МУК 4.1.1792-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации дифлубензурона в воздухе рабочей зоны методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом России 31.10.2003)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 1 апреля 2004 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
31 октября 2003 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ДИФЛУБЕНЗУРОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1 апреля 2004 года
1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
Разработчики методики указаны в конце.
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 31 октября 2003 г.
4. Введены с 1 апреля 2004 года.
Настоящие методические указания устанавливают методику количественного химического анализа воздуха рабочей зоны методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии для определения в нем массовой концентрации дифлубензурона в диапазоне 0,3 — 3,0 мг/куб. м.
Дифлубензурон — действующее вещество препарата димилин, СП (250 г/кг),
фирма-производитель Юнирояль Кемикал Ко Лтд, Великобритания.
3-(2,6-Дифторбензоил)-1-(4-хлорфенил)мочевина (IUPAC).
Структурная формула (не приводится).
C H ClF N O 14 9 2 2 2
Белое кристаллическое вещество. Температура плавления: 239 °С. -5
Давление паров при 20 °С: менее 1,3 х 10 Па. Растворимость в органических растворителях (г/куб. дм): при 20 °С: ацетон - 6,5; при 25 °С: диметилформамид - 104,0; диметилсульфоксид - 120,0; диоксан - 24,0; метанол - 1,0; дихлорметан - 0,6. Растворимость в
воде при 25 °С — 0,08 мг/куб. дм.
Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс и мышей — более 50 4600 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ) для крыс — более 50 10000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK ) для крыс — 50 более 35 мг/куб. дм.
Дифлубензурон используется в качестве инсектицида гормонального действия, нарушающего процесс образования хитина в организме насекомых. Активен против большого числа насекомых, обладает, в основном, кишечным действием. Рекомендуется для борьбы с болезнями плодовых культур (яблоня), овощных (капуста), в лесопосадках для защиты грибов, борьбы с личинками комаров.
Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны — 3,0 мг/куб. м.
Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.
Измерения концентраций дифлубензурона выполняют методами высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором или газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов после кислотного гидролиза дифлубензурона с последующей обработкой трифторуксусным ангидридом.
Концентрирование дифлубензурона из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента».
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме пробы — 0,1 нг (ГЖХ) и 2 нг (ВЭЖХ).
реактивы и материалы
3.1 Средства измерений
Газовый хроматограф «Цвет — 560», снабженный ТУ 2.722.150 детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) с пределом детектирования по -14
линдану 4 х 10 г/куб. см Жидкостной хроматограф Perkin-Elmer Номер Госреестра (США) с ультрафиолетовым детектором 15945-97 Микрошприцы типа МШ-1 вместимостью 1 куб. мм ТУ 5Е2-833-024 Аспирационное устройство ЭА-1 ТУ 25-11-1414-78 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-80Е
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена ТУ 215-73Е деления 1 °С, пределы измерения 0 — 55 °С
Мерные колбы вместимостью 50, 100 и 1000 куб. см ГОСТ 1770-74Е
Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см ГОСТ 20292-74Е
Пробирки градуированные со шлифом ГОСТ 1770-74Е вместимостью 10 куб. см
Цилиндры мерные вместимостью 100 и 250 куб. см ГОСТ 1770-74Е.
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
Дифлубензурон с содержанием действующего вещества 99,0% (Юнироял Кемикал Лтд, Великобритания)
Азот особой чистоты из баллона ГОСТ 9293-79
Ангидрид трифторуксусной кислоты (Riedel-de Haen A6)
Ацетонитрил для хроматографии, х.ч. ТУ 6-09-4326-76 Вода бидистиллированная или деионизованная Вода дистиллированная
Бензол, х.ч. ГОСТ 5955-75
н-Гексан, х.ч. ТУ 6-09-4521-77
Натрий гидроксид, х.ч. ГОСТ 4221-76
Метиловый спирт, х.ч. ГОСТ 6995-77
Натрий сернокислый безводный, х.ч. ГОСТ 1277-81 Соляная кислота, х.ч. ГОСТ 3118-67
Супелкопорт с 5% OV-210 (0,16 — 0,20 мм), Хемалол, Чехия.
3.3 Вспомогательные устройства
Бумажные фильтры «синяя лента», ТУ 6-09-2678-77 обеззоленные, предварительно промытые ацетоном или этанолом
Воронки химические конусные ГОСТ 25336-82Е
диаметром 34 — 40 мм
Воронка Бюхнера диаметром 20 мм ГОСТ 9147-80Е
Колбы грушевидные со шлифом ГОСТ 10394-72 вместимостью 100 куб. см
Колба плоскодонная со шлифом вместимостью ГОСТ 9737-70 300 куб. см
Насос водоструйный ГОСТ 25336-82Е
Пробирки центрифужные ГОСТ 25336-82Е
Ректификационная стационарная установка РУТ ТУ 25-11-1103-75
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М
Стаканы химические вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336-82Е
Термостат суховоздушный ТУ 64-1-1411-76Е
Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении
Фильтродержатели пластмассовые диаметром 18 — 20 мм
Холодильник водяной обратный ГОСТ 9737-70
Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм
Хроматографическая колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 куб. мм.
Допускается применение другого оборудования и хроматографических колонок с техническими характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение.
4.1. При работе с реактивами соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1005-88.
4.2. При выполнении измерений с использованием газового и жидкостного хроматографов соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика, с опытом работы на газовом и жидкостном хроматографах.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха 20 +/- 5 °С, атмосферное давление 630 — 800 мм рт. ст. и влажности не более 80%.
- выполнение измерений на газовом и жидкостном хроматографах проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к приборам.
7. Подготовка к выполнению измерений
Перед выполнением измерений осуществляют следующие работы: подготовка органических растворителей, приготовление растворов, подготовка хроматографических колонок и установление градуировочной характеристики, отбор проб.
7.1 Метод ВЭЖХ
7.1.1 Подготовка органических растворителей
7.1.1.1 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.1.1.2 Очистка ацетона
Растворитель сушат над молекулярными ситами 4А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла с числом теоретических тарелок не менее 30. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 куб. см ацетона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она не должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20°.
7.1.1.3 Контроль чистоты ацетона
В круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 30 куб. см ацетона, упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха, в колбу вносят 5 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 7.1.2) и анализируют раствор в условиях хроматографирования по п. 7.6.1.1.
7.1.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 600 куб. см ацетонитрила, доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
7.2 Метод ГЖХ
7.2.1 Приготовление 12,5 № раствора гидроксида натрия
Навеску гидроксида натрия массой 50,0 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят дистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают.
7.2.2 Приготовление 3,6 М раствора соляной кислоты
В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 30 куб. см соляной кислоты, доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.
7.3 Приготовление стандартных растворов
7.3.1 Серия № 1 (метод ВЭЖХ)
7.3.1.1. Исходный раствор дифлубензурона для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 50 куб. см помещают 0,0500 г дифлубензурона, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.
7.3.1.2. Раствор № 1 дифлубензурона для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см исходного стандартного раствора дифлубензурона (п. 7.3.1.1) с концентрацией 1 мг/куб. см, разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
7.3.1.3. Рабочие растворы № 2 — 6 дифлубензурона для градуировки (концентрации 0,1 — 1,0 мкг/куб. см). В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см стандартного раствора № 1 (п. 7.3.1.2) с концентрацией 10 мкг/куб. см, доводят до метки подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 7.1.2) и тщательно перемешивают. Получают рабочие растворы № 2 — 3, 5 — 6 с концентрацией дифлубензурона 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см, соответственно. Раствор № 4 с концентрацией дифлубензурона 0,3 мкг/куб. см готовят аналогично, помещая в мерную колбу емкостью 50 куб. см 1,5 куб. см раствора № 1 (п. 7.3.1.2). Растворы хранятся в холодильнике в течение суток.
7.3.2 Серия № 2 (метод ГЖХ)
7.3.2.1. Исходный раствор дифлубензурона для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,0100 г дифлубензурона, доводят до метки метиловым спиртом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 2-х недель.
7.3.2.2. Раствор № 1 для градуировки (соответствует концентрации дифлубензурона 20 мкг/куб. см). В конический концентратор вместимостью 100 куб. см помещают 2 куб. см исходного стандартного раствора дифлубензурона (п. 7.3.2.1) с концентрацией 100 мкг/куб. см, растворитель отдувают потоком теплого воздуха и проводят гидролиз и дериватизацию согласно п. п. 8.2. и 8.3, соответственно. Раствор полученного производного упаривают до 5 — 7 куб. см, переносят в мерную пробирку и добавляют бензол до объема 10 куб. см. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
7.3.2.3. Рабочие растворы № 2 — 6 для градуировки (соответствуют концентрации дифлубензурона 0,1 — 1,0 мкг/куб. см).
В две мерные колбы вместимостью 100 куб. см вносят с помощью пипетки 0,5 и 5,0 куб. см раствора № 1 концентрации 20 мкг/куб. см в бензоле (п. 7.3.2.2) и доводят до метки бензолом. Получают растворы № 2 и № 6 с концентрациями 0,1 и 1,0 мкг/куб. см. Растворы № 3 — 5 с концентрациями 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/куб. см готовят аналогично, помещая в мерные колбы вместимостью 50 куб. см 0,5; 0,75 и 1,25 куб. см раствора № 1, соответственно.
7.4 Отбор проб
Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 0,5 — 1 куб. дм/мин. аспирируют в течение 5 минут через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.
Для измерения концентрации дифлубензурона на уровне 0,5 ПДК воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 0,33 куб. дм воздуха (измерение по п. 7.6.1, ВЭЖХ) или 0,67 куб. дм воздуха (измерение по п. 7.6.2, ГЖХ).
Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4 °С, — 7 дней.
7.5 Подготовка и кондиционирование
хроматографических колонок
7.5.1 Метод ГЖХ
Готовую насадку (5% OV-210 на Супелкопорте, 0,16 — 0,20 мм) засыпают в стеклянную колонку длиной 1 м, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 260 °С в течение 10 — 12 часов.
7.5.2 Метод ВЭЖХ
Промывают колонку подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 7.1.2) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.
7.6 Установление градуировочной характеристики
7.6.1 Метод ВЭЖХ
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации дифлубензурона в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки с использованием серии стандартных растворов № 1, состоящей из 5-ти растворов № 2 — 6, приготовленных по п. 7.3.1.3. В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1.1.
7.6.1.1 Условия хроматографирования
Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)
Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил — вода (60:40, по объему)
Рабочая длина волны: 254 (или 280) <*> нм
<*> Детектирование при длине волны 280 нм приемлемо при наличии в натурных пробах воздуха примесей, поглощающих в области 254 нм, время выхода которых совпадает с временем выхода дифлубензурона.
Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы: 20 куб. мм
Время выхода дифлубензурона: 5,8 — 6,0 мин.
Линейный диапазон детектирования: 2 — 20 нг.
Градуировочный график проверяют ежедневно по 1 — 2-м стандартным растворам различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на +/- 5% от данных, заложенных на графике, градуировочный график строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
7.6.2 Метод ГЖХ
Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной градуировки на градуировочных растворах дифлубензурона. Она выражает зависимость высоты пика (мм) от концентрации дифлубензурона в растворе (мкг/куб. см) и строится с использованием серии стандартных растворов № 2, состоящей из 5-ти растворов № 2 — 6, приготовленных по п. 7.3.2.3. В испаритель прибора вводят по 1 куб. мм данных градуировочных растворов и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.2.1.
7.6.2.1 Условия хроматографирования
Хроматограф газовый «Цвет-560» с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов
Хроматографическая колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-210 на Супелкопорте (0,16 — 0,20 мм)
Температура термостата колонки - 130 °С детектора - 300 °С
Скорость газа-носителя (азота) — 25 +/- 1 мл/мин. 10
Рабочая шкала электрометра 64 х 10 ОМ
Скорость движения ленты самописца 200 мм/час
Объем вводимой пробы — 1 куб. мм
Время удерживания производного дифлубензурона — 2 мин. 35 сек.
Линейный диапазон детектирования: 0,1 — 1,0 нг
Градуировочный график проверяют ежедневно по 1 — 2-м стандартным растворам различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на +/- 11% от данных, заложенных на графике, градуировочный график строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
8.1 Подготовка проб к анализу
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см, заливают 10 куб. см ацетона, оставляют на 10 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 куб. см.
Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 40 — 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Сухой остаток при проведении измерений методом ВЭЖХ (по п. 7.6.1.1) растворяют в 5 куб. см подвижной фазы, центрифугируют (фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку), хроматографируют. При проведении измерений методом ГЖХ (по п. 7.6.2.1) сухой остаток подвергают гидролизу и дериватизации в соответствии с п. п. 8.2 и 8.3 и хроматографируют.
Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Измеряют площадь или высоту пика, при ручной обработке хроматограмм высоты пиков измеряют на хроматограмме с помощью линейки с точностью до 0,5 мм.
Перед анализом испытываемой пробы проводят хроматографирование холостой пробы — экстракта неэкспонированного фильтра.
Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ или бензолом (ГЖХ).
8.2 Гидролиз дифлубензурона
В конический концентратор емкостью 100 куб. см помещают стандартный раствор дифлубензурона или экстракт с фильтра, упаривают до влажного остатка, отдувают растворитель потоком воздуха, вносят 60 куб. см 3,6 М раствора соляной кислоты и в течение 6-ти часов выдерживают на водяной бане при кипении с обратным холодильником. После охлаждения к реакционной массе добавляют 12,5 № раствор гидроксида натрия до рН 10, переносят в делительную воронку вместимостью 250 куб. см и проводят экстракцию 50 куб. см бензола при встряхивании в течение 1 мин. Процедуру экстракции повторяют трижды. Бензольные слои собирают, пропуская через обезвоженный сульфат натрия (весом около 20 г), помещенный на бумажный фильтр. По окончании сульфат натрия промывают тремя порциями бензола по 4 куб. см.
Объединенный бензольный экстракт упаривают на роторном испарителе до объема 20 — 30 куб. см и подвергают дериватизации.
8.3 Дериватизация
К бензольному раствору в концентраторе добавляют 0,5 куб. см ангидрида трифторуксусной кислоты и выдерживают с обратным холодильником в течение 3-х часов при температуре 50 °С на водяной бане или в термостате. После охлаждения раствор упаривают до 5 — 7 куб. см, переносят в градуированную пробирку вместимостью 10 куб. см и добавляют бензол до объема 10 куб. см.
9. Обработка результатов измерений
Массовую концентрацию дифлубензурона в пробе воздуха, Х, мг/куб. м рассчитывают по формуле:
20
где:
Х - содержание дифлубензурона в пробе воздуха, мг/куб. м;
С - концентрация дифлубензурона в хроматографируемом растворе,
найденная по градуировочному графику, мкг/куб. см; W — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см; V — объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный 20 к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), куб. дм.
V = 0,386 х Р х u t / (273 + Т), 20
Т — температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град. С;
Р — атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u — расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t — длительность отбора пробы, мин.
Если пробоотборное устройство фиксирует объем воздуха (V, куб. дм), в вышеприведенной формуле произведение u t заменяется на V.
Идентификация и расчет концентрации дифлубензурона в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, подключенного к хроматографу.
10. Оформление результатов измерений
Результат количественного анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:
_
- <a id="p100188"></a>результат анализа Х (мг/куб. м), характеристика погрешности
дельта, %, Р = 0,95 или:
_
Х +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м, Р = 0,95,
_
дельта х Х
где ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м. 100
_
За результат анализа (Х) принимается среднее арифметическое _
результатов параллельных определений Х и Х (Х = (Х + Х ) / 2),
1 2 1 2
расхождение между которыми не превосходит значений норматива
оперативного контроля сходимости d. Значения норматива
оперативного контроля сходимости приведены в таблице.
Результат измерений должен оканчиваться тем же десятичным разрядом, что и погрешность.
11. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.
Юдина Т.В., Волчек С.И., Волкова В.Н. (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).