---
title: "\"МУК 4.1.1872-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств азимсульфурона в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1872-04"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1872-04"
---

## "МУК 4.1.1872-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств азимсульфурона в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1872-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств азимсульфурона в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России 07.03.2004)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 мая 2004 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
7 марта 2004 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЗИМСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ РИСА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.1872-04**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения<br>
с 1 мая 2004 года

</div>


1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100010"></a>Вводная часть


<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Дюпон де Немур.
<a id="p100012"></a>Торговое название: Гулливер.
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИСО: Азимсульфурон.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК:
<a id="p100015"></a>1-(4,6-диметокси-пиримидин-2-ил)-3-[2-метил-4-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)-2Н-пиразол-3-сульфонил]-мочевина.
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится)
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C  H  N  O S.
                           13 16 10 5
<a id="p100018"></a>Молекулярная масса: 424,4.
<a id="p100019"></a>Химически чистый Азимсульфурон представляет собой белый кристаллический порошок.
<a id="p100020"></a>Температура плавления: 170 °С.
                           -6
<a id="p100021"></a>    Давление паров 4,0 х 10   мПа (при 25 °С).
<a id="p100022"></a>    Коэффициент  распределения  октанол-вода K   log P: 0,646 (pH 5), -1,37
                                              ow
(pH 7), -2,08 (pH 9).
<a id="p100023"></a>Растворимость в воде (мг/л, 20 °С): 72,3 (pH 5); 1050 (pH 7); 6536 (pH 9).
<a id="p100024"></a>Растворимость в органических растворителях (мг/л при 25 °С): ацетон - 26,4, ацетонитрил - 13,0, этилацетат - 13,0, гексан < 0,2, метанол - 2,1, хлористый метилен - 65,9.
<a id="p100025"></a>Константа диссоциации рКа (при 25 °С) - 3,6.
<a id="p100026"></a>    Вещество  медленно  гидролизуется  в водных растворах, DT   (сутки, при
                                                             50
25 °С) 89 (pH 5), 124 (pH 7), 132 (pH 9).
<a id="p100027"></a>    Азимсульфурон  разлагается  в  почве  в результате фотолиза, почвенного
метаболизма и химического гидролиза. DT   в затопленной почве составляет 25
                                       50
суток  (при  25  °С), DT   во влажной почве 18 - 134 суток в зависимости от
                        50
температуры и степени увлажнения.
<a id="p100028"></a>    Быстро разлагается в растениях.
<a id="p100029"></a>    Из  организмов  теплокровных  >  95% азимсульфурона выводится в течение
двух суток, 60 - 73% от этого количества - в неизменном виде.
<a id="p100030"></a>    Краткая  токсикологическая  характеристика:  Азимсульфурон  относится к
малоопасным соединениям  по острой оральной (ЛД   для крыс составляет более
                                               50
5000  мг/кг), дермальной  (ЛД   для кроликов более - 2000 мг/кг) и умеренно
                             50
опасным по  ингаляционной (ЛК  ,  4  часа, для крыс более - 5900 мг/куб. м)
                             50
токсичности.  Не  раздражает  кожу  и  слизистую  оболочку  глаз  (кролики,
гвинейские свиньи).
<a id="p100031"></a>Область применения препарата: Азимсульфурон - избирательный гербицид системного действия, проникающий, в основном, через листья растений и ингибирующий активность ацетолактасинтетазы, участвующей в биосинтезе лейцина, изолейцина и валина. Избирательность действия определяется различиями в скорости метаболизма гербицида в растении. Рекомендуется в качестве послевсходового гербицида для подавления однодольных (просовидные) и некоторых двудольных сорняков в посевах риса при норме расхода 20 - 25 г д.в./га.
<a id="p100032"></a>В России проходит регистрационные испытания в качестве гербицида в посевах риса под фирменным названием Гулливер, ВДГ, 500 г/кг, с нормой расхода 20 - 30 г препарата/га при однократной обработке культуры в фазы от 3 листа до кущения.


## 2. <a id="p100033"></a>МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЗИМСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ РИСА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ



### <a id="p100034"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100035"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100036"></a>Методика основана на определении Азимсульфурона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися жидкими фазами и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак-С). Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100037"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100038"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах 1 и [2](#p100048).

<a id="p100039"></a>Таблица 1

<div align="center">

<a id="p100040"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="18%"><col width="19%"><col width="12%"><col width="16%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td></td><td colspan="5">Метрологические параметры, р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг (мг/л)</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/л)</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S</td><td>Доверительный интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,050</td><td>84,29</td><td>0,111</td><td>84,29 +/- 0,52</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,010</td><td>0,010 - 0,100</td><td>80,85</td><td>0,040</td><td>80,85 +/- 1,86</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,010</td><td>0,010 - 0,100</td><td>82,69</td><td>0,046</td><td>82,69 +/- 2,16</td></tr>
<tr><td>Солома</td><td>0,020</td><td>0,020 - 0,200</td><td>84,43</td><td>0,051</td><td>84,43 +/- 2,38</td></tr>
</table>


<div align="right">

<a id="p100047"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100048"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗИМСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ**

</div>

**И СОЛОМЕ РИСА (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="20%"><col width="20%"><col width="25%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено, мг/кг (мг/л)</td><td>Обнаружено, мг/кг (мг/л)</td><td>Доверительный интервал, мг/кг (мг/л), +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,005</td><td>0,00420</td><td>0,00003</td><td>84,0</td></tr>
<tr><td>0,010</td><td>0,0084</td><td>0,0002</td><td>84,2</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,0169</td><td>0,0002</td><td>84,5</td></tr>
<tr><td>0,050</td><td>0,0422</td><td>0,0011</td><td>84,4</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,010</td><td>0,0082</td><td>0,0003</td><td>82,0</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,0152</td><td>0,0008</td><td>75,9</td></tr>
<tr><td>0,050</td><td>0,0413</td><td>0,0018</td><td>82,7</td></tr>
<tr><td>0,100</td><td>0,0828</td><td>0,0020</td><td>82,8</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно</td><td>0,010</td><td>0,0082</td><td>0,0004</td><td>82,3</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,0165</td><td>0,0007</td><td>82,5</td></tr>
<tr><td>0,050</td><td>0,0415</td><td>0,0056</td><td>83,0</td></tr>
<tr><td>0,100</td><td>0,0829</td><td>0,0018</td><td>82,9</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Солома</td><td>0,020</td><td>0,0165</td><td>0,0008</td><td>82,3</td></tr>
<tr><td>0,040</td><td>0,0325</td><td>0,0009</td><td>81,2</td></tr>
<tr><td>0,100</td><td>0,0860</td><td>0,0071</td><td>86,0</td></tr>
<tr><td>0,200</td><td>0,1731</td><td>0,0128</td><td>86,5</td></tr>
</table>



##### <a id="p100067"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100068"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании риса.


### <a id="p100069"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование



##### <a id="p100070"></a>2.2.1 Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100071"></a>Азимсульфурон, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,3%, фирма Дюпон.
<a id="p100072"></a>Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-87 или для ВЭЖХ "В-230НМ".
<a id="p100073"></a>Вода деионизированная бидистиллированная, ГОСТ 6709-72.
<a id="p100074"></a>Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100075"></a>Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100076"></a>Калий фосфорнокислый однозамещенный, [ГОСТ 4198-75](https://bukva.ai/docs/gost-4198-75).
<a id="p100077"></a>Калия перманганат, ч.д.а., ГОСТ 20490-75.
<a id="p100078"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч., ГОСТ 6552-80 или 85%, Fluka, 79621.
<a id="p100079"></a>Кислота серная концентрированная, х.ч., ГОСТ 4204-77.
<a id="p100080"></a>Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 61-75.
<a id="p100081"></a>Магния сульфат, ГОСТ 4523-67.
<a id="p100082"></a>Метилен хлористый (дихлорметан), [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80).
<a id="p100083"></a>Натрия гидроксид (едкий натр) гранулированный, х.ч., ГОСТ 4328-77.
<a id="p100084"></a>Натрия сульфат (натрий сернокислый), безводный, х.ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100085"></a>Натрия хлорид (натрий хлористый), ГОСТ 4233-77.
<a id="p100086"></a>Патроны концентрирующие Диапак-С (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100087"></a>Хлороформ (трихлорметан), ч., ГОСТ 20015-74.
<a id="p100088"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).

<div align="center">

<a id="p100089"></a>Фильтры бумажные, ТУ 6-09-1678-77.

</div>



##### <a id="p100090"></a>2.2.2 Приборы, оборудование и посуда


<a id="p100091"></a>Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,0050 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа.
<a id="p100092"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP-8, зернение 5 мкм, фирма Уотерс, или
<a id="p100093"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP-18, зернение 5 мкм, фирма Уотерс.
<a id="p100094"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работы с концентрирующими патронами).
<a id="p100095"></a>Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
<a id="p100096"></a>Ванна ультразвуковая "Серьга", ТУ 3.836.008, или аналогичная.
<a id="p100097"></a>Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е, или аналогичные.
<a id="p100098"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г, ГОСТ 19491-74.
<a id="p100099"></a>Воронки делительные на 500 и 250 мл, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100100"></a>Воронки конические стеклянные диаметром 50 - 60 мм, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100101"></a>Встряхиватель механический, ТУ 64-673М или аналогичный.
<a id="p100102"></a>Иономер (pH-метр-милливольтметр) pH-150М, ГОСТ 22261, с электродами:
<a id="p100103"></a>стеклянным лабораторным ЭСЛ-43-11 (ЭСЛ-45-11, ЭСЛ-48-11) ТУ 25-05(1Е2.840.516)-78, и
<a id="p100104"></a>хлорсеребряным ЭВЛ-1М4 ТУ 25-05(1Е2.840.517)-78, или аналогичными.
<a id="p100105"></a>Испаритель ротационный вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный.
<a id="p100106"></a>Колбы круглодонные со шлифами, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100107"></a>Колбы мерные на 100 мл, 50 мл и 25 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100108"></a>Колбы плоскодонные конические со шлифами, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100109"></a>Мельница лабораторная электрическая, ТУ 46-22-236-84, или аналогичная.
<a id="p100110"></a>Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50 - 100 мкл.
<a id="p100111"></a>Насос вакуумный водоструйный, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100112"></a>Палочки стеклянные, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100113"></a>Пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 22292-74.
<a id="p100114"></a>Стаканы стеклянные на 100 - 500 мл, ГОСТ 25366-80Е.
<a id="p100115"></a>Стеклянный холодильник с прямой трубкой, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100116"></a>Центрифуга, МРТУ 42-219-69.

<div align="center">

<a id="p100117"></a>Цилиндры мерные на 25, 50, 100 и 500 мл, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).

</div>



### <a id="p100118"></a>2.3. Подготовка к определению



##### <a id="p100119"></a>2.3.1 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

<a id="p100120"></a>Колонку Symmetry Shield RP-8 или Symmetry Shield RP-18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1,0 мл/мин. в течение 3 - 4 часов.

##### <a id="p100121"></a>2.3.2 Приготовление растворов для жидкостной хроматографии

<a id="p100122"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и деионизированную бидистиллированную воду.

###### <a id="p100123"></a>2.3.2.1 Приготовление деионизированной бидистиллированной воды

<a id="p100124"></a>Бидистиллят из дистиллятора заливают в круглодонную колбу подходящего объема, кипятят в течение 6 часов с перманганатом калия, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.

###### <a id="p100125"></a>2.3.2.2 Приготовление 0,3%-ного раствора ортофосфорной кислоты

<a id="p100126"></a>В мерную колбу на 1000 мл помещают 3 мл концентрированной ортофосфорной кислоты и доводят объем до метки деионизированной бидистиллированной водой.

###### <a id="p100127"></a>2.3.2.3 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100128"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 л помещают 450 мл ацетонитрила и 550 мл 0,3%-ного раствора ортофосфорной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 мл/мин. в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту. Полученный раствор используют в качестве подвижной фазы.

##### <a id="p100129"></a>2.3.3 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100130"></a>Взвешивают 0,050 г Азимсульфурона в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в хлористом метилене и доводят объем до метки хлористым метиленом (Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1 мг/мл). Стандартный раствор N 1 можно хранить в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100131"></a>Отбирают 10 мл стандартного раствора N 1, переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят объем до метки ацетонитрилом (Стандартный раствор N 2 с концентрацией 100 мкг/мл). Стандартный раствор N 2 можно хранить в холодильнике в течение 3 месяцев.

##### <a id="p100132"></a>2.3.4 Построение градуировочного графика

<a id="p100133"></a>Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация Азимсульфурона в растворе) методом последовательного разбавления ацетонитрилом из стандартного раствора Азимсульфурона в ацетонитриле N 2 готовят градуировочные растворы с концентрациями 0,05; 0,10; 0,20 и 0,50 мкг/мл. Вводят в хроматограф по 20 мкл из соответствующих градуировочных растворов:
<a id="p100134"></a>Измеряют площадь пиков (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации). Строят графики зависимости площади хроматографического пика от концентрации Азимсульфурона.

##### <a id="p100135"></a>2.3.5 Подготовка органических растворителей

<a id="p100136"></a>Перед началом анализа проверяют чистоту гексана, этилацетата, хлористого метилена и хлороформа. Для этого досуха выпаривают на ротационном вакуумном испарителе 100 мл растворителя, отдувают остатки паров растворителей током холодного воздуха. Добавляют в концентратор 2 мл ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют при 245 нм. При недостаточной чистоте растворителей проводят их очистку.
<a id="p100137"></a>Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором марганцовокислого калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 441).
<a id="p100138"></a>Хлороформ и хлористый метилен встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 443)
<a id="p100139"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты промывают равным объемом 5%-ного раствора соды, сушат над безводным хлористым кальцием (Беккер Г. и др., Органикум, Москва, 1979 г., с. 372), кипятят в течение 1 часа с сульфатом магния, предварительно прокаленным до полного удаления кристаллизационной воды, и затем перегоняют.

##### <a id="p100140"></a>2.3.6 Приготовление растворов для проведения анализа

<a id="p100141"></a>2.3.6.1. Приготовление щелочного фосфатного буфера - 0,05 М раствор однозамещенного фосфорнокислого калия, pH 9.
<a id="p100142"></a>В мерную колбу объемом 1000 мл помещают 800 мл дистиллированной воды и растворяют в ней 8,75 г гидрофосфата калия и 100 г хлорида натрия, доводят pH (по pH-метру) да 9, используя 1М раствор гидроксида натрия, после чего доводят раствор до метки дистиллированной водой.

###### <a id="p100143"></a>2.3.6.2 Приготовление 0,2%-ных растворов уксусной кислоты в этилацетате

<a id="p100144"></a>В мерную колбу объемом 100 мл помещают 50 мл этилацетата и туда же добавляют 0,2 мл ледяной уксусной кислоты и доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивая. Раствор используют для элюирования Азимсульфурона с концентрирующим патроном Диапак-С.

##### <a id="p100145"></a>2.3.7 Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С и работа с ним

<a id="p100146"></a>2.3.7.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С (0,6 г) для очистки экстракта.
<a id="p100147"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 мл/мин.
<a id="p100148"></a>Патрон Диапак-С устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 мл (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100149"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 5 мл этилацетата и 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2. Элюат отбрасывают. После промывки нельзя допускать высыхания поверхности концентрирующего патрона!
<a id="p100150"></a>2.3.7.2. Проверка хроматографического поведения Азимсульфурона на концентрирующем патроне Диапак-С.
<a id="p100151"></a>При отработке методики или поступлении новой партии концентрирующих патронов проводят изучение хроматографического поведения Азимсульфурона на патроне. Для этого из стандартного раствора Азимсульфурона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/мл, отбирают 1 мл, помещают в круглодонную колбу объемом 100 мл и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 8 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на концентрирующий патрон, предварительно подготовленный, как указано в [разделе 2.3.7.1](#p100146). Концентратор тщательно обмывают 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2 и смесь также вносят на концентрирующий патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют.
<a id="p100152"></a>Концентрирующий патрон высушивают под вакуумом в течение 2 минут. Азимсульфурон элюируют с патрона 10 мл 0,2% раствора уксусной кислоты в этилацетате, порциями по 5 мл. Элюат после внесения каждой порции выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Азимсульфурон, и объединяют их.


### <a id="p100153"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100154"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100155"></a>Пробы воды анализируются в день отбора или могут храниться в холодильнике при +4 °С в течение 3 дней. Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре при комнатной температуре. Замороженные образцы зеленой массы хранят в морозильной камере при температуре не выше 18 °С.
<a id="p100156"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому измельчают на лабораторной мельнице.


### <a id="p100157"></a>2.5. Описание определения



##### <a id="p100158"></a>2.5.1 Вода


###### <a id="p100159"></a>2.5.1.1 Экстракция и предварительная очистка

<a id="p100160"></a>Пробу воды объемом 100 мл фильтруют через бумажный фильтр "красная лента". Добавляют к пробе по каплям концентрированную ортофосфорную кислоту строго до pH 1,7 - 1,8 (по pH-метру). Переносят пробу воды в делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют 5 - 7 г кристаллического хлорида натрия. Интенсивно встряхивают делительную воронку до полного растворения хлорида натрия.
<a id="p100161"></a>Экстрагируют Азимсульфурон из воды 40 мл хлористого метилена, интенсивно встряхивая воронку в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний метиленхлоридный слой собирают в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 30 мл хлористого метилена.
<a id="p100162"></a>Объединенный экстракт упаривают на роторном испарителе досуха при температуре водяной бани не более 35 °С. Остатки растворителя отдувают из концентратора воздухом комнатной температуры не менее 3 минут. Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетонитрила и вводят в хроматограф 20 мкл пробы.

###### <a id="p100163"></a>2.5.1.2 Очистка на концентрирующем патроне

<a id="p100164"></a>В случае недостаточной чистоты анализируемых проб воды можно использовать процедуру очистки на концентрирующем патроне Диапак-С, 2.3.7.3.
<a id="p100165"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 8 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на концентрирующий патрон. Концентратор тщательно обмывают 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2 и смесь также вносят на концентрирующий патрон. Элюат отбрасывают.
<a id="p100166"></a>Концентрирующий патрон высушивают под вакуумом в течение 2 минут. Азимсульфурон элюируют с патрона 5 мл 0,2%-ной уксусной кислоты в этилацетате, элюат выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100167"></a>Пробу после растворения нежелательно упаривать и повторно перерастворять, так как при этом уменьшается полнота определения Азимсульфурона. Нежелательно также хранить очищенную пробу в холодильнике в виде раствора, так как при этом происходит разрушение элементов анализируемой матрицы, что приводит к значительному уменьшению чистоты пробы и изменению типовой картины.

##### <a id="p100168"></a>2.5.2 Почва

<a id="p100169"></a>Образец почвы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл смеси ацетонитрила с водой в соотношении 8:1. Экстрагируют Азимсульфурон на ультразвуковой ванне в течение 10 минут и на встряхивателе в течение 10 минут. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 мл смеси ацетонитрил - вода в соотношении 8:1, экстрагируя на ультразвуковой ванне по 5 минут и на встряхивателе по 10 минут. Экстракты центрифугируют при 4000 об./мин. в течение 10 мин. Супернатанты фильтруют в концентратор объемом 250 мл через фильтр "красная лента". Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С до водного остатка.
<a id="p100170"></a>В концентратор добавляют 80 мл щелочного фосфатного буфера (pH 9). Тщательно обмывают стенки и содержимое концентратора переносят в делительную воронку на 250 мл.
<a id="p100171"></a>Добавляют в делительную воронку 40 мл хлороформа, плотно закрывают пробку и плавно встряхивают в течение 1 минуты. Оставляют в покое до полного разделения слоев. Нижний хлороформный слой отбрасывают. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Повторяют процедуру промывки экстракта еще два раза, используя по 30 мл хлороформа.
<a id="p100172"></a>После завершающей промывки верхний слой собирают в химический стакан, в который добавляют по каплям концентрированную ортофосфорную кислоту строго до pH 1,7 - 1,8 (по pH-метру). Переносят пробу в чистую делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют 5 г кристаллического хлорида натрия. Интенсивно встряхивают делительную воронку до полного растворения хлорида натрия.
<a id="p100173"></a>Экстрагируют Азимсульфурон из воды 40 мл хлористого метилена, интенсивно встряхивая воронку в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний метиленхлоридный слой собирают в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 30 мл хлористого метилена.
<a id="p100174"></a>Объединенный экстракт упаривают на роторном испарителе досуха при температуре водяной бани не более 35 °С. Остатки растворителя отдувают из концентратора воздухом комнатной температуры не менее 3 минут.
<a id="p100175"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100163). После очистки элюат выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100176"></a>2.5.3 Зерно риса

<a id="p100177"></a>Образец размолотого зерна массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл этилацетата, экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 10 минут и на встряхивателе в течение 15 минут. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 мл этилацетата, экстрагируя на ультразвуковой ванне по 10 минут. Экстракт центрифугируют при 4000 об./мин., супернатант фильтруют в концентратор объемом 250 мл через фильтр "красная лента". Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С до объема приблизительно 1 мл.
<a id="p100178"></a>В концентратор добавляют 100 мл щелочного фосфатного буфера (pH 9). Тщательно обмывают стенки и содержимое концентратора переносят в делительную воронку на 250 мл.
<a id="p100179"></a>Добавляют в делительную воронку 40 мл хлороформа, плотно закрывают пробку и плавно встряхивают в течение 1 минуты. Оставляют в покое до полного разделения слоев. Нижний хлороформный слой отбрасывают. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Повторяют процедуру промывки экстракта еще два раза, используя по 30 мл хлороформа. После завершающей промывки верхний слой собирают в химический стакан, в который добавляют по каплям концентрированную ортофосфорную кислоту строго до pH 1,7 - 1,8 (по pH-метру). Переносят пробу в чистую делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют 5 - 7 г кристаллического хлорида натрия. Интенсивно встряхивают делительную воронку до полного растворения хлорида натрия.
<a id="p100180"></a>Экстрагируют Азимсульфурон из воды 40 мл хлористого метилена, интенсивно встряхивая воронку в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний метиленхлоридный слой собирают в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 30 мл хлористого метилена.
<a id="p100181"></a>Объединенный экстракт упаривают на роторном испарителе досуха при температуре водяной бани не более 35 °С. Остатки растворителя отдувают из концентратора воздухом комнатной температуры не менее 3 минут.
<a id="p100182"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100163). После очистки элюат выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100183"></a>2.5.4 Солома риса

<a id="p100184"></a>Образец размолотой соломы массой 5 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 1 мл дистиллированной воды, 100 мл этилацетата, экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 10 минут и на встряхивателе в течение 15 минут. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 мл этилацетата. Экстрагируют на ультразвуковой ванне по 10 минут. Экстракты фильтруют в концентратор объемом 250 мл через фильтр "красная лента". Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С до объема приблизительно 1 мл.
<a id="p100185"></a>В концентратор добавляют 100 мл щелочного фосфатного буфера (pH 9). Тщательно обмывают стенки и содержимое концентратора переносят в делительную воронку на 250 мл.
<a id="p100186"></a>Добавляют в делительную воронку 40 мл хлороформа, плотно закрывают пробку и плавно встряхивают в течение 1 минуты. Оставляют в покое до полного разделения слоев. Нижний хлороформный слой отбрасывают. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Повторяют процедуру промывки экстракта еще два раза, используя по 30 мл хлороформа. После завершающей промывки верхний слой собирают в химический стакан, в который добавляют по каплям концентрированную ортофосфорную кислоту строго до pH 1,7 - 1,8 (по pH-метру). Переносят пробу в чистую делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют 5 - 7 г кристаллического хлорида натрия. Интенсивно встряхивают делительную воронку до полного растворения хлорида натрия.
<a id="p100187"></a>Экстрагируют Азимсульфурон из воды 40 мл хлористого метилена, интенсивно встряхивая воронку в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний метиленхлоридный слой собирают в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Верхний водный слой оставляют в делительной воронке. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 30 мл хлористого метилена.
<a id="p100188"></a>Объединенный экстракт выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре водяной бани не более 35 °С. Остатки растворителя отдувают из концентратора воздухом комнатной температуры не менее 3 минут.
<a id="p100189"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100163). После очистки элюат выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.


### <a id="p100190"></a>2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100191"></a>2.6.1 Условия хроматографирования

<a id="p100192"></a>Хроматограф "Waters" или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.
<a id="p100193"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP-18, 4,6 мм х 25 см, зернением 5 мкм или альтернативная колонка Symmetry Shield RP-18, 4,6 мм х 25 см, зернением 5 мкм.
<a id="p100194"></a>Температура колонки: 25 °С.
<a id="p100195"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,3%-ная ортофосфорная кислота в соотношении 45:55.
<a id="p100196"></a>Рабочая длина волны детектора: 245 нм.
<a id="p100197"></a>Чувствительность 0,005 ед. оптической плотности на шкалу.
<a id="p100198"></a>Объем вводимой пробы: 20 мкл.
<a id="p100199"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 1 - 10 нг.

##### <a id="p100200"></a>2.6.2 Обработка результатов анализа

<a id="p100201"></a>Содержание Азимсульфурона рассчитывают по формуле:

                               S   х А х V
                                пр
<a id="p100202"></a>                          Х = ------------- х Р,
                              100 х S   х m
                                     ст

    где:
    Х - содержание Азимсульфурона в пробе, мг/кг или мг/л;
    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
    А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    m - масса анализируемого образца, г (мл);
    Р - содержание Азимсульфурона в аналитическом стандарте, %.


## 3. <a id="p100203"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100204"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.


## 4. <a id="p100205"></a>Разработчики


<a id="p100206"></a>Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов".



<a id="p100207"></a>

---