---
title: "\"МУК 4.1.2055-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.2055-06"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-2055-06"
---

## "МУК 4.1.2055-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.2055-06. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

(утв. Роспотребнадзором 10.04.2006)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 мая 2006 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
10 апреля 2006 года

</div>



#### <a id="p100157"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУДИОКСОНИЛА**
**В ЗЕРНЕ И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<div align="center">

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.2055-06**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

1 мая 2006 года

</div>


1. <a id="p100005"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

<div align="center">

4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

</div>


<a id="p100009"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации флудиоксонила в зерне и масле сои в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг.
<a id="p100010"></a>Флудиоксонил - действующее вещество фунгицида Максим, КС (25 г/л), фирма-производитель Сингента Кроп Протекшн АГ (Швейцария).
<a id="p100011"></a>4-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-4-ил)-пиррол-3-карбонитрил (IUPAC).
<a id="p100012"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100013"></a>    C  H F N O .
     12 6 2 2 2
<a id="p100014"></a>    Мол. масса: 248,2.
<a id="p100015"></a>    Бесцветное  кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления:
                                                      -4
199,8   °С.  Давление  паров  при  25  °С:  3,9  х  10    мПа.  Коэффициент
распределения  н-октанол/вода:  К   log Р = 4,12. Растворимость (г/куб. дм)
                                 ow
при  25 °С: ацетон - 190; этанол - 44; н-октанол - 20; толуол - 2,7; гексан
- 0,008; вода - 0,0018.
<a id="p100016"></a>    В  биологически активных почвах в аэробных условиях флудиоксонил быстро
разлагается или переходит в прочносвязанное состояние: DT   = 10 - 25 дней.
                                                         50
<a id="p100017"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100018"></a>    Острая  пероральная токсичность (LD  ) для крыс и мышей - > 5000 мг/кг;
                                       50
острая  дермальная  токсичность  (LD  )  для  крыс  -  > 2000 мг/кг; острая
                                    50
ингаляционная  токсичность  (LC  )  для  крыс  -  > 2600 мг/куб. м воздуха.
                               50
Флудиоксонил не оказывает раздражающего действия на слизистые оболочки глаз
и  кожу  кроликов  и  не  обладает  тератогенным,  мутагенным  и онкогенным
эффектами.  Фунгицид  практически  нетоксичен  для  птиц,  рыб, пчел, диких
животных, дождевых червей, дафний и водорослей.
<a id="p100019"></a>Рекомендуемый норматив для флудиоксонила в зерне и масле сои - 0,02 мг/кг.
<a id="p100020"></a>Область применения препарата
<a id="p100021"></a>Флудиоксонил - контактный фунгицид широкого спектра действия с продолжительной активностью. Высокоэффективен против снежной плесени, твердой головни, гельминтоспориозной и фузариозной корневых гнилей на зерновых злаках, а также ризоктониоза, склеротиниоза, серой гнили и альтернариоза на винограде, косточковых плодовых, овощных и декоративных культурах.
<a id="p100022"></a>Зарегистрирован в России под торговым названием Максим, КС (25 г/л) в качестве фунгицида для предпосевного протравливания семян зерновых культур, гороха, а также для обработки клубней картофеля перед закладкой на хранение. В настоящее время проходит регистрационные испытания в качестве протравителя семян сои.


## 1. <a id="p100023"></a>Метрологические характеристики метода


<a id="p100024"></a>Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и [2](#p100031).

<a id="p100025"></a>Таблица 1

<a id="p100026"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="11%"><col width="19%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="15%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="6">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Относительное отклонение, DS, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,5</td><td>3,8</td><td>1,7</td><td>+/- 3,5</td></tr>
<tr><td>Масло</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,7</td><td>3,6</td><td>1,6</td><td>+/- 3,4</td></tr>
</table>


<a id="p100030"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100031"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛУДИОКСОНИЛА**

</div>

В МОДЕЛЬНЫХ МАТРИЦАХ (n = 5)


<table>
<colgroup><col width="11%"><col width="28%"><col width="26%"><col width="35%"></colgroup>
<tr><td>Матрица</td><td>Внесено флудиоксонила, мг/кг</td><td>Открыто флудиоксонила, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно</td><td>0,02</td><td>80,0</td><td>4,5</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>81,6</td><td>3,7</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>83,6</td><td>3,5</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>84,7</td><td>3,1</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Масло</td><td>0,02</td><td>80,3</td><td>+/- 4,1</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>82,0</td><td>+/- 3,9</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>83,7</td><td>+/- 3,5</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>85,0</td><td>+/- 2,1</td></tr>
</table>



## 2. <a id="p100041"></a>Метод измерений


<a id="p100042"></a>Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Контроль флудиоксонила в матрицах осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из зерна и масла ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия.
<a id="p100043"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


## 3. <a id="p100044"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,

реактивы и материалы


### <a id="p100045"></a>3.1. Средства измерений


<a id="p100046"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором       Номер Госреестра
с переменной длиной волны (фирмы Knauer, Германия)
<a id="p100047"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100048"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим ГОСТ 7328
пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой
погрешности +/- 0,036 г
<a id="p100049"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100050"></a>Меры массы ГОСТ 7328
<a id="p100051"></a>Пипетки градуированные 2-го класса точности [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
<a id="p100052"></a>Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)

<div align="center">

вместимостью 5 куб. см<br>
<a id="p100053"></a>Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)<br>
25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см.

</div>

<a id="p100054"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


### <a id="p100055"></a>3.2. Реактивы


<a id="p100056"></a>Флудиоксонил, аналитический стандарт с  содержанием
д.в. 99,8% (Сингента, Швейцария)
<a id="p100057"></a>Ацетонитрил, хч                                            ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100058"></a>Вода бидистиллированная                                    ГОСТ 6702
<a id="p100059"></a>н-Гексан, хч                                               ТУ 6-09-3375
<a id="p100060"></a>Натрий сернокислый, безводный, хч [ГОСТ 4166](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)

<div align="center">

<a id="p100061"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, ч [ГОСТ 22300](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)

</div>

<a id="p100062"></a>Эфир диэтиловый                                            ГОСТ 6265-74
<a id="p100063"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


### <a id="p100064"></a>3.3. Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100065"></a>Ванна ультразвуковая, модель D-50,
фирма Branson Instr. Co. (США)
<a id="p100066"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 0147
<a id="p100067"></a>Воронки делительные вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100068"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 и 60 мм ГОСТ 25336
<a id="p100069"></a>Дефлегматор елочный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100070"></a>Колба Бунзена                                                  ГОСТ 5614
<a id="p100071"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100072"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25 и 150 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100073"></a>Колонка хроматографическая стеклянная длиной 25 см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100074"></a>Мельница электрическая лабораторная                            ТУ 46-22-236
<a id="p100075"></a>Оксид алюминия нейтральный (Вельм, Германия) 1 степени
активности для колоночной хроматографии
<a id="p100076"></a>Стаканы химические вместимостью 100 и 500 куб. см
<a id="p100077"></a>Стекловата
<a id="p100078"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или                     ТУ 25-11-917
ротационный вакуумный испаритель В-169
фирмы Buchi (Швейцария)
<a id="p100079"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100080"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной 15 см,
внутренним диаметром 4 мм, содержащая Кромасил 100-С18 (5 мкм)
<a id="p100081"></a>Шприц для ввода образцов в жидкостной хроматограф
вместимостью 50 - 100 куб. мм (Hamilton, США)
<a id="p100082"></a>Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.


## 4. <a id="p100083"></a>Требования безопасности


<a id="p100084"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
<a id="p100085"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.


## 5. <a id="p100086"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100087"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
<a id="p100088"></a>К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.


## 6. <a id="p100089"></a>Условия измерений


<a id="p100090"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100091"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100092"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.


## 7. <a id="p100093"></a>Подготовка к выполнению измерений


<a id="p100094"></a>Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с оксидом алюминия.


### <a id="p100095"></a>7.1. Очистка органических растворителей



##### <a id="p100096"></a>7.1.1 Очистка н-гексана

<a id="p100097"></a>Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения ее окрашивания в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

##### <a id="p100098"></a>7.1.2 Очистка этилацетата

<a id="p100099"></a>Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

##### <a id="p100100"></a>7.1.3 Очистка диэтилового эфира

<a id="p100101"></a>Растворитель предварительно встряхивают со свежеприготовленным раствором железного купороса, а затем последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют.


### <a id="p100102"></a>7.2. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта


<a id="p100103"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию: 10 г оксида алюминия V степени активности в 20 куб. см гексана (оксид алюминия V степени активности по Брокману получают добавлением 15% воды к оксиду алюминия I степени активности). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., после чего она готова к работе.


### <a id="p100104"></a>7.3. Проверка хроматографического поведения флудиоксонила на колонке с оксидом алюминия


<a id="p100105"></a>В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,5 куб. см градуировочного раствора N 1 флудиоксонила с концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле [(п. 7.6.2)](#p100114), раствор упаривают досуха, остаток растворяют в 0,6 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,4 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую баню на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.2](#p100102). Промывают колонку 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек. Фракционно (по 5 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 7.4, перемешивают и анализируют на содержание флудиоксонила по [п. 9.4](#p100135).


### <a id="p100106"></a>7.4. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100107"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 500 куб. см ацетонитрила, 500 куб. см бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.


### <a id="p100108"></a>7.5. Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100109"></a>Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по [п. 7.4](#p100106)) при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.


### <a id="p100110"></a>7.6. Приготовление градуировочных растворов



##### <a id="p100111"></a>7.6.1 Исходный раствор флудиоксонила для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

<a id="p100112"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,010 г флудиоксонила, растворяют в 40 - 50 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
<a id="p100113"></a>Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение 3-х месяцев.

##### <a id="p100114"></a>7.6.2 Раствор флудиоксонила N 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см)

<a id="p100115"></a>В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора флудиоксонила с концентрацией 100 мкг/куб. см [(п. 7.6.1)](#p100111), разбавляют ацетонитрилом до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов N 2 - 5.
<a id="p100116"></a>Для приготовления проб зерна и масла с внесением при оценке полноты извлечения флудиоксонила из исследуемых образцов используют ацетоновый раствор флудиоксонила с концентрацией 10 мкг/куб. см.
<a id="p100117"></a>Градуировочный раствор N 1 и ацетоновый раствор флудиоксонила хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.
<a id="p100118"></a>7.6.3. Рабочие растворы N 2 - 5 флудиоксонила для градуировки (концентрация 0,05 - 0,5 мкг/куб. см)
<a id="p100119"></a>В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 куб. см градуировочного раствора N 1 флудиоксонила с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.6.2)](#p100114), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.4](#p100106), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией флудиоксонила 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см соответственно.
<a id="p100120"></a>Растворы готовят непосредственно перед использованием.


### <a id="p100121"></a>7.7. Установление градуированной характеристики


<a id="p100122"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации флудиоксонила в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
<a id="p100123"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора [(п. 7.6.3)](#p100118) и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 9.4](#p100135). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.


## 8. <a id="p100124"></a>Отбор и хранение проб


<a id="p100125"></a>Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными [ГОСТом 10852-86](https://bukva.ai/docs/3979) "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".
<a id="p100126"></a>Пробы зерна высушивают до стандартной влажности и хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С. Масло хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °С. В некоторых случаях масло получают из зерна сои экстракцией органическими неполярными растворителями (петролейный и диэтиловый эфиры) непосредственно перед проведением анализа.


## 9. <a id="p100127"></a>Выполнение определения



### <a id="p100128"></a>9.1. Экстракция флудиоксонила


<a id="p100129"></a>9.1.1. Зерно. Образец размолотого зерна массой 10 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 100 куб. см ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 5 мин. Раствор (с осадком) фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 куб. см. Осадок на фильтре промывают 25 куб. см ацетонитрила. Экстракт и промывную жидкость, объединенные в мерном цилиндре, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/2 его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в круглодонную колбу. Далее проводят очистку экстракта по [п. 9.2](#p100131).
<a id="p100130"></a>9.1.2. Масло. Образец масла массой 5 г вносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, добавляют 10 куб. см гексана, перемешивают. В воронку вносят 30 куб. см ацетонитрила, интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой отделяют и собирают в химический стакан вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции масляной фазы повторяют еще дважды, используя по 20 куб. см ацетонитрила. Дальнейшую очистку объединенного ацетонитрильного экстракта проводят по п. 9.2.


### <a id="p100131"></a>9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей


<a id="p100132"></a>Экстракты, полученные по [пп. 9.1.1](#p100129) и [9.1.2](#p100130), переносят в делительную воронку вместимостью 200 куб. см, прибавляют 20 куб. см гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2-х мин. После разделения фаз нижний ацетонитрильный слой переносят в круглодонную колбу и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре 40 °С. Остаток в круглодонной колбе растворяют в 20 куб. см смеси ацетонитрил - вода (3:7, по объему) и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 20 куб. см смеси гексан - диэтиловый эфир (4:1, по объему), интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. После разделения фаз верхний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажный фильтр в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Операцию экстракции водно-ацетонитрильной фазы повторяют еще дважды, используя по 15 куб. см смеси гексан - диэтиловый эфир (4:1, по объему). Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С.


### <a id="p100133"></a>9.3. Очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия


<a id="p100134"></a>Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по [п. 9.2](#p100131), растворяют в 0,6 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,4 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по [п. 7.2](#p100102). Колбу обмывают 3 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 35 куб. см смеси гексан - этилацетат (8:2, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в сек., отбрасывают первые 10 куб. см элюата и собирают последующие 25 куб. см в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 40 °С. Остаток в колбе растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по [п. 7.4](#p100106), перемешивают и анализируют на содержание флудиоксонила по п. 9.4.


### <a id="p100135"></a>9.4. Условия хроматографирования


<a id="p100136"></a>Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Knauer, Германия)
<a id="p100137"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Кромасил 100-С18 (5 мкм)
<a id="p100138"></a>Температура колонки: комнатная
<a id="p100139"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (50:50, по объему)
<a id="p100140"></a>Скорость потока элюента: 0,8 куб. см/мин.
<a id="p100141"></a>Рабочая длина волны: 268 нм
<a id="p100142"></a>Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100143"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм
<a id="p100144"></a>Ориентировочное время выхода флудиоксонила: 10,5 - 11 мин.
<a id="p100145"></a>Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг
<a id="p100146"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой, приготовленной по [п. 7.4](#p100106)
<a id="p100147"></a>Альтернативная подвижная фаза: Диасорб 130-С16
<a id="p100148"></a>Ориентировочное время выхода флудиоксонила: 9,6 - 10,3 мин.


## 10. <a id="p100149"></a>Обработка результатов анализа


<a id="p100150"></a>Содержание флудиоксонила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                  Н  х А х V
                                   1
<a id="p100151"></a>                              Х = -----------,
                                    Н  х m
                                     0

    где:
    Х - содержание флудиоксонила в пробе, мг/кг;
    Н  - высота пика образца, мм;
     1
    Н  - высота пика стандарта, мм;
     0
    А - концентрация стандартного раствора флудиоксонила, мкг/куб. см;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    m - масса анализируемой части образца (г) (для зерна и масла - 5 г).


## 11. <a id="p100152"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100153"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ Р ИСО 5725-1-6.2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".


## 12. <a id="p100154"></a>Разработчики


<a id="p100155"></a>ВНИИ фитопатологии.



<a id="p100156"></a>

---