---
title: "\"МУК 4.1.1910-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению Фенмедифама в корнеплодах и зеленой массе столовой и кормовой свеклы методом газожидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.1910-04"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1910-04"
---

## "МУК 4.1.1910-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению Фенмедифама в корнеплодах и зеленой массе столовой и кормовой свеклы методом газожидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.1910-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению Фенмедифама в корнеплодах и зеленой массе столовой и кормовой свеклы методом газожидкостной хроматографии"

(утв. Минздравом России 01.01.2004)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

1 января 2004 года

</div>



#### <a id="p100142"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНМЕДИФАМА В КОРНЕПЛОДАХ**
**И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ СТОЛОВОЙ И КОРМОВОЙ СВЕКЛЫ**
**МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100003"></a>**МУК 4.1.1910-04**

1. <a id="p100004"></a>Подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100005"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100006"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100007"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100008"></a>Вводная часть. Краткая характеристика препарата


<a id="p100009"></a>Фирма-производитель: Авентис КропСайенс ГмбХ.
<a id="p100010"></a>Торговое название препаратов: Бетанал С, Бетанал АМ 11, Бетанал 22, Бетанал Прогресс АМ, Бетанал Прогресс ОФ, Бетарен Экспресс АМ, Бурефен ФД 11.
<a id="p100011"></a>Название действующего вещества по ИСО: Фенмедифам.
<a id="p100012"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: метил-3-(3-метилкарбанилокси)-карбанилат; 3-метоксикарбониламинофенил-3'-метилкарбанилат.
<a id="p100014"></a>    Эмпирическая формула: C  H  N O .
                           16 16 2 4
<a id="p100015"></a>Молекулярная масса: 300,3.
<a id="p100016"></a>Химически чистый Фенмедифам представляет собой бесцветное кристаллическое вещество с температурой плавления 143 - 144 °C.
<a id="p100017"></a>    Коэффициент распределения  в  системе н-октанол - вода К   log P = 3,59
                                                            ow
(pH 9).
                                        -6
<a id="p100018"></a>    Давление насыщенных паров: 1,33 х 10   мПа (при 25 °C).
                                         -8                   -1
<a id="p100019"></a>    Константа  Генри:  (расчетная) 5 х 10   Па х куб. м х моль   рКа  менее
0,1.
<a id="p100020"></a>Растворимость в воде - 4,7 мг/л (при комнатной температуре).
<a id="p100021"></a>Растворимость (при 20 °C в г/кг): в ацетоне - 200; циклогексаноне - 200; этилацетате - 56,3; метаноле - 50; хлороформе - 20; дихлорметане - 16,7; толуоле - 0,97; гексане - 0,5.
<a id="p100022"></a>    Стабилен   при  температуре  ниже  200  °C.  Очень  стабилен  в  кислых
растворах,  но  гидролизуется в нейтральных и щелочных растворах; DT   (при
                                                                    50
22 °C) 50 суток (pH 5), 14,5 часов (pH 7), 10 минут (pH 9).
<a id="p100023"></a>    Краткая   токсикологическая   характеристика:  Фенмедифам  относится  к
малоопасным  веществам  по  острой пероральной токсичности (ЛД   для крыс и
                                                              50
мышей  -  более  8000  мг/кг, свиней и собак - более 4000 мг/кг) и умеренно
опасным веществам по острой  дермальной (ЛД   - для  кроликов 1000 мг/кг) и
                                           50
ингаляционной   токсичности  (ЛК    (4 часа)  для крыс  -  7000  мг/куб.  м
                                50
воздуха). Не раздражает кожу.
<a id="p100024"></a>    Фенмедифам метаболизируется в почве и растениях, в частности, в свекле.
Продуктами   метаболизма   являются   метил-N-(3-гидроксифенил)карбамат   и
м-аминофенол,  а также комплексы с компонентами почвы. DT   в почве - до 25
                                                         50
суток,  DT    -  до  108  суток.  Фенмедифам не аккумулируется в почве и не
          90
передвигается  в растения. Риск проникновения в грунтовые воды отсутствует.
В   организмах  млекопитающих  основные  пути  метаболизма  -  гидролиз  до
метил-N-(3-гидроксифенил)карбамата   и   конъюгация  до  глюкуронидов.  99%
Фенмедифама  и  его метаболитов выводятся из организма с мочой в течение 72
часов.
<a id="p100025"></a>В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,03 мг/кг/сутки; ПДК в почве - 0,25 мг/кг (транслокационный лимитирующий показатель); ПДК в воде водоемов - 0,05 мг/куб. дм; ПДК в воздухе рабочей зоны - 0,50 мг/куб. м; ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,001 мг/куб. м. МДУ в сельскохозяйственной продукции (мг/кг): свекла сахарная, столовая, кормовая - 0,20 мг/кг; цикорий, цикорий салатный - 0,50 мг/кг.
<a id="p100026"></a>Область применения препарата: Фенмедифам используется в качестве послевсходового гербицида в посевах сахарной, столовой и кормовой свеклы. Подавляет развитие широколистных сорняков, действуя через листья. Двудольные сорняки чувствительны к Фенмедифаму от фазы всходов до образования четырех настоящих листьев, злаковые - в фазе появления первого листа.
<a id="p100027"></a>Зарегистрирован в России под торговыми названиями: (в смеси с Десмедифамом): "Бетанал АМ 11, КЭ (80 + 80 г/л)", "Бетанал 22, КЭ (160 + 160 г/л)", "Бурефен ФД 11, КЭ (80 + 80 г/л)"; (в смеси с Десмедифамом и Этофумезатом): "Бетарен Экспресс АМ, КЭ (60 + 60 + 60 г/л)". Рекомендуется применение с нормой расхода препарата до 6 л/га до трех обработок за сезон (по каждой волне сорняков).


## 2. <a id="p100028"></a>Методика определения остаточных количеств Фенмедифама в корнеплодах и зеленой массе столовой и кормовой свеклы методом газожидкостной хроматографии



### <a id="p100029"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100030"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100031"></a>Методика основана на выделении Фенмедифама из анализируемых проб методом экстракции органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися жидкими фазами, получении химического производного путем гидролитического расщепления Фенмедифама в 3-метиланилин и бромирования последнего. Определение производного Фенмедифама производится методом газожидкостной хроматографии с использованием электронозахватного детектора. Идентификация вещества проводится по времени удерживания. Количественное определение осуществляется методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100032"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100033"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах 1 и [2](#p100040). Число параллельных определений по каждой концентрации - 4. Общее число определений n = 20. Доверительная вероятность р = 0,95.

<a id="p100034"></a>Таблица 1

<a id="p100035"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="15%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения Карбофурана, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S</td><td>доверительный интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>корнеплоды столовой (кормовой) свеклы</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,50</td><td>83,57</td><td>4,026</td><td>83,57 +/- 1,88</td></tr>
<tr><td>зеленая масса столовой (кормовой) свеклы</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,50</td><td>81,81</td><td>3,639</td><td>81,81 +/- 1,70</td></tr>
</table>


<a id="p100039"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100040"></a>**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ И ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНМЕДИФАМА**

</div>

**В КОРНЕПЛОДАХ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ СТОЛОВОЙ (КОРМОВОЙ) СВЕКЛЫ**


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="20%"><col width="20%"><col width="20%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Добавлено Карбофурана, мг/кг (мг/л)</td><td>Обнаружено Карбофурана, мг/кг (мг/л)</td><td>Доверительный интервал, +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td></tr>
<tr><td>корнеплоды столовой</td><td>0,05</td><td>0,0419</td><td>0,0020</td><td>83,0</td></tr>
<tr><td rowspan="3">(кормовой) свеклы</td><td>0,10</td><td>0,0832</td><td>0,0052</td><td>83,2</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,165</td><td>0,0085</td><td>82,5</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>0,423</td><td>0,0107</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td>зеленая масса столовой</td><td>0,05</td><td>0,040</td><td>0,0034</td><td>80,1</td></tr>
<tr><td rowspan="3">(кормовой) свеклы</td><td>0,10</td><td>0,081</td><td>0,0023</td><td>81,0</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,165</td><td>0,0053</td><td>82,5</td></tr>
<tr><td>0,50</td><td>0,412</td><td>0,0176</td><td>82,4</td></tr>
</table>



##### <a id="p100045"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100046"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, близких по химическому строению (карбаматы), а также и других применяемых при возделывании столовой и кормовой свеклы.


### <a id="p100047"></a>2.2. Реактивы, растворы; оборудование и приборы



##### <a id="p100048"></a>2.2.1 Реактивы, растворы и материалы

<a id="p100049"></a>Ацетон, х.ч., ТУ 6-09-3513-86.
<a id="p100050"></a>Ацетонитрил, х.ч., ТУ 6-09-3534-74, или для ВЭЖХ "В-230НМ".
<a id="p100051"></a>н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100052"></a>Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100053"></a>Калия бромат, х.ч., [ГОСТ 4457-74](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-4457-74).
<a id="p100054"></a>Калия бромат, 1%-ный раствор в дистиллированной воде.
<a id="p100055"></a>Калия бромид, х.ч., ГОСТ 4160-74.
<a id="p100056"></a>Калия бромид, 20%-ный раствор в дистиллированной воде.
<a id="p100057"></a>Калия гидроксид (кали едкое), гранулированный, ч.д.а., ОСТ 6-01-301-74.
<a id="p100058"></a>Кислота серная, концентрированная, х.ч., [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78).
<a id="p100059"></a>Кислота серная, 1 н раствор в дистиллированной воде.
<a id="p100060"></a>Кислота хлороводородная (соляная), концентрированная, х.ч., ГОСТ 3118-77.
<a id="p100061"></a>Кислота хлороводородная, 0,05 н раствор в дистиллированной воде.
<a id="p100062"></a>Натрия гидроксид (натр едкий), х.ч., ГОСТ 4328-77.
<a id="p100063"></a>Натрия гидроксид, 10 н и 1 н растворы в дистиллированной воде.
<a id="p100064"></a>Натрия сульфат (натрий сернокислый) безводный, ч.д.а., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100065"></a>Натрия сульфит (натрий серноватисто-кислый), ч.д.а., [ГОСТ 27068-86](https://bukva.ai/docs/gost-27068-86).
<a id="p100066"></a>Натрия хлорид, ГОСТ 4233-77.
<a id="p100067"></a>Толуол, х.ч., [ГОСТ 5789-78](https://bukva.ai/docs/gost-5789-78).
<a id="p100068"></a>Фенмедифам, аналитический стандарт с содержанием д.в. не менее 99,8%, фирма Авентис КропСайенс ГмбХ.
<a id="p100069"></a>Фильтры бумажные, ТУ 6-09-1678-77.
<a id="p100070"></a>Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты), [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100071"></a>Этиленгликоль, [ГОСТ 10164-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-10164-75).
<a id="p100072"></a>Эфир диэтиловый медицинский, ГОСТ 6265-74.

##### <a id="p100073"></a>2.2.2 Приборы, оборудование и посуда

<a id="p100074"></a>Хроматограф "Кристалл 2000М" с электронозахватным детектором.
<a id="p100075"></a>Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая SE-30, 25 м (ООО "Предприятие Химресурс XXI", 109429, Россия, г. Москва, ул. Верхние Поля, 24, тел.: 359-17-56).
<a id="p100076"></a>Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
<a id="p100077"></a>Баня песчаная.
<a id="p100078"></a>Ванна ультразвуковая "Серьга", ТУ 3.836.008, или аналогичная.
<a id="p100079"></a>Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е, или аналогичные.
<a id="p100080"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г, ГОСТ 19491-74.
<a id="p100081"></a>Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100082"></a>Воронки конические стеклянные диаметром 50 - 60 мм, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100083"></a>Встряхиватель механический, ТУ 64-673М, или аналогичный.
<a id="p100084"></a>Испаритель ротационный вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный.
<a id="p100085"></a>Колбы круглодонные со шлифами, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100086"></a>Колбы мерные на 100 мл, 50 мл и 25 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100087"></a>Колбы плоскодонные конические со шлифами, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100088"></a>Концентраторы грушевидные и круглодонные объемом 50, 100 и 250 мл, КТУ-100-14/19, ГОСТ 10394-75.
<a id="p100089"></a>Микрошприц для газожидкостного хроматографа на 5 - 10 мкл.
<a id="p100090"></a>Насос вакуумный водоструйный, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100091"></a>Палочки стеклянные, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100092"></a>Пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 22292-74.
<a id="p100093"></a>Стаканы стеклянные на 100 - 500 мл, ГОСТ 25366-80Е.
<a id="p100094"></a>Цилиндры мерные на 25, 50, 100 и 500 мл, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).


### <a id="p100095"></a>2.3. Отбор проб


<a id="p100096"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100097"></a>Отобранные пробы столовой и кормовой свеклы анализируются в день отбора или могут храниться в холодильнике при +4 °C в течение 3 дней. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре -18 °C. Непосредственно перед определением пробы корнеплодов столовой и кормовой свеклы и капусты измельчают на терке. Пробы зеленой массы измельчают ножницами.


### <a id="p100098"></a>2.4. Подготовка к определению



##### <a id="p100099"></a>2.4.1 Приготовление щелочного этиленгликоля

<a id="p100100"></a>Растворяют 1 г гранулированного гидроксида калия в 1 мл дистиллированной воды и доводят объем до 25 мл этиленгликолем.

##### <a id="p100101"></a>2.4.2 Приготовление стандартных и градуировочных растворов


###### <a id="p100102"></a>2.4.2.1 Приготовление стандартных растворов Фенмедифама в ацетоне

<a id="p100103"></a>Взвешивают 50 мг Фенмедифама в мерной колбе на 50 мл, интенсивно встряхивая, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. (Стандартный раствор N 1 с концентрацией Фенмедифама 1,0 мг/мл.) Стандартный раствор N 1 можно хранить в холодильнике в течение 6 месяцев в плотно закрытой посуде.
<a id="p100104"></a>Переносят 1 мл стандартного раствора N 1 в мерную колбу на 100 мл и ацетоном доводят до метки. (Стандартный раствор N 2 с концентрацией Фенмедифама 10 мкг/мл.) Аналогично методом последовательных разбавлений готовят стандартные растворы Фенмедифама в ацетоне с концентрациями 4,0; 2,0 и 1,0 мкг/мл. Стандартные растворы с концентрациями 0,25 - 10,0 мкг/мл устойчивы на холоде в темной посуде не более 2 недель.
<a id="p100105"></a>Стандартные растворы Фенмедифама в ацетоне используют для получения градуировочных растворов и для внесения в корнеплоды и зеленую массу столовой и кормовой свеклы при отработке и апробации методики.

###### <a id="p100106"></a>2.4.2.2 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100107"></a>В концентратор добавить 1 мл стандартного раствора Фенмедифама в ацетоне с концентрацией 1,00 мкг/мл. Содержимое концентратора упарить досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Последовательно перенести тремя порциями по 2 мл диэтилового эфира содержимое концентратора в термостойкую колбу с плотно пришлифованной пробкой. Током теплого воздуха высушить содержимое колбы. Подвергнуть Фенмедифам щелочному гидролизу. Для этого добавить в колбу 1 мл этиленгликоля и 1 мл щелочного этиленгликоля. Колбу плотно закрыть крышкой и поместить ее в песчаную баню с температурой 180 °C на 15 минут. По прошествии этого времени колбу охладить до комнатной температуры. Подвергнуть образовавшийся после гидролиза 3-метиланилин бромированию, при этом все работы следует выполнять в вытяжном шкафу. В колбу добавить 10 мл 1 н серной кислоты, 1 мл бромида калия и 1 мл бромата калия. Содержимое колбы тщательно перемешать и поместить ее в темное место на 15 минут. После бромирования избыток брома удаляют сухим сульфитом натрия. Сульфит натрия добавляют небольшими порциями, перемешивая колбу до полного исчезновения желтой окраски. В колбу добавляют 1,5 мл 10 н раствора гидроксида натрия. Аккуратно перемешивают содержимое колбы. Экстрагируют бромированный продукт 4 мл толуола. Получают градуировочный раствор с концентрацией 0,25 мкг/мл в пересчете на Фенмедифам.
<a id="p100108"></a>Аналогичным образом готовят градуировочные растворы с концентрациями 0,50, 1,00 и 2,50 мкг/мл (в пересчете на Фенмедифам). Для этого берут по 1 мл стандартных растворов с концентрациями 2,0, 4,0 и 10,0 мкг/мл соответственно.
<a id="p100109"></a>Градуировочные растворы используют для построения калибровочного графика.

##### <a id="p100110"></a>2.4.3 Подготовка и кондиционирование колонки для газожидкостной хроматографии

<a id="p100111"></a>Капиллярную кварцевую колонку SE-30, 25 м устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 180 °C, давлении газа-носителя (газ 1) 80 кПа, расходе газа-носителя (газ 2) 0,5 мл/мин., сбросе 1:20 и поддуве (газ 3) 30 мл/мин. в течение 6 часов.

##### <a id="p100112"></a>2.4.4 Построение калибровочного графика

<a id="p100113"></a>Для построения калибровочного графика (площадь пика - концентрация градуировочного раствора в пересчете на Фенмедифам) вводят в хроматограф по 1 мкл градуировочных растворов. Измеряют площадь пиков (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации). Строят графики зависимости площади хроматографического пика от расчетной концентрации Фенмедифама.


### <a id="p100114"></a>2.5. Описание определения



##### <a id="p100115"></a>2.5.1 Ботва и корнеплоды столовой и кормовой свеклы

<a id="p100116"></a>Измельченный образец корнеплодов или зеленой массы столовой (кормовой) свеклы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл. В колбу вносят 5 - 10 мл 0,05 н раствора соляной кислоты. Прибавляют 40 мл смеси ацетонитрил - 0,05 н соляная кислота в соотношении 9:1 и помещают колбу на 5 минут в ультразвуковую ванну, затем экстрагируют Фенмедифам в течение 20 минут на качалке. Процедуру экстракции повторяют еще 2 раза, используя по 30 мл ацетонитрила. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр "красная лента" в делительную воронку на 250 мл.
<a id="p100117"></a>В делительную воронку добавляют приблизительно 3 г хлорида натрия, интенсивно встряхивают в течение 30 секунд. После разделения слоев нижний водный слой с остатками не растворившегося хлорида натрия отбрасывают.
<a id="p100118"></a>К оставшемуся в делительной воронке ацетонитрильному слою прибавляют 40 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. После полного разделения слоев нижний ацетонитрильный слой собирают в химический стакан объемом 200 мл. Верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт из химического стакана снова переносят в делительную воронку. Повторяют процедуру промывки ацетонитрильного экстракта гексаном еще 2 раза, используя по 30 мл гексана. После завершающей промывки нижний ацетонитрильный слой собирают в концентратор на 100 мл, пропуская его через слой безводного сульфата натрия.
<a id="p100119"></a>Ацетонитрильный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100120"></a>В концентратор добавляют 2 мл ацетона, тщательно растворяют сухой остаток. Для лучшего растворения концентратор помещают на 1/2 минуты в ультразвуковую ванну. Содержимое концентратора аккуратно переносят в делительную воронку. В концентратор повторно добавляют 2 мл ацетона, тщательно обмывают стенки. Содержимое переносят в ту же делительную воронку. К объединенным порциям ацетона добавляют 100 мл 1 н раствора гидроксида натрия (рН 9) в дистиллированной воде. Плавно встряхивают в течение 1 минуты.
<a id="p100121"></a>В делительную воронку добавляют 40 мл этилацетата. Интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. Оставляет делительную воронку в покое. После полного разделения слоев нижний водный слой собирают в химический стакан объемом 200 мл. Верхний слой собирают в концентратор на 250 мл, пропуская его через слой безводного сульфата натрия. Содержимое химического стакана снова переносят в делительную воронку. Повторяют процедуру экстракции Фенмедифама еще 2 раза, используя по 30 мл этилацетата. Все слои этилацетата объединяют в концентраторе на 100 мл. Процедуру экстракции следует проводить по возможности быстро.
<a id="p100122"></a>Этилацетат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C досуха. Остатки растворителя отдувают из концентратора воздухом комнатной температуры не менее 3 минут.
<a id="p100123"></a>Получение производных Фенмедифама
<a id="p100124"></a>Содержимое концентратора последовательно перенести тремя порциями по 2 мл диэтилового эфира в термостойкую колбу с плотно пришлифованной пробкой. Током теплого воздуха высушить содержимое колбы. Подвергнуть Фенмедифам щелочному гидролизу. Для этого добавить в колбу 1 мл этиленгликоля и 1 мл щелочного этиленгликоля. Колбу плотно закрыть крышкой и поместить ее в песчаную баню с температурой 180 °C на 15 минут. По прошествии этого времени колбу охладить до комнатной температуры. Подвергнуть образовавшийся после гидролиза 3-метиланилин бромированию, при этом все работы следует выполнять в вытяжном шкафу. В колбу добавить 10 мл 1 н серной кислоты, 1 мл бромида калия и 1 мл бромата калия. Содержимое колбы тщательно перемешать и поместить ее в темное место на 15 минут. После бромирования избыток брома удаляют сухим сульфитом натрия. Сульфит натрия добавляют небольшими порциями, перемешивая колбу до полного исчезновения желтой окраски. В колбу добавляют 1,5 мл 10 н раствора гидроксида натрия. Аккуратно перемешивают содержимое колбы. Экстрагируют бромированный продукт 4 мл толуола. Из слоя толуола микрошприцем отбирают аликвоту 1 мкл и вводят ее в хроматограф.


### <a id="p100125"></a>2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100126"></a>2.6.1 Условия хроматографирования

<a id="p100127"></a>Хроматограф "Кристалл 2000М" с электронозахватным детектором или другой с аналогичными характеристиками.
<a id="p100128"></a>Капиллярная кварцевая колонка SE-30, длина 25 м.
<a id="p100129"></a>Температура детектора - 340 °C, испарителя - 210 °C, программированный нагрев колонки - с 180 °C (const 3 мин.) до 210 °C по 10 град./мин., 210 °C (const 6 мин.).
<a id="p100130"></a>Газ 1: тип регулятора расхода газа РРГ 11, давление 80 кПа.
<a id="p100131"></a>Газ 2 (азот) - 10 мл/мин.: расход 0,5 мл/мин., сброс 1:20.
<a id="p100132"></a>Режим Splitless, начало сброса 5 сек., длительность сброса 30 сек., минимальный расход 20 мл/мин.
<a id="p100133"></a>Газ 3 (азот, поддув детектора) - 30 мл/мин.

##### <a id="p100134"></a>2.6.2 Обработка результатов анализа

<a id="p100135"></a>Содержание Фенмедифама рассчитывают по формуле:

                                S   х А х V
                                 пр
<a id="p100136"></a>                           Х = ------------- х Р,
                               100 х S   х m
                                      ст

    где:
    Х - содержание Фенмедифама в пробе, мг/кг;
    S   - площадь (высота) пика стандарта, мВ х с;
     ст
    S   - площадь (высота) пика образца, мВ х с;
     пр
    А  -  концентрация  градуировочного раствора в пересчете на Фенмедифам,
мкг/мл;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    m - масса анализируемого образца, г;
    Р - содержание Фенмедифама в аналитическом стандарте, %.


## 3. <a id="p100137"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100138"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами. При анализе образуется свободный бром, который является чрезвычайно опасным веществом, потому все работы, связанные с дериватизацией пробы, необходимо проводить в вытяжном шкафу. Персонал лаборатории должен быть обучен правилам безопасности.


## 4. <a id="p100139"></a>Разработчики


<a id="p100140"></a>Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов".



<a id="p100141"></a>

---