---
title: "\"МУК 4.1.1979-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций протиоконазола в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1979-05"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1979-05"
---

## "МУК 4.1.1979-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций протиоконазола в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1979-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций протиоконазола в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 21.04.2005)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2005 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере защиты<br>
прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

21 апреля 2005 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ПРОТИОКОНАЗОЛА В ВОЗДУХЕ**
**РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1979-05**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 июля 2005 года

<a id="p100006"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации протиоконазола в диапазоне 0,05 - 1,0 мг/куб. м.
<a id="p100007"></a>2-[(RS)-2-гидрокси-2-(1-хлорциклопропил)-3-(2-хлорфенил)пропил]-2Н-1,2,4-триазол-3(4Н)-тион (IUPAC).
<a id="p100008"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100009"></a>    Эмпирическая формула: C  H  Cl N OS.
                           14 15  2 3
<a id="p100010"></a>    Молекулярная масса: 344,3.
<a id="p100011"></a>    Белое  или  светло-бежевое  твердое  вещество  без  запаха. Температура
                                                                     -7
плавления:  139,1  -  144,5  °C.  Давление паров при 20 °C: << 4 х 10   Па.
Коэффициент распределения  н-октанол/вода: K   log  P = 4,16  (pH 4),  3,82
                                            ow
(pH 7) и 2,0 (pH 9). Растворимость  (г/куб. дм)  при 20 °C: ацетон -  более
250,  этилацетат  -  более  250,   дихлорметан  -  88,  ацетонитрил  -  69;
растворимость в воде - 0,005 (pH 4), 0,3 (pH 8) и 2,0 (pH 9).
<a id="p100012"></a>    Вещество  стабильно  при  хранении на воздухе, а также в кислой (DT   =
                                                                       50
120  дней)  и щелочной (DT   > 1 года) средах. В присутствии света в водных
                          50
фотолитических  условиях  протиоконазол  достаточно  быстро  деградирует  с
периодом полураспада 47,7 часа.
<a id="p100013"></a>    Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
<a id="p100014"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100015"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для крыс -  более 6200 мг/кг;
                                         50
острая  дермальная  токсичность (LD  ) для крыс - более 2000 мг/кг;  острая
                                   50
ингаляционная токсичность (LC  ) для крыс - более 4990 мг/куб. м воздуха.
                             50
<a id="p100016"></a>Протиоконазол не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз.
<a id="p100017"></a>Гигиенические нормативы
<a id="p100018"></a>ОБУВ в воздухе рабочей зоны 1,0 мг/куб. м.
<a id="p100019"></a>Область применения препарата
<a id="p100020"></a>Протиоконазол - фунгицид системного действия из группы ингибиторов синтеза эргостерина. Вещество обладает защитным, искореняющим и лечебным действием.

1. <a id="p100021"></a>Погрешность измерений

<a id="p100022"></a>Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью (дельта), не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. <a id="p100023"></a>Метод измерения

<a id="p100024"></a>Измерения концентраций протиоконазола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
<a id="p100025"></a>Концентрирование протиоконазола из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят ацетонитрилом.
<a id="p100026"></a>Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг.
<a id="p100027"></a>Определению не мешают тебуконазол, основной метаболит протиоконазола - протиоконазол-дестио и компоненты препаративной формы.

<div align="center">

3. <a id="p100028"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,

</div>

реактивы и материалы


#### <a id="p100029"></a>3.1 Средства измерений


<a id="p100030"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны
(фирмы Perkin-Elmer, США)                         Номер Госреестра 15945-97
<a id="p100031"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100032"></a>Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ
(ЗАО "ОПТЭК", г. Санкт-Петербург) или
аспирационное устройство ЭА-1                     ТУ 25-11-1414-78
<a id="p100033"></a>Барометр-анероид М-67                             ТУ 2504-1797-75
<a id="p100034"></a>Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена
деления 1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C         ТУ 215-73Е
<a id="p100035"></a>Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100036"></a>Пипетки градуированные 2 класса точности
вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91)
<a id="p100037"></a>Пробирки градуированные вместимостью
5 или 10 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100038"></a>Цилиндры мерные 2 класса точности
вместимостью 500 и 1000 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100039"></a>Цилиндры мерные 2 класса точности с
пришлифованной пробкой вместимостью 25 куб. см [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100040"></a>    Допускается  использование средств измерения с аналогичными или лучшими
характеристиками.


#### <a id="p100041"></a>3.2 Реактивы


<a id="p100042"></a>Протиоконазол с содержанием действующего
вещества 99,8% (Байер, Германия)
<a id="p100043"></a>Ацетонитрил для хроматографии, х.ч.               ТУ-6-09-4326-76
<a id="p100044"></a>Вода бидистиллированная, деионизованная или
перегнанная над KMnO ГОСТ 6709
                    4
<a id="p100045"></a>Кислота ортофосфорная, ч., 85%                    ГОСТ 6652
<a id="p100046"></a>    Допускается  использование  реактивов иных производителей с аналогичной

<div align="center">

или более высокой квалификацией.

</div>



#### <a id="p100047"></a>3.3 Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100048"></a>Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные      ТУ 6-09-2678-77
<a id="p100049"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 и 60 мм ГОСТ 25336
<a id="p100050"></a>Груша резиновая
<a id="p100051"></a>Мембранные фильтры капроновые диаметром 47 мм
<a id="p100052"></a>Насос водоструйный                                ГОСТ 10696
<a id="p100053"></a>Пробирки центрифужные ГОСТ 25336
<a id="p100054"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М
или ротационный вакуумный испаритель В-169
фирмы Buchi, Швейцария                            ТУ 25-11-917-74
<a id="p100055"></a>Стаканы химические вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100056"></a>Стекловата
<a id="p100057"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100058"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100059"></a>Набор для фильтрации растворителей
через мембрану
<a id="p100060"></a>Холодильник водяной, обратный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100061"></a>Хроматографическая колонка стальная,
длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм,
содержащая Кромасил 100 С18, зернением 8 мкм
<a id="p100062"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа вместимостью 50 - 100 куб. мм
<a id="p100063"></a>    Допускается    применение    хроматографических   колонок   и   другого

<div align="center">

оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

</div>


4. <a id="p100064"></a>Требования безопасности

<a id="p100065"></a>4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
<a id="p100066"></a>4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

5. <a id="p100067"></a>Требования к квалификации операторов

<a id="p100068"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. <a id="p100069"></a>Условия измерений

<a id="p100070"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100071"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100072"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. <a id="p100073"></a>Подготовка к выполнению измерений

<a id="p100074"></a>Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.


#### <a id="p100075"></a>7.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100076"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.


#### <a id="p100077"></a>7.2 Приготовление 0,02 М раствора ортофосфорной кислоты


<a id="p100078"></a>Для приготовления 0,02 М раствора ортофосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 1,36 куб. см ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.


#### <a id="p100079"></a>7.3 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100080"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 400 куб. см 0,02 М ортофосфорной кислоты, добавляют 600 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.


#### <a id="p100081"></a>7.4 Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100082"></a>Промывают колонку подвижной фазой [(п. 7.3)](#p100079) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 1,0 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.


#### <a id="p100083"></a>7.5 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100084"></a>7.5.1. Исходный раствор протиоконазола для градуировки (концентрация 500 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,05 г протиоконазола, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более 2 недель.
<a id="p100085"></a>Растворы N 1 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
<a id="p100086"></a>7.5.2. Раствор N 1 протиоконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 2 куб. см исходного раствора протиоконазола с концентрацией 500 мкг/куб. см [(п. 7.5.1)](#p100084), разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 10 дней.
<a id="p100087"></a>7.5.3. Рабочие растворы N 2 - 5 протиоконазола для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/куб. см). В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 5,0 и 10,0 куб. см раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.5.2)](#p100086), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по [п. 7.3](#p100079)), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией протиоконазола 0,05; 0,1; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см, соответственно.
<a id="p100088"></a>Растворы хранятся в холодильнике в течение суток.


#### <a id="p100089"></a>7.6 Отбор проб


<a id="p100090"></a>Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". Воздух с объемным расходом 5 куб. дм/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
<a id="p100091"></a>Для измерения концентрации протиоконазола на уровне 0,05 мг/куб. м необходимо отобрать 50 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4 °C - 3 дня.


#### <a id="p100092"></a>7.7 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100093"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации протиоконазола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки N 2 - 5.
<a id="p100094"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 7.7.1](#p100095). Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика протиоконазола.


##### <a id="p100095"></a>7.7.1 Условия хроматографирования


<a id="p100096"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором
<a id="p100097"></a>Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
<a id="p100098"></a>Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая кромасил 100 С18, зернением 8 мкм
<a id="p100099"></a>Температура колонки: комнатная
<a id="p100100"></a>Подвижная фаза: 0,02 М ортофосфорная кислота-ацетонитрил (40:60, по объему)
<a id="p100101"></a>Скорость потока элюента: 1,0 куб. см/мин.
<a id="p100102"></a>Рабочая длина волны: 213 нм
<a id="p100103"></a>Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100104"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм
<a id="p100105"></a>Ориентировочное время выхода протиоконазола: 9,6 - 9,8 мин.
<a id="p100106"></a>Линейный диапазон детектирования: 1 - 20 нг.
<a id="p100107"></a>Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор протиоконазола с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по [п. 7.3](#p100079)).
<a id="p100108"></a>Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 9% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

8. <a id="p100109"></a>Выполнение измерений

<a id="p100110"></a>Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см, заливают 15 куб. см ацетонитрила, помещают в темное место, периодически встряхивая в течение 10 минут. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой, в цилиндр с пришлифованной пробкой вместимостью 25 куб. см. Фильтр обрабатывают новой порцией ацетонитрила объемом 10 куб. см, экстракты объединяют.
<a id="p100111"></a>Общий объем экстракта в цилиндре доводят до 25 куб. см ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Отбирают аликвоту объемом 2 куб. см, переносят в градуированную пробирку, добавляют 2 куб. см подвижной фазы, приготовленной по [п. 7.3](#p100079), перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в [п. 7.7.1](#p100095).
<a id="p100112"></a>Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию протиоконазола в хроматографируемом растворе.
<a id="p100113"></a>Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

9. <a id="p100114"></a>Обработка результатов измерений

<a id="p100115"></a>Массовую концентрацию протиоконазола в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

<a id="p100116"></a>                              X = C x 2W / V  ,
                                            20

<a id="p100117"></a>    где:
    C   -   концентрация   протиоконазола  в  хроматографируемом  растворе,
найденная  по  градуировочному  графику  в соответствии с величиной площади
хроматографического пика, мкг/куб. см;
    2  -  коэффициент,  учитывающий  разбавление  аликвоты  экстракта перед
хроматографированием;
    W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
    V    -  объем  пробы  воздуха,  отобранный  для  анализа, приведенный к
     20
стандартным (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °C) условиям

<a id="p100118"></a>                     V   = 0,386 x P x ut / (273 + T),
                      20

<a id="p100119"></a>    где:
    T  - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.
C;
    P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
    u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
    t - длительность отбора пробы, мин.
<a id="p100120"></a>    Примечание: Идентификация и расчет концентрации протиоконазола в пробах
могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных
с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

                   10. <a id="p100121"></a>Оформление результатов измерений

                          _
<a id="p100122"></a>    За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов
                                          _
двух  параллельных  определений X  и  X  (X = (X  + X ) / 2),   расхождение
                                 1     2        1    2
между   которыми  не  превышает   значений  норматива оперативного контроля
сходимости (d): |X  - X | <= d.
                  1    2

                                    _
<a id="p100123"></a>                        d = d     x X / 100, мг/куб. м,
                             отн.
<a id="p100124"></a>    где:
    d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;
    d     - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%).
     отн.
<a id="p100125"></a>    Результат количественного анализа представляют в виде:
                          _
    -  <a id="p100126"></a>результат  анализа X (мг/куб. м), характеристика погрешности дельта,
%, P = 0,95 или

                     _
<a id="p100127"></a>                     X +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м, P = 0,95,

                                          _
                                 дельта x X
<a id="p100128"></a>    где                 ДЕЛЬТА = -----------, мг/куб. м.
                                    100

<a id="p100129"></a>    Результат  измерений  должен  иметь  тот  же  десятичный  разряд, что и
погрешность.

11. <a id="p100130"></a>Контроль погрешности измерений

<a id="p100131"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с [ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-4-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

12. <a id="p100132"></a>Разработчики

<a id="p100133"></a>Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.); Брагина И.В. (Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора).



<a id="p100134"></a>

---