---
title: "\"МУК 4.1.1851-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств клопиралида в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.1851-04"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1851-04"
---

## "МУК 4.1.1851-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств клопиралида в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.1851-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств клопиралида в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии"

(утв. Минздравом России 05.03.2004)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2004 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
5 марта 2004 года

</div>



#### <a id="p100165"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ КЛОПИРАЛИДА**
**В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ РАПСА МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ**
**ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.1851-04**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения<br>
с 1 июля 2004 года

</div>


1. <a id="p100005"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100009"></a>Вводная часть



#### <a id="p100010"></a>1.1 Краткая характеристика препарата

<a id="p100011"></a>Фирма-изготовитель: Дау АгроСаенсес.
<a id="p100012"></a>Торговое название: Лонтрел Гранд, Лонтрел-300.
<a id="p100013"></a>Действующее вещество (д.в.): клопиралид.
<a id="p100014"></a>Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: 3,6-=dichloropyridine-2-carboxylic acid.
<a id="p100015"></a>Структурная формула д.в. (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула д.в.: C H Cl NO .
                                6 3  2  2
<a id="p100017"></a>Молекулярная масса д.в.: 192,0.
<a id="p100018"></a>Химически чистое вещество: кристаллы белого цвета.
<a id="p100019"></a>Температура плавления д.в.: 151 - 152 °С.
<a id="p100020"></a>Растворимость д.в. (г/кг) при 20 °С: в воде - 1,0, циклогексаноне - 387, ацетоне - 153, ксилоле - 6,5.
<a id="p100021"></a>В обычных условиях устойчив, с органическими и неорганическими основаниями образует хорошо растворимые в воде соли.

#### <a id="p100022"></a>1.2 Краткая токсикологическая характеристика д.в.

<a id="p100023"></a>    LD   для крыс - 4300 - 5000  мг/кг,  LC   (96 ч), для рыб - 103,5 мг/л.
      50                                   50
Нетоксичен для пчел и других насекомых.
<a id="p100024"></a>Гигиенические нормативы: ПДК в воде водоемов - 0,04 мг/л, ОДК в почве - 0,1 мг/кг, МДУ в зерне хлебных злаков - 0,2 мг/кг, ВМДУ в кукурузе и сахарной свекле - 0,1 мг/кг, капусте - 0,05 мг/кг.

#### <a id="p100025"></a>1.3 Область применения препарата

<a id="p100026"></a>Гербицид для борьбы с некоторыми однолетними и многолетними двудольными сорными растениями (в том числе сложноцветными и видами горца).


## 2. <a id="p100027"></a>Метод определения клопиралида в семенах и масле рапса с применением капиллярной газожидкостной хроматографии



#### <a id="p100028"></a>2.1 Основные положения


##### <a id="p100029"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100030"></a>Метод основан на извлечении остаточных количеств клопиралида из анализируемого объекта органическими растворителями и проведении очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей.
<a id="p100031"></a>Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением капиллярной газожидкостной хроматографии и использованием детектора электронного захвата (ДЭЗ).

##### <a id="p100032"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100033"></a>Метод специфичен в присутствии других применяемых пестицидов. Проведение очистки экстрактов, а также использование капиллярной колонки и селективного детектора позволяет устранять влияние коэкстрактивных веществ на результаты анализа.

##### <a id="p100034"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100035"></a>Диапазоны измеряемых концентраций, пределы обнаружения и другие метрологические параметры метода представлены в таблицах 1 и [2](#p100045).

<div align="right">

<a id="p100036"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100037"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="62%"><col width="20%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Метрологические параметры</td><td colspan="2">Анализируемые объекты:</td></tr>
<tr><td>Семена рапса</td><td>Масло рапса</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения, мг/кг</td><td>0,01</td><td>0,02</td></tr>
<tr><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>0,01 - 0,08</td><td>0,02 - 0,16</td></tr>
<tr><td>Среднее значение определения, %</td><td>80,2</td><td>77,8</td></tr>
<tr><td>Стандартное отклонение, %</td><td>5,5</td><td>6,2</td></tr>
<tr><td>Относительное стандартное отклонение, %</td><td>3,1</td><td>3,5</td></tr>
</table>


<div align="right">

<a id="p100044"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100045"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛОПИРАЛИДА В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ (N = 6)**

</div>



| Анализируемые объекты | Внесено, мг/кг | Извлечено, % | Доверительный интервал среднего результата, % |
| --- | --- | --- | --- |
| Семена рапса | 0,01 0,02 0,04 0,08 | 73,5 78,1 83,7 85,4 | +/- 7,6 +/- 5,5 +/- 4,8 +/- 4,3 |
| Масло рапса | 0,02 0,04 0,08 0,16 | 74,3 76,5 78,8 81,7 | +/- 7,1 +/- 6,7 +/- 5,8 +/- 5,2 |



#### <a id="p100055"></a>2.2 Реактивы, растворы, материалы

<a id="p100056"></a>Аналитический стандарт клопиралида.
<a id="p100057"></a>Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-25-89.
<a id="p100058"></a>Ацетон, осч, ТУ 2633-004-11291058-94.
<a id="p100059"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч, ТУ 6-09-4326-76.
<a id="p100060"></a>Вата медицинская, ТУ 9393-001-00302238-97.
<a id="p100061"></a>    Вода дистиллированная и перегнанная над KMnO  и щелочью.
                                                4
<a id="p100062"></a>н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100063"></a>Дихлорметан, хч, ТУ 6-09-2662-77.
<a id="p100064"></a>Изооктан эталонный, [ГОСТ 12433-83](https://bukva.ai/docs/gost-12433-83).
<a id="p100065"></a>Калия гидроокись, чда, [ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80).
<a id="p100066"></a>Натрий сернокислый б/в (сульфат), чда, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100067"></a>Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.
<a id="p100068"></a>N-Нитрозометилмочевина, хч, ТУ 6-09-11-1643-82.
<a id="p100069"></a>Серная кислота, осч, [ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78).
<a id="p100070"></a>Смесь н-гексан:этиловый эфир, 50:50, по объему.
<a id="p100071"></a>Фильтры бумажные красная лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100072"></a>Фильтры бумажные белая лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100073"></a>Фильтры бумажные синяя лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100074"></a>Эфир этиловый (серный), ОСТ 84-2006-88.


#### <a id="p100075"></a>2.3 Приборы, аппаратура, посуда

<a id="p100076"></a>Газовый хроматограф с ДЭЗ.
<a id="p100077"></a>Колонка хроматографическая кварцевая капиллярная длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой ВР-50 (типа OV-17), толщина пленки - 0,5 мкм.
<a id="p100078"></a>Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73, или аналогичный.
<a id="p100079"></a>Весы аналитические типа ВЛА-200, ГОСТ 34104-80.
<a id="p100080"></a>Весы лабораторные типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.
<a id="p100081"></a>Воронки делительные емкостью 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100082"></a>Воронки для фильтрования стеклянные, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100083"></a>Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-76.
<a id="p100084"></a>Колбы-концентраторы емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100085"></a>Колбы плоскодонные емкостью 100 и 300 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100086"></a>Колбы мерные со шлифом емкостью 25, 50, 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100087"></a>Колпачки алюминиевые для герметизации флаконов, [ГОСТ Р 51314-99](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51314-99).
<a id="p100088"></a>Мельница электрическая лабораторная, ТУ 46-22-236-79, или аналогичная.
<a id="p100089"></a>Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
<a id="p100090"></a>Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100091"></a>Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1 или аналогичный.
<a id="p100092"></a>Пипетки мерные емкостью 1, 2, 5 и 10 мл, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100093"></a>Приспособление для обжима колпачков на флаконах, ТУ 42-2-2442-73.
<a id="p100094"></a>Пробирки мерные со шлифом емкостью 5,0 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100095"></a>Стаканы химические на 100, 200 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100096"></a>Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении.
<a id="p100097"></a>Установка для упаривания растворителей в токе азота.
<a id="p100098"></a>Установка ультразвуковая "Серьга" УЗМ002 или аналогичная.
<a id="p100099"></a>Флаконы стеклянные (типа пенициллиновых) емкостью 5,0 мл, ТУ 64-2-10-87.
<a id="p100100"></a>Шкаф сушильный, ТУ 64-1-1411-76.
<a id="p100101"></a>Электроплитка, ГОСТ 14919-83.


#### <a id="p100102"></a>2.4 Подготовка к определению


##### <a id="p100103"></a>2.4.1 Подготовка и очистка растворителей

<a id="p100104"></a>Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре +40 °С до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.

##### <a id="p100105"></a>2.4.2 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100106"></a>Основной раствор клопиралида с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением в ацетоне 0,01 г аналитического стандарта в мерной колбе емкостью 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре +4 - 6 °С не более трех месяцев.
<a id="p100107"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 1,6, 0,8, 0,4 и 0,2 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора клопиралида последовательным разбавлением ацетоном. Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре +4 - 6 °С не более месяца.
<a id="p100108"></a>В модельных опытах при изучении полноты извлечения клопиралида используют ацетоновые растворы стандартного вещества.
<a id="p100109"></a>Для приготовления калибровочных растворов в мерные пробирки со шлифом емкостью 5,0 мл вносят по 1,0 мл рабочих растворов клопиралида с концентрациями 0,2, 0,4, 0,8 и 1,6 мкг/мл. Растворитель в пробирках упаривают в токе азота досуха и проводят метилирование клопиралида по [п. 2.4.3](#p100110).

##### <a id="p100110"></a>2.4.3 Метилирование клопиралида

<a id="p100111"></a>В пробирки с сухим остатком добавляют по 2,0 мл свежеприготовленного по [п. 2.4.5](#p100114) эфирного раствора диазометана. Пробирки закрывают пробками и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °С. После этого в пробирки добавляют по 1,0 мл изооктана и упаривают растворители в токе азота до 1,0 мл.

##### <a id="p100112"></a>2.4.4 Построение калибровочного графика

<a id="p100113"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа [(п. 2.7.3)](#p100144) вводят по 1 мкл приготовленных по [п. 2.4.3](#p100110) растворов, содержащих клопиралид (в виде производного) в концентрациях 0,2, 0,4, 0,8 и 1,6 мкг/мл. Осуществляют не менее трех параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации клопиралида в рабочем растворе в мкг/мл.
<a id="p100114"></a>2.4.5. Приготовление эфирного раствора диазометана (из расчета метилирования экстрактов 2-х проб).
<a id="p100115"></a>N-Нитрозометилмочевину массой 0,5 г помещают во флакон емкостью 2,0 - 3,0 мл и герметизируют резиновой пробкой и колпачком с помощью приспособления для обжима колпачков на флаконах. Этиловый эфир объемом 4,0 мл вносят в другой флакон емкостью 5,0 мл, герметизируют резиновой пробкой и колпачком и охлаждают в морозильной камере холодильника в течение 30 минут.
<a id="p100116"></a>После этого флаконы через предварительно проколотые пробки соединяют гибкой тефлоновой трубкой (внутр. диам. ~ 1,5 - 2,0 мм), одним концом погружая ее в этиловый эфир на всю глубину (флакон с охлажденным этиловым эфиром обязательно должен еще иметь свободный выход в атмосферу). Во флакон с нитрозометилмочевиной, используя шприц с тонкой иглой и прокалывая пробку, добавляют по каплям по стенке 50%-ный водный раствор гидроокиси калия (~ 0,3 мл) до прекращения реакции. Этиловый эфир при насыщении диазометаном окрашивается в ярко-желтый цвет.
<a id="p100117"></a>Внимание! Приготовление эфирного раствора диазометана и процедуру метилирования необходимо обязательно проводить в работающем вытяжном шкафу.


#### <a id="p100118"></a>2.5 Отбор, первичная обработка и хранение проб

<a id="p100119"></a>Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.1979, N 2051-79.
<a id="p100120"></a>Пробы семян рапса просушивают до стандартной влажности и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
<a id="p100121"></a>Пробы масла рапса хранят при +4 - 6 °С в закрытой стеклянной таре.


#### <a id="p100122"></a>2.6 Подготовка проб к определению

<a id="p100123"></a>Пробы семян рапса перед анализом рассыпают на бумаге или кальке и пинцетом удаляют включения. Семена измельчают на лабораторной мельнице и после перемешивания измельченной массы отбирают усредненную аналитическую пробу.


#### <a id="p100124"></a>2.7 Проведение определения


##### <a id="p100125"></a>2.7.1 Семена рапса


###### <a id="p100126"></a>2.7.1.1 Экстракция клопиралида

<a id="p100127"></a>Аналитическую пробу семян массой 20 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, добавляют 150 мл смеси ацетон:дистиллированная вода (90:10), слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 мин. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл смеси ацетон:дистиллированная вода (90:10), которую также фильтруют в колбу-концентратор.
<a id="p100128"></a>При использовании аппарата для встряхивания в плоскодонную колбу с аналитической пробой вносят 150 мл смеси ацетон:дистиллированная вода (90:10) и встряхивают в течение 60 минут. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр "красная лента" в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл смеси ацетон:дистиллированная вода (90:10), которую также фильтруют в колбу-концентратор.
<a id="p100129"></a>Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель до объема 10 - 20 мл при температуре +40 °С. В колбу-концентратор добавляют 200 мл бидистиллированной воды, 2,0 мл 5,0%-ного водного раствора серной кислоты и содержимое колбы перемешивают встряхиванием. Колбу-концентратор помещают в холодильник и выдерживают при температуре +4 - 6 °С в течение 4 - 5 часов. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр "белая лента" в делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 10%-ный водный раствор гидроокиси калия до pH 9 - 10, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и после перемешивания 75 мл дихлорметана. Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2-х минут. После 15-минутного отстаивания нижний дихлорметановый слой сливают и отбрасывают. Процедуру очистки экстракта с использованием 50 мл дихлорметана повторяют. Далее в воронку добавляют 40 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и после перемешивания 75 мл н-гексана. Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в химический стакан емкостью 500 мл, а верхний гексановый слой сливают и отбрасывают.
<a id="p100130"></a>Водный раствор пробы, находящийся в химическом стакане, подкисляют концентрированной серной кислотой до pH 2,0 и переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 75 мл смеси гексан:этиловый эфир (50:50) и встряхивают в течение 2-х минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в химический стакан, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через фильтр "синяя лента" со слоем безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 1,0 - 1,5 см) в колбу-концентратор емкостью 150 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси гексан:этиловый эфир (50:50). Нижний водный слой отбрасывают.
<a id="p100131"></a>Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре +40 °С до объема 3 - 5 мл. Остаток экстракта количественно переносят в мерную пробирку со шлифом емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40 °С.

###### <a id="p100132"></a>2.7.1.2 Метилирование клопиралида

<a id="p100133"></a>В пробирку с сухим остатком добавляют 2,0 мл свежеприготовленного по [п. 2.4.5](#p100114) эфирного раствора диазометана. Пробирку закрывают пробкой и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °С. После этого в пробирку добавляют 1,0 мл изооктана и упаривают растворители в токе азота до 1,0 мл.
<a id="p100134"></a>Газохроматографический анализ на содержание клопиралида проводят по [п. 2.7.3](#p100144).

##### <a id="p100135"></a>2.7.2 Масло рапса


###### <a id="p100136"></a>2.7.2.1 Экстракция клопиралида

<a id="p100137"></a>Аналитическую пробу масла массой 10,0 +/- 0,1 г растворяют в 50 мл н-гексана (насыщенного ацетонитрилом) в плоскодонной колбе емкостью 100 мл и после этого гексановый раствор масла переносят в делительную воронку емкостью 250 мл. Колбу промывают 50 мл ацетонитрила (насыщенного н-гексаном) и переносят его в воронку. Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний ацетонитрильный слой сливают в колбу-концентратор емкостью 100 мл. Колбу промывают еще 25 мл ацетонитрила (насыщенного н-гексаном) и также переносят в воронку (250 мл). Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут, отстаивают 5 минут и нижний ацетонитрильный слой объединяют с предыдущим. Верхний гексановый слой отбрасывают.
<a id="p100138"></a>Колбу-концентратор с объединенным ацетонитрильным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель досуха при температуре +50 °С. Сухой остаток растворяют в 20 мл ацетона. К раствору добавляют 200 мл бидистиллированной воды, 2,0 мл 5,0%-ного водного раствора серной кислоты и содержимое колбы перемешивают встряхиванием. Колбу-концентратор помещают в холодильник и выдерживают при температуре +4 - 6 °С в течение 4 - 5 часов. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр "белая лента" в делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 10%-ный водный раствор гидроокиси калия до pH 9 - 10, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и после перемешивания 75 мл дихлорметана. Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2-х минут. После 15-минутного отстаивания нижний дихлорметановый слой сливают и отбрасывают. Процедуру очистки экстракта с использованием 50 мл дихлорметана повторяют. Далее в воронку добавляют 40 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и после перемешивания 75 мл н-гексана. Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2-х минут. После 5-минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в химический стакан емкостью 500 мл, а верхний гексановый слой сливают и отбрасывают.
<a id="p100139"></a>Водный раствор пробы, находящийся в химическом стакане, подкисляют концентрированной серной кислотой до pH 2,0 и переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 75 мл смеси гексан:этиловый эфир (50:50) и встряхивают в течение 2-х минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в химический стакан, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через фильтр "синяя лента" со слоем безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 1,0 - 1,5 см) в колбу-концентратор емкостью 150 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси гексан:этиловый эфир (50:50). Нижний водный слой отбрасывают.
<a id="p100140"></a>Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре +40 °С до объема 3 - 5 мл. Остаток экстракта количественно переносят в мерную пробирку со шлифом емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40 °С.

###### <a id="p100141"></a>2.7.2.2 Метилирование клопиралида

<a id="p100142"></a>В пробирку с сухим остатком добавляют 2,0 мл свежеприготовленного по [п. 2.4.5](#p100114) эфирного раствора диазометана. Пробирку закрывают пробкой и ставят на 12 - 14 часов (на ночь) в холодильник с температурой +4 - 6 °С. После этого в пробирку добавляют 1,0 мл изооктана и упаривают растворители в токе азота до 1,0 мл.
<a id="p100143"></a>Газохроматографический анализ на содержание клопиралида проводят по [п. 2.7.3](#p100144).

##### <a id="p100144"></a>2.7.3 Условия хроматографирования

<a id="p100145"></a>Газовый хроматограф с ДЭЗ.
<a id="p100146"></a>Колонка хроматографическая капиллярная длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой ВР-50 (типа OV-17), толщина слоя - 0,5 мкм.
<a id="p100147"></a>Температура колонки: программирование от 100 °С (3 мин.) до 280 °С (25 мин.) со скоростью 8,0 °С/мин.
<a id="p100148"></a>Температура испарителя: 240 °С.
<a id="p100149"></a>Температура детектора: 300 °С.
<a id="p100150"></a>Расход газов: газа-носителя (азот в/ч) - 1,5 куб. см/мин., дополнительного газа (азот в/ч) к ДЭЗ - 40 куб. см/мин.
<a id="p100151"></a>Объем вводимой пробы: 1 мкл.
<a id="p100152"></a>Время удерживания клопиралида (в виде производного): 14,18 +/- 0,05 мин.
<a id="p100153"></a>Предел детектирования: 0,1 нг.
<a id="p100154"></a>Линейный диапазон детектирования: 0,2 - 2,0 нг.

##### <a id="p100155"></a>2.7.4 Обработка результатов анализа

<a id="p100156"></a>    Содержание  клопиралида  рассчитывают  методом  внешнего  стандарта  по
формуле:

                                  H  х A х V
                                   1
<a id="p100157"></a>                              X = ----------,
                                    H  х m
                                     0

    где:
    X - содержание клопиралида в пробе, мг/кг;
    H  - высота (площадь) пика анализируемого вещества, мм (кв. мм);
     1
    H  - высота (площадь) пика стандартного вещества, мм (кв. мм);
     0
    A - концентрация стандартного раствора клопиралида, мкг/мл;
    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    m - масса (г) аналитической пробы.


## 3. <a id="p100158"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100159"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации к приборам.


## 4. <a id="p100160"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100161"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95) "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".


## 5. <a id="p100162"></a>Разработчики


<a id="p100163"></a>ВНИИ защиты растений.



<a id="p100164"></a>

---