---
title: "\"МУК 4.1.1460-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и сое методом газожидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.1460-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1460-03"
---

## "МУК 4.1.1460-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и сое методом газожидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.1460-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и сое методом газожидкостной хроматографии"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

24 июня 2003 года

</div>



#### <a id="p100177"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ**
**ТЕПРАЛОКСИДИМА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, САХАРНОЙ СВЕКЛЕ И СОЕ**
**МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.1460-03**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

30 июня 2003 года

</div>


1. <a id="p100005"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина), Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгилевич) при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Веселов).
2. <a id="p100006"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

<div align="center">

4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

</div>



## 1. <a id="p100009"></a>Вводная часть


<a id="p100010"></a>Фирма-производитель: БАСФ АГ, Германия.
<a id="p100011"></a>Торговое название: АРАМО.
<a id="p100012"></a>Действующее вещество: тепралоксидим (BAS 620 Н).
<a id="p100013"></a>2-[1-(3-хлор-(3Е)-пропенилоксиимино)пропил]-3-гидрокси-5-(тетрагидропиран-4-ил)циклогекс-2-енон (ИЮПАК).
<a id="p100014"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100015"></a>    Эмпирическая формула: C  H  ClNO .
                           17 24    4
<a id="p100016"></a>Молекулярная масса: 341,8.
<a id="p100017"></a>Белое кристаллическое вещество без запаха.
<a id="p100018"></a>Температура плавления: 72,5-74,4 °С.
                                      -7
<a id="p100019"></a>    Давление паров при 20 °С: 1,1 х 10   мбар.
<a id="p100020"></a>    Коэффициент распределения н-октанол/вода: К   log Р = 1,03 (рН
                                               ow
7)
<a id="p100021"></a>    Растворимость  (г/л)  при  20  °С:  гептан - 10, толуол - 820,
дихлорметан - 1190, метанол - 330, ацетон - 700, этилацетат - 690,
вода - 0,43.
<a id="p100022"></a>    Стабильность   к   гидролизу   при 22 град. С: DT   =  6,6 дня
                                                     50
(рН 4); 22,1  дня  (рН 5).  При  рН  7  и  9  вещество  оставалось
стабильным на протяжении 33-дневного эксперимента.
<a id="p100023"></a>    Тепралоксидим  фотолабилен  и  достаточно быстро разрушается в
почве в аэробных условиях (DT   = 1 - 9 дней).
                             50
<a id="p100024"></a>Краткая токсикологическая характеристика:
<a id="p100025"></a>    Острая пероральная токсичность (LC  ) тепралоксидима для  крыс
                                      50
составляет около  5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD  )
                                                               50
для крыс более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC  )
                                                               50
для  крыс - более 5,1 мг/куб. дм. Вещество не вызывает раздражения
слизистой  оболочки глаз и кожи у кроликов. LC   для рыб около 100
                                              50
мг/куб. дм (96 час.).
<a id="p100026"></a>Тепралоксидим не токсичен для пчел, птиц и диких животных. Гигиенические регламенты применения вещества в России не установлены. В Германии предварительные значения МДУ для сахарной свеклы и зерна сои составляют 0,1 и 5 мг/кг соответственно.
<a id="p100027"></a>Область применения препарата:
<a id="p100028"></a>Тепралоксидим - гербицид системного действия из группы ингибиторов синтеза жирных кислот. Он быстро проникает в листья вегетирующих растений и передвигается в корни. Предназначен для уничтожения однолетних и многолетних злаковых сорных растений в посевах широколистных культур (хлопчатник, картофель, сахарная свекла, соя, подсолнечник, люцерна и овощные), виноградниках, лесопитомниках. Применяется для обработки в период от фазы 3 листьев до конца кущения у злаковых сорняков.
<a id="p100029"></a>Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Арамо (BAS 62000 Н) (концентрат эмульсии, содержащий 200 г тепралоксидима в 1 л препарата) на сахарной свекле и сое в качестве избирательного гербицида при норме расхода препарата до 2 л/га.


## 2. <a id="p100030"></a>Методика определения тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и сое методом газожидкостной хроматографии



### <a id="p100031"></a>2.1 Основные положения



##### <a id="p100032"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100033"></a>Методика основана на газохроматографическом определении тепралоксидима на неподвижной фазе OV-17 после экстракции его из растительного материала и почвы водным ацетоном, из воды - дихлорметаном, из масла - водным метанолом, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с оксидом алюминия.
<a id="p100034"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100035"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100036"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания сахарной свеклы и сои.

##### <a id="p100037"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100038"></a>Таблица 1

<div align="center">

<a id="p100039"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**

</div>



<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="15%"><col width="20%"><col width="12%"><col width="11%"><col width="14%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="6">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 15</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/ куб. дм, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение S, %</td><td>Относит. Стандарт. отклон. DS, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,05</td><td>89,4</td><td>4,0</td><td>1,8</td><td>89,4 +/- 3,7</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>85,7</td><td>6,3</td><td>2,8</td><td>85,7 +/- 5,9</td></tr>
<tr><td>Сахарная</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>82,5</td><td>5,3</td><td>2,4</td><td>82,5 +/-</td></tr>
<tr><td>свекла Соя</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>82,7</td><td>4,9</td><td>2,2</td><td>5,0 82,7 +/-</td></tr>
<tr><td>(зерно) Масло</td><td>0,10</td><td>1,10 - 1,0</td><td>82,6</td><td>3,7</td><td>1,7</td><td>4,6 82,6 +/- 3,5</td></tr>
</table>


<a id="p100046"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100047"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕПРАЛОКСИДИМА В МОДЕЛЬНЫХ МАТРИЦАХ**<br>
(n = 6)

</div>



| Матрица | Внесено мг/куб. дм, мг/кг | Открыто, % | Доверительный интервал среднего, % |
| --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,005 0,01 0,025 0,05 | 85,8 89,8 89,2 92,8 | +/- 3,6 +/- 4,2 +/- 2,9 +/- 1,5 |
| Почва | 0,02 0,04 0,10 0,20 | 78,2 86,6 88,2 90,0 | +/- 4,8 +/- 2,6 +/- 3,0 +/- 2,6 |
| Сахарная | 0,05 | 77,0 | +/- 5,1 |
| свекла | 0,10 0,25 0,50 | 82,4 84,2 86,2 | +/- 4,4 +/- 4,4 +/- 2,5 |
| Соя | 0,05 | 79,0 | +/- 5,5 |
| (зерно) | 0,10 0,25 0,50 | 82,2 83,6 85,8 | +/- 4,1 +/- 3,9 +/- 3,8 |
| Масло | 0,10 0,20 0,50 1,0 | 79,8 81,4 83,6 85,6 | +/- 3,3 +/- 3,7 +/- 3,1 +/- 2,8 |



### <a id="p100069"></a>2.2. Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100070"></a>Тепралоксидим с содержанием д.в. 99,8 % (БАСФ, Германия).
<a id="p100071"></a>Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.
<a id="p100072"></a>Ацетонитрил, ч., ТУ 6-09-3534-82.
<a id="p100073"></a>Вода дистиллированная или деионизованная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100074"></a>н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100075"></a>Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.
<a id="p100076"></a>Калий углекислый, х.ч., [ГОСТ 4221-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76).
<a id="p100077"></a>Калия перманганат, х.ч., ГОСТ 20490-75.
<a id="p100078"></a>Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.
<a id="p100079"></a>Натрий двууглекислый, ГОСТ 83-79.
<a id="p100080"></a>Натрия гидроксид, х.ч., ГОСТ 4328-77.
<a id="p100081"></a>Натрия сульфат безводный, х.ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100082"></a>Спирт метиловый, х.ч., [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77).
<a id="p100083"></a>Толуол, х.ч., ТУ 6-09-4305-76.
<a id="p100084"></a>Фосфора пентоксид, ч., МРТУ 6-09-5769-69.
<a id="p100085"></a>Хлористый метилен, [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80).
<a id="p100086"></a>Этилацетат, [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100087"></a>Алюминия оксид для хроматографии, II степени активности по Брокману, нейтральный, МРТУ 6-09-3916-83.
<a id="p100088"></a>Целит 535 (2 - 15 мкм) (Серва, Германия).
<a id="p100089"></a>Вата хлопковая.
<a id="p100090"></a>Стекловата.
<a id="p100091"></a>Фильтры бумажные синяя лента, ТУ 6-09-1678-77.
<a id="p100092"></a>Элюент N 1 для колоночной хроматографии: смесь метанол - этилацетат (6:4, по объему).
<a id="p100093"></a>Элюент N 2 для колоночной хроматографии: смесь метанол - этилацетат (7:3, по объему).


### <a id="p100094"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100095"></a>Хроматограф газовый Tracor 570 (США) с детектором по захвату электронов.
<a id="p100096"></a>Колонка хроматографическая стеклянная, 1800 х 2 мм, неподвижная фаза 3% OV-17 на Инертон-супер, 0,16 - 0,20 мм (Хемапол, Чехия), или 3% OV-61 на Хромосорбе W(HP), 0,15 - 0,18 мм.
<a id="p100097"></a>Микрошприц емкостью 10 мкл, МШ-10Ф по ТУ 64-1-2850.
<a id="p100098"></a>Весы аналитические типа ВЛР-200, ГОСТ 19401-74.
<a id="p100099"></a>Встряхиватель механический, ТУ 64-1-1081-83.
<a id="p100100"></a>Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63.
<a id="p100101"></a>Прибор для перегонки при атмосферном давлении.
<a id="p100102"></a>Ротационный испаритель, тип ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
<a id="p100103"></a>Сито с диаметром отверстий 1 мм.
<a id="p100104"></a>Баня водяная, ТУ 46-22-603-75.
<a id="p100105"></a>Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100106"></a>Воронка Бюхнера, ГОСТ 0147-73.
<a id="p100107"></a>Воронки делительные вместимостью 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100108"></a>Воронки для фильтрования стеклянные ГОСТ 8613-75.
<a id="p100109"></a>Колба Бунзена, ГОСТ 5614-75.
<a id="p100110"></a>Колбы конические с притертыми пробками вместимостью 250 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100111"></a>Колбы мерные вместимостью 25, 50 и 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100112"></a>Колбы грушевидные вместимостью 10, 50, 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100113"></a>Колонка хроматографическая стеклянная, 25 х 0,8 см.
<a id="p100114"></a>Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5 и 10 мл, ГОСТ 10515-75.
<a id="p100115"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 мл, [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100116"></a>Цилиндры мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 и 500 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).


### <a id="p100117"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100118"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100119"></a>Отобранные пробы почвы и растительного материала хранят в стеклянной таре в холодильнике не более двух дней. Для длительного хранения корнеплоды и ботву сахарной свеклы замораживают и хранят в морозильной камере при -18 град. С; пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике, пробы зерна и масла сои хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 град. С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 град. С в течение 3 дней, при температуре -18 град. С - в течение месяца.
<a id="p100120"></a>Перед анализом сухую почву просеивают черев сито с отверстиями диаметром 1 мм, а ботву и корнеплоды измельчают.


### <a id="p100121"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100122"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100123"></a>Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворители последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
<a id="p100124"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом калия и поташом (на 1 л
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3
<a id="p100125"></a>Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора углекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
<a id="p100126"></a>Оксид алюминия V степени активности по Брокману получают добавлением 12% дистиллированной воды к навеске оксида алюминия II степени активности.

##### <a id="p100127"></a>2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки

<a id="p100128"></a>Готовую насадку (3% OV-17 на Инертон-супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 град. С в течение 8 - 10 часов.

##### <a id="p100129"></a>2.5.3 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100130"></a>Основной стандартный раствор тепралоксидима с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,8% д.в., в толуоле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
<a id="p100131"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора тепралоксидима соответствующим последовательным разбавлением толуолом. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более 7 дней.
<a id="p100132"></a>При изучении полноты открывания тепралоксидима в модельных матрицах используются ацетоновые растворы вещества.

##### <a id="p100133"></a>2.5.4 Построение калибровочного графика

<a id="p100134"></a>Дня построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора тепралоксидима с концентрацией 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 мкг/мл.
<a id="p100135"></a>Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации тепралоксидима в растворе в мкг/мл.

##### <a id="p100136"></a>2.5.5 Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта

<a id="p100137"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 0,8 см вставляют тампон из стекловаты и вносят суспензию 15 г оксида алюминия V степени активности в 20 мл этилацетата. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помешают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 30 мл метанола и 20 мл смеси метанол - этилацетат (6:4, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

##### <a id="p100138"></a>2.5.6 Проверка хроматографического поведения тепралоксидима на колонке с оксидом алюминия

<a id="p100139"></a>В грушевидную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора тепралоксидима с концентрацией 100 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл элюента N 1 (смесь метанол - этилацетат, 6:4) и наносят на колонку. Промывают колонку 30 мл элюента N 1 и затем 50 мл элюента N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают растворитель, остаток растворяют в 1 мл толуола и анализируют на содержание тепралоксидима по [п. 2.7](#p100154).
<a id="p100140"></a>Фракции, содержащие тепралоксидим, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл толуола и вновь анализируют по [п. 2.7](#p100154). Рассчитывают содержание тепралоксидима в элюате, определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.
<a id="p100141"></a>Примечание: Профиль вымывания тепралоксидима может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.


### <a id="p100142"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100143"></a>2.6.1 Экстракция тепралоксидима

<a id="p100144"></a>2.6.1.1. Вода. 250 мл предварительно отфильтрованной воды помещают в делительную воронку емкостью 500 мл и дважды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 50 мл при энергичном встряхивании в течение 1 мин. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при 30 град. С. Для удаления следов хлористого метилена к сухому остатку добавляют 5 мл гексана и растворитель упаривают досуха на роторном испарителе при 30 град. С. Эту операцию повторяют еще раз. Сухой остаток растворяют в 1 мл толуола и анализируют на содержание тепралоксидима по [п. 2.7](#p100154).
<a id="p100145"></a>2.6.1.2. Почва. Навеску (25 г) подготовленной почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему) и суспензию перемешивают в течение 1 часа на аппарате для встряхивания. Добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Осадок на фильтре промывают 50 мл экстрагента. Дальнейшую очистку объединенного экстракта проводят по [пп. 2.6.2](#p100149) и [2.6.3](#p100151).
<a id="p100146"></a>2.6.1.3. Сахарная свекла. К навеске (30 г) измельченного материала добавляют 120 мл смеси ацетон-вода (80:20, по объему) и гомогенизируют 3 минуты при 10000 об./мин. К гомогенату добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Осадок на фильтре промывают 50 мл экстрагента. Из объединенного экстракта отбирают 1/3 объема раствора, эквивалентную 10 г ткани. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [пп. 2.6.2](#p100149) и [2.6.3](#p100151).
<a id="p100147"></a>2.6.1.4. Зерно сои. Навеску (10 г) зерна заливают 15 мл воды и оставляют на ночь. Переносят зерно в стакан гомогенизатора, приливают 50 мл ацетона и гомогенизируют 3 минуты при 10000 об./мин. К гомогенату добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Осадок на фильтре промывают 75 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему). Дальнейшую очистку объединенного экстракта проводят по [пп. 2.6.2](#p100149) и [2.6.3](#p100151).
<a id="p100148"></a>2.6.1.5. Масло. Навеску (5 г) соевого масла помещают в коническую колбу емкостью 200 мл, приливают 50 мл смеси метанол - вода (80:20, по объему) и перемешивают в течение 20 минут на аппарате для встряхивания. Эмульсию переносят в делительную воронку емкостью 100 мл и оставляют на 15 минут в морозилке холодильника. Отделяют метанольный слой и масло повторно экстрагируют 50 мл смеси метанол - вода (80:20, по объему) указанным выше способом. Объединенный метанольный экстракт фильтруют через небольшой слой хлопковой ваты и в дальнейшем подвергают очистке по [пп. 2.6.2](#p100149) и [2.6.3](#p100151).

##### <a id="p100149"></a>2.6.2 Очистка перераспределением в несмешивающуюся жидкость

<a id="p100150"></a>Экстракты почвы (из [п. 2.6.1.2](#p100145)), сахарной свеклы (из [п. 2.6.1.3](#p100146)), зерна сои (из [п. 2.6.1.4](#p100147)) и масла (из [п. 2.6.1.5](#p100148)) упаривают до водной фазы на роторном испарителе при температуре 40 град. С. Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 200 мл, приливают 30 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 40 мл хлористого метилена. Смесь встряхивают в течение 1 минуты и после ее разделения отделяют дихлорметановый слой. Экстракцию водной фракции хлористым метиленом повторяют еще раз (40 мл). Объединенный дихлорметановый экстракт высушивают над безводным сульфатом натрия и выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 град. С. Сухой остаток растворяют в 25 мл гексана и раствор переносят в делительную воронку вместимостью 200 мл. Колбу обмывают 50 мл ацетонитрила, который переносят в делительную воронку. Смесь встряхивают 1 минуту и отделяют ацетонитрильный слой. Экстракцию гексановой фракции ацетонитрилом повторяют еще раз (50 мл). Объединенный ацетонитрильный экстракт высушивают над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 40 град. С.

##### <a id="p100151"></a>2.6.3 Очистка на колонке с оксидом алюминия

<a id="p100152"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.2](#p100149) экстрактов почвы, сахарной свеклы, семян и масла сои, количественно переносят тремя 1-мл порциями элюента N 1 (метанол - этилацетат, 6:4) в подготовленную хроматографическую колонку. При анализе масла промывают колонку 15 мл элюента N 1, которые отбрасывают, и элюируют тепралоксидим 15 мл элюента N 1. При анализе остальных объектов промывают колонку 30 мл элюента N 1, которые отбрасывают, и элюируют тепралоксидим 50 мл элюента N 2 (смесь метанол - этилацетат, 7:3), собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Полученные растворы упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 град. С. Сухие остатки объектов растворяют в 1 мл толуола и анализируют на содержание тепралоксидима по [п. 2.7](#p100154).
<a id="p100153"></a>Примечание: При использовании новой партии сорбента или растворителей проводится проверка хроматографического поведения тепралоксидима на колонке с оксидом алюминия.


### <a id="p100154"></a>2.7. Условия хроматографирования


<a id="p100155"></a>Газовый хроматограф Tracor 570 (США) с детектором по захвату электронов (Ni).
                                   -9
<a id="p100156"></a>    Показания электрометра - 1 х 10   А.
<a id="p100157"></a>Скорость движения ленты самописца - 15 см/час.
<a id="p100158"></a>Колонка стеклянная спиральная 1800 х 2 мм; неподвижная фаза - 3% OV-17 на Инертон-супер (0,16 - 0,20 мм).
<a id="p100159"></a>Температура испарителя - 240 град. С, термостата колонки - 240 град. С, детектора - 350 град. С.
<a id="p100160"></a>Скорость потока газа-носителя (азота) - 25 мл/мин.
<a id="p100161"></a>Объем вводимой пробы - 2 мкл.
<a id="p100162"></a>Время удерживания тепралоксидима - 3 мин. 12 сек.
<a id="p100163"></a>Предел детектирования - 1 нг.
<a id="p100164"></a>Линейный диапазон детектирования - 1 - 10 нг.
<a id="p100165"></a>Альтернативная фаза: 3% OV-61 на Хромосорбе W(HP) (0,15 - 0,18 мм); колонка стеклянная 1800 х 2 мм; условия хроматографирования те же.
<a id="p100166"></a>Каждую анализируемую пробу вводят три раза и вычисляют среднюю высоту пика.
<a id="p100167"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 10 мкг/мл, разбавляют толуолом.


### <a id="p100168"></a>2.8. Обработка результатов анализа


<a id="p100169"></a>Содержание тепралоксидима рассчитывает методом абсолютной калибровки по формуле:

                             Н  х А х V
                              1
<a id="p100170"></a>                        Х =  ----------,
                               Н  х m
                                0

    где:
    Х - содержание тепралоксидима в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
    Н  - высота пика образца, мм;
     1
    Н  - высота пика стандарта, мм;
     0
    А - концентрация стандартного раствора тепралоксидима, мкг/мл;
    V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
    m - объем или масса анализируемой пробы, мл или г  (для воды -
100  мл; для свеклы и сои - 10 г; для почвы -  25 г;  для  масла -
5 г).


## 3. <a id="p100171"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100172"></a>Соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с легковоспламеняющимися жидкостями, токсичными веществами, электронагревательными приборами, сосудами, работающими под вакуумом.


## 4. <a id="p100173"></a>Разработчики


<a id="p100174"></a>Талалакина Т.Н., науч. сотр., Павлова Н.Н., науч. сотр., канд. биол. наук, Чканикова Е.В., науч. сотр., канд. мед. наук, Макеев А.М., зав. лаб., канд. биол. наук.
<a id="p100175"></a>ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-86.



<a id="p100176"></a>

---
