---
title: "\"МУК 4.1.2114-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча) газохроматографическим методом. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2114-06"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2114-06"
---
## "МУК 4.1.2114-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча) газохроматографическим методом. Методические указания"
# "МУК 4.1.2114-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча) газохроматографическим методом. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 09.08.2006)
> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 сентября 2006 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
9 августа 2006 года
#### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
**ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ХЛОРОФОРМА,**
**1,2-ДИХЛОРЭТАНА, ТЕТРАХЛОРМЕТАНА, ХЛОРБЕНЗОЛА**
**В БИОСРЕДАХ (МОЧА) ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ**
**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.2114-06**
Дата введения
1 сентября 2006 года
Методические указания по определению концентраций химических веществ в биологических средах предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.
Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием органических соединений в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.
Методические указания разработаны в соответствии с требованиями [ГОСТ Р 8.563-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-329) "ГСОЕИ. Методики выполнения измерений", ГОСТ Р 1.5-92 "ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов". Методика анализа обеспечивает выполнение измерений массовой концентрации алифатических и ароматического хлорированных углеводородов в моче в диапазоне концентраций:
- хлороформ от 0,012 до 0,500 мкг/куб. см с погрешностью 24,9% при доверительной вероятности 0,95;
- тетрахлорметан от 0,001 до 0,030 мкг/куб. см с погрешностью 14,8% при доверительной вероятности 0,95;
- 1,2-дихлорэтан от 0,06 до 1,90 мкг/куб. см с погрешностью 25,0% при доверительной вероятности 0,95;
- хлорбензол от 0,044 до 2,200 мкг/куб. см с погрешностью 16,0% при доверительной вероятности 0,95.
Хлороформ (трихлорметан)
CHCl Молекулярная масса 119,38.
3
Хлороформ - бесцветная жидкость с характерным сладковатым запахом. Температура кипения 61,15 °С, температура плавления -63,5 °С. Хлороформ растворим в органических растворителях и малорастворим в воде, наркотик [[1]](#p100160).
Тетрахлорметан
CCl Молекулярная масса 153,82.
4
Тетрахлорметан - бесцветная жидкость. Температура кипения 76,75 °С, температура плавления -22,87 °С. Тетрахлорметан растворим в органических растворителях и малорастворим в воде. Тетрахлорметан - сильнейший наркотик [[1]](#p100160).
1,2-Дихлорэтан
C H Cl Молекулярная масса 98,97.
2 4 2
1,2-Дихлорэтан - бесцветная жидкость. Температура кипения 83,5 °С, температура плавления -35,3 °С, растворим в органических растворителях и малорастворим в воде. 1,2-Дихлорэтан является токсичным соединением [[1]](#p100160).
Хлорбензол
C H Cl Молекулярная масса 112,56.
6 5
Хлорбензол - бесцветная жидкость. Температура кипения 132 °С, температура плавления -45,6 °С. Хлорбензол хорошо растворим в органических растворителях и малорастворим в воде. Хлорбензол - наркотик, действующий на систему крови подобно бензолу, но значительно слабее [[1]](#p100160).
Методика основана на предварительном концентрировании анализируемых соединений из биологического материала (моча) экстракцией гептаном (хлороформ, 1,2-дихлорэтан) или гексаном (тетрахлорметан, хлорбензол) и последующем газохроматографическом анализе экстракта.
Выполнение измерений массовой концентрации алифатических хлорированных углеводородов и хлорбензола проводят методом газовой хроматографии с детектором электронного захвата. Определению не мешают ацетон, ароматические углеводороды, алифатические спирты, трихлорэтилен при содержании каждого из указанных веществ не более 0,5 мкг/куб. см.
Длительность анализа одной пробы мочи, включая экстракцию пробы, - 40 мин.
3.
Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы и реактивы
Раствор щавелевой кислоты, 10%-й.
4. Требования к безопасности
4.1. При выполнении работ должны быть соблюдены меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004-85 и правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76.
4.2. При работе необходимо соблюдать "Правила по технике безопасности и производственной санитарии при работе в химических лабораториях" (утверждены МЗ СССР 20.12.82) и "[Правила](https://bukva.ai/docs/pravila-ustroystva-i-bezopasnoy-ekspluatatsii) устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением" (утверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87).
4.3. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
4.4. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
5.
Требования к квалификации оператора
7.
Подготовка к выполнению измерений
**РАБОЧИЕ АТТЕСТОВАННЫЕ РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ**
**ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИИ**
**ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ**
| Номер смеси для градуировки | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Хлороформ, объем исходной аттестованной смеси (1,19 мкг/куб. см), куб. см | 1,0 | 2,0 | 5,0 | 10,0 | 20,0 | 30,0 |
| Концентрация хлороформа, мкг/куб. см | 0,012 | 0,024 | 0,060 | 0,120 | 0,240 | 0,360 |
| 1,2-Дихлорэтан, объем исходной аттестованной смеси (6,29 мкг/куб. см), куб. см | 1,0 | 2,0 | 5,0 | 10,0 | 20,0 | 30,0 |
| Концентрация 1,2-дихлорэтана, мкг/куб. см | 0,063 | 0,126 | 0,315 | 0,630 | 1,260 | 1,880 |
| Тетрахлорметан, объем исходной аттестованной смеси (1,63 мкг/куб. см), куб. см | 0,06 | 0,2 | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,0 |
| Концентрация тетрахлорметана, мкг/куб. см | 0,001 | 0,0033 | 0,008 | 0,016 | 0,024 | 0,033 |
| Хлорбензол, объем исходной аттестованной смеси (22,13 мкг/куб. см), куб. см | 0,2 | 0,5 | 1,0 | 2,0 | 5,0 | 10,0 |
| Концентрация хлорбензола, мкг/куб. см | 0,044 | 0,110 | 0,220 | 0,440 | 1,100 | 2,210 |
Для построения градуировочной характеристики хлороформа и 1,2-дихлорэтана аттестованный раствор в объеме 100 куб. см помещают в делительную воронку, добавляют 30 г высаливателя (хлорид натрия), подкисляют 10%-м раствором щавелевой кислоты (pH = 2) (контроль ведут по лакмусовой бумаге) и приливают 10 куб. см гептана. Содержимое воронки интенсивно встряхивают 10 мин., после отстаивания гептановый экстракт сливают в пробирку и центрифугируют для денатурации белка 10 мин.
Для построения градуировочной характеристики тетрахлорметана и хлорбензола аттестованный раствор в объеме 100 куб. см помещают в делительную воронку, добавляют 30 г высаливателя (хлорид натрия), подщелачивают 10%-м раствором гидроксида натрия (pH = 10) (контроль ведут по лакмусовой бумаге) и приливают 10 куб. см гексана. Содержимое воронки интенсивно встряхивают 10 мин., после отстаивания гексановый экстракт сливают в пробирку и центрифугируют для денатурации белка 10 мин.
В хроматографическую колонку через испаритель вводят по 10 куб. мм каждого экстракта градуировочного раствора и анализируют в условиях:
температура термостата колонок - 90 °С;
температура испарителя - 170 °С;
температура детектора - 250 °С;
расход газа-носителя (азот) - 30 куб. см/мин.;
скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч;
время удерживания хлороформа - 3 мин. 05 с;
тетрахлорметана - 4 мин. 20 с;
1,2-дихлорэтана - 5 мин. 30 с;
хлорбензола - 12 мин. 25 с.
На полученной хроматограмме определяют площади пиков определяемых компонентов и по средним результатам из 6 серий строят градуировочную характеристику. Градуировку проверяют 1 раз в квартал и при смене партии реактивов.
#### 7.5 Отбор проб
Отбор проб мочи в объеме не менее 400 куб. см производят в тщательно вымытый стеклянный сосуд с притертой пробкой. Анализ мочи проводить сразу или хранить в холодильнике не более 12 ч после отбора пробы.
Для определения хлороформа и 1,2-дихлорэтана. Пробу мочи в объеме 100 куб. см помещают в делительную воронку, добавляют 30 г высаливателя (хлорид натрия), подкисляют 10%-м раствором щавелевой кислоты (pH = 2) (контроль ведут по лакмусовой бумаге) и приливают 10 куб. см гептана. Содержимое воронки интенсивно встряхивают 10 мин., после отстаивания гептановый экстракт сливают в пробирку и центрифугируют для денатурации белка 10 мин. Полученный центрифугат в объеме 10 куб. мм хроматографируют и проводят количественное определение анализируемых соединений в подготовленной пробе по калибровочному графику. Процедуру повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух параллельных проб мочи.
Для определения тетрахлорметана и хлорбензола. Пробу мочи в объеме 100 куб. см помещают в делительную воронку, добавляют 30 г высаливателя (хлорид натрия), подщелачивают 10%-м раствором гидроксида натрия (pH = 10) (контроль ведут по лакмусовой бумаге) и приливают 10 куб. см гексана. Содержимое воронки интенсивно встряхивают 10 мин., после отстаивания гексановый экстракт сливают в пробирку и центрифугируют для денатурации белка 10 мин. Полученный центрифугат в объеме 10 куб. мм хроматографируют и проводят количественное определение анализируемых соединений в подготовленной пробе по калибровочному графику. Процедуру повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух параллельных проб мочи. Условия выполнения измерений аналогичны условиям при установлении градуировочной характеристики [(п. 7.4)](#p100090).
9.
Вычисление результатов измерений
10.
Внутренний контроль качества результатов измерений
**ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ТОЧНОСТИ,**
**ПОВТОРЯЕМОСТИ, ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ**
| Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/куб. см | Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма , % r | Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости) сигма R , % _ Х L | Показатель точности (границы относительной погрешности при вероятности Р = 0,95), +/- дельта, % |
| --- | --- | --- | --- |
| Хлороформ, от 0,012 до 0,5 вкл. | 3,6 | 5,9 | 24,9 |
| Тетрахлорметан, от 0,001 до 0,03 вкл. | 12,3 | 15,9 | 14,8 |
| 1,2-Дихлорэтан, от 0,06 до 1,9 вкл. | 6,2 | 7,4 | 25,0 |
| Хлорбензол, от 0,04 до 2,2 вкл. | 6,7 | 12,9 | 16,0 |
**ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛОВ ПОВТОРЯЕМОСТИ И ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ**
**ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ Р = 0,95**
| Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/куб. см | Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r , % n | Предел внутрилабораторной воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории, но в разных условиях), R , % _ Х L |
| --- | --- | --- |
| Хлороформ, от 0,012 до 0,5 вкл. | 10,1 | 13,5 |
| Тетрахлорметан, от 0,001 до 0,03 вкл. | 14,1 | 16,3 |
| 1,2-Дихлорэтан, от 0,06 до 1,9 вкл. | 17,1 | 20,3 |
| Хлорбензол, от 0,04 до 2,2 вкл. | 13,1 | 16,7 |
#### 10.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят раз в квартал в анализируемой серии измерений. Определяют содержание исследуемых соединений в градуировочных растворах, которые соответствуют началу, середине и концу градуировочного интервала. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданными и измеренными значениями концентраций не превышает 5%.
#### 10.2 Контроль повторяемости
Относительное расхождение между результатами двух измерений,
выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении
образцов одной и той же рабочей пробы с использованием одних и тех же
средств измерений и реактивов, в течение возможно минимального интервала
времени, не должно превышать значения предела повторяемости r [(табл. 3)](#p100134).
n
Повторяемость результатов параллельных измерений признают
удовлетворительной, если:
r Х + Х
n max min
Х - Х <= --- х -----------,
max min 100 2
где:
r - значение предела повторяемости, %;
n
Х - максимальный результат из 2-х параллельных измерений;
max
Х - минимальный результат из 2-х параллельных измерений.
min
Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
#### 10.3 Контроль воспроизводимости
Контроль воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы.
Пробу делят на две равные части и анализируют в соответствии с методикой,
максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разное
время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и
т.д.). Воспроизводимость результатов контрольных измерений признают
удовлетворительной, если выполняется условие:
R
_ _ _
Х Х + Х
_ _ L 1 2
|Х - Х | <= --- х -------,
1 2 100 2
где:
_
Х - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных
1
измерений, мкг/куб. см;
_
Х - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных
2
измерений, полученный в других условиях, мкг/куб. см;
R - значение предела внутрилабораторной воспроизводимости, %
_
Х
L
[(табл. 3)](#p100134).
_ _
Расхождение между результатами измерений Х и Х , полученных в разных
1 2
условиях, не должно превышать значений показателя воспроизводимости R при
_
Х
L
доверительной вероятности Р = 0,95, указанных в [табл. 3](#p100134).
Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
#### 10.4 Контроль точности
Контроль точности с использованием метода добавок состоит в сравнении
результата контрольной процедуры, равного разности между результатом
контрольного измерения содержания хлорированных соединений (хлороформ,
тетрахлорметан, 1,2-дихлорэтан, хлорбензол) в пробе с известной добавкой
1
_ _
(Х ), в рабочей пробе без добавки (Х) и величиной добавки С (добавка
д
должна составлять не менее 40% от содержания хлорированных соединений в
рабочей пробе) с нормативом точности К. Результаты контроля признаются
удовлетворительными, если выполняется условие:
1
_ _
|Х - Х - С | = К ,
д k
1
_
Х - средний результат контрольного измерения содержания определяемого
компонента в рабочей пробе с известной добавкой из 2-х параллельных
измерений, мкг/куб. см;
_
Х - средний результат контрольного измерения содержания определяемого
компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений, мкг/куб. см;
С - величина добавки к пробе, мкг/куб. см.
д
__________________________
/ 2 1 2
/дельта _ дельта _
К = 0,84 х \/(------ х Х) + (------ х Х )
100 100
Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным при
выполнении условия: К <= К.
k
При превышении норматива контроля К эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.
Периодичность ВКК регламентируют в руководстве по качеству лаборатории.
1. Бандман А.Л., Войтенко Г.А., Волкова Н.В. и др. Вредные химические вещества. Углеводороды. Галогенпроизводные углеводородов: Справ. изд. /Под ред. В.А. Филова и др. Л.: "Химия", 1990.
Методические указания разработаны Пермским научно-исследовательским клиническим институтом детской экопатологии (Т.С. Уланова, Т.В. Нурисламова, Н.А. Попова).
---