МУК 4.1.0.499-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций мексамина хлоргидрата и мексамина основания методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания

№ МУК 4.1.0.499-96Действующий акт

Актуально на 01.11.2026.

Как цитировать: "МУК 4.1.0.499-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций мексамина хлоргидрата и мексамина основания методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания". МУК 4.1.0.499-96. https://bukva.ai/docs/muk-4-1-0-499-96

(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

Примечание

Документ введен в действие с 8 июня 1996 года.

Утверждено И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России,

заместитель Главного
государственного санитарного
врача Российской Федерации
Е. Н. Беляев
8 июня 1996 года

Дата введения -
с момента утверждения

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ МЕКСАМИНА ХЛОРГИДРАТА И МЕКСАМИНА ОСНОВАНИЯ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.0.499-96

рис. 1 М. м. 190,24

Мексамин основание (5-метокситриптамин) — кристаллическое вещество светло-коричневого цвета. Хорошо растворим в метиловом и этиловом спиртах, в органических растворителях, в т.ч. хлороформе и ацетонитриле, а также в водных растворах кислот. Слабо растворим в воде. Температура плавления — 120 — 121 °C.

рис. 2 М. м. 226,50

Мексамин хлоргидрат (5-метокситриптамин хлоргидрат) — кристаллическое вещество белого или светло-коричневого цвета. Растворим в метиловом и этиловом спиртах, в органических растворителях, в т.ч. хлороформе и ацетонитриле. Хорошо растворим в воде. Температура плавления — 242 — 244 °C.

В воздухе находятся в виде аэрозолей.

Обладают общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе — 0,1 мг/м3.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения мексамина основания в хроматографируемом объеме пробы (10 мкл) — 0,1 мкг, суммы мексамина хлоргидрата и мексамина основания в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) — 0,005.

Нижний предел измерения мексамина основания и мексамина хлоргидрата в воздухе — 0,05 мг/м3 (при отборе 100 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций мексамина основания и мексамина хлоргидрата в воздухе — от 0,05 до 1 мг/м3.

Измерению не мешает наличие 5-метокситриптамин-2-карбоновой кислоты.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения анализа, включая отбор пробы, — около 40 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроклоночный жидкостной хроматограф «Милихром» или другие модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка № 1 длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом «Силасорб SPH C_{18} » с размером зерен 6,0 мкм (Чехия)
Хроматографическая колонка № 2 длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом «Силасорб CN» с размером зерен 7,0 мкм (Чехия)
Электроаспиратор ЭА-1	ОСТ 95.10052-84
Фильтродержатель
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки вместимостью 1 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75
Роторный испаритель	ТУ 25-11-97-74
Колбы грушевидные для вакуумной перегонки, вместимостью 25 — 30 мл ГОСТ 9737-70
	Реактивы, растворы и материалы

Мексамин хлоргидрат, фармакопейный
Мексамин основание, фармакопейный
Кислота ортофосфорная, х.ч., 2%-ный раствор	ГОСТ 6552-58
Кислота уксусная ледяная, х.ч., 1%-ный раствор	ГОСТ 61-75
Калий фосфорно-кислый однозамещенный	ТУ 4198-75
Ацетонитрил очищенный, ч.	ТУ 6-09-3534-82
	Ацетонитрил очищенный получают из технического ацетонитрила чистого путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта № 4. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка — спиральки Левина из нержавеющей стали (2 x 2 x 0,2 мм) Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °C (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °C
Гексан очищенный
Гексан очищенный получают из гексана, х.ч. путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка — спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 69 °C (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °C	ТУ 6-09-3375-78
Этанол (спирт этиловый) очищенный
Этанол очищенный получают из спирта этилового ректификованного путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка — спиральки Левина из нержавеющей стали (2 x 2 x 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 78,3 °C (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °C 0,1 М фосфатный буфер (pH 2,5) готовят в мерной колбе, вместимостью 100 мл. 1,36 г калия фосфорно-кислого однозамещенного помещают в колбу, добавляют 10 — 20 мл дистиллированной воды, затем 0,1 мл 2% ортофосфорной кислоты, доводят раствор до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают	ТУ 18300-72
	Элюент 1: ацетонитрил — 0,1 М фосфатный буфер (pH 2,5), (1:9)
Элюент 2: гексан-этанол, 2:1
Растворитель 1:1% раствор уксусной кислоты
Растворитель 2: этанол

Стандартный раствор № 1 с концентрацией мексамина хлоргидрата 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г мексамина хлоргидрата в 1%-ном растворе уксусной кислоты в мерной колбе, вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор № 2 с концентрацией мексамина хлоргидрата 5 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 раствором уксусной кислоты.

Стандартный раствор № 3 с концентрацией мексамина основания 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г мексамина основания в этаноле в мерной колбе, вместимостью 100 мл.

Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение недели.

Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 85-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют раздельно через 2 независимых фильтра типа АФА-ВП-10 (фильтр № 1 и фильтр № 2). Для определения 1/2 ОБУВ достаточно аспирировать по 100 л воздуха через каждый фильтр. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографические колонки промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф, в хроматографическую колонку № 1 от 0,005 до 0,1 мкг мексамина хлоргидрата из стандартного раствора № 2.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки	20 °C
Скорость подачи элюента (ацетонитрил-0, М фосфатный буфер (pH 2,5) — 1:9	100 мкл/мин
Длина волны УФ-детектора	224 нм
Скорость движения диаграммной ленты	3 мм/мин
Чувствительность детектора	0,1
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания мексамина хлоргидрата и мексамина основания в фосфатном буфере	13 мин 45 с
Элюирующий объем	1375 мкл
Эффективность колонки по мексамина хлоргидрату и мексамина основанию в фосфатном буфере	2200 тт

Строят градуировочный график № 1, для чего на полученных хроматограммах измеряют площади пиков и вычерчивают градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм2) от совместного содержания мексамина хлоргидрата и мексамина основания в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Инжектируют в хроматограф в хроматографическую колонку № 2 от 0,1 до 2 мкг мексамина основания из стандартного раствора № 3.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки	20 °C
Скорость подачи элюента: гексан-этанол, 2:1	200 мкл/мин
Длина волны УФ-детектора	210 нм
Скорость движения диаграммной ленты	1,5 мм/мин
Чувствительность детектора	0,8
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	10 мкл
Время удерживания мексамина основания	8 мин 45 с
Элюирующий объем	1750 мкл
Эффективность колонки по мексамина основанию	420 тт

Строят градуировочный график № 2, для чего на полученных хроматограммах измеряют площади пиков и вычерчивают градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм2) от содержания мексамина основания в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр № 1 с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл 1%-ного раствора уксусной кислоты и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра суммарного количества мексамина основания и мексамина хлоргидрата — 98,5%.

Хроматографирование полученного раствора № 1 проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика № 1.

Количественное определение суммарного содержания мексамина основания и мексамина хлоргидрата в хроматографируемых объемах проводят по предварительно построенному градуировочному графику № 1.

Фильтр № 2 с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл этанола и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра суммарного количества мексамина основания — 97%.

Раствор переносят количественно в грушевидную колбу для перегонки под вакуумом и упаривают на роторном испарителе под вакуумом при температуре 35 — 40 °C до постоянного веса. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл элюента № 2.

Хроматографирование полученного раствора № 2 проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика № 2.

Количественное определение индивидуального содержания мексамина основания в хроматографируемых объемах проводят по предварительно построенному градуировочному графику № 2.

Расчет концентрации

Суммарную концентрацию мексамина основания и мексамина хлоргидрата C в воздухе (в мг/м3) вычисляют по формуле:

C = \frac{\text{а} \cdot \text{в}}{\text{б} \cdot V} , где

а — суммарное содержание мексамина основания и мексамина хлоргидрата в хроматографируемом объеме пробы, найденное по соответствующему градуировочному графику, мкг;

б — объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в — общий объем анализируемого раствора, мл;

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. Приложение 1 (не приводится)).

Концентрацию мексамина основания C в воздухе (в мг/м3) вычисляют по формуле:

C = \frac{\text{а} \cdot \text{в}}{\text{б} \cdot V} , где

а — содержание мексамина основания в хроматографируемом объеме пробы, найденное по соответствующему градуировочному графику, мкг;

б — объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в — общий объем анализируемого раствора, мл;