, используя по 75 куб. см смеси растворителей. Экстракты объединяют в концентраторе и упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100215"></a>9.3.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100216"></a>К маслянистому остатку в концентраторе, полученному по [п. 9.3.1](#p100213), прибавляют 20 куб. см гексана, обмывают стенки колбы и переносят смыв в сухую делительную воронку объемом 250 куб. см. Концентратор обмывают еще двумя порциями гексана объемом по 20 и 10 куб. см и объединяют все смывы в делительной воронке.
<a id="p100217"></a>Фамоксадон экстрагируют из гексанового раствора тремя порциями ацетонитрила объемом по 20 куб. см. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100218"></a>Маслянистый остаток растворяют в 50 куб. см гексана, переносят в сухую делительную воронку объемом 250 куб. см и экстрагируют Фамоксадон тремя порциями ацетонитрила объемом по 20 куб. см, встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия толщиной 1 см. Гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

##### <a id="p100219"></a>9.3.3 Очистка экстракта на колонках с Флоризилом.

<a id="p100220"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.3.2](#p100215), растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, обмывая стенки концентратора, затем в концентратор прибавляют 5 мл гексана, тщательно перемешивают и полученную смесь вносят на колонку. Колонку промывают 15 куб. см смеси гексан - этилацетат в соотношении 10:1 и элюат отбрасывают. Фамоксат элюируют с колонки 20 куб. см смеси гексан - этилацетат в соотношении 3:1, собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100221"></a>9.3.4. Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак С16.
<a id="p100222"></a>Сухой остаток растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и очищают на патроне Диапак С16, как указано в [п. 9.1.3](#p100191). После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и еще раз очищают на патроне Диапак С. После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 5 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.


### <a id="p100223"></a>9.4. Масло подсолнечника



##### <a id="p100224"></a>9.4.1 Экстракция.

<a id="p100225"></a>Образец масла подсолнечника массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 100 куб. см гексана и 5 г безводного сульфата натрия и помещают на 15 минут на механический встряхиватель. Затем гексаново-масляный раствор декантируют в делительную воронку объемом 250 куб. см, осушитель оставляют в колбе и отбрасывают. Из гексана Фамоксадон экстрагируют тремя порциями ацетонитрила объемом по 30 куб. см, встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия толщиной 1 см. Экстракты объединяют в концентраторе и упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100226"></a>9.4.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100227"></a>Маслянистый остаток, полученный по [п. 9.4.1](#p100224), растворяют в 50 куб. см гексана, переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Из гексановой фазы Фамоксадон экстрагируют тремя порциями ацетонитрила объемом по 20 куб. см, встряхивая делительную воронку по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия толщиной 1 см. Гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт упаривают до маслянистого остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100228"></a>9.4.3. Очистка экстракта на колонках с Флоризилом и на концентрирующих патронах Диапак С и Диапак С16.
<a id="p100229"></a>Маслянистый остаток, полученный по [п. 9.4.2](#p100226), растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, добавляют 5 куб. см гексана и очищают на колонках с Флоризилом, как указано в [п. 9.3.3](#p100219). После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и очищают на патроне Диапак С16, как указано в [п. 9.1.3](#p100191). После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и еще раз очищают на патроне Диапак С16, как указано в п. 7.5.2.2. После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 5 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.


### <a id="p100230"></a>9.5. Зеленая масса подсолнечника



##### <a id="p100231"></a>9.5.1 Экстракция.

<a id="p100232"></a>Образец измельченной зеленой массы подсолнечника массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 куб. см, прибавляют 50 куб. см ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Затем колбу выдерживают 5 минут на механическом встряхивателе при комнатной температуре и фильтруют в плоскодонную колбу объемом 250 куб. см с 5 г сухого хлорида натрия. Экстракцию повторяют еще два раза в тех же условиях, используя по 50 куб. см ацетонитрила. Экстракты объединяют в плоскодонной колбе объемом 250 куб. см с 5 г сухого хлорида натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 минут. Затем экстракт переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см и отбрасывают нижний водный слой.
<a id="p100233"></a>9.5.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100234"></a>К ацетонитрильному экстракту в делительной воронке прибавляют 50 куб. см гексана и интенсивно встряхивают воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой помещают в химический стакан объемом 150 куб. см, верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и промывают еще одной порцией гексана объемом 50 куб. см. Гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт (нижний слой) собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Осушитель затем обмывают 10 куб. см ацетонитрила, смыв объединяют с основным экстрактом и ацетонитрильный экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100235"></a>К сухому остатку в концентраторе прибавляют 40 куб. см хлористого метилена, обмывают стенки концентратора и переносят смыв в делительную воронку объемом 500 куб. см. Затем концентратор обмывают еще двумя порциями хлористого метилена объемом по 30 куб. см и все смывы объединяют в делительной воронке.
<a id="p100236"></a>Туда же прибавляют 100 куб. см дистиллированной воды, 10 куб. см 0,1%-ного раствора перманганата калия и встряхивают воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой хлористого метилена помещают в химический стакан объемом 150 куб. см, верхний водный слой отбрасывают.
<a id="p100237"></a>Хлористый метилен из химического стакана переносят в чистую делительную воронку, прибавляют 100 куб. см дистиллированной воды, 10 куб. см 0,1%-ного раствора перманганата калия и повторяют процедуру промывки. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой хлористого метилена собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Верхний водный слой отбрасывают. Осушитель обмывают 10 куб. см хлористого метилена, объединяют смыв с основным экстрактом и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100238"></a>9.5.3. Очистка экстракта на колонках с Флоризилом и на концентрирующих патронах Диапак С16.
<a id="p100239"></a>Сухой остаток, полученный по [п. 9.5.2](#p100233), растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, добавляют 5 куб. см гексана и очищают на колонках с Флоризилом, как указано в [п. 9.3.3](#p100219). После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 9 куб. см воды и очищают на патроне Диапак С16, как указано в [п. 9.1.3](#p100191). После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 5 куб. см ацетонитрила и хроматографируют.
<a id="p100240"></a>После хроматографирования каждой пробы следует промывать колонку не менее 12 минут.


### <a id="p100241"></a>9.6. Условия хроматографирования


<a id="p100242"></a>Хроматограф "Waters" или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.
<a id="p100243"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 4,6 мм х 25 см, зернением 5 мкм.
<a id="p100244"></a>Предколонка стальная Symmetry C18, 3,9 мм х 2 см, зернением 5 мкм.
<a id="p100245"></a>Температура колонки: 25 °С.
<a id="p100246"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 3,1 мМ ортофосфорная кислота в соотношении 65:35.
<a id="p100247"></a>Длина волны 245 нм.
<a id="p100248"></a>Время удерживания Фамоксадона 10,6 - 11,07 мин.
<a id="p100249"></a>Чувствительность 0,003 ед. оптической плотности на шкалу.
<a id="p100250"></a>Объем вводимой пробы 20 куб. мм.
<a id="p100251"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.


## 10. <a id="p100252"></a>ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ


<a id="p100253"></a>Содержание Фамоксадона рассчитывают по формуле:

                               Sпр х А х V
<a id="p100254"></a>                          Х = ------------- х Р,
                              100 х Sст х m

<a id="p100255"></a>где:
<a id="p100256"></a>Х - содержание Фамоксадона в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
<a id="p100257"></a>Sст - высота (площадь) пика стандарта, мм;
<a id="p100258"></a>Sпр - высота (площадь) пика образца, мм;
<a id="p100259"></a>А - концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
<a id="p100260"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100261"></a>m - масса анализируемого образца, г (куб. см);
<a id="p100262"></a>Р - содержание Фамоксадона в аналитическом стандарте, %.


## 11. <a id="p100263"></a>ПРОВЕРКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ПАРАЛЛЕЛЬНЫХ ОПРЕДЕЛЕНИЙ


<a id="p100264"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100265"></a>                         ------------------- <= r,                      (1)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(таблица 1)](#p100034), при этом r =
2,8 сигма .
         r
<a id="p100266"></a>При невыполнении [условия (1)](#p100265) выясняют причины превышения предел повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100267"></a>ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ


<a id="p100268"></a>    Результат анализа представляют в виде:

               _
<a id="p100269"></a>              (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;
    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100270"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта  -  граница  относительной   погрешности  методики   (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100034)), %.
<a id="p100271"></a>В случае если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100272"></a>"содержание вещества в пробе менее 0,05 мг/кг" <*>.

<a id="p100273"></a>

---

<a id="p100274"></a><*> 0,05 мг/кг - предел обнаружения.


## 13. <a id="p100275"></a>КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100276"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100277"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100278"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
<a id="p100279"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100280"></a>                          С  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                           д         л,Х         л,Х'

    где   +/- ДЕЛЬТА  _ (+/-  ДЕЛЬТА  _ )   -   характеристика  погрешности
                    л,Х             л,Х'
(абсолютная погрешность) результатов  анализа,  соответствующая  содержанию
компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания  компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100281"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100282"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта  -  граница  относительной   погрешности  методики   (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100034)), %.
<a id="p100283"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                 _    _
<a id="p100284"></a>                            К  = Х' - Х - С ,
                             к             д

          _     _
    где   Х',   Х,   С  -  среднее арифметическое результатов  параллельных
                      д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100263)) содержания компонента в
образце   с   добавкой,   испытуемом   образце   и   концентрация   добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100285"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
<a id="p100286"></a>                       К = \/ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                   л,Х'         л,Х

<a id="p100287"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100288"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100289"></a>                              |К | <= К,                                (2)
                                к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100290"></a>При невыполнении [условия (2)](#p100289) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100291"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

<a id="p100292"></a>    Расхождение  между  результатами  измерений,  выполненных в двух разных
лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100293"></a>                         ------------------- <= R,                      (3)
                              (Х  + Х )
                                1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
[таблица 1](#p100034)), %.


## 14. <a id="p100294"></a>РАЗРАБОТЧИКИ


<a id="p100295"></a>Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов".



<a id="p100296"></a>

---