---
title: "\"МУК 4.1.2064-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств хизалофоп-П-этила в зерне гороха, семенах и масле подсолнечника по основному метаболиту хизалофоп-П кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.2064-06"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2064-06"
---

## "МУК 4.1.2064-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств хизалофоп-П-этила в зерне гороха, семенах и масле подсолнечника по основному метаболиту хизалофоп-П кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.2064-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств хизалофоп-П-этила в зерне гороха, семенах и масле подсолнечника по основному метаболиту хизалофоп-П кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии"

(утв. Роспотребнадзором 05.05.2006)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2006 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
5 мая 2006 года

</div>



#### <a id="p100168"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ХИЗАЛОФОП-П-ЭТИЛА**
**В ЗЕРНЕ ГОРОХА, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА ПО ОСНОВНОМУ**
**МЕТАБОЛИТУ ХИЗАЛОФОП-П КИСЛОТЕ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.2064-06**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 июля 2006 года

1. <a id="p100005"></a>Подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100009"></a>Вводная часть



#### <a id="p100010"></a>1.1 Краткая характеристика препарата.

<a id="p100011"></a>Фирма производитель: ЗАО "Фирма Август".
<a id="p100012"></a>Торговое название: Миура, КЭ.
<a id="p100013"></a>Действующее вещество (д.в.): хизалофоп-П-этил.
<a id="p100014"></a>Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: (R)-2-[4-[(6-хлорхиноксалин-2-илокси)-фенокси]пропионовой кислоты этиловый эфир.
<a id="p100015"></a>Структурная формула д.в.: (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула д.в.: C  H  ClN O .
                                19 17   2 4
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса д.в.: 372,8.
<a id="p100018"></a>Химически чистое вещество: светло-коричневые кристаллы.
<a id="p100019"></a>Температура плавления д.в.: 76 - 77 °C.
<a id="p100020"></a>Давление пара д.в. при 20 °C: 0,011 мПа.
<a id="p100021"></a>Растворимость д.в. (г/л) при 20 °C: в воде - 0,0004, в гексане - 5,0, этаноле - 22, ксилоле - 360, ацетоне - 650.
<a id="p100022"></a>Стабильность д.в.: устойчив к действию света, разлагается до хизалофоп-П кислоты под действием разбавленных кислот и щелочей.
<a id="p100023"></a>    Острая пероральная токсичность препаратов (LD  ) для крыс - 1180 - 1210
                                                 50
мг/кг,  для  мышей - 1750 - 1800 мг/кг. Не оказывает раздражающего действия
на кожу.
<a id="p100024"></a>Гигиенические нормативы: ВМДУ в горохе и масле подсолнечника - 0,05 мг/кг, семенах подсолнечника - 0,02 мг/кг.

#### <a id="p100025"></a>1.2 Краткая характеристика хизалофоп-П кислоты.

<a id="p100026"></a>Название по номенклатуре ИЮПАК: (R)-2-[4-[(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовая кислота.
<a id="p100027"></a>Структурная формула: (не приводится).
<a id="p100028"></a>    Эмпирическая формула д.в.: C  H  ClN O .
                                17 13   2 4
<a id="p100029"></a>Молекулярная масса д.в.: 344,8.


## 2. <a id="p100030"></a>Метод определения хизалофоп-П-этила в зерне гороха, семенах и масле подсолнечника по основному метаболиту хизалофоп-П кислоте с применением капиллярной газожидкостной хроматографии



### <a id="p100031"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100032"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100033"></a>Метод основан на количественном определении хизалофоп-П кислоты, основного метаболита хизалофоп-П-этила, и включает извлечение остаточных количеств хизалофоп-П кислоты из анализируемого объекта органическими растворителями, очистку экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и метилирование хизалофоп-П кислоты диазометаном. Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением капиллярной газожидкостной хроматографии и использованием термоионного детектора (ТИД).

##### <a id="p100034"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100035"></a>Метод специфичен в присутствии других применяемых в сельском хозяйстве пестицидов. Способы очистки экстрактов, а также применение селективного детектора и капиллярной колонки позволяет устранять влияние коэкстрактивных веществ на результаты анализа.

##### <a id="p100036"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100037"></a>Диапазоны измеряемых концентраций, пределы обнаружения и другие метрологические параметры метода представлены в таблицах 1 и [2](#p100047).

<a id="p100038"></a>Таблица 1

<a id="p100039"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="43%"><col width="19%"><col width="19%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Метрологические параметры</td><td colspan="3">Анализируемые объекты:</td></tr>
<tr><td>зерно гороха</td><td>семена подсолнечника</td><td>масло подсолнечника</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>0,01</td><td>0,01</td><td>0,025</td></tr>
<tr><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>0,01 - 0,08</td><td>0,01 - 0,08</td><td>0,025 - 0,2</td></tr>
<tr><td>Среднее значение определения, %</td><td>82,3</td><td>77,0</td><td>80,0</td></tr>
<tr><td>Стандартное отклонение, %</td><td>4,5</td><td>5,9</td><td>6,2</td></tr>
<tr><td>Относительное стандартное отклонение, %</td><td>2,7</td><td>3,3</td><td>3,7</td></tr>
</table>


<a id="p100046"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100047"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХИЗАЛОФОП-П КИСЛОТЫ**

</div>

**В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ (N = 6)**


<table>
<colgroup><col width="30%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="36%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемые объекты</td><td>Внесено, мг/кг</td><td>Извлечено, %</td><td>Доверительный интервал среднего результата, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно гороха</td><td>0,01</td><td>77,3</td><td>+/- 5,3</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>81,4</td><td>+/- 4,6</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>83,7</td><td>+/- 4,3</td></tr>
<tr><td>0,08</td><td>86,9</td><td>+/- 3,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Семена подсолнечника</td><td>0,01</td><td>69,8</td><td>+/- 6,7</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>75,3</td><td>+/- 6,1</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>79,2</td><td>+/- 5,8</td></tr>
<tr><td>0,08</td><td>83,5</td><td>+/- 5,3</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Масло подсолнечника</td><td>0,025</td><td>75,5</td><td>+/- 7,1</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>78,3</td><td>+/- 6,5</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>82,2</td><td>+/- 5,8</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>83,8</td><td>+/- 5,4</td></tr>
</table>



### <a id="p100061"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы


<a id="p100062"></a>Аналитический стандарт хизалофоп-П кислоты.
<a id="p100063"></a>Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-25-89.
<a id="p100064"></a>Ацетон, ос.ч. ТУ 2633-004-11291058-94.
<a id="p100065"></a>Ацетонитрил для хроматографии, х.ч., ТУ 6-09-4326-76.
<a id="p100066"></a>Вата медицинская, ТУ 9393-001-00302238-97.
<a id="p100067"></a>    Вода дистиллированная и перегнанная над KMnO  и щелочью.
                                                4
<a id="p100068"></a>н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100069"></a>Дихлорметан, х.ч., ТУ 6-09-2662-77.
<a id="p100070"></a>Изооктан эталонный, [ГОСТ 12433-83](https://bukva.ai/docs/gost-12433-83).
<a id="p100071"></a>Калия гидроокись, ч.д.а., [ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80).
<a id="p100072"></a>Натрий сернокислый б/в (сульфат), ч.д.а., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100073"></a>Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.
<a id="p100074"></a>N-Нитрозометилмочевина, х.ч., ТУ 6-09-11-1643-82.
<a id="p100075"></a>Серная кислота, ос.ч., [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78).
<a id="p100076"></a>Спирт этиловый ректификат (этанол), [ГОСТ 17299-78](https://bukva.ai/docs/gost-17299-78).
<a id="p100077"></a>Фильтры бумажные, красная лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100078"></a>Фильтры бумажные, белая лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100079"></a>Фильтры бумажные, синяя лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100080"></a>Эфир этиловый (серный), ОСТ 84-2006-88.


### <a id="p100081"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100082"></a>Газовый хроматограф с ТИД.
<a id="p100083"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52, толщина слоя - 0,45 мкм.
<a id="p100084"></a>Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный.
<a id="p100085"></a>Весы аналитические типа ВЛА-200, ГОСТ 34104-80.
<a id="p100086"></a>Весы лабораторные типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.
<a id="p100087"></a>Воронки делительные емкостью 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100088"></a>Воронки химические конусные, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100089"></a>Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-76.
<a id="p100090"></a>Колбы-концентраторы емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100091"></a>Колбы плоскодонные емкостью 100 и 300 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100092"></a>Колбы мерные со шлифом емкостью 25, 50, 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100093"></a>Колпачки алюминиевые для герметизации флаконов, [ГОСТ Р 51314-99](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51314-99).
<a id="p100094"></a>Мельница электрическая лабораторная, ТУ 46-22-236-79 или аналогичная.
<a id="p100095"></a>Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
<a id="p100096"></a>Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100097"></a>Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1 или аналогичный.
<a id="p100098"></a>Пипетки мерные емкостью 1, 2, 5 и 10 мл, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100099"></a>Приспособление для обжима колпачков на флаконах, ТУ 42-2-2442-73.
<a id="p100100"></a>Пробирки мерные со шлифом емкостью 5,0 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100101"></a>Стаканы химические на 100, 200 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100102"></a>Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении.
<a id="p100103"></a>Установка для упаривания растворителей в токе азота.
<a id="p100104"></a>Установка ультразвуковая "Серьга" УЗМ002 или аналогичная.
<a id="p100105"></a>Флаконы стеклянные (типа пенициллиновых) емкостью 5,0 мл, ТУ 64-2-10-87.
<a id="p100106"></a>Электроплитка, ГОСТ 14919-83.


### <a id="p100107"></a>2.4. Подготовка к определению



##### <a id="p100108"></a>2.4.1 Подготовка и очистка растворителей

<a id="p100109"></a>Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре +40 °C до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.

##### <a id="p100110"></a>2.4.2 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100111"></a>Основной раствор хизалофоп-П кислоты с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением в смеси ацетон:этанол (80:20) 0,01 г аналитического стандарта в мерной колбе емкостью 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре +4 - 6 °C не более трех месяцев.
<a id="p100112"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 4,0, 2,0, 1,0 и 0,5 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора хизалофоп-П кислоты соответствующим последовательным разбавлением ацетоном.
<a id="p100113"></a>Для приготовления калибровочных растворов в мерные пробирки со шлифом емкостью 5,0 мл вносят по 1,0 мл рабочих растворов хизалофоп-П кислоты с концентрациями 0,5, 1,0, 2,0 и 4,0 мкг/мл. Растворители в пробирках упаривают в токе азота досуха и проводят метилирование хизалофоп-П кислоты.
<a id="p100114"></a>В пробирки добавляют по 2,0 мл свежеприготовленного эфирного раствора диазометана [(п. 2.4.4)](#p100117), закрывают притертыми пробками и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °C. После этого этиловый эфир в пробирках упаривают досуха в токе азота при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл изооктана и хроматографируют по [п. 2.6.3](#p100144).

##### <a id="p100115"></a>2.4.3 Построение калибровочного графика

<a id="p100116"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл приготовленных по [п. 2.4.2](#p100110) растворов, содержащих хизалофоп-П кислоту (в виде хизалофоп-П-метила) в концентрациях 0,5, 1,0, 2,0 и 4,0 мкг/мл. Осуществляют не менее трех параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации хизалофоп-П кислоты в рабочем растворе в мкг/мл.

##### <a id="p100117"></a>2.4.4 Приготовление эфирного раствора диазометана (из расчета метилирования хизалофоп-П кислоты в экстрактах 2-х проб)

<a id="p100118"></a>N-Нитрозометилмочевину массой 0,5 г помещают во флакон емкостью 2,0 - 3,0 мл и герметизируют резиновой пробкой и колпачком с помощью приспособления для обжима колпачков на флаконах. Этиловый эфир объемом 4,0 мл вносят в другой флакон емкостью 5,0 мл, герметизируют резиновой пробкой и колпачком и охлаждают в морозильной камере холодильника в течение 30 минут.
<a id="p100119"></a>После этого флаконы через предварительно проколотые пробки соединяют гибкой тефлоновой трубкой (внутр. диам. ~ 1,5 - 2,0 мм), одним концом погружая ее в этиловый эфир на всю глубину (флакон с охлажденным этиловым эфиром обязательно должен еще иметь свободный выход в атмосферу). Во флакон с нитрозометилмочевиной, используя шприц с тонкой иглой и прокалывая пробку, добавляют по каплям по стенке 50% водный раствор гидроокиси калия (~ 0,3 мл) до прекращения реакции. Этиловый эфир при насыщении диазометаном окрашивается в ярко желтый цвет.
<a id="p100120"></a>Внимание! Приготовление эфирного раствора диазометана и процедуру метилирования необходимо обязательно проводить в работающем вытяжном шкафу.


### <a id="p100121"></a>2.5. Отбор, первичная обработка и хранение проб


<a id="p100122"></a>Отбор проб зерна гороха проводят в соответствии с [ГОСТ 28674-90](https://bukva.ai/docs/gost-28674-90). "Горох. Требования по заготовке и поставке", семян и масла подсолнечника - [ГОСТ 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979). "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100123"></a>Среднюю пробу зерна гороха измельчают, перемешивают и выделяют аналитические пробы. Для длительного хранения аналитические пробы зерна гороха помещают в морозильную камеру с температурой -18 °C и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
<a id="p100124"></a>Пробы семян подсолнечника просушивают до стандартной влажности и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре. Перед анализом семена подсолнечника вылущивают, измельчают на лабораторной мельнице и после перемешивания измельченной массы отбирают усредненную аналитическую пробу.
<a id="p100125"></a>Пробы масла подсолнечника хранят в холодильнике при 0 - 4 °C в закрытой стеклянной таре не более 2-х месяцев.


### <a id="p100126"></a>2.6. Проведение определения



##### <a id="p100127"></a>2.6.1 Зерно гороха и семена подсолнечника


###### <a id="p100128"></a>2.6.1.1 Экстрагирование и очистка экстракта

<a id="p100129"></a>Аналитическую пробу массой 25,0 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл и добавляют к пробе зерна гороха 150 мл смеси ацетон:этанол (80:20), а к пробе семян подсолнечника 150 мл смеси ацетон:этанол:бидистиллированная вода (70:20:10). Содержимое колбы слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 минут. После этого экстракт фильтруют через бумажный фильтр белая лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.
<a id="p100130"></a>При использовании аппарата для встряхивания в колбу с аналитической пробой зерна гороха вносят 150 мл смеси ацетон:этанол (80:20), а к пробе семян подсолнечника добавляют 150 мл смеси ацетон:этанол:бидистиллированная вода (70:20:10). Содержимое колбы встряхивают в течение 60 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр белая лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.
<a id="p100131"></a>Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители до объема 10 - 20 мл при температуре +40 °C. В колбу-концентратор добавляют 200 мл бидистиллированной воды, 5,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия, перемешивают встряхиванием и помещают в холодильник с температурой +4 - 6 °C на 2 часа. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в делительную воронку емкостью 500 мл. К содержимому воронки добавляют 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, 75 мл дихлорметана и воронку встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний дихлорметановый слой сливают и отбрасывают. Эту процедуру очистки экстракта повторяют с использованием 50 мл дихлорметана. Далее в воронку добавляют 40 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, приливают 75 мл н-гексана и встряхивают содержимое воронки в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний водный слой собирают в химический стакан емкостью 300 мл, а верхний гексановый слой сливают и отбрасывают.
<a id="p100132"></a>Водный раствор пробы, находящийся в химическом стакане, подкисляют концентрированной серной кислотой до pH 2,0 и переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 75 мл смеси гексан:этиловый эфир (80:20) и встряхивают в течение 2-х минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в химический стакан, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через фильтр синяя лента со слоем безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 1,0 - 1,5 см) в колбу-концентратор емкостью 150 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси гексан:этиловый эфир (80:20). Нижний водный слой отбрасывают.
<a id="p100133"></a>Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители до объема 3 - 5 мл при температуре +40 °C. Остаток экстракта количественно переносят из колбы-концентратора в мерную пробирку со шлифом емкостью 5,0 мл и упаривают растворители досуха в токе азота при температуре +50 °C.

###### <a id="p100134"></a>2.6.1.2 Метилирование

<a id="p100135"></a>После охлаждения до комнатной температуры в пробирку с сухим остатком добавляют 2,0 мл свежеприготовленного эфирного раствора диазометана (по [п. 2.4.4](#p100117)). Пробирку закрывают притертой пробкой и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °C. После этого этиловый эфир в пробирке упаривают досуха в токе азота при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл изооктана и проводят количественное определение хизалофоп-П кислоты по [п. 2.6.3](#p100144).

##### <a id="p100136"></a>2.6.2 Масло подсолнечника


###### <a id="p100137"></a>2.6.2.1 Экстрагирование и очистка экстракта

<a id="p100138"></a>Аналитическую пробу масла массой 10,0 +/- 0,1 г растворяют в 50 мл гексана (насыщенного ацетонитрилом) в плоскодонной колбе емкостью 100 мл и после этого гексановый раствор масла переносят в делительную воронку емкостью 250 мл. Колбу промывают 50 мл ацетонитрила (насыщенного гексаном) и также переносят его в воронку. Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний ацетонитрильный слой сливают в колбу-концентратор емкостью 250 мл. В делительную воронку добавляют еще 50 мл ацетонитрила (насыщенного гексаном). Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут, отстаивают и нижний ацетонитрильный слой объединяют в колбе-концентраторе с предыдущим. Верхний гексановый слой отбрасывают.
<a id="p100139"></a>Колбу-концентратор с объединенным ацетонитрильным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель до объема 10 - 20 мл при температуре +50 °C. В колбу-концентратор добавляют 200 мл дистиллированной воды, 5,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия, раствор перемешивают встряхиванием и выдерживают 2 часа в холодильнике с температурой +4 - 6 °C. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр белая лента в делительную воронку емкостью 500 мл. К содержимому воронки добавляют 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, 75 мл дихлорметана и воронку встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний дихлорметановый слой сливают и отбрасывают. Эту процедуру очистки экстракта повторяют два раза с использованием каждый раз по 50 мл дихлорметана. Далее в воронку добавляют 40 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, приливают 75 мл н-гексана и встряхивают содержимое воронки в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний водный слой собирают в химический стакан емкостью 300 мл, а верхний гексановый слой сливают и отбрасывают.
<a id="p100140"></a>Водный раствор пробы, находящийся в химическом стакане, подкисляют концентрированной серной кислотой до pH 2,0 и переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 75 мл смеси гексан:этиловый эфир (80:20) и встряхивают в течение 2-х минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в химический стакан, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через фильтр синяя лента со слоем безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 1,0 - 1,5 см) в колбу-концентратор емкостью 150 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси гексан:этиловый эфир (80:20). Нижний водный слой отбрасывают.
<a id="p100141"></a>Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители до объема 3 - 5 мл при температуре +40 °C. Остаток экстракта количественно переносят из колбы-концентратора в мерную пробирку со шлифом емкостью 5,0 мл и упаривают растворители досуха в токе азота при температуре +50 °C.

###### <a id="p100142"></a>2.6.2.2 Метилирование

<a id="p100143"></a>После охлаждения до комнатной температуры в пробирку с сухим остатком добавляют 2,0 мл свежеприготовленного эфирного раствора диазометана (по [п. 2.4.4](#p100117)). Пробирку закрывают притертой пробкой и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °C. После этого этиловый эфир в пробирке упаривают досуха в токе азота при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл изооктана и проводят количественное определение хизалофоп-П кислоты по п. 2.6.3.

##### <a id="p100144"></a>2.6.3 Условия хроматографирования

<a id="p100145"></a>Газовый хроматограф с ТИД.
<a id="p100146"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52, толщина слоя - 0,45 мкм.
<a id="p100147"></a>Температура колонки: программирование от 180 °C (1 мин.) до 280 °C (15 мин.) со скоростью 10 °C/мин.
<a id="p100148"></a>Температура испарителя: 250 °C.
<a id="p100149"></a>Температура детектора: 290 °C.
<a id="p100150"></a>Расход газов: газа-носителя (гелий марки "А") - 2,5 куб. см/мин., водорода и воздуха к ТИД - 30 и 250 куб. см/мин. соответственно, дополнительного газа (гелий марки "А") к ТИД - 30 куб. см/мин.
<a id="p100151"></a>Объем вводимой пробы: 2 мкл.
<a id="p100152"></a>Время удерживания хизалофоп-П кислоты (в виде производного): 13,2 +/- 0,1 мин.
<a id="p100153"></a>Предел детектирования: 0,25 нг.
<a id="p100154"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,5 - 4,0 нг.

##### <a id="p100155"></a>2.6.4 Обработка результатов анализа.

<a id="p100156"></a>Содержание хизалофоп-П кислоты рассчитывают методом внешнего стандарта по формуле:

                                  H x A x V
<a id="p100157"></a>                              X = ---------,
                                   H   x m
                                    ст

<a id="p100158"></a>    где:
    X - содержание хизалофоп-П кислоты в пробе, мг/кг;
    H - высота (площадь) пика анализируемого вещества, мм (кв. мм);
    H   - высота (площадь) пика стандартного вещества, мм (кв. мм);
     ст
    A  -  концентрация  стандартного рабочего раствора хизалофоп-П кислоты,
мкг/мл;
    V - количество экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    m - масса (г) аналитической пробы.
<a id="p100159"></a>    Пересчет на содержание хизалофоп-П-этила (X ) проводят по формуле:
                                               1

<a id="p100160"></a>                              X  = 1,08 x X.
                               1


## 3. <a id="p100161"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100162"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации к приборам.


## 4. <a id="p100163"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100164"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".


## 5. <a id="p100165"></a>Разработчики


<a id="p100166"></a>ВНИИ защиты растений.



<a id="p100167"></a>

---