МУК 4.1.2002-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций Тепралоксидима в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
(утв. Роспотребнадзором 22.07.2005)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 1 октября 2005 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
22 июля 2005 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТЕПРАЛОКСИДИМА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1 октября 2005 года
1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана; Всероссийским институтом защиты растений при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, (протокол № 2 от 16.06.2005).
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации тепралоксидима в диапазоне 0,1 — 1,0 мг/куб. м.
Тепралоксидим — действующее вещество препарата АРАМО 50, КЭ (50 г/л);
фирма-производитель БАСФ (Германия);
(EZ)-(RS)-3-Гидрокси-5-(пергидропиран-4-ил)-2-{1-[(2E)-3-хлораллилоксиимино]пропил}циклогек-2-ен-1-он (IUPAC).
Структурная формула (не приводится).
C H ClNO . 17 24 4
Тепралоксидим — белое кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления 72,5 — 74,4 °С. Давление паров при 20 °С 0,011 мПа. Растворимость технического продукта в органических растворителях при 20 °С (в мг/куб. дм): ацетон — 700; гептан — 10; дихлорметан — 1190; метанол — 330; толуол -
820; этилацетат - 690. Растворимость в воде при 20 °С (в г/куб. дм): 0,43 (pH 7); 7,25 (pH 9). Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log Р = 1,03 (pH 7); 3,5 (pH 2,5). Стабильность в водных растворах при
ow 22 °С: 6,6 дня (pH 4); 22,1 дня (pH 5); 33 дня (pH 7 и 9). Константа диссоциации рКа 4,58 (20 °С).
Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс = 5000 мг/кг, острая 50 дермальная токсичность (LD ) для кроликов > 2000 мг/кг; острая 50 ингаляционная токсичность (LC ) > 5100 мг/куб. дм (4 часа). 50
Тепралоксидим — высокоэффективный системный гербицид, рекомендуется для борьбы с однолетними и многолетними злаковыми сорняками в посевах сахарной свеклы и сои.
Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) тепралоксидима в воздухе рабочей зоны — 1,0 мг/куб. м.
1. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.
2. Метод измерений
Измерения концентраций тепралоксидима выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Концентрирование тепралоксидима из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтров проводят ацетоном.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 2,0 нг.
Определению не мешают компоненты препаративной формы.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
3.1. Средства измерений
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым Номер в Государственном детектором с переменной длиной волны реестре средств измерений (фирмы Perkin-Elmer, США) 15945-97 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2 и 2-1000-2 ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности ГОСТ 29227 вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
Пробирки градуированные вместимостью ГОСТ 1770 5 или 10 куб. см
Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК», ТУ 25-11-1414-78 г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена ТУ 215-73Е деления 1 °С, пределы измерения 0 — 55 °С
Цилиндры мерные 2-го класса точности ГОСТ 1770 вместимостью 10, 500 и 1000 куб. см
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Тепралоксидим с содержанием основного вещества 99,8% (фирма БАСФ, Германия)
Ацетон, о.с.ч. ТУ-6-09-3513-86 Ацетонитрил для хроматографии, х.ч. ТУ 6-09-4326-76
Вода бидистиллированная, деионизованная или ГОСТ 6709 перегнанная над KMnO 4
Кислота муравьиная, ч., 85% ГОСТ 5848
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы
Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с ТУ 64-1-2851-78 Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные ТУ 6-09-2678-77
Воронки конусные диаметром 30 — 37 мм ГОСТ 25336 Груша резиновая
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100 куб. см ГОСТ 9737 Мембранные фильтры капроновые диаметром 47 мм
Пробирки центрифужные ГОСТ 25336
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-74 или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария
Стаканы химические вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336
Установка для перегонки растворителей
Набор для фильтрации растворителей через мембрану
Хроматографическая колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 — 100 куб. мм
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ а воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров для отбора проб воздуха, отбор проб.
7.1. Очистка органических растворителей
7.1.1 Очистка ацетона
Ацетон перегоняют над небольшим количеством KMO и прокаленным 4 карбонатом калия.
7.1.2 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 400 куб. см бидистиллированной или деионизированной воды, 1,0 куб. см муравьиной кислоты, 600 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
7.3. Кондиционирование хроматографической колонки
Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1,0 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.
7.4. Приготовление градуировочных растворов
7.4.1 Исходный раствор тепралоксидима для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см)
В мерную колбу вместимостью 100 куб. см вносят 0,100 г тепралоксидима, добавляют 50 — 70 куб. см ацетонитрила, растворяют, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.
Растворы № 1 — 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
7.4.2 Раствор № 1 тепралоксидима для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см)
В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помешают 1 куб. см исходного градуировочного раствора тепралоксидима с концентрацией 1 мг/куб. см (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
7.4.3. Рабочие растворы № 2 — 6 тепралоксидима для градуировки (концентрация 0,1 — 1,0 мкг/куб. см)
В 5 мерных колб вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.4.2), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 — 6 с концентрацией тепралоксидима 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно. Растворы хранятся в холодильнике в течение 2-х недель.
7.5. Установление градуированной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от концентрации тепралоксидима в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-и растворам для градуировки № 2 — 6.
В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика действующего вещества.
Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 6% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.
7.5.1 Условия хроматографирования
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирма Perkin-Elmer, США)
Колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS зернением 5 мкм
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил — вода — муравьиная кислота (60:40:0,1 по объему)
Скорость потока элюента: 1,0 куб. см/мин.
Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы: 20 куб. мм
Ориентировочное время выхода имазетапира: 6,8 — 7,1 мин.
Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор тепралоксидима с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют ацетонитрилом.
7.6. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха
Бумажные фильтры «синяя лента» последовательно промывают этанолом и ацетоном порциями 25 — 30 куб. см, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.
7.7. Отбор проб
Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Воздух со скоростью 1 — 3 куб. дм/мин. аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.
Для измерения концентрации тепралоксидима на уровне 0,5 ОБУВ для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1,0 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре не выше +4 °С — 14 дней.
V = 0,386 х Р х u t / (273 + Т), 20
Т — температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град. С;
Р — атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u — расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t — длительность отбора пробы, мин.
Примечание: Идентификация и расчет концентрации тепралоксидима в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.
10. Оформление результатов измерений
_
За результат анализа (Х) принимается среднее арифметическое результатов _
двух параллельных определений Х и Х (Х = (Х + Х ) / 2), расхождение
1 2 1 2
между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля
сходимости (d): |Х - Х | <= d.
1 2
_
d = d х Х / 100, мг/куб. м, отн.
где:
d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;
d - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 10%).
отн.
Результат количественного анализа представляют в виде: _ - результат анализа Х (мг/куб. м), характеристика погрешности дельта, % _ (равна 25%), Р = 0,95 или Х +/- ДЕЛЬТА, мг/куб. м, Р = 0,95, где ДЕЛЬТА — абсолютная погрешность.
_
дельта х Х
ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м. 100
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
11. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».