МУК 4.1.2164-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств дифеноконазола в картофеле, моркови и томатах методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 15.02.2007)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ введен в действие с 1 мая 2007 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека
Г. Г. Онищенко
15 февраля 2007 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИФЕНОКОНАЗОЛА В КАРТОФЕЛЕ, МОРКОВИ И ТОМАТАХ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.2164-07
1 мая 2007 года
1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации дифеноконазола в клубнях картофеля, корнеплодах моркови и плодах томата в диапазоне 0,02 — 0,2 мг/кг.
Дифеноконазол — действующее вещество гербицида Скор, КЭ (250 г/л), фирма-производитель Сингента Кроп Протекшн АГ (Швейцария).
4-хлорфениловый эфир cis,trans-3-хлор-4-[4-метил-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-2-ил]фенила (ИЮПАК).
1-[2-[4-(4-хлорфенокси)-2-хлорфенил]-4-метил-1,3-диоксолан-2-илметил]-1H-1,2,4-триазол (С.А.).
Структурная формула (не приводится).
C H Cl N O . 19 17 2 3 3
Кристаллическое вещество от белого до светло-бежевого цвета. -5
Температура плавления: 78,6 °С. Давление паров при 25 °С: 3,3 х 10 мПа. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log Р = 4,20. Растворимость
ow
(г/куб. дм) при 25 °С: этанол — 330, ацетон — 610, толуол — 490, н-гексан — < 3,4, н-октанол — 95, вода — 0,015.
Вещество устойчиво к гидролизу и фотолизу (при естественном солнечном свете DT = 145 дней).
50
Дифеноконазол быстро сорбируется почвой и медленно разрушается.
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — 1453, для мышей — > 50 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ) для кроликов — > 2010 50 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC ) для крыс — > 3300 мг/куб. м 50 воздуха. LC для рыб — 0,8 — 1,2 мг/куб. дм (96 час). Фунгицид нетоксичен 50 для птиц, пчел и дождевых червей.
Гигиенические регламенты применения дифеноконазола: ОДК в почве — 0,1 мг/кг; ПДК в воде водоемов — 0,001 мг/куб. дм; МДУ в свекле сахарной, яблоках и грушах — 0,1 мг/кг, в зерне хлебных злаков — не допускается в пределах чувствительности метода контроля. ВМДУ в картофеле, моркови и томатах — 0,1 мг/кг.
Дифеноконазол — системный фунгицид и протравитель семян. Обладает длительным защитным и лечебным действием против широкого круга растительных патогенов из классов аскомицетов, базидиомицетов, дейтеромицетов, включая возбудителей альтернариоза, септориоза, церкоспороза, парши, антракноза, ржавчины, мучнистой росы, а также некоторых патогенов, обитающих на семенах пшеницы, сахарной свеклы, картофеля, семечковых плодовых и овощных культур.
Зарегистрирован в России под торговым названием Скор, КЭ (250 г/л) в качестве средства борьбы с возбудителями парши, мучнистой росы и церкоспороза на посадках яблони, груши и посевах сахарной свеклы с нормой расхода препарата 0,15 — 0,4 кг/га. В настоящее время препарат проходит регистрационные испытания в качестве фунгицида на посадках картофеля и томатов, посевах моркови.
1. Метрологические характеристики метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, Р = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| Картофель | от 0,02 до 0,1 вкл. | 50 | 3,5 | 9,8 | 15,2 |
| более 0,1 до 0,2 | 25 | 1,5 | 4,2 | 6,6 | |
| Морковь | от 0,02 до 0,1 вкл. | 50 | 2,4 | 6,7 | 10,5 |
| более 0,1 до 0,2 | 25 | 1,7 | 4,8 | 7,5 | |
| Томаты | от 0,02 до 0,1 вкл. | 50 | 3,4 | 9,5 | 14,5 |
| более 0,1 до 0,2 | 25 | 2,2 | 6,2 | 9,5 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.
ДЛЯ n = 20, Р = 0,95
| Анализируемый | Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20 | ||||
| объект | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/- % |
| Картофель | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 83,0 | 2,7 | +/- 2,6 |
| Морковь | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 83,8 | 3,1 | +/- 2,9 |
| Томаты | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 84,5 | 3,5 | +/- 3,3 |
2. Метод измерений
Методика основана на определении вещества с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронозахватным детектором (ЭЗД). Контроль дифеноконазола в матрицах осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из растительного материала ацетоном, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак-диол.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
3.1. Средства измерений
Газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с ЭЗД Номер Госреестра № 14516-95 (СКВ «Хроматэк», Россия)
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
Весы лабораторные общего назначения с ГОСТ 7328 наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,036 г
Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности ГОСТ 29227 вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
Пробирки градуированные с пришлифованной ГОСТ 1770 пробкой вместимостью 5 куб. см
Цилиндры мерные 2-го класса точности ГОСТ 1770 вместимостью 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Дифеноконазол, аналитический стандарт фирмы Сингента (Швейцария) с содержанием д.в. 99,5%
Вода бидистиллированная или деионизованная ГОСТ 7602 н-Гексан, хч ТУ 6-09-3375
Натрий сернокислый безводный, хч ГОСТ 4166
Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233
Этиловый эфир уксусной кислоты, ч ГОСТ 22300
Эфир диэтиловый медицинский ГОСТ 6265
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы
Азот газообразный (баллон), осч ГОСТ 9293
Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма Branson Instr. Co. (США)
Воронки делительные вместимостью 100 и ГОСТ 25336 250 куб. см
Воронки конусные диаметром 30 — 37 и 60 мм ГОСТ 25336
Дефлегматор елочный ГОСТ 9737
Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см ГОСТ 9737
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью ГОСТ 9737 25 и 100 куб. см
Колонка кварцевая капиллярная НР-1 (типа SE-30) длиной 5 м, внутренним диаметром 0,53 мм, толщина пленки 0,88 мкм, фирма Хьюлетт-Паккард (США) или аналогичная
Колонка хроматографическая стеклянная ГОСТ 9737 длиной 25 см, внутренним диаметром 8 — 10 мм
Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 10696 Патроны концентрирующие Диапак-диол (0,6 г) ТУ 4215-001-05451931-94
(ЗАО «БиоХимМак СТ», Москва)
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ТУ 25-11-917 ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi (Швейцария)
Силикагель для адсорбционной хроматографии (Вельм, Германия) I степени активности
Стаканы химические вместимостью 100 и 500 ГОСТ 25336 куб. см
Установка для перегонки растворителей
Фильтры бумажные «красная лента» обеззоленные ТУ 6-09-2678-77 или фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ
Шприц для ввода образцов для газового хроматографа вместимостью 1 — 10 куб. мм (Hamilton, США)
Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя с опытом работы на газовом хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем и концентрирующих патронов Диапак-диол.
7.1. Очистка органических растворителей
7.1.1 Очистка н-гексана
Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.
7.1.2 Очистка этилацетата
Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.
7.1.3 Очистка ацетона
Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г KMnO и 2 г K CO ). 4 2 3
7.1.4 Очистка силикагеля
Силикагель I степени активности встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °С в течение 3 часов.
7.2. Подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак-диол для очистки экстракта
Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 — 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию: 3 г силикагеля I степени активности в 15 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 15 куб. см смеси гексан — этилацетат (7:3, по объему) со скоростью 1 — 2 капли в сек., после чего она готова к работе.
Концентрирующий патрон Диапак-диол промывают последовательно с помощью медицинского шприца 10 куб. см ацетона и 6 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему) со скоростью 5 куб. см/мин.
7.3. Проверка хроматографического поведения дифеноконазола на колонке с силикагелем
В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,2 куб. см градуировочного раствора № 1 дифеноконазола с концентрацией 2 мкг/куб. см в смеси гексан — ацетон (8:2, по объему) (п. 7.5.2). Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 2 куб. см смеси гексан — этилацетат (7:3, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по п. 7.2. Промывают колонку 30 куб. см смеси гексан — этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1 — 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку с силикагелем промывают 40 куб. см смеси гексан — этилацетат (3:7, по объему). Фракционно (по 5 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание дифеноконазола по п. 9.5.
7.4. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки
Капиллярную кварцевую колонку НР-1 (типа SE-30) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280 °С и скорости газа-носителя 2 куб. см/мин. в течение 8 — 10 часов.
7.5. Приготовление градуировочных растворов
7.5.1 Исходный раствор дифеноконазола для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)
В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,010 г дифеноконазола, растворяют в 40 — 50 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему), доводят объем раствора этой же смесью до метки, тщательно перемешивают.
Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение 3-х месяцев.
7.5.2 Раствор дифеноконазола № 1 для градуировки (концентрация 2 мкг/куб. см)
В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 2 куб. см исходного раствора дифеноконазола с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.5.1), разбавляют смесью гексан — ацетон (8:2, по объему) до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов № 2 — 5.
Для приготовления проб плодов и корнеплодов с внесением при оценке полноты извлечения дифеноконазола из исследуемых образцов используют ацетоновый раствор дифеноконазола с концентрацией 1 мкг/куб. см.
Градуировочный раствор № 1 и ацетоновый раствор дифеноконазола хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.
7.5.3. Рабочие растворы № 2 — 5 дифеноконазола для градуировки (концентрация 0,02 — 0,2 мкг/куб. см)
В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора № 1 дифеноконазола с концентрацией 2 мкг/куб. см (п. 7.5.2), доводят до метки смесью гексан — ацетон (8:2, по объему), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 — 5 с концентрацией дифеноконазола 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/куб. см соответственно.
Растворы готовят непосредственно перед использованием.
7.6. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х с) от концентрации дифеноконазола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки.
В инжектор хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора (п. 7.5.3) и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.
8. Отбор и хранение проб
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными ГОСТами 1725-85 «Томаты свежие», 1721-85 «Морковь столовая, свежая, заготавливаемая и поставляемая. Технические условия», 51808-2001 «Картофель свежий продовольственный, реализуемый в розничной торговой сети. Технические условия», 7176-85 «Картофель свежий, продовольственный, заготовляемый и поставляемый. Технические условия», 26832-86 «Картофель свежий для переработки на продукты питания. Технические условия», 6014-68 «Картофель свежий для переработки. Технические условия».
Пробы клубней картофеля, корнеплодов моркови и плодов томата хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более одного дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре -18 °С до анализа.
Перед анализом образцы измельчают ножом или на терке.
9. Выполнение определения
9.1. Экстракция дифеноконазола
9.1.1. Плоды, корнеплоды, клубни. Образец измельченного растительного материала массой 25 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, добавляют 100 куб. см ацетона и гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. Раствор (с осадком) фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 50 куб. см ацетона. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора. Отбирают 1/5 объема экстракта (эквивалентна 5 г образца), переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см и добавляют 30 куб. см деионизованной воды. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.
9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
Экстракт, полученный по п. 9.1.1 и помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (10 — 20 куб. см) при температуре не выше 40 °С. К водному остатку прибавляют 10 куб. см деионизованной воды, 15 куб. см насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см смеси гексан — диэтиловый эфир (4:1, по объему), интенсивно встряхивают в течение 2-х мин. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя по 25 куб. см смеси гексан — диэтиловый эфир (4:1). Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С и подвергают дополнительной очистке на колонке с силикагелем по п. 9.3 и концентрирующем патроне Диапак-диол по п. 9.4.
9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем
Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.2, растворяют в 0,9 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,1 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.2. Колбу обмывают 2 куб. см смеси гексан — этилацетат (7:3, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 30 куб. см смеси гексан — этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1 — 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Дифеноконазол элюируют с колонки 35 куб. см смеси гексан — этилацетат (3:7, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток экстракта клубней картофеля и плодов томата растворяют в 5 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание дифеноконазола по п. 9.5. Экстракт корнеплодов моркови дополнительно очищают с помощью концентрирующего патрона Диапак-диол.
9.4. Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак-диол
Сухой остаток экстракта корнеплодов моркови в круглодонной колбе, полученный по п. 9.3, растворяют при помощи ультразвуковой ванны в 2 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему) и переносят в подготовленный концентрирующий патрон Диапак-диол (п. 7.3). Патрон промывают 2,5 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему), элюат отбрасывают. Дифеноконазол элюируют 9 куб. см смеси гексан — ацетон (7:3, по объему) в круглодонную колбу вместимостью 25 куб. см. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Остаток в колбе растворяют в 5 куб. см смеси гексан — ацетон (8:2, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание дифеноконазола по п. 9.5.
9.5. Условия хроматографирования
Газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с электронозахватным детектором с -15 пределом детектирования не выше 8,2 х 10 г/куб. см.
Колонка капиллярная кварцевая НР-1 (типа SE-30), длина 5 м, внутренний диаметр 0,53 мм, толщина пленки 0,88 мкм, фирма Хьюлетт-Паккард (США).
Температура термостата испарителя — 270 °С, детектора — 320 °С, термостата колонки — 245 °С.
Расход газов: газа-носителя (азот) — 2,5 куб. см/мин.; поддувочного газа через детектор — 25 куб. см/мин.
Время удерживания дифеноконазола: 3 мин. 35 сек.
Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
Линейный диапазон детектирования: 0,02 — 0,4 нг.
Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю площадь хроматографического пика дифеноконазола.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 2,0 мкг/куб. см, разбавляют смесью гексан — ацетон (8:2).
10. Обработка результатов анализа
Содержание дифеноконазола рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
Н х А х V
1
где:
Х - содержание дифеноконазола в пробе, мг/кг;
Н - площадь пика образца, мВ х с;
1
Н - площадь пика стандарта, мВ х с;
0
А - концентрация стандартного раствора дифеноконазола, мкг/куб. см;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m - масса анализируемой части образца (г) (для корнеплодов, плодов,
клубней — 5 г).
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 х |Х - Х | х 100
1 2
------------------- <= r, (1)
(Х + Х )
1 2
где:
Х , Х - результаты параллельных определений, мг/кг (куб. дм);
1 2
r — значение предела повторяемости (таблица 1), при этом r = 2,8 сигма . r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
_
(Х +/- ДЕЛЬТА), мг/кг (куб. дм), при вероятности Р = 0,95,
где:
_
Х - среднее арифметическое результатов определений, признанных
приемлемыми, мг/кг (куб. дм); ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг (куб. дм);
_
дельта - граница относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе „менее нижней границы определения“ менее 0,02 мг/кг для корнеплодов, плодов и клубней <*>.»
<*> 0,02 мг/кг — предел обнаружения для корнеплодов, плодов и клубней.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки С должна удовлетворять условию: д
С = ДЕЛЬТА _ + ДЕЛЬТА __, д л,Х л,Х' где +/- ДЕЛЬТА _ (+/- ДЕЛЬТА __) - характеристика погрешности л,Х л,Х' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг (куб. дм);
_
дельта - граница относительной погрешности методики (показатель
точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.
Результат контроля процедуры К рассчитывают по формуле: к
__ _ К = Х' - Х - С , к д __ _ где Х', Х, С - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг (куб. дм).
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
_____________________
/ 2 2 К = \/ДЕЛЬТА __ + ДЕЛЬТА _. л,Х' л,Х Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
к
контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 х |Х - Х | х 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(Х + Х )
1 2
где:
Х , Х - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг (куб.
1 2
дм); R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.