---
title: "\"МУК 4.1.1973-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств эпоксиконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1973-05"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1973-05"
---

## "МУК 4.1.1973-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств эпоксиконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1973-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств эпоксиконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 21.04.2005)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2005 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной<br>
службы по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

21 апреля 2005 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЭПОКСИКОНАЗОЛА**
**В БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1973-05**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

1 июля 2005 года

</div>



## 1. <a id="p100006"></a>Вводная часть


<a id="p100007"></a>Действующее вещество: эпоксиконазол.
<a id="p100008"></a>(2RS,3SR)-1-[3-(2-хлорфенил)-2,3-эпокси-2-(4-фторфенил)пропил]-1H-1,2,4-триазол(ИЮПАК).
<a id="p100009"></a>цис-1-[[3-(2-хлорфенил)-2-(4-фторфенил)оксиранил]метил]-1H-1,2,4-триазол(С.А.).
<a id="p100010"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100011"></a>    Эмпирическая формула: C  H  ClFN O.
                           17 13    3
<a id="p100012"></a>Молекулярная масса: 329,8.
<a id="p100013"></a>Бесцветное кристаллическое вещество без запаха.
<a id="p100014"></a>Температура плавления: 136,2 °C.
<a id="p100015"></a>Давление паров при 20 °C: менее 0,01 мПа.
<a id="p100016"></a>    Коэффициент распределения н-октанол/вода: K   log P = 3,44 (pH 7).
                                               ow
<a id="p100017"></a>Растворимость (г/л) при 20 °C: ацетон - 144, дихлорметан - 291, н-гептан - 0,4; вода - 6,6 мг/л.
<a id="p100018"></a>Вещество стабильно при нормальных условиях хранения, не гидролизуется в водном растворе при различных значениях температуры и pH.
<a id="p100019"></a>Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100020"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  )  для крыс  - более 5000 мг/кг;
                                         50
острая  дермальная  токсичность (LD  ) для крыс - более 2000 мг/кг,  острая
                                   50
ингаляционная  токсичность  (LC  )  для  крыс  -  более  5,3  мг/л воздуха.
                               50
Эпоксиконазол  не  оказывает  раздражающего  действия  на  кожу и слизистую
оболочку глаз кролика. LC   для рыб - 2,2 - 6,8 мг/кг (96 ч).
                         50
<a id="p100021"></a>Эпоксиконазол нетоксичен для пчел, дождевых червей, птиц, дафний и водорослей.
<a id="p100022"></a>Гигиенические нормативы
<a id="p100023"></a>МДУ в сахарной свекле 0,1 мг/кг.
<a id="p100024"></a>Область применения препарата
<a id="p100025"></a>Эпоксиконазол - системный фунгицид широкого спектра действия из класса триазолов. Высокоэффективен против возбудителей ржавчины, мучнистой росы, пятнистостей листьев и колоса зерновых культур.


## 2. <a id="p100026"></a>Методика определения остаточных количеств эпоксиконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии



### <a id="p100027"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100028"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100029"></a>Методика основана на газохроматографическом определении эпоксиконазола на неподвижной фазе SE-30 с использованием электронозахватного детектора (ЭЗД) после экстракции его из растительного материала водным ацетоном, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с силикагелем.
<a id="p100030"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100031"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100032"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания сахарной свеклы.

##### <a id="p100033"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<div align="right">

<a id="p100034"></a>Таблица

</div>


<div align="center">

<a id="p100035"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="11%"><col width="18%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="15%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="6">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение S, %</td><td>Относительное отклонение DS, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td>Ботва</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,5</td><td>3,9</td><td>1,7</td><td>+/- 3,7</td></tr>
<tr><td>Корнеплоды</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,1</td><td>2,9</td><td>1,3</td><td>+/- 2,7</td></tr>
</table>



### <a id="p100039"></a>2.2. Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100040"></a>Эпоксиконазол с содержанием д.в. 99,8% (БАСФ, Германия)
<a id="p100041"></a>Ацетон ГОСТ 2603-79
<a id="p100042"></a>Вода дистиллированная или деионизованная                    ГОСТ 7602-72
<a id="p100043"></a>н-Гексан, ч                                                 ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100044"></a>Калия перманганат ГОСТ 20490-75
<a id="p100045"></a>Кальция хлорид, хч                                          ГОСТ 4161-77
<a id="p100046"></a>Калий углекислый, хч [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100047"></a>Кислота серная, хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100048"></a>Натрий двууглекислый ГОСТ 83-79
<a id="p100049"></a>Натрия гидроксид, хч ГОСТ 4328-77
<a id="p100050"></a>Натрия сульфат безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100051"></a>Натрия хлорид, хч ГОСТ 4233-77
<a id="p100052"></a>Этилацетат [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
<a id="p100053"></a>Элюент N 1 для колоночной хроматографии:
смесь гексан - ацетон (8:2, по объему)
<a id="p100054"></a>Элюент N 2 для колоночной хроматографии:
смесь гексан - ацетон (6:4, по объему)
<a id="p100055"></a>Азот газообразный, осч ГОСТ 9293-74

<div align="center">

<a id="p100056"></a>Силикагель (0,063 - 0,2 мм) для адсорбционной<br>
хроматографии (Мерк, Германия) I степени активности

</div>

<a id="p100057"></a>Стекловата
<a id="p100058"></a>Целит 535 (2 - 15 мкм) (Серва, Германия)
<a id="p100059"></a>Фильтры бумажные, синяя лента                               ТУ 6-09-1678.


### <a id="p100060"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100061"></a>Хроматограф газовый "Кристалл 2000М" с ЭЗД с пределом
                                          -15
детектирования по Линдану не выше 8,2 х 10    г/куб. см
или аналогичный
<a id="p100062"></a>Колонка хроматографическая 1500 х 3 мм, неподвижная фаза
3% OV-17 на Хромосорбе W/HP (0,12 - 0,15 мм)
<a id="p100063"></a>Колонка хроматографическая 1500 х 3 мм, неподвижная фаза
3% SE-30 на Хромосорбе W/HP (0,12 - 0,15 мм)
<a id="p100064"></a>Колонка капиллярная для ГЖХ ZB-1, длина 30 м, внутренний
диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,5 мкм, неподвижная
фаза SE-30, фирма Phenomenex, США или аналогичная
<a id="p100065"></a>Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10Ф                           ТУ 64-1-2850
<a id="p100066"></a>Весы аналитические типа ВЛР-200                             ГОСТ 19401-74
<a id="p100067"></a>Гомогенизатор или аналогичный                               МРТУ 42-1505-63
<a id="p100068"></a>Ротационный испаритель, тип ИР-1М                           ТУ 25-11-917-76
<a id="p100069"></a>Прибор для перегонки при атмосферном давлении
<a id="p100070"></a>Вакуумный водоструйный насос                                ГОСТ 10696-75
<a id="p100071"></a>Воронка Бюхнера                                             ГОСТ 0147-73
<a id="p100072"></a>Колба Бунзена                                               ГОСТ 5614-75
<a id="p100073"></a>Воронки делительные вместимостью 100 и 500 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100074"></a>Колбы конические с притертыми пробками ГОСТ 25336-82
вместимостью 250 мл
<a id="p100075"></a>Колбы мерные вместимостью 50 и 100 мл [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100076"></a>Колбы грушевидные вместимостью 50, 100, 250 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100077"></a>Цилиндры мерные вместимостью 50, 100 и 250 мл [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100078"></a>Пробирки градуированные с притертыми пробками               ГОСТ 10515-75
вместимостью 5 и 10 мл
<a id="p100079"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 мл [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100080"></a>Воронки стеклянные                                          ГОСТ 9737-70.


### <a id="p100081"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100082"></a>Отбор образцов проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100083"></a>Отобранные пробы ботвы и корнеплодов хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более двух дней; при длительном хранении (не более трех месяцев) пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °C. Перед анализом ботву и корнеплоды измельчают и отбирают усредненную пробу.


### <a id="p100084"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100085"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100086"></a>Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворитель последовательно промывают водой, 2,5%-м раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
<a id="p100087"></a>    Ацетон  перегоняют над  перманганатом  калия и поташом  (на 1 л ацетона

<div align="center">

10 г KMnO  и 2 г K CO ).<br>
         4        2  3

</div>

<a id="p100088"></a>Этилацетат промывают равным объемом 5%-го раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
<a id="p100089"></a>Силикагель I степени активности встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 150 °C в течение 3 ч.

##### <a id="p100090"></a>2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки

<a id="p100091"></a>Готовую насадку (3% SE-30 на Хромосорбе W/HP) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °C в течение 8 - 10 ч.

##### <a id="p100092"></a>2.5.3 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100093"></a>Основной стандартный раствор эпоксиконазола с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,8% д.в., в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
<a id="p100094"></a>Рабочие растворы с концентрациями 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора эпоксиконазола соответствующим последовательным разведением ацетоном. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более недели.

##### <a id="p100095"></a>2.5.4 Построение калибровочного графика

<a id="p100096"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора эпоксиконазола с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение площади хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ х с от концентрации эпоксиконазола в растворе в мкг/мл.

##### <a id="p100097"></a>2.5.5 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

<a id="p100098"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 0,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 10 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 мл смеси гексан - ацетон (8:2, по объему) и 20 мл гексана со скоростью 1 - 2 капли в с, после чего она готова к работе.

##### <a id="p100099"></a>2.5.6 Проверка хроматографического поведения эпоксиконазола на колонке с силикагелем

<a id="p100100"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 1 мл стандартного раствора эпоксиконазола с концентрацией 1 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл смеси гексан - ацетон (8:2, по объему) и наносят на колонку. Промывают колонку 50 мл смеси гексан - ацетон (8:2) и затем 40 мл смеси гексан - ацетон (6:4) со скоростью 1 - 2 капли в с. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл этилацетата и анализируют на содержание эпоксиконазола по [п. 2.7.1](#p100109).
<a id="p100101"></a>Фракции, содержащие эпоксиконазол, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 4 мл этилацетата и вновь анализируют по [п. 2.7.1](#p100109). Рассчитывают содержание эпоксиконазола в элюате, определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.
<a id="p100102"></a>*Примечание.* Профиль вымывания эпоксиконазола может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.


### <a id="p100103"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100104"></a>2.6.1 Экстракция эпоксиконазола и очистка экстракта

<a id="p100105"></a>К навеске (25 г) измельченной ботвы или корнеплодов добавляют 100 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему), гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. Добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу емкостью 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон - вода (80:20). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 32 мл), эквивалентную 5 г растительного материала, и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 15 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 30 мл гексана и содержимое встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев отделяют гексановую фазу и собирают ее в колбу емкостью 100 мл. Оставшуюся водную фазу обрабатывают гексаном еще два раза (по 30 мл). Объединенный гексановый экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия в грушевидную колбу емкостью 200 мл и затем упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.2.

##### <a id="p100106"></a>2.6.2 Очистка на колонке с силикагелем

<a id="p100107"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании экстракта растительного материала из [п. 2.6.1](#p100104), количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гексан - ацетон (8:2) в подготовленную хроматографическую колонку [(п. 2.5.5)](#p100097). Промывают колонку 40 мл элюента N 1, элюат отбрасывают. Эпоксиконазол элюируют 30 мл элюента N 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Полученный раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C. Сухой остаток растворяют в 5 мл этилацетата и анализируют на содержание эпоксиконазола по [п. 2.7.1](#p100109).


### <a id="p100108"></a>2.7. Условия хроматографирования



##### <a id="p100109"></a>2.7.1 Метод ГЖХ с насадочными колонками

<a id="p100110"></a>    Газовый  хроматограф  "Кристалл  2000М" с электронозахватным детектором
   63                                                        -15
(Ni  ) с пределом  детектирования по Линдану не выше 8,2 х 10    г/куб. см.
<a id="p100111"></a>Колонка хроматографическая стеклянная, 1500 х 3 мм; неподвижная фаза - 3% SE-30 на Хромосорбе W/HP (0,12 - 0,15 мм).
<a id="p100112"></a>Температура детектора - 320 °C, испарителя - 270 °C, термостата колонки - 230 °C.
<a id="p100113"></a>Скорость потока газа-носителя (азота) - 40 мл/мин.
<a id="p100114"></a>Объем вводимой пробы - 2 мкл.
<a id="p100115"></a>Время удерживания эпоксиконазола - 2 мин. 10 с.
<a id="p100116"></a>Предел детектирования - 0,1 нг.
<a id="p100117"></a>Линейный диапазон детектирования - 0,1 - 1,0 нг.
<a id="p100118"></a>Альтернативная фаза: 3% OV-17 на Хромосорбе W/HP (0,12 - 0,15 мм), хроматографическая колонка 1500 х 3 мм; температура детектора - 320 °С, инжектора - 270 °C, термостата колонки - 255 °C.
<a id="p100119"></a>Время удерживания эпоксиконазола - 3 мин. 25 с.
<a id="p100120"></a>Каждую анализируемую пробу вводят три раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100121"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют этилацетатом.

##### <a id="p100122"></a>2.7.2 Метод ГЖХ с капиллярными колонками

<a id="p100123"></a>    Газовый  хроматограф  "Кристалл  2000М" с электронозахватным детектором
   63                                                        -15
(Ni  ) с пределом  детектирования по Линдану не выше 8,2 х 10    г/куб. см.
<a id="p100124"></a>Колонка капиллярная кварцевая ZB-1, 30 м х 0,32 мм х 0,5 мкм (SE-30).
<a id="p100125"></a>Температура термостата испарителя - 270 °C, детектора - 320 °C, термостата колонки по следующей программе: 170 °C - 2 мин.; 25 °C/мин. до 250 °C; выдержка - 10 мин.
<a id="p100126"></a>Газовый режим: газ-носитель - азот, общий расход - 22,5 мл/мин.; газ для поддува в детектор - азот, расход - 19,3 мл/мин.
<a id="p100127"></a>Деление потока: 1:6.
<a id="p100128"></a>Абсолютное время удерживания эпоксиконазола: 9 мин. 10 с.
<a id="p100129"></a>Объем вводимой пробы - 1 мкл.
<a id="p100130"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,025 - 0,5 нг.
<a id="p100131"></a>Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
<a id="p100132"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют этилацетатом.


### <a id="p100133"></a>2.8. Обработка результатов анализа


<a id="p100134"></a>Содержание эпоксиконазола рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                  Н  х А х V
                                   1
<a id="p100135"></a>                              х = ----------,
                                    Н  х m
                                     0

    где:
    Х - содержание эпоксиконазола в пробе, мг/кг;
    Н  - площадь пика анализируемой пробы, мВ х с;
     1
    Н  - площадь пика стандартного раствора, мВ х с;
     0
    А - концентрация стандартного раствора эпоксиконазола, мкг/мл;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    m - масса анализируемой части образца, г (для ботвы и корнеплодов - 5 г).


## 3. <a id="p100136"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100137"></a>Соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с легко воспламеняющимися жидкостями, токсичными веществами, электронагревательными приборами, сосудами, работающими под вакуумом.


## 4. <a id="p100138"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100139"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95). ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.


## 5. <a id="p100140"></a>Разработчики


<a id="p100141"></a>Назарова Т.А., Микитюк О.Д., Л.В. Дубовая, А.М. Макеев, ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел.: 592-92-20.



<a id="p100142"></a>

---