---
title: "\"МУК 4.1.1437-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств Тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.1437-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-1437-03"
---

## "МУК 4.1.1437-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств Тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.1437-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств Тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

24 июня 2003 года

</div>



#### <a id="p100217"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТРИТОСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР, ЗЕРНЕ**
**И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МУК 4.1.1437-03**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

30 июня 2003 года

1. <a id="p100005"></a>Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина), Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгилевич) при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Веселов).
2. <a id="p100006"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. <a id="p100007"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100009"></a>ВВОДНАЯ ЧАСТЬ


<a id="p100010"></a>Фирма-производитель: БАСФ.
<a id="p100011"></a>Торговое название: БАС 635.
<a id="p100012"></a>Название действующего вещества по ИСО: Тритосульфурон.
<a id="p100013"></a>Синонимы: BAS 635 Н.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК:
<a id="p100015"></a>1-(2-трифторметилфенилсульфонил)-3-(2-метокси-6-трифторметил-1,3,5-триазин-4-ил)мочевина.
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C  H F N O S.
                           13 9 6 5 4
<a id="p100018"></a>Молекулярная масса: 445,33.
<a id="p100019"></a>Химически чистый Тритосульфурон представляет собой белый кристаллический порошок без запаха.
<a id="p100020"></a>Температура плавления: 166,5 - 169,4 °С.
                             -7
<a id="p100021"></a>    Давление паров < 1,0 х 10   мБар (при 20 °С).
<a id="p100022"></a>    Коэффициент  распределения октанол - вода lg P    2,85 (рН 4),
                                                  ow
0,62 (рН 7,0), 2,39 (рН 10,0).
<a id="p100023"></a>Растворимость в воде 0,044 г/л (при 20 °С).
<a id="p100024"></a>Растворимость в органических растворителях (г/л при 20 °С): ацетон - 300,0, метанол - 23,0, толуол - 4,2, этилацетат - 86,0, хлористый метилен - 25,0.
<a id="p100025"></a>Константа диссоциации рКа - 4,69 при 20 °С.
<a id="p100026"></a>Стабилен при хранении в обычных условиях в течение 2 лет. Тритосульфурон относительно стабилен в водных растворах, период полуразложения в почве 20 - 40 дней. Он метаболизируется в почве с образованием четырех метаболитов и, в конечном счете, разлагается до углекислого газа. В растениях Тритосульфурон разлагается в результате процессов гидроксилирования и глюкозилирования в положение 5-фенольного кольца. Остатки его в урожае не обнаруживаются.
<a id="p100027"></a>    Краткая   токсикологическая   характеристика:   Тритосульфурон
относится к малоопасным веществам. Острая пероральная токсичность:
ЛД    (крысы)  более  4700  мг/кг.  Не раздражает слизистые и кожу
  50
кроликов. В России гигиенические нормативы не установлены.
<a id="p100028"></a>Область применения препарата: Тритосульфурон - системный гербицид, хорошо проникающий в растение через корни и листья и передвигающийся в растениях в обоих направлениях - базипетально и акропетально. Эффективно подавляет двудольные однолетние сорняки, слабо действует на многолетние двудольные сорные растения и не подавляет злаковые сорняки.
<a id="p100029"></a>Тритосульфурон рекомендуется для применения на посевах зерновых культур, рисе, сорго, кукурузы и на торфе. Подавляет развитие широколистных сорняков, используется для повсходовой обработки с нормой расхода до 50 г д.в./га.
<a id="p100030"></a>В России и странах СНГ проходят регистрационные испытания препараты под кодовыми названиями БАС 63500 и БАС 65500 (смесь с Дикамбой) в качестве гербицидов в посевах зерновых культур и кукурузы с нормой расхода до 50 г Тритосульфурона на га при однократной обработке в фазу кущения зерновых культур или 3 - 4 листьев кукурузы.


## 2. <a id="p100031"></a>МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТРИТОСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР, ЗЕРНЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ



### <a id="p100032"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100033"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100034"></a>Методика основана на определении Тритосульфурона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися фазами и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак-С). Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100035"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100036"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах 1 и [2](#p100048).

<a id="p100037"></a>Таблица 1

<a id="p100038"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="17%"><col width="18%"><col width="17%"><col width="15%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td colspan="6">Метрологические параметры, р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Предел обнаружения, мг/кг (мг/л)</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/л)</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S</td><td>Доверительный интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,050</td><td>91,8</td><td>2,52</td><td>1,18</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>83,9</td><td>1,17</td><td>0,52</td></tr>
<tr><td>Зерно пшеницы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>78,4</td><td>2,20</td><td>1,03</td></tr>
<tr><td>Солома пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,050 - 0,500</td><td>83,7</td><td>2,50</td><td>1,17</td></tr>
<tr><td>Зерно кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>82,6</td><td>2,48</td><td>1,16</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса кукурузы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>74,3</td><td>1,64</td><td>0,77</td></tr>
</table>


<a id="p100047"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100048"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИТОСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ**<br>
**И СОЛОМЕ ПШЕНИЦЫ, ЗЕРНЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КУКУРУЗЫ**

</div>

**(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)**


| Среда | Внесено, мг/кг (мг/л) | Обнаружено, мг/кг (мг/л) | Доверительный интервал, +/- | Полнота определения, % |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Вода | 0,005 | 0,00448 | 0,0001 | 89,6 |
|  | 0,010 | 0,00914 | 0,0003 | 91,4 |
|  | 0,020 | 0,01840 | 0,0006 | 92,0 |
|  | 0,050 | 0,04698 | 0,0015 | 93,96 |
| среднее |  |  |  | 91,74 |
| Почва | 0,01 | 0,0083 | 0,0001 | 83,0 |
|  | 0,02 | 0,0169 | 0,0004 | 84,5 |
|  | 0,05 | 0,0418 | 0,0004 | 83,6 |
|  | 0,1 | 0,0846 | 0,0009 | 84,6 |
| среднее |  |  |  | 83,9 |
| Зерно пшеницы | 0,01 | 0,0077 | 0,0001 | 77,0 |
|  | 0,02 | 0,0155 | 0,0003 | 77,5 |
|  | 0,05 | 0,0405 | 0,0010 | 80,9 |
|  | 0,1 | 0,0785 | 0,0030 | 78,5 |
| среднее |  |  |  | 78,5 |
| Солома пшеницы | 0,05 | 0,0425 | 0,0002 | 85,0 |
|  | 0,10 | 0,0804 | 0,0029 | 80,4 |
|  | 0,20 | 0,0167 | 0,0030 | 83,5 |
|  | 0,50 | 0,4286 | 0,0082 | 85,7 |
| среднее |  |  |  | 83,6 |
| Зерно кукурузы | 0,01 | 0,0084 | 0,0001 | 84,0 |
|  | 0,02 | 0,0168 | 0,0003 | 84,0 |
|  | 0,05 | 0,0398 | 0,0010 | 79,6 |
|  | 0,1 | 0,0837 | 0,0030 | 83,7 |
| среднее |  |  |  | 82,8 |
| Зеленая масса кукурузы | 0,01 | 0,0073 | 0,0002 | 73,0 |
|  | 0,02 | 0,0151 | 0,0005 | 75,5 |
|  | 0,05 | 0,0376 | 0,0006 | 75,2 |
|  | 0,10 | 0,0736 | 0,0008 | 73,6 |
| среднее |  |  |  | 74,35 |



##### <a id="p100081"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100082"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при выращивании пшеницы и кукурузы.


### <a id="p100083"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование



##### <a id="p100084"></a>2.2.1 Реактивы, материалы и растворы

<a id="p100085"></a>Тритосульфурон аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,8%, фирма БАСФ.
<a id="p100086"></a>Ацетон, ос.ч., 9-5, ТУ 2633-00-4-11291058-94.
<a id="p100087"></a>Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-87.
<a id="p100088"></a>Вода бидистиллированная деионизированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100089"></a>н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375.
<a id="p100090"></a>Гелий газообразный очищенный марки "А", ТУ-51-940-80.
<a id="p100091"></a>Калий марганцовокислый, ч.д.а., ГОСТ 20490-75.
<a id="p100092"></a>    Калий фосфорнокислый однозамещенный (KH PO ), безводный.
                                           2  4
<a id="p100093"></a>    Магния сульфат, MgSO  х 7H O, ГОСТ 4523-67.
                        4     2
<a id="p100094"></a>Натрия бикарбонат, х.ч., [ГОСТ 4201-79](https://bukva.ai/docs/gost-4201-79).
<a id="p100095"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч., [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100096"></a>Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-77.
<a id="p100097"></a>Кислота ортофосфорная, х.ч., ГОСТ 6552-80.
<a id="p100098"></a>Кислота соляная концентрированная, ГОСТ 857-88.
<a id="p100099"></a>Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 61-75.
<a id="p100100"></a>Кислота уксусная, 0,1% водный раствор.
<a id="p100101"></a>Хлороформ, ч., [ГОСТ 20015-88](https://bukva.ai/docs/gost-20015-88).
<a id="p100102"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты, [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100103"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ:
<a id="p100104"></a>ацетонитрил - 450 мл, 0,2% водный раствор ортофосфорной кислоты - 400 мл.
<a id="p100105"></a>Концентрирующие патроны Диапак-С (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94.
<a id="p100106"></a>Фильтры бумажные "красная лента", ТУ-6-09-1678-86.
<a id="p100107"></a>Фильтры для очистки растворителей диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма Уотерс.

##### <a id="p100108"></a>2.2.2 Приборы и оборудование

<a id="p100109"></a>Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа.
<a id="p100110"></a>Колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP-8, зернение 5 мкм, фирма Уотерс или колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, Zorbax SB-C18, зернение 5 мкм, фирма Rockland Technologies, Inc.
<a id="p100111"></a>Ванна ультразвуковая.
<a id="p100112"></a>Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80 Е, или аналогичные.
<a id="p100113"></a>Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г, ГОСТ 19491-74.
<a id="p100114"></a>Воронки делительные на 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100115"></a>Воронки конические стеклянные диаметром 50 - 60 мм, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100116"></a>Встряхиватель механический, ТУ 64-673М, или аналогичный.
<a id="p100117"></a>Колбы конические плоскодонные на 250 и 500 мл, ГОСТ 9737-70.
<a id="p100118"></a>Колбы мерные на 25, 50 и 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100119"></a>Концентраторы грушевидные и круглодонные объемом 50, 100 и 250 мл, КТУ-100-14/19, ГОСТ 10394-72.
<a id="p100120"></a>Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50 - 100 мкл.
<a id="p100121"></a>Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100122"></a>Пипетки мерные на 0,2; 1,0; 2,0; и 5,0 мл, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100123"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74, или аналогичный.
<a id="p100124"></a>Стаканы стеклянные на 100 - 500 мл, ГОСТ 25366-80Е.
<a id="p100125"></a>Аллонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак-С.


### <a id="p100126"></a>2.3. Подготовка к определению



##### <a id="p100127"></a>2.3.1 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

<a id="p100128"></a>Колонку Symmetry Shield RP-8 или Zorbax SB-C18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин. в течение 3 - 4 часов.

##### <a id="p100129"></a>2.3.2 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100130"></a>Взвешивают 100 мг Тритосульфурона в мерной колбе объемом 100 мл. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом (стандартный раствор с концентрацией Тритосульфурона 1,0 мг/мл). Затем 1,0 мл стандартного раствора с концентрацией 1,0 мг/мл отбирают пипеткой в мерную колбу объемом 100 мл и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании (стандартный раствор с концентрацией Тритосульфурона 10,0 мкг/мл). Стандартные растворы можно хранить в холодильнике в течение трех месяцев.
<a id="p100131"></a>Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/мл Тритосульфурона, и используют эти растворы для хроматографического исследования и внесения в контрольные образцы.

##### <a id="p100132"></a>2.3.3 Подготовка растворителей и приготовление растворов для проведения анализа


###### <a id="p100133"></a>2.3.3.1 Подготовка растворителей

<a id="p100134"></a>Перед началом эксперимента проверяют чистоту ацетона, гексана, этилацетата и хлороформа. Для этого досуха упаривают на ротационном вакуумном испарителе 100 мл растворителя, добавляют в концентратор 2 мл ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют при 230 нм. При недостаточной чистоте растворителей проводят их очистку:
- <a id="p100135"></a>Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.
- <a id="p100136"></a>Ацетон перегоняют над небольшим количеством марганцовокислого калия. (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 438 - 439.)
- <a id="p100137"></a>н-Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором марганцовокислого калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 441).
- <a id="p100138"></a>Хлороформ встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд. Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 443).
- <a id="p100139"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат) промывают равным объемом 5% раствора соды, сушат над безводным хлористым кальцием (Беккер Г. и др. Органикум, Москва 1979 г., с. 372), кипятят в течение 1 часа с прокаленным сульфатом магния и затем перегоняют.

###### <a id="p100140"></a>2.3.3.2 Приготовление 0,05 М К НРО , рН 9 - щелочного буфера

                                    2   4
для экстракции
<a id="p100141"></a>    В   мерную   колбу   объемом   1000   мл   помещают   800   мл
дистиллированной  воды  и  растворяют  в  ней 8,7 г К НРО  и 100 г
                                                     2   4
NaCl,  доводят рН (по рН-метру) до 9, используя 1 М водный раствор
едкого натра, после чего доводят раствор до метки дистиллированной
водой.

###### <a id="p100142"></a>2.3.3.3 Приготовление 6 М раствора соляной кислоты

<a id="p100143"></a>В мерную колбу объемом 100 мл помещают 30 мл дистиллированной воды и добавляют туда 49,2 мл концентрированной соляной кислоты, после чего доводят раствор до метки дистиллированной водой.

###### <a id="p100144"></a>2.3.3.4 Приготовление 0,1% раствора уксусной кислоты в этилацетате

<a id="p100145"></a>В мерную колбу объемом 100 мл помещают 50 мл этилацетата, туда же добавляют 0,1 мл ледяной уксусной кислоты и доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивая. Раствор используют для элюирования Тритосульфурона с картриджа Диапак-С.

##### <a id="p100146"></a>2.3.4 Приготовление растворов для жидкостной хроматографии

<a id="p100147"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.

###### <a id="p100148"></a>2.3.4.1 Приготовление 0,2% водного раствора ортофосфорной кислоты

<a id="p100149"></a>В мерную колбу объемом 1000 мл наливают 500 мл очищенной воды, добавляют туда 2 мм концентрированной ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки очищенной водой и тщательно перемешивают.

###### <a id="p100150"></a>2.3.4.2 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100151"></a>В плоскодонную колбу объемом 1 л помещают 450 мл ацетонитрила и 400 мл 0,2% раствора ортофосфорной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 мл/мин. в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту. Полученный раствор используют в качестве подвижной фазы.

##### <a id="p100152"></a>2.3.5 Построение калибровочного графика

<a id="p100153"></a>Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно 3 раза по 20 мкл каждого из стандартных растворов, содержащих Тритосульфурон с концентрациями 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/мл, измеряют площадь пиков, рассчитывают среднее значение площади пика для каждой концентрации и строят график зависимости площади пика от концентрации Тритосульфурона.

##### <a id="p100154"></a>2.3.6 Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С (0,6 г) для очистки экстракта

<a id="p100155"></a>Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 мл/мин.
<a id="p100156"></a>Патрон Диапак-С устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 мл (используют как емкость для элюентов).
<a id="p100157"></a>Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 5 мл этилацетата и 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2. Элюат отбрасывают. Не допускать высыхания поверхности картриджа!

##### <a id="p100158"></a>2.3.7 Проверка хроматографического поведения Тритосульфурона на концентрирующем патроне Диапак-С

<a id="p100159"></a>Из стандартного раствора Тритосульфурона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/мл, отбирают 1 мл, помещают в круглодонную колбу объемом 100 мл и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 8 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на картридж. Концентратор тщательно обмывают 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2 и смесь также вносят на картридж. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют.
<a id="p100160"></a>Картридж высушивают под вакуумом в течение 2 минут. Тритосульфурон элюируют с картриджа 10 мл 0,1% уксусной кислоты в этилацетате порциями по 5 мл. Элюат после внесения каждой порции упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют. По результатам хроматографического анализа определяют количество уксусной кислоты, необходимой для элюирования Тритосульфурона.


### <a id="p100161"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100162"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре при комнатной температуре. Зерно кукурузы хранят в початках после доведения их до стандартной влажности.
<a id="p100163"></a>Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
<a id="p100164"></a>Пробы зеленой массы кукурузы хранят в течение до 2-х суток в холодильнике. Для длительного хранения их замораживают и хранят при температуре не выше -15 °С. Перед анализом зерно и солому измельчают на лабораторной мельнице.


### <a id="p100165"></a>2.5. Описание определения



##### <a id="p100166"></a>2.5.1 Вода

<a id="p100167"></a>Пробу воды объемом 100 мл фильтруют через фильтр "красная лента" в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, добавляют 1,0 г однозамещенного фосфорнокислого калия, перемешивают до полного растворения соли и переносят содержимое пробы в делительную воронку объемом 250 мл. Затем к содержимому делительной воронки добавляют 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают.
<a id="p100168"></a>Водную фазу еще раз промывают 30 мл хлороформа, хлороформ отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют 6 М соляной кислотой до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон трижды экстрагируют хлороформом порциями по 30 мл, интенсивно встряхивая воронку в течение 2 мин. Каждый раз после разделения фаз в воронке нижний слой (хлороформ) собирают в концентратор, пропуская его через безводный сульфат натрия. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток после упаривания растворяют в 5 мл ацетонитрила и аликвоту объемом 20 мкл хроматографируют.
<a id="p100169"></a>При необходимости сухой остаток после упаривания хлороформа очищают на патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.2.2](#p100174). После очистки элюат упаривают досуха, растворяют в 5 мл ацетонитрила и аликвоту объемом 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100170"></a>2.5.2 Зерно колосовых культур

<a id="p100171"></a>2.5.2.1. Экстракция и предварительная очистка экстракта. Образец размолотого зерна массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл ацетонитрила и экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 5 минут. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 мл ацетонитрила и экстрагируя на ультразвуковой ванне по 5 минут. Экстракт центрифугируют при 4000 об./мин. и фильтруют в делительную воронку объемом 250 мл через фильтр "красная лента".
<a id="p100172"></a>К объединенному экстракту в делительной воронке добавляют 30 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой собирают в химический стакан объемом 200 мл и возвращают в делительную воронку, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт промывают порциями по 30 мл гексана еще 2 раза, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор через химическую воронку с 2 г безводного сульфата натрия и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100173"></a>К сухому остатку в концентраторе добавляют 5 мл ацетонитрила, помещают на 10 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят экстракт в делительную воронку объемом 250 мл. Концентратор ополаскивают 50 мл дистиллированной воды и переносят смыв в ту же делительную воронку. Туда же добавляют 30 мл щелочного фосфатного буфера и перемешивают содержимое. Полученный экстракт промывают тремя порциями гексана по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают. Затем экстракт промывают тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют ~ 0,5 мл 6 М соляной кислоты до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями этилацетата по 50 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний этилацетатный слой объединяют в колбе с 5 г безводного сульфата натрия, дают выстояться 10 минут при периодическом перемешивании, затем пропускают через слой осушителя (безводного сульфата натрия), предварительно смоченного 5 мл этилацетата. Осушитель после пропускания через него экстракта промывают 5 мл этилацетата и объединяют с основным экстрактом. Этилацетатный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, остатки растворителя отдувают холодным воздухом до исчезновения запаха этилацетата.
<a id="p100174"></a>2.5.2.2. Очистка экстракта на патроне Диапак. Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата, помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 8 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на картридж. Концентратор тщательно обмывают 5 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 8:2 и смесь также вносят на картридж. Элюат отбрасывают. Картридж высушивают под вакуумом в течение 2 минут. Тритосульфурон элюируют с картриджа 5 мл 0,1% уксусной кислоты в этилацетате, элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100175"></a>Пробу, подвергшуюся растворению, нежелательно упаривать и повторно перерастворять, так как при этом уменьшается полнота определения Тритосульфурона. Нежелательно также хранить очищенную пробу в холодильнике в растворенном виде, так как при этом происходит разрушение элементов матрицы, что приводит к значительному уменьшению чистоты пробы и изменению типовой картины.

##### <a id="p100176"></a>2.5.3 Солома колосовых культур

<a id="p100177"></a>Образец размолотой соломы массой 5 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 1 мл дистиллированной воды, 100 мл ацетонитрила и экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 5 минут. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 100 и 75 мл ацетонитрила и экстрагируя на ультразвуковой ванне по 5 минут. Экстракт фильтруют в делительную воронку объемом 500 мл через фильтр "красная лента".
<a id="p100178"></a>К объединенному экстракту в делительной воронке добавляют 50 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой собирают в химический стакан объемом 500 мл и возвращают в делительную воронку, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт промывают порциями по 50 мл гексана еще 2 раза, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор через химическую воронку с 2 г безводного сульфата натрия и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100179"></a>К сухому остатку в концентраторе добавляют 5 мл ацетонитрила, помещают на 10 секунд в ультразвуковую ванну, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят экстракт в делительную воронку объемом 250 мл. Концентратор ополаскивают 50 мл дистиллированной воды и переносят смыв в ту же делительную воронку. Туда же добавляют 30 мл щелочного фосфатного буфера и перемешивают содержимое. Полученный экстракт промывают тремя порциями гексана по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают. Затем экстракт промывают тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют ~ 0,5 мл 6 М соляной кислоты до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями этилацетата по 50 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний этилацетатный слой объединяют в колбе с 5 г безводного сульфата натрия, дают выстояться 10 минут при периодическом перемешивании, затем пропускают через слой осушителя (безводного сульфата натрия), предварительно смоченного 5 мл этилацетата. Осушитель после пропускания через него экстракта промывают 5 мл этилацетата и объединяют с основным экстрактом. Этилацетатный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, остатки растворителя отдувают холодным воздухом до исчезновения запаха этилацетата.
<a id="p100180"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.2.2](#p100174).
<a id="p100181"></a>После очистки элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100182"></a>2.5.4 Зерно кукурузы

<a id="p100183"></a>Образец размолотого зерна кукурузы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл ацетона и экстрагируют в течение 5 минут на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 минут на механическом встряхивателе. Экстракцию повторяют еще три раза, используя по 50 мл ацетона и экстрагируя на ультразвуковой ванне и механическом встряхивателе по 5 минут. Экстракт центрифугируют при 4000 об./мин., фильтруют в концентратор объемом 250 мл через фильтр "красная лента". Ацетоновый экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100184"></a>К сухому остатку добавляют 3 мл ацетона, тщательно обмывают стенки концентратора, туда же добавляют 50 мл дистиллированной воды и 30 мл щелочного фосфатного буфера и перемешивают содержимое. К экстракту в делительной воронке добавляют 30 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний водный слой собирают в химический стакан объемом 200 мл и возвращают в делительную воронку, гексан отбрасывают. Водный экстракт промывают порциями по 30 мл гексана еще 2 раза, гексан отбрасывают. К водной фазе добавляют 10 мл щелочного фосфатного буфера. Затем экстракт промывают тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют ~ 0,5 мл 6 М соляной кислоты до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой пропускают через слой осушителя (безводного сульфата натрия). Осушитель после пропускания через него экстракта промывают 5 мл хлороформа и объединяют с основным экстрактом. Хлороформный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100185"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.2.2](#p100174).
<a id="p100186"></a>После очистки элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100187"></a>2.5.5 Зеленая масса кукурузы

<a id="p100188"></a>Образец измельченной зеленой массы кукурузы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 100 мл ацетонитрила и экстрагируют в течение 5 минут на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 минут на механическом встряхивателе. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 75 мл ацетонитрила и экстрагируя на ультразвуковой ванне и механическом встряхивателе по 5 минут. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 500 мл с 5 г хлористого натрия через фильтр "красная лента".
<a id="p100189"></a>Объединенный экстракт тщательно перемешивают и выдерживают в течение 10 минут при комнатной температуре. Затем экстракт переносят в делительную воронку объемом 500 мл, выделившийся нижний водный слой отбрасывают. К объединенному экстракту в делительной воронке добавляют 50 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой собирают в химический стакан объемом 500 мл и возвращают в делительную воронку, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт промывают порциями по 50 мл гексана еще 2 раза, гексан отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт собирают в концентратор, пропуская через слой осушителя (безводного сульфата натрия). Осушитель после пропускания через него экстракта промывают 5 мл ацетонитрила, объединяют с основным экстрактом и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100190"></a>К сухому остатку в концентраторе добавляют 5 мл ацетона, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят экстракт в делительную воронку объемом 250 мл. Концентратор обмывают еще двумя порциями ацетона по 3 и 2 мл и переносят смыв в ту же делительную воронку. Туда же добавляют 30 мл дистиллированной воды, 70 мл щелочного фосфатного буфера и перемешивают содержимое. Полученный экстракт промывают тремя порциями гексана по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают. Затем экстракт промывают тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют ~ 1,0 мл 6 М соляной кислоты до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой объединяют в химическом стакане объемом 200 мл, после чего возвращают в делительную воронку, водную фазу отбрасывают. Из хлороформного экстракта Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями по 20 мл щелочного буфера, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний водный слой объединяют в химическом стакане, после чего возвращают в делительную воронку, нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу в делительной воронке подкисляют ~ 0,5 мл 6 М соляной кислоты до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон экстрагируют тремя порциями хлороформа по 20 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой пропускают через слой осушителя (безводного сульфата натрия). Осушитель после пропускания через него экстракта промывают 5 мл хлороформа и объединяют с основным экстрактом. Хлороформный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.
<a id="p100191"></a>Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.2.2](#p100174).
<a id="p100192"></a>После очистки элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

##### <a id="p100193"></a>2.5.6 Почва

<a id="p100194"></a>Образец почвы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл смеси ацетон - вода в соотношении 8:2 и экстрагируют в течение 10 минут на ультразвуковой ванне и 10 минут на механическом встряхивателе. После экстракции пробу центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4000 об./мин. и супернатант переносят через бумажный фильтр "красная лента" в концентратор объемом 250 мл. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 мл смеси ацетон - вода в соотношении 8:2 и экстрагируя 10 минут на ультразвуковой ванне и 10 минут на механическом встряхивателе. После центрифугирования и фильтрования экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 мл и осторожно (вспенивание!) упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С до водного остатка. К водному остатку в концентраторе добавляют 30 мл щелочного фосфатного буфера, рН и переносят раствор в делительную воронку. Водную фазу в делительной воронке дважды промывают гексаном порциями по 30 мл, интенсивно встряхивая воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают, водный остаток возвращают в делительную воронку. Затем водную фазу в делительной воронке дважды промывают хлороформом порциями по 30 мл, интенсивно встряхивая воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний хлороформный слой отбрасывают. Водную фазу подкисляют 6 М соляной кислотой до рН 3 (по универсальному индикатору). Тритосульфурон из водной фазы экстрагируют тремя порциями хлороформа по 30 мл, интенсивно встряхивая воронку в течение 2 минут. После полного разделения слоев нижний слой (хлороформ) собирают в концентратор, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл этилацетата (помещают на 30 секунд в ультразвуковую ванну), тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 8 мл гексана и очищают на концентрирующем патроне Диапак-С, как указано в [п. 2.5.2.2](#p100174). После очистки элюат упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.


### <a id="p100195"></a>2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100196"></a>2.6.1 Условия хроматографирования

<a id="p100197"></a>Хроматограф "Waters" или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.
<a id="p100198"></a>Колонка стальная Symmetry Shield RP-8, 4,6 мм х 25 см, зернение 5 мкм.
<a id="p100199"></a>Время удерживания Тритосульфурона - 11,718 - 12,442 мин.
<a id="p100200"></a>Альтернативная колонка:
<a id="p100201"></a>Колонка стальная Zorbax SB-C18, 4,6 мм х 25 см, зернение 5 мкм.
<a id="p100202"></a>Время удерживания Тритосульфурона - 9,791 - 10,397 мин.
<a id="p100203"></a>Температура колонки: 25 °С.
<a id="p100204"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,2% ортофосфорная кислота в соотношении 40:60.
<a id="p100205"></a>Чувствительность 0,005 ед. оптической плотности на шкалу.
<a id="p100206"></a>Объем вводимой пробы 20 мкл.
<a id="p100207"></a>Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.

##### <a id="p100208"></a>2.6.2 Обработка результатов анализа

<a id="p100209"></a>Содержание Тритосульфурона рассчитывают по формуле:

                            S   х А х V
                             пр
<a id="p100210"></a>                       Х = ------------- х Р,
                           100 х S   х m
                                  ст

    где:
    Х - содержание Тритосульфурона в пробе, мг/кг или мг/л;
    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
    А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
    V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
    m - масса анализируемого образца, г (мл);
    Р - содержание Тритосульфурона в аналитическом стандарте, %.


## 3. <a id="p100211"></a>ТРЕБОВАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100212"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.


## 4. <a id="p100213"></a>РАЗРАБОТЧИКИ


<a id="p100214"></a>Калинин В.А., профессор, канд. с.-х. наук, Довгилевич Е.В., ст. н. сотр., канд. биол. наук, Калинина Т.С., ст. н. сотр., канд. с.-х. наук, Довгилевич А.В., ст. н. сотр., канд. хим. наук, Устименко Н.В., ст. н. сотр., канд. биол. наук.
<a id="p100215"></a>Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-43-26.



<a id="p100216"></a>

---