МУК 4.1.1969-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ацетохлора в ботве, корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной хроматографии. Методические указания

(утв. Роспотребнадзором 21.04.2005)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЦЕТОХЛОРА В БОТВЕ, КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ И КОРНЕПЛОДАХ МОРКОВИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1. Вводная часть

Действующее вещество: ацетохлор.

Структурная формула (не приводится).

2-хлор-N-этоксиметил-6'-этилацето-о-толуидид (IUPAC).

    Эмпирическая формула: C  H  ClNO .
                           14 20    2

Мол. масса: 269,8.

    Химически чистый препарат - маслянистая жидкость  темно-желтого цвета с
температурой   кипения  125  °C  при  40  Па.   Коэффициент   распределения
н-октанол/вода: K   log P = 3,03 (20 °C).

             ow

    Растворимость  (25 °C) в воде  223 мг/л,  хорошо  растворим  в ацетоне,
диэтиловом  эфире,  бензоле,  н-гексане, хлороформе, этаноле, этилацетате и

толуоле.

В почве период полураспада DT 8 — 18 дней. 50

Оральная токсичность (LD ) для крыс 2148 мг/кг. 50

Область применения

Системный гербицид корневого действия, подавляющий однолетние злаковые и некоторые виды двудольных сорняков в период их прорастания.

2. Методика определения ацетохлора в ботве и корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод определения ацетохлора основан на экстракции пестицида органическими растворителями и очистке экстракта на патроне Диапак С-16. Количественное определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора электронного захвата (ДЭЗ или ДПР).

2.1.2 Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования. Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению не мешает.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в таблице.

Объект анализа	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг	Среднее значение определения, % (n = 24)	Стандартное отклонение S, %	Доверительный интервал среднего %, n = 24, Р = 0,95
Ботва свеклы	0,005	0,01 — 0,2	95	10	7
Корнеплоды свеклы	0,005	0,01 — 0,2	98	9	6
Корнеплоды моркови	0,005	0,01 — 0,2	89	13	8

2.2. Реактивы, материалы

Ацетохлор, аналитический стандарт >= 96 %

Ацетон, чда ГОСТ 2603-79

Вода дистиллированная                              ГОСТ 7602-76
н-Гексан, хч                                       ТУ 6-09-3375-78

Концентрирующие патроны Диапак С-16 (0,6 г)

Хлористый метилен, чда ТУ-2631-020-11291058-96.

2.3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф «Цвет 550» или аналогичный с ДЭЗ

Колонка стеклянная 1 м х 3 мм с 5% SE-30 на хроматоне N-супер (0,125 — 0,160 мм)

Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные ГОСТ 34104-80Е

Весы технические ВЛКТ-500 ГОСТ 24104-80

Установка ультразвуковая "Серьга"                           ТУ 3.836.008
Микрошприц МШ-10, МШ-10М                                    ТУ 2-833-106

Аллонж НШ 14,5

Шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл

Насос водоструйный                                          МРТУ 42 861-64
Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС                 ГОСТ 10384-72

Воронки лабораторные В-75-110 ГОСТ 25336-82

Цилиндры мерные на 100 куб. см, 500 куб. см ГОСТ 1774-74

Колбы мерные на 100 куб. см ГОСТ 1770-74

Пипетки на 1, 2, 5, 10 куб. см ГОСТ 22292-74

Стаканы химические ГОСТ 25336-82Е.

Допускается использование оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79).

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают на вакуумном ротационном испарителе до объема 1 мл и хроматографируют. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

2.5.2 Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку, не присоединяя к детектору, кондиционируют в токе инертного газа (азот) при температуре 250 °C в течение 8 — 10 ч.

2.5.3 Приготовление стандартного и градуировочных растворов

Для приготовления стандартного раствора с концентрацией 1 мг/мл количественно переносят 50 мг аналитического стандарта ацетохлора в мерную колбу на 50 мл и растворяют навеску в ацетоне. Из полученного раствора готовят градуировочные растворы с концентрациями 2; 1; 0,5; 0,2 мкг/мл методом последовательного разбавления гексаном.

Для внесения в образец при определении полноты извлечения используют соответствующие растворы ацетохлора в ацетоне.

2.5.4 Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика зависимости площади пика от концентрации ацетохлора в растворе в хроматограф вводят по 2 мкл градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади (мВ х с) пика от концентрации ацетохлора в градуировочном растворе (мкг/мл).

2.5.5 Подготовка концентрирующего патрона Диапак С-16 для очистки экстракта

Патрон устанавливают на аллонж с отводом для соединения с водоструйным насосом. Сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл (используется как емкость для прокачивания водно-ацетонового экстракта и элюирующего растворителя). Для активации и кондиционирования патрона через него последовательно пропускают 10 мл ацетона и 10 мл дистиллированной воды. Элюаты отбрасывают. Скорость потока через патрон не должна превышать 1 — 2 мл/мин. После кондиционирования патрона нельзя допускать высыхания поверхности картриджа и попадания в него пузырьков воздуха. Сразу после приготовления патрон используют для работы.

2.5.6 Проверка хроматографического поведения ацетохлора на патронах Диапак С-16

Готовят водный модельный раствор. Для этого к 150 мл 3%-ного водно-ацетонового раствора добавляют 1 мл стандартного раствора ацетохлора в ацетоне с концентрацией 1 мкг/мл. Пропускают полученный раствор через предварительно активированный патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин. После подсушивания патрона в течение 15 мин. в токе азота элюируют ацетохлор 20 мл хлористого метилена, отбирая фракции по 5 мл. Каждую фракцию упаривают на роторном испарителе при температуре не выше 35 °C. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и хроматографируют. Определяют профиль вымывания ацетохлора с сорбента.

Примечание: профиль вымывания ацетохлора может измениться при использовании другой партии патронов Диапак С-16.

2.5.7 Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.6. Проведение определения

Навеску ботвы или корнеплодов свеклы и моркови (20 г) измельчают, помещают в коническую колбу с притертой пробкой, добавляют 70 мл 3%-го водно-ацетонового раствора и экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 5 мин. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр. Объединенный экстракт пропускают через подготовленный патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин. После подсушивания патрона в течение 15 мин. в токе инертного газа ацетохлор элюируют хлористым метиленом. Элюат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 35 °C. Сухой остаток растворяют в 1 — 4 мл гексана и хроматографируют.

2.6.3 Условия хроматографирования

Газовый хроматограф «Цвет 550М» с ДПР или аналогичный. Колонка стеклянная 3 м х 3 мм с 5% SE-30 на хроматоне N-супер (0,125 — 0,160 мм). Температура колонки 210 °C, испарителя 250 °C, детектора 310 °C. Скорость газа-носителя (азот) через колонку — 82,8 куб. см/мин.

Объем вводимой пробы — 1 мкл. Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,2 — 2,0 нг.

2.6.6 Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание ацетохлора в пробе (Х, мг/кг) вычисляют по формуле:

                              Н  х С х V
                               2

Х = ----------, Н х Р 1

где:
Н  - высота  (площадь) пика ацетохлора в стандартном растворе, мм (мВ х
 1

с); Н — высота (площадь) пика ацетохлора в анализируемой пробе, мм (мВ х 2 с); V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; Р — навеска анализируемого образца, г; С — концентрация ацетохлора в стандартном растворе, мкг/мл.

Концентрацию ацетохлора в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2 параллельных определений.

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор ацетохлора с концентрацией 2 мкг/мл, разбавляют.

3. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования инструкции «Основные правила безопасной работы в химической лаборатории», общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, а также инструкции по эксплуатации газового хроматографа и электрооборудования до 400 В.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-2003. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Долженко В.И., Цибульская И.А., Остроухова О.К.

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.

---