МУК 4.1.1980-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств протиоконазола и его основного метаболита протиоконазола-дестио в воде, протиоконазола и протиоконазола-дестио по метаболиту протиоконазолу-дестио в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 21.04.2005)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 1 июля 2005 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
21 апреля 2005 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРОТИОКОНАЗОЛА И ЕГО ОСНОВНОГО МЕТАБОЛИТА ПРОТИОКОНАЗОЛА-ДЕСТИО В ВОДЕ, ПРОТИОКОНАЗОЛА И ПРОТИОКОНАЗОЛА-ДЕСТИО ПО МЕТАБОЛИТУ ПРОТИОКОНАЗОЛУ-ДЕСТИО В ПОЧВЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.1980-05
Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации протиоконазола и его основного метаболита протиоконазола-дестио в воде в диапазоне 0,0005 — 0,01 мг/куб. дм, протиоконазола и протиоконазола-дестио по метаболиту протиоконазолу-дестио в почве в диапазоне 0,01 — 0,2 мг/кг.
2-[(RS)-2-гидрокси-2-(1-хлорциклопропил)-3-(2-хлорфенил) пропил]-2H-1,2,4-триазол-3(4H)-тион(IUPAC).
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула C H Cl N OS. 14 15 2 3
Белое или светло-бежевое твердое вещество без запаха. Температура -7
плавления: 139,1 - 144,5 °С. Давление паров при 20 °С: << 4 х 10 Па. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log P = 4,16 (pH 4), 3,82
ow
(pH 7) и 2,0 (pH 9). Растворимость (г/куб. дм) при 20 °С: ацетон - более 250, этилацетат - более 250, дихлорметан - 88, ацетонитрил - 69;
растворимость в воде — 0,005 (pH 4), 0,3 (pH 8) и 2,0 (pH 9).
Вещество стабильно при хранении на воздухе, а также в кислой (DT = 50 120 дней) и щелочной (DT > 1 года) средах. В присутствии света в водных 50
фотолитических условиях протиоконазол достаточно быстро деградирует с периодом полураспада 47,7 часа. Основным продуктом фотодеградации является
протиоконазол-дестио, его содержание составляет до 56%.
В почве в полевых условиях протиоконазол подвергается быстрой деградации, ДТ составляет 1,3 - 2,8 дней (в среднем 1,7 дней),
50
ДТ — 4,4 — 9,3 дня (в среднем 5,8 дней). Отмечена заметная сорбция 90
протиоконазола почвой. Основным почвенным метаболитом является протиоконазол-дестио. ДТ протиоконазола-дестио в почве в полевых условиях
50
составляет 16,3 — 72,3 дня (в среднем 42 дня), ДТ — 54,1 — 240 дней 90
(в среднем 140 дней). Протиоконазол-дестио детектирован на пределе обнаружения (6 мкг/кг) в 10 - 20 см слое. Максимальные его уровни наблюдались в период от 1 до 28 дней после применения, полное исчезновение
(менее 6 мкг/кг) после 55 — 240 дней.
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — более 6200 мг/кг; 50 острая дермальная токсичность (LD ) для крыс — более 2000 мг/кг; острая 50 ингаляционная токсичность (LC ) для крыс — более 4990 мг/куб. м воздуха. 50
Протиоконазол не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз.
Основной метаболит протиоконазола: протиоконазол-дестио (SXX0665)
альфа-(1-хлорциклопропил)-альфа-(2-хлорфенил)метил-1H-1,2,4-триазол-1 этанол (С.А.).
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула C H Cl N O. 14 15 2 3
Бесцветный порошок без запаха. Температура плавления: 108,5 °С. -7
Давление паров при 20 °С: 2,7 х 10 Па. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log P = 3,04.
ow
Растворимость (г/куб. дм) при 20 °С: гексан - 3, толуол - 84, ацетон - 100, ацетонитрил - 43, дихлорметан - более 200, вода - 0,051. Стабилен в кислой и щелочной средах (DT > 5000 ч).
50
Протиоконазол — фунгицид системного действия из группы ингибиторов синтеза эргостерина. Вещество обладает защитным, искореняющим и лечебным действием.
1. Метрологические характеристики метода
Метрологические характеристики метода представлены в таблице.
| Определяемое вещество | Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20 | ||||
| предел обнаружения, мг/кг | диапазон определяемых концентраций, мг/кг | среднее значение определения, % | стандартное отклонение S, % | доверительный интервал среднего результата, % | |
| Вода | |||||
| Протиоконазол | 0,0005 | 0,0005 — 0,01 | 94,63 | 6,77 | +/- 3,5 |
| Протиоконазолдестио | 0,0005 | 0,0005 — 0,01 | 93,61 | 5,50 | +/- 2,9 |
| Почва | |||||
| Протиоконазолдестио | 0,01 | 0,01 — 0,2 | 85,89 | 4,20 | +/- 2,9 |
2. Метод измерений
Методика основана на определении веществ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Для концентрирования и очистки пробы воды использованы патроны для твердофазной экстракции C18 Sep Pak. Контроль протиоконазола и его основного метаболита протиоконазола-дестио в образцах почвы осуществляется по содержанию протиоконазола-дестио после экстракции из анализируемого образца смесью ацетонитрил — вода, очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
3.1. Средства измерений
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым Номер Госреестра 15945-97 детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США)
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
Весы лабораторные общего назначения, ГОСТ 7328 с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г
Колбы мерные 2-100-2, 2-1000-2 ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2 класса ГОСТ 29227 точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
Пробирки градуированные с пришлифованной ГОСТ 1770 пробкой вместимостью 5 куб. см
Цилиндры мерные 2 класса точности ГОСТ 1770 вместимостью 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см.
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Протиоконазол, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,8% (Байер, Германия)
Протиоконазол-дестио, аналитический стандарт с содержанием д.в. 98,5% (Байер, Германия)
Ацетонитрил для хроматографии, хч ТУ 6-09-4326-76 Вода деионизованная ГОСТ 6702 н-Гексан, хч ТУ 6-09-3375
Кислота ортофосфорная, хч, 85% ГОСТ 6552
Кислота уксусная, лед. ГОСТ 61
Метилен хлористый (дихлорметан), хч ГОСТ 12794
Метиловый спирт (метанол), хч ГОСТ 6995
Натрий серно-кислый безводный, хч ГОСТ 4166
Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233
L-Цистеин гидрохлорид для синтеза (Мерк, ФРГ)
Этиловый эфир уксусной кислоты, ч ГОСТ 22300.
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы
Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с ТУ 64-1-2851-78
Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)
Бумажные фильтры «красная лента» обеззоленные или фильтры из хроматографической бумаги
Воронки делительные вместимостью 250 куб. см ГОСТ 25336
Воронки конусные диаметром 30 — 37 и 60 мм ГОСТ 25336
Колбы плоскодонные вместимостью ГОСТ 9737 100, 250, 400 — 500 куб. см
Колбы грушевидные на шлифе вместимостью ГОСТ 9737 100 — 150 куб. см
Колонка хроматографическая стеклянная длиной 25 см, внутренним диаметром 8 — 10 мм
Мембранные фильтры капроновые диаметром 47 мм
Набор для фильтрации растворителей через мембрану
Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 10696
Стаканы химические вместимостью ГОСТ 25336 100, 500 куб. см
Патроны для твердофазной экстракции C18 Sep Pak (Waters, США)
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-74 или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария
Установка для перегонки растворителей
Холодильник водяной обратный ГОСТ 9737
Хроматографическая колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая кромасил 100 C18, зернением 8 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 — 100 куб. мм
Шприц медицинский с разъемом Льюера ГОСТ 22090 вместимостью 20 куб. см.
Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%.
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с оксидом алюминия и концентрирующих патронов C18 Sep Pak.
7.1. Очистка органических растворителей
7.1.1 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.1.2 Очистка н-гексана
Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения ее окрашивания в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.
7.1.3 Очистка этилацетата
Этилацетат промывают последовательно 5%-м водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия, перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.
7.2 Приготовление 0,02 М раствора ортофосфорной кислоты
В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 1,36 куб. см 85%-й ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.
7.3. Приготовление 0,05%-го раствора уксусной кислоты
В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 300 — 400 куб. см дистиллированной воды, вносят 0,5 куб. см ледяной уксусной кислоты, перемешивают, доводят водой до метки, вновь перемешивают.
7.4. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта
Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 8 — 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г оксида алюминия в 15 — 20 куб. см смеси гексан — этилацетат (85:15, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 см этилацетата со скоростью 1 — 2 капли в с, затем 20 куб. см смеси гексан — этилацетат (85:15, по объему). После этого колонка готова к работе.
7.5. Проверка хроматографического поведения протиоконазола-дестио на колонке с оксидом алюминия
В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,5 куб. см градуировочного раствора № 1 протиоконазола-дестио с концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле (п. 7.9.2), раствор упаривают досуха, остаток растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин., добавляют 2,5 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразвуковую баню на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.4. Промывают колонку 25 куб. см смеси гексан — этилацетат (85:15, по объему) со скоростью 1 — 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 50 куб. см смеси гексан — этилацетат (60:40, по объему). Фракционно (по 10 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 7.3, перемешивают и анализируют на содержание протиоконазола-дестио по п. 9.3.
7.6. Подготовка концентрирующего патрона C18 Sep Pak
Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца 2 куб. см метанола со скоростью прохождения растворителя через патрон 1 — 2 капли в с, затем 5 куб. см 0,05%-ного раствора уксусной кислоты. Патрон готовят непосредственно перед использованием для концентрирования образца.
7.7. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 600 куб. см ацетонитрила, 400 см 0,02 М раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.
7.8. Кондиционирование хроматографической колонки
Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.7) при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.
7.9. Приготовление градуировочных растворов
7.9.1. Исходные растворы протиоконазола и протиоконазола-дестио для градуировки (концентрация 500 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,05 г протиоконазола (или протиоконазола-дестио), растворяют в 40 — 50 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.
Растворы хранят в морозильной камере при температуре не выше — 18 °С в течение 3-х месяцев.
7.9.2. Растворы протиоконазола и протиоконазола-дестио № 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 2 куб. см исходного раствора протиоконазола (или протиоконазола-дестио) с концентрацией 500 мкг/куб. см (п. 7.9.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.
Этот раствор используют для приготовления проб воды с внесением при оценке полноты извлечения протиоконазола и протиоконазола-дестио из исследуемых образцов. Для внесения в образцы почвы используют растворы с концентрацией 10 мкг/куб. см, приготовленные в смеси метанол — вода — цистеин гидрохлорид (100:900:0,01; объем/объем/вес).
Градуировочные растворы № 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше — 18 °С в течение месяца.
7.9.3. Рабочие растворы № 2 — 5 протиоконазола и протиоконазола-дестио для градуировки (концентрация 0,05 — 1,0 мкг/см).
В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора № 1 протиоконазола (или протиоконазола-дестио) с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.9.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.7, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 — 5 с концентрацией протиоконазола (или протиоконазола-дестио) 0,05; 0,1; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см, соответственно.
Растворы готовят непосредственно перед употреблением.
7.10. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации протиоконазола (или протиоконазола-дестио) в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки.
В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.
8. Отбор и хранение проб
Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», 1743.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», 26950-89 «Почвы. Отбор проб».
Пробы воды анализируют в день отбора или замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре -18 °С не более 2 недель.
Образцы почвы подсушивают на воздухе в темноте, помещают в герметичную полиэтиленовую тару и хранят в холодильнике при температуре 4 — 6 °С не более 4 недель.
Для длительного хранения образцы почвы замораживают и хранят при температуре -18 °С.
Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр, почвы — просеивают через сито с диаметром отверстий 1 мм.
9. Выполнение определения
9.1. Вода
Образец отфильтрованной воды объемом 200 куб. см помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 — 300 куб. см с пришлифованной пробкой, вносят 0,01 г цистеина гидрохлорида и 0,1 куб. см ледяной уксусной кислоты, тщательно перемешивают.
Подготовленную пробу вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон C18 Sep Pak, подготовленный по п. 7.6, со скоростью пропускания раствора 1 — 2 капли в с. Операцию осуществляют в затемненном помещении. После нанесения пробы патрон промывают 5 см смеси ацетонитрил — 0,05%-ая уксусная кислота (2:8, по объему), элюат отбрасывают. Вещества элюируют с патрона 2 куб. см смеси ацетонитрил — 0,05%-ая уксусная кислота (9:1, по объему), собирая элюат в градуированную пробирку с пришлифованной пробкой, перемешивают и анализируют на содержание протиоконазола и протиоконазола-дестио по п. 9.3.
9.2. Почва
9.2.1 Экстракция
Образец суховоздушной почвы массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 100 куб. см смеси ацетонитрил — вода (80:20, по объему) и помещают на встряхиватель на 1 ч.
Раствор (с осадком почвы) фильтруют в мерный цилиндр вместимостью 100 куб. см с пришлифованной пробкой через складчатый бумажный фильтр, помещенный на конусную воронку. Осадок на фильтре промывают 25 куб. см смеси ацетонитрил — вода (80:20, по объему). Экстракт и промывную жидкость, объединенные в мерном цилиндре, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/2 его часть (эквивалентную 10 г образца) переносят в круглодонную колбу. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.2.
9.2.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
Экстракт, полученный по п. 9.2.1 и помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (~ 10 куб. см) при температуре не выше 35 °С, внимательно следя за процессом и не допуская переброса жидкости при вспенивании. К водному остатку прибавляют 40 куб. см деионизованной воды и 5 г хлорида натрия, перемешивают до полного растворения соли и переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см хлористого метилена, интенсивно встряхивают воронку в течение 2 мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя по 25 куб. см хлористого метилена. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха и подвергают дополнительной очистке на колонке по п. 9.2.3.
9.2.3 Очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия
Остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.2.2, растворяют в 0,5 куб. см этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин., добавляют 2,5 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразвуковую баню на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.4. Колбу обмывают трижды порциями по 3 куб. см смеси гексан — этилацетат (85:15, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 25 куб. см смеси гексан — этилацетат (85:15, по объему) со скоростью 1 — 2 капли в с, элюат отбрасывают. Протиоконазол-дестио элюируют с колонки 40 куб. см смеси гексан — этилацетат (60:40, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Остаток в колбе растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 7.3, перемешивают и анализируют на содержание протиоконазола-дестио по п. 9.3.
9.3. Условия хроматографирования
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Perkin-Elmer, США).
Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая кромасил 100 C18, зернением 8 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: ацетонитрил — 0,02 М ортофосфорная кислота (60:40, по объему).
Скорость потока элюента: 1 куб. см/мин.
Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
Ориентировочное время выхода протиоконазола-дестио: 6,4 — 6,6 мин.; протиоконазола: 9,4 — 9,7 мин.
Линейный диапазон детектирования 1 — 20 нг.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой, приготовленной по п. 7.3.
10. Обработка результатов анализа
10.1. Вода
Содержание протиоконазола в пробе с учетом его основного метаболита протиоконазола-дестио в эквиваленте действующего вещества (Х, мг/куб. дм) рассчитывают по формуле:
(А + Б х К) х V
А, Б — концентрации протиоконазола и протиоконазола-дестио, соответственно, найденные по градуировочным графикам, мкг/куб. см;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
W — объем анализируемого образца, куб. см.
К — коэффициент пересчета содержания протиоконазола-дестио на эквивалент протиоконазола по соотношению молекулярных масс (равен 1,103).
10.2. Почва
Содержание протиоконазола в пробе с учетом его основного метаболита протиоконазола-дестио в эквиваленте действующего вещества (Х, мг/кг) рассчитывают по формуле:
Б х К х V х С
Б — концентрация протиоконазола-дестио, найденная по градуировочному графику, мкг/куб. см;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m — масса анализируемого образца, г.
К — то же, что и в п. 10.1.
С — коэффициент пересчета на полный объем экстракта (равен 2).
11. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
12. Разработчики
Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана); Брагина И.В. (Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора).