---
title: "\"МУК 4.1.1850-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств ацетамиприда в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур\""
number: "МУК 4.1.1850-04"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1850-04"
---

## "МУК 4.1.1850-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств ацетамиприда в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур"

# "МУК 4.1.1850-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств ацетамиприда в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур"

(утв. Минздравом России 05.03.2004)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2004 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
5 марта 2004 года

</div>



#### <a id="p100188"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АЦЕТАМИПРИДА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ, БОТВЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЗЕРНЕ**
**И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР**

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.1850-04**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

с 1 июля 2004 года

</div>


1. <a id="p100005"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

<div align="center">

4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

</div>



## 1. <a id="p100009"></a>Вводная часть


<a id="p100010"></a>Торговое наименование: Снейк.
<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Агротрейд.
<a id="p100012"></a>Действующее вещество: Ацетамиприд.
<a id="p100013"></a>Структурная формула (не приводится).
         1                            2        1
<a id="p100014"></a>    (E)-N -[(6-хлор-3-пиридил)метил]-N -циано-N -метилацетамидин (IUPAC).
<a id="p100015"></a>    (E)-N-[(6-хлор-3-пиридинил)метил]-N'-циано-N-метилэтанимидамид (CA).
<a id="p100016"></a>    Брутто формула: C  H  ClN .
                     10 11   4
<a id="p100017"></a>Мол. масса: 222,7.
<a id="p100018"></a>Химически чистый ацетамиприд представляет собой бесцветные кристаллы.
<a id="p100019"></a>Температура плавления 98,9 °С.
                            -3
<a id="p100020"></a>    Давление паров: < 1 х 10   мPa (25 °С).
<a id="p100021"></a>    Коэффициент     распределения    в    системе    н-октанол    -    вода
K   lg P = 0,80 (25 °С).
 ow
<a id="p100022"></a>Растворимость при 25 °С в воде - 4,25 г/л. Растворим в ацетоне (> 200 г/л), метаноле, этаноле, дихлорметане, хлороформе (> 200 г/л), ацетонитриле (> 200 г/л) и тетрагидрофуране.
<a id="p100023"></a>Стабилен в буферных растворах при pH 4, 5, 7. Медленно разлагается при pH 9 (период полураспада 420 дней). Устойчив к воздействию солнечного света, pKa 0,7.
<a id="p100024"></a>Медленно деградирует на (или в) растениях с образованием 5 идентифицированных метаболитов.
<a id="p100025"></a>    Острая  пероральная токсичность LD   для крыс: самцы - 217 мг/кг; самки
                                      50
-  146  мг/кг.  Острая дермальная токсичность LD   (14 дней) для крыс обоих
                                                50
полов  -  более  2000  мг/кг. Не ирритант для глаз и кожи (кролики). Острая
ингаляционная  токсичность  LC   (4 часа) для крыс обоих полов - более 0,29
                              50
мг/л.  LC   (24 - 96 часов): для карпа - более 100 мг/л: для дафнии - более
         50
200 мг/л.

<div align="center">

<a id="p100026"></a>Агонист никотин ацетилхолиновых рецепторов, действующий на синапсы в ЦНС насекомых. Ацетамиприд - системный инсектицид, обладающий трансламинарной активностью, контактного и желудочного действия. Используется для контроля тли, Hemiptera, Thysanoptera и Lepidoptera путем обработки почвы и зеленой массы растений, на широком диапазоне культур, особенно на овощных, плодовых и чае.

<a id="p100027"></a>Гигиенические нормативы для ацетамиприда в России

<a id="p100028"></a>ОДК в почве - 0,06 мг/кг, ПДК в воде водоемов - 0,02 мг/куб. дм, ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,2 мг/куб. м. МДУ для ацетамиприда в огурцах и томатах - 0,03 мг/кг, в картофеле и пшенице - 0,5 мг/кг.

</div>



## 2. <a id="p100029"></a>Методика определения ацетамиприда в воде, почве, ботве и клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом ВЭЖХ



### <a id="p100030"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100031"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100032"></a>Методика основана на определении ацетамиприда методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора после его извлечения из образцов водно-ацетоновой смесью с последующей очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и на колонке с силикагелем.

##### <a id="p100033"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<div align="right">

<a id="p100034"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах 1 и [2](#p100045).

<a id="p100035"></a>Таблица 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100036"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**

</div>



| Объект анализа | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % (для каждого объекта n = 24) | Относительное стандартное отклонение S, % | Доверительный интервал среднего, n = 24, P = 0,95 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,002 | 0,002 - 0,02 | 88,7 | 6,9 | 6,0 |
| Почва | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 83,8 | 6,9 | 6,0 |
| Ботва картофеля | 0,02 | 0,02 - 0,2 | 85,1 | 6,7 | 5,9 |
| Клубни картофеля | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 86,8 | 6,7 | 5,9 |
| Солома зерновых колосовых | 0,04 | 0,04 - 0,4 | 82,9 | 6,4 | 5,6 |
| Зерно зерновых колосовых | 0,01 | 0,01 - 0,1 | 83,0 | 6,5 | 5,7 |


<div align="right">

<a id="p100044"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100045"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЦЕТАМИПРИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, БОТВЕ**<br>
**И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ**<br>
КУЛЬТУР МЕТОДОМ ВЭЖХ (n = 6 ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)

</div>



<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="17%"><col width="20%"><col width="25%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено, мг/кг</td><td>Найдено, мг/кг</td><td>Стандартное отклонение, +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,002</td><td>0,00182</td><td>0,00013</td><td>91,0</td></tr>
<tr><td>0,004</td><td>0,00361</td><td>0,00028</td><td>90,3</td></tr>
<tr><td>0,01</td><td>0,00861</td><td>0,00077</td><td>86,1</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0175</td><td>0,0013</td><td>87,5</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>88,7</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,01</td><td>0,00852</td><td>0,0008</td><td>85,2</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0169</td><td>0,0014</td><td>84,5</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0417</td><td>0,0029</td><td>83,3</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0821</td><td>0,0069</td><td>82,1</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>83,8</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Ботва картофеля</td><td>0,02</td><td>0,0167</td><td>0,0013</td><td>83,6</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0343</td><td>0,0031</td><td>85,8</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0850</td><td>0,0052</td><td>85,0</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,1716</td><td>0,0154</td><td>85,8</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>85,1</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Клубни картофеля</td><td>0,01</td><td>0,00859</td><td>0,0007</td><td>85,9</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0174</td><td>0,0015</td><td>87,0</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,043</td><td>0,0032</td><td>86,2</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0879</td><td>0,0059</td><td>87,9</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>86,8</td></tr>
<tr><td>Солома зерновых</td><td>0,04</td><td>0,0323</td><td>0,0030</td><td>80,8</td></tr>
<tr><td rowspan="3">колосовых</td><td>0,08</td><td>0,0681</td><td>0,0051</td><td>85,1</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,163</td><td>0,011</td><td>81,4</td></tr>
<tr><td>0,4</td><td>0,338</td><td>0,025</td><td>84,4</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>82,9</td></tr>
<tr><td>Зерно зерновых</td><td>0,01</td><td>0,00811</td><td>0,0007</td><td>81,1</td></tr>
<tr><td rowspan="3">колосовых</td><td>0,02</td><td>0,0167</td><td>0,0013</td><td>83,7</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,0422</td><td>0,0036</td><td>84,4</td></tr>
<tr><td>0,1</td><td>0,0827</td><td>0,0051</td><td>82,7</td></tr>
<tr><td>Среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>83,0</td></tr>
</table>



##### <a id="p100078"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100079"></a>Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению не мешает.


### <a id="p100080"></a>2.2. Реактивы и материалы


<a id="p100081"></a>Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.
<a id="p100082"></a>Ацетонитрил для ВЭЖХ, "В-230НМ" или х.ч., ТУ 6-09-3534-87.
<a id="p100083"></a>Бумажные фильтры "красная лента", ТУ 6.091678-86.
<a id="p100084"></a>Вода бидистиллированная, деионизированная, ГОСТ 6709-72.
<a id="p100085"></a>Дихлорметан, х.ч., ТУ 6-09-3716-80.
<a id="p100086"></a>Ацетамиприд, аналитический стандарт с содержанием д.в. 100% (Nippon Soda Co., Ltd).
<a id="p100087"></a>Калий углекислый, х.ч., [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76).
<a id="p100088"></a>Калия перманганат, ГОСТ 20490-75.
<a id="p100089"></a>Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.
<a id="p100090"></a>Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.
<a id="p100091"></a>Натрий двууглекислый, ГОСТ 83-79.
<a id="p100092"></a>Натрий сернокислый безводный, ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76), свежепрокаленный.
<a id="p100093"></a>Натрия гидроксид, х.ч., ГОСТ 4328-77.
<a id="p100094"></a>н-Гексан, х.ч., ТУ 2631-003-05807999-98, свежеперегнанный.
<a id="p100095"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил - вода (25:75, по объему).
<a id="p100096"></a>Силикагель для колоночной хроматографии 60 (0,040 - 0,063 mm) (Merck, Германия).
<a id="p100097"></a>Стекловата.
<a id="p100098"></a>Фосфора пентоксид, ч., МРТУ 6-09-5759-69.
<a id="p100099"></a>Элюент N 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат (50:50, по объему).
<a id="p100100"></a>Элюент N 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат (10:90, по объему).
<a id="p100101"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а., [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).


### <a id="p100102"></a>2.3. Приборы и посуда


<a id="p100103"></a>Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы "Waters" с УФ-детектором (Waters 2487) с дегазатором и автоматическим пробоотборником или аналогичный.
<a id="p100104"></a>Колонка Symmetry C-18 (250 х 4,6) мм, 5 мкм (Waters).
<a id="p100105"></a>Предколонка Waters Symmetry C-18.
<a id="p100106"></a>Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е или аналогичные.
<a id="p100107"></a>Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63.
<a id="p100108"></a>Установка ультразвуковая "Серьга", ТУ 3.836.008.
<a id="p100109"></a>Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная зерновая ЛМЗ, ТУ 1-01-0593-79.
<a id="p100110"></a>Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.
<a id="p100111"></a>Бидистиллятор.
<a id="p100112"></a>Насос водоструйный, МРТУ 42 861-64.
<a id="p100113"></a>Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.
<a id="p100114"></a>Колбы круглодонные на шлифах КШ10 и КШ250 29-32 ТС, ГОСТ 10384-72.
<a id="p100115"></a>Воронки лабораторные В-75-110, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100116"></a>Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.
<a id="p100117"></a>Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 500 и 1000 куб. см, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100118"></a>Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 и 1000 куб. см, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100119"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5, 10 куб. см, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100120"></a>Колонки стеклянные (25 х 1) см.


### <a id="p100121"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100122"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Пробы зерна и соломы для определения остатков в урожае хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре. Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно (семена) и солому измельчают на лабораторной мельнице. Пробы ботвы и клубней картофеля хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца. Перед анализом их гомогенизируют.


### <a id="p100123"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100124"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100125"></a>    Органические   растворители  перед  началом  работы  очищают,  сушат  и
перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен
встряхивают  с  небольшими  порциями  концентрированной  серной  кислоты до
прекращения  окрашивания  свежей  порции  кислоты,  затем  промывают водой,
2%-ным  раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над
гидроксидом  натрия и перегоняют. Ацетон перегоняют над перманганатом калия
и  поташем  (на  1 л ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ). Ацетонитрил сушат над
                                      4        2  3
пентоксидом   фосфора   и   перегоняют;  отогнанный  растворитель  повторно
перегоняют  над  углекислым  калием.  Этилацетат  промывают  равным объемом
5%-ного  раствора  двууглекислого  натрия,  сушат  над хлористым кальцием и
перегоняют.

##### <a id="p100126"></a>2.5.2 Кондиционирование колонки

<a id="p100127"></a>Перед началом анализа колонку (Symmetry C-18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (1 мл/мин.) до стабилизации нулевой линии в течение 1 - 2 часов.

##### <a id="p100128"></a>2.5.3 Приготовление растворов

<a id="p100129"></a>Для получения 50%-ного водного ацетона в колбе емкостью 1 л смешивают 500 мл ацетона с 500 мл дистиллированной воды, используя мерные цилиндры.
<a id="p100130"></a>Для получения 75%-ного водного ацетона в колбе емкостью 1 л смешивают 750 мл ацетона и 250 мл дистиллированной воды, используя мерные цилиндры.
<a id="p100131"></a>    Для приготовления 0,05 М раствора K CO  6,9  г карбоната калия помещают
                                       2  3
в  мерную  колбу  емкостью  1000  куб.  см,  растворяют  при  перемешивании
в 600 куб. см дистиллированной воды и доводят объем раствора до метки.
<a id="p100132"></a>Для приготовления 1 М раствора NaOH 40 г едкого натра помещают в мерную колбу емкостью 1000 куб. см, растворяют при перемешивании в 600 куб. см дистиллированной воды и доводят объем раствора до метки.
<a id="p100133"></a>Для приготовления 0,02 М раствора NaOH 20 мл 1 М раствора едкого натра помещают в мерную колбу емкостью 1000 куб. см и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.
<a id="p100134"></a>Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с водой в соотношении 25:75 по объему, используя мерные цилиндры.

<div align="center">

<a id="p100135"></a>Для приготовления элюента N 1 в колбе на 1000 мл смешивают 500 мл н-гексана и 500 мл этилацетата. Для приготовления элюента N 2 в колбе на 1000 мл смешивают 100 мл н-гексана и 900 мл этилацетата.

<a id="p100136"></a>Приготовление стандартного и градуировочных растворов

</div>


<a id="p100137"></a>Берут точную навеску ацетамиприда (50 мг), переносят в мерную колбу на 100 мл, растворяют навеску в ацетонитриле и доводят до метки. (Стандартный раствор концентрацией 0,5 мг/мл). Градуировочные растворы с концентрациями 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 и 2,0 мкг/мл готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрил - вода (20:80, по объему).
<a id="p100138"></a>Стандартный раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °С в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение суток.
<a id="p100139"></a>При изучении полноты открывания ацетамиприда используют ацетонитрильные растворы вещества. Растворы внесения с концентрациями 0,1 и 1,0 мкг/мл готовят из стандартного раствора с концентрацией 0,5 мг/мл методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

##### <a id="p100140"></a>2.5.4 Построение градуировочного графика

<a id="p100141"></a>Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация ацетамиприда в растворе) в хроматограф вводят по 20 мкл градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации ацетамиприда в градуировочном растворе (мкг/мл).

##### <a id="p100142"></a>2.5.5 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

<a id="p100143"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помещают тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 30 мл смеси гексан - этилацетат (50:50, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку последовательно промывают 30 мл элюента N 2 и 30 мл элюента N 1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

##### <a id="p100144"></a>2.5.6 Проверка хроматографического поведения ацетамиприда на колонке с силикагелем

<a id="p100145"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора ацетамиприда с концентрацией 10 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха (температура не выше 40 °С), остаток растворяют в 5 мл элюента N 1 и наносят на колонку. Колбу обмывают еще 5 мл элюента N 1 и также вносят на колонку. Промывают колонку 100 мл элюента N 1, которые отбрасывают, затем 100 мл элюента N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ [(п. 2.5.3)](#p100128) и анализируют на содержание ацетамиприда по [п. 2.6.7](#p100168).
<a id="p100146"></a>Фракции, содержащие ацетамиприд, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по [п. 2.6.7](#p100168). Рассчитывают содержание ацетамиприда в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.
<a id="p100147"></a>Примечание: параметры удерживания ацетамиприда и сопутствующих экстрактивных веществ могут меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

##### <a id="p100148"></a>2.5.7 Подготовка приборов и средств измерения

<a id="p100149"></a>Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.


### <a id="p100150"></a>2.6. Проведение определения



##### <a id="p100151"></a>2.6.1 Определение ацетамиприда в пробах воды

<a id="p100152"></a>    Образец  предварительно  отфильтрованной  воды  объемом 100 мл помещают
делительную воронку емкостью 250 мл и промывают дважды гексаном порциями по
20 м,  встряхивая  каждый  раз в течение 2 - 3 мин. Верхний гексановый слой
отбрасывают,  водную  фазу экстрагируют трижды хлористым метиленом порциями
по 30 мл, встряхивая делительную воронку  каждый раз в течение 2 - 3 мин. и
собирая  нижний  органический  слой.  Объединенный метиленхлоридный раствор
промывают в делительной воронке дважды 0,05 М раствором K CO   порциями  по
                                                         2  3
30 мл, пропускают через слой  безводного  сульфата  натрия (2 г), осушитель
промывают  10  -  15 мл хлористого метилена. После этого экстракт упаривают
досуха  на  ротационном  испарителе  при  температуре  не  выше  40 °С. При
необходимости  проводят  дополнительную  очистку  экстракта  на  колонке  с
силикагелем и [пункту 2.6.6](#p100166). Сухой остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы
для ВЭЖХ и 50 мкл раствора вводят в жидкостный хроматограф.

##### <a id="p100153"></a>2.6.2 Извлечение ацетамиприда из проб почвы

<a id="p100154"></a>Образец воздушно-сухой почвы массой 20 г помещают в коническую колбу емкостью 250 мл с притертой пробкой, добавляют 100 мл 50%-ного водного ацетона и экстрагируют в течение 15 мин. на ультразвуковой бане. Суспензию фильтруют на стеклянной воронке через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 мл 50%-ного водного ацетона. Объединенные экстракты упаривают до водного остатка (70 - 75 мл) на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С.
<a id="p100155"></a>Дальнейшую очистку экстракта проводят по [пункту 2.6.5](#p100160).
<a id="p100156"></a>2.6.3. Извлечение ацетамиприда из проб зерна и соломы зерновых колосовых и ботвы картофеля.
<a id="p100157"></a>Навеску измельченной на ножевой мельнице соломы (5 г) или пастбищных трав (10 г), размолотого на лабораторной мельнице зерна (20 г) или гомогенизированной ботвы картофеля (10 г) помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл смеси ацетон - вода (1:1, по объему) и экстрагируют в течение 15 мин. на ультразвуковой бане. Суспензию фильтруют на стеклянной воронке через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 мл 50%-ного водного ацетона. Объединенные экстракты упаривают до водного остатка (75 - 80 мл) на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [пункту 2.6.5](#p100160).

##### <a id="p100158"></a>2.6.4 Извлечение ацетамиприда из клубней картофеля

<a id="p100159"></a>Гомогенизированную пробу клубней картофеля массой 20 г помещают в коническую колбу емкостью 250 мл и экстрагируют ацетамиприд 50 мл 75%-ного водного ацетона на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Суспензию фильтруют через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу. Экстракцию проводят еще дважды. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °С до полного удаления ацетона (объем 80 - 90 мл). Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.5.

##### <a id="p100160"></a>2.6.5 Очистка экстрактов

<a id="p100161"></a>Полученные по [п. п. 2.6.2](#p100153) - 2.6.4 водные экстракты промывают в делительной воронке объемом 250 мл трижды гексаном порциями по 30 мл (верхний органический слой отбрасывают), встряхивая делительную воронку каждый раз в течение 1 - 2 минут. Водную фазу экстрагируют трижды хлористым метиленом порциями по 30 мл, встряхивая делительную воронку каждый раз в течение 2 - 3 мин. и собирая нижний органический слой <*>. Объединенный метиленхлоридный раствор промывают в делительной воронке дважды 0,02 М раствором NaOH порциями по 30 мл, пропускают через слой безводного сульфата натрия (2 г), осушитель промывают 10 - 15 мл хлористого метилена. После этого экстракт упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [пункту 2.6.6](#p100166) <**>.

<a id="p100162"></a>

---

<a id="p100163"></a><*> В случае образования сравнительно стойких эмульсий для сокращения времени расслоения можно добавить в делительную воронку: на стадии промывки экстрактов гексаном - небольшое количество (до 5 мл) этилового спирта, а на стадии переэкстракции - насыщенный раствор хлорида натрия (15 - 20 мл).
<a id="p100164"></a><**> В случаях когда очистка экстрактов контрольных проб [(п. 2.6.4)](#p100158) дает удовлетворительные результаты, дополнительную очистку на колонке с силикагелем можно исключить.

<a id="p100165"></a>Внимание! Отделение водного слоя следует производить только после полного расслоения жидкостей в делительной воронке.

##### <a id="p100166"></a>2.6.6 Очистка на колонке с силикагелем

<a id="p100167"></a>Сухой остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.5](#p100160) экстрактов почвы и растительных материалов, количественно переносят двумя 5-мл порциями смеси гексан - этилацетат (50:50 по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку [(п. 2.5.5)](#p100142). Промывают колонку 100 мл элюента N 1. Элюат отбрасывают. Ацетамиприд элюируют 75 мл элюента N 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 250 мл. Раствор упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и 50 мкл раствора вводят в жидкостный хроматограф.

##### <a id="p100168"></a>2.6.7 Условия хроматографирования

<a id="p100169"></a>Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы Waters с УФ-детектором (Waters 2487).
<a id="p100170"></a>Рабочая длина волны 244 нм.
<a id="p100171"></a>Предколонка Waters Symmetry C-18 для защиты аналитической колонки.
<a id="p100172"></a>Колонка Symmetry C-18 (250 х 4,6) мм, 5 мкм (Waters, USA).
<a id="p100173"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 25:75.
<a id="p100174"></a>Скорость потока 1 мл/мин.
<a id="p100175"></a>Время удерживания ацетамиприда 9,3 +/- 0,1 мин.
<a id="p100176"></a>Объем вводимой пробы 50 мкл.
<a id="p100177"></a>Линейный диапазон детектирования 0,1 - 2,0 мкг/мл.

##### <a id="p100178"></a>2.6.8 Обработка результатов анализа

<a id="p100179"></a>Количественное определение проводят методом абсолютной градуировки, содержание ацетамиприда в образцах воды, почвы или растительных материалов (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                                  S  х C х V
                                   2
<a id="p100180"></a>                              X = ----------,
                                    S  х P
                                     1

    где:
    S  - площадь пика ацетамиприда в стандартном растворе, мм;
     1
    S  - площадь пика ацетамиприда в анализируемой пробе, мм;
     2
    V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, мл;
    P - навеска анализируемого образца, г (для воды - объем, мл);
    C - концентрация стандартного раствора ацетамиприда, мкг/мл.
    Содержание  остаточных  количеств  ацетамиприда в анализируемом образце
вычисляют как среднее из 3-х параллельных определений.
    Образцы,  дающие  пики  большие, чем стандартный раствор ацетамиприда 2

<div align="center">

мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

</div>



## 3. <a id="p100181"></a>Требования техники безопасности


<div align="center">

<a id="p100182"></a>При проведении работы необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе в химических лабораториях, а также инструкции по эксплуатации жидкостного хроматографа и других используемых приборов.

</div>



## 4. <a id="p100183"></a>Контроль погрешности измерений


<div align="center">

<a id="p100184"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95). ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

</div>



## 5. <a id="p100185"></a>Разработчики


<a id="p100186"></a>ВНИИ защиты растений.



<a id="p100187"></a>

---