---
title: "\"МУК 4.1.2166-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипродиона в огурцах и томатах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2166-07"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2166-07"
---

## "МУК 4.1.2166-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипродиона в огурцах и томатах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.2166-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ипродиона в огурцах и томатах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 15.02.2007)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 мая 2007 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
15 февраля 2007 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИПРОДИОНА В ОГУРЦАХ**
**И ТОМАТАХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2166-07**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

1 мая 2007 года

</div>


1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.

<a id="p100010"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации ипродиона в огурцах и томатах в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг.
<a id="p100011"></a>Ипродион - действующее вещество фунгицида Ровраль, СП (500 г/кг), фирма-производитель Байер Кроп Сайенс (Германия).
<a id="p100012"></a>3-(3,5-дихлорфенил)-N-изопропил-2,4-диоксоимидазолидин-1-карбоксамид (ИЮПАК).
<a id="p100013"></a>3-(3,5-дихлорфенил)-N-(1-метилэтил)-2,4-диоксо-1-имидазолидинкарбоксамид (С.А.).
<a id="p100014"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100015"></a>    C  H  Cl N O .
     13 13  2 3 3
<a id="p100016"></a>    Мол. масса: 330,2.
<a id="p100017"></a>    Белый  кристаллический порошок без запаха. Температура плавления: 134,0
                                          -4
°С. Давление паров  при  25  °С:  5,0 х 10   мПа. Коэффициент распределения
н-октанол/вода:  K   log P = 3,0 (pH 3 и 5). Растворимость (г/л) при 20 °С:
                  ow
ацетонитрил  -  168,  ацетон  -  342,  дихлорметан - 450, этилацетат - 225,
толуол - 150, гексан - 0,59, вода - 0,013.
<a id="p100018"></a>    Вещество  относительно  стабильно  в  кислой  среде, но гидролизуется в
водных  растворах при pH 7 (DT   = 1 - 7 дней) и значительно быстрее при pH
                              50
9 (DT   < 1 часа).
     50
<a id="p100019"></a>    В  водных  растворах  ипродион  разрушается  под действием УФ-света, но
относительно стабилен на солнечном свету.
<a id="p100020"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100021"></a>    Острая  пероральная токсичность (LD  ) для крыс и мышей - > 2000 мг/кг;
                                       50
острая  дермальная  токсичность  (LD  )  для  крыс  -  > 2000 мг/кг; острая
                                    50
ингаляционная  токсичность  (LC  )  для  крыс  - > 5,16 мг/куб. дм воздуха.
                               50
Ипродион  не  оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку
глаз кролика. LC   для рыб - 3,7 мг/л (96 час.).
                50
<a id="p100022"></a>Инсектицид нетоксичен для птиц, пчел, дафний, земляных червей, почвенных микроорганизмов.
<a id="p100023"></a>Гигиенические нормативы для ипродиона в России: ОДК в почве - 0,15 мг/кг; ПДК в воде - 0,01 мг/куб. дм; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/куб. м; МДУ для винограда - 0,4 мг/кг; для картофеля, огурцов, томатов, подсолнечника (семена и масло), моркови и земляники - не допускается в пределах чувствительности метода контроля.
<a id="p100024"></a>Область применения препарата
<a id="p100025"></a>Ипродион является контактным фунгицидом с защитным и искореняющим действием. Ингибирует прорастание спор и рост грибного мицелия. Вещество проявляет высокую эффективность против возбудителей септориоза, церкоспороза, альтернариоза, фузариоза, фомоза, белой и серой гнилей всходов, мучнистой росы, фомопсиса на овощных, масличных и цветочных культурах, виноградниках.
<a id="p100026"></a>Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Ровраль, СП (500 г/кг) в качестве средства борьбы с возбудителями фитофтороза, пероноспороза и альтернариоза на посадках огурцов и томатов защищенного грунта путем обработки вегетирующих растений.


## 1. <a id="p100027"></a>Метрологические характеристики метода


<a id="p100028"></a>При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

<a id="p100029"></a>Таблица 1

<div align="center">

<a id="p100030"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="19%"><col width="19%"><col width="20%"><col width="14%"><col width="15%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %</td><td>Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r</td><td>Предел повторяемости, r, %</td><td>Предел воспроизводимости, R, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Огурцы</td><td>от 0,02 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>3,6</td><td>10,1</td><td>15,6</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,2</td><td>25</td><td>1,8</td><td>5,0</td><td>7,8</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Томаты</td><td>от 0,02 до 0,1 вкл.</td><td>50</td><td>3,6</td><td>10,1</td><td>15,6</td></tr>
<tr><td>более 0,1 до 0,2</td><td>25</td><td>2,8</td><td>7,8</td><td>12,1</td></tr>
</table>


<a id="p100036"></a>Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

<a id="p100037"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100038"></a>**ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ,**<br>
**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА**

</div>

ДЛЯ n = 20, Р = 0,95


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="18%"><col width="19%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, +/-, %</td></tr>
<tr><td>Огурцы</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>83,7</td><td>3,6</td><td>+/- 3,3</td></tr>
<tr><td>Томаты</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>85,0</td><td>3,57</td><td>+/- 3,3</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100042"></a>Метод измерений


<a id="p100043"></a>Методика основана на определении ипродиона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Контроль ипродиона в образцах плодов огурца и томата осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из растительного материала водным ацетоном, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак С8.
<a id="p100044"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100045"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы



### <a id="p100046"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100047"></a>Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором с     Номер Госреестра
переменной длиной волны (фирма Knauer, Германия)           N 16848-03
<a id="p100048"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100049"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим ГОСТ 7328
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,038 г
<a id="p100050"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100051"></a>Меры массы ГОСТ 7328
<a id="p100052"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 куб. см
<a id="p100053"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
вместимостью 5 куб. см
<a id="p100054"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
50, 100, 500 и 1000 куб. см
<a id="p100055"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100056"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100057"></a>Ипродион, аналитический стандарт с содержанием
действующего вещества 99,8% (Байер, Германия)
<a id="p100058"></a>Ацетон, чда ГОСТ 2603-79
<a id="p100059"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч                           ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100060"></a>Вода бидистиллированная или деионизованная                  ГОСТ 6702
<a id="p100061"></a>н-Гексан, хч                                                ТУ 6-09-3375
<a id="p100062"></a>Кислота орто-фосфорная, хч, 85% ГОСТ 6552
<a id="p100063"></a>Натрий сернокислый, безводный, хч [ГОСТ 4166](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100064"></a>Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233
<a id="p100065"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, ч [ГОСТ 22300](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100066"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


### <a id="p100067"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100068"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма
Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100069"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147
<a id="p100070"></a>Воронки делительные вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100071"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 мм ГОСТ 25336
<a id="p100072"></a>Гомогенизатор                                       МРТУ 42-1505
<a id="p100073"></a>Дефлегматор елочный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100074"></a>Колба Бунзена вместимостью 250 куб. см              ГОСТ 5614
<a id="p100075"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50 и [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
100 куб. см
<a id="p100076"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100077"></a>Колонка хроматографическая стеклянная длиной
25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100078"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 15 см,   ТУ 4215-001-05451931-94
внутренним диаметром 4 мм, содержащая Диасфер
110-С18 (5 мкм) (ЗАО "БиоХимМак СТ", Москва)
<a id="p100079"></a>Насос водоструйный вакуумный                        ГОСТ 10696
<a id="p100080"></a>Патроны концентрирующие Диапак С8 (0,6 г)           ТУ 4215-002-05451931-94
(ЗАО "БиоХимМак СТ", Москва)
<a id="p100081"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или          ТУ 25-11-917-74
ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы
Buchi (Швейцария)
<a id="p100082"></a>Силикагель 60 (0,063 - 0,2 мм) для колоночной
хроматографии (Мерк, Германия) I степени
активности
<a id="p100083"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100084"></a>Стекловата
<a id="p100085"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100086"></a>Фильтры бумажные "красная лента" обеззоленные или   ТУ 6-09-2678-77
фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ
<a id="p100087"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа вместимостью 100 куб. мм,
модель Microliter # 1710 (Hamilton, США)
<a id="p100088"></a>Шприц медицинский с разъемом Льюера вместимостью ГОСТ 22090
10 куб. см
<a id="p100089"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.


## 4. <a id="p100090"></a>Требования безопасности


<a id="p100091"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими веществами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
<a id="p100092"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


## 5. <a id="p100093"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100094"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
<a id="p100095"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100096"></a>Условия измерений


<a id="p100097"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100098"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 + 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100099"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100100"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100101"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак С8.


### <a id="p100102"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100103"></a>7.1.1 Очистка ацетонитрила

<a id="p100104"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

##### <a id="p100105"></a>7.1.2 Очистка н-гексана

<a id="p100106"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания ее в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

##### <a id="p100107"></a>7.1.3 Очистка этилацетата

<a id="p100108"></a>Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

##### <a id="p100109"></a>7.1.4 Очистка силикагеля

<a id="p100110"></a>Силикагель 60 (0,063 - 0,20 мм) для колоночной хроматографии встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °С в течение 5 часов.


### <a id="p100111"></a>7.2. Приготовление 0,005 М раствора орто-фосфорной кислоты


<a id="p100112"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 0,34 куб. см 85%-ной орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.


### <a id="p100113"></a>7.3. Подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак С8 для очистки экстракта


<a id="p100114"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля I степени активности в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 куб. см смеси гексан - этилацетат (1:9 по объему) и 30 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., после чего она готова к работе.
<a id="p100115"></a>Концентрирующий патрон Диапак С8 промывают последовательно с помощью медицинского шприца 7 куб. см ацетонитрила и 7 куб. см смеси ацетонитрил - вода (2:8) со скоростью 5 куб. см/мин.


### <a id="p100116"></a>7.4. Проверка хроматографического поведения ипродиона на колонке с силикагелем


<a id="p100117"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора N 1 ипродиона с концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле [(п. 7.7.2)](#p100126), раствор упаривают досуха, остаток растворяют в 3 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.3](#p100113). Промывают колонку 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2 по объему). Фракционно (по 10 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1,0 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1,5 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 7.5, перемешивают и анализируют на содержание ипродиона по [п. 9.5](#p100147).


### <a id="p100118"></a>7.5. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100119"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 650 куб. см ацетонитрила, 350 куб. см 0,005 М раствора орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.


### <a id="p100120"></a>7.6. Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100121"></a>Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 7.5](#p100118)) при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.


### <a id="p100122"></a>7.7. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100123"></a>7.7.1 Исходный раствор ипродиона для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

<a id="p100124"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,010 г ипродиона, растворяют в 40 - 50 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100125"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение 3-х месяцев.

##### <a id="p100126"></a>7.7.2 Раствор ипродиона N 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см)

<a id="p100127"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора ипродиона с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.7.1)](#p100123), разбавляют до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов N 2 - 5, а также для приготовления проб огурцов и томатов с внесением при оценке полноты извлечения ипродиона из исследуемых образцов.
<a id="p100128"></a>Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.
<a id="p100129"></a>7.7.3. Рабочие растворы N 2 - 5 ипродиона для градуировки (концентрация 0,05 - 0,5 мкг/куб. см)
<a id="p100130"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 куб. см градуировочного раствора N 1 ипродиона с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.7.2)](#p100126), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.5](#p100118), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией ипродиона 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100131"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


### <a id="p100132"></a>7.8. Установление градуировочной характеристики


<a id="p100133"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации ипродиона в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
<a id="p100134"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора [(п. 7.7.3)](#p100129) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.5](#p100147). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.


## 8. <a id="p100135"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100136"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными ГОСТами 1725-85 "Томаты свежие" и 1726-85 "Огурцы свежие. Технические условия".
<a id="p100137"></a>Пробы огурцов и томатов хранят в стеклянной посуде в холодильнике при температуре 4 °С не более 2-х дней; при длительном хранении пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °С. Перед анализом плоды измельчают.


## 9. <a id="p100138"></a>Выполнение определения



### <a id="p100139"></a>9.1. Экстракция ипродиона


<a id="p100140"></a>9.1.1. Плоды. Навеску (25 г) измельченного растительного материала помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, приливают 100 куб. см 50%-ного водного ацетона и гомогенизируют 5 минут при 8000 об./мин. Гомогенат фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 50 куб. см 50%-ного водного ацетона. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/5 его часть (эквивалентна 5 г образца) переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 9.2.


### <a id="p100141"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100142"></a>Экстракт плодов, полученный по [п. 9.1](#p100139) и помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (10 - 12 куб. см) при температуре 40 °С. К водному остатку приливают 15 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают в течение 2-х минут. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя 30 и 20 куб. см гексана. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой безводного сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С и подвергают дополнительной очистке на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак С8 по п. п. 9.3 и [9.4](#p100145).


### <a id="p100143"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем


<a id="p100144"></a>Остаток в круглодонной колбе, полученный по [п. 9.2](#p100141), растворяют в 3,0 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.3](#p100113). Колбу обмывают 5 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему), которые также наносят на колонку. Колонку промывают 45 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Ипродион элюируют с колонки 45 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2 по объему), отбрасывая первые 20 куб. см элюата и собирая последующие 25 куб. см элюата непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °С и остаток подвергают дополнительной очистке на концентрирующем патроне Диапак С8 по п. 9.4.


### <a id="p100145"></a>9.4. Очистка на концентрирующем патроне Диапак С8


<a id="p100146"></a>Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по [п. 9.3](#p100143), растворяют в 0,6 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,4 куб. см деионизованной воды, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон Диапак С8, подготовленный по [п. 7.3](#p100113), со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Колбу обмывают 2 куб. см ацетонитрил - вода (2:8 по объему), которые также вносят на патрон. После нанесения пробы патрон промывают 2 куб. см смеси ацетонитрил - вода (5:5 по объему), элюат отбрасывают. Ипродион элюируют с патрона 4 куб. см смеси ацетонитрил - 0,005 М орто-фосфорная кислота (65:35 по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 50 куб. см. Раствор упаривают досуха при температуре 40 °С. Остаток в колбе растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин, вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по [п. 7.5](#p100118), перемешивают и анализируют на содержание ипродиона по п. 9.5.


### <a id="p100147"></a>9.5. Условия хроматографирования


<a id="p100148"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирма Knauer, Германия).
<a id="p100149"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая в качестве неподвижной фазы Диасфер 110-С18 зернением 5 мкм.
<a id="p100150"></a>Температура колонки: комнатная.
<a id="p100151"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,005 М орто-фосфорная кислота (65:35 по объему).
<a id="p100152"></a>Скорость потока элюента: 0,8 куб. см/мин.
<a id="p100153"></a>Рабочая длина волны: 225 нм.
<a id="p100154"></a>Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу.
<a id="p100155"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100156"></a>Время удерживания ипродиона: около 6 минут.
<a id="p100157"></a>Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг.
<a id="p100158"></a>Альтернативная неподвижная фаза: Диасорб 130-С8 Т (6 мкм).
<a id="p100159"></a>Время удерживания ипродиона: около 5 мин. 40 сек.
<a id="p100160"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


## 10. <a id="p100161"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100162"></a>Содержание ипродиона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                  Н  х А х V
                                   1
<a id="p100163"></a>                              Х = ----------,
                                    Н  х m
                                     0

    где:
    Х - содержание ипродиона в пробе, мг/кг;
    Н  - высота пика образца, мм;
     1
    Н  - высота пика стандарта, мм;
     0
    А - концентрация стандартного раствора ипродиона, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемой части образца, г (для плодов - 5 г).


## 11. <a id="p100164"></a>Проверка приемлемости результатов параллельных определений


<a id="p100165"></a>За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100166"></a>                        -------------------- <= r,                      (1)
                             (Х  + Х )
                               1    2

    где:
    Х , Х  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
 r - значение предела повторяемости [(таблица 1)](#p100030), при этом r = 2,8 сигма .
                                                                          r
<a id="p100167"></a>При невыполнении условия [(1)](#p100166) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.


## 12. <a id="p100168"></a>Оформление результатов


<a id="p100169"></a>Результат анализа представляют в виде:

              _
<a id="p100170"></a>             (Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности Р = 0,95,

    где:
    _
    Х   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;

<div align="center">

    ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

</div>


<a id="p100171"></a>ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

<a id="p100172"></a>дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100030)), %.
<a id="p100173"></a>В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
<a id="p100174"></a>"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" менее 0,02 мг/кг <*> для плодов огурца и томата".

<a id="p100175"></a>

---

<div align="center">

<a id="p100176"></a><*> 0,02 мг/кг - предел обнаружения для плодов огурца и томата.

</div>



## 13. <a id="p100177"></a>Контроль качества результатов измерений


<a id="p100178"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
<a id="p100179"></a>13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
<a id="p100180"></a>13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
<a id="p100181"></a>    Величина добавки С  должна удовлетворять условию:
                      д

<a id="p100182"></a>                       С  = ДЕЛЬТА  _ + ДЕЛЬТА  _ ,
                        д         л,Х         л,Х'

    где   +/-  ДЕЛЬТА  _  (+/-  ДЕЛЬТА  _ )  -  характеристика  погрешности
                     л,Х              л,Х'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

<a id="p100183"></a>                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

    где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

<a id="p100184"></a>                        ДЕЛЬТА = дельта х Х / 100,

    дельта   -   граница  относительной  погрешности  методики  (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, [таблица 1](#p100030)), %.
<a id="p100185"></a>    Результат контроля процедуры К  рассчитывают по формуле:
                                  к

                                  _    _
<a id="p100186"></a>                             К  = Х' - Х - С ,
                              к             д

         _    _
    где  Х',  Х,  С   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений (признанных приемлемыми по [п. 11](#p100164)) содержания компонента в
образце    с    добавкой,   испытуемом   образце,   концентрация    добавки
соответственно, мг/кг.
<a id="p100187"></a>    Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

                              ______________________
                             /      2            2
<a id="p100188"></a>                       К = \/ ДЕЛЬТА  _  + ДЕЛЬТА  _.
                                    л,Х'         л,Х

<a id="p100189"></a>    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
                                                            к
контроля (К).
<a id="p100190"></a>    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

<a id="p100191"></a>                                |К | <= К,                              (2)
                                  к

процедуру анализа признают удовлетворительной.
<a id="p100192"></a>При невыполнении условия [(2)](#p100191) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

#### <a id="p100193"></a>13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

<a id="p100194"></a>Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                         2 х |Х  - Х | х 100
                               1    2
<a id="p100195"></a>                        -------------------- <= R,                      (3)
                             (Х  + Х )
                               1    2

    где:
    Х , Х  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,

<div align="center">

[таблица 1](#p100030)), %.

</div>



## 14. <a id="p100196"></a>Разработчики


<a id="p100197"></a>ВНИИ фитопатологии.



<a id="p100198"></a>

---