---
title: "\"МУК 4.1.0.336-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентрации холестерина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.0.336-96"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/muk-4-1-0-336-96"
---

## "МУК 4.1.0.336-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентрации холестерина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания"

# "МУК 4.1.0.336-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентрации холестерина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания"

(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100002) в действие с 8 июня 1996 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждено<br>
И.о. Председателя<br>
Госкомсанэпиднадзора России -<br>
заместителем Главного<br>
государственного санитарного<br>
врача Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
8 июня 1996 года

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ХОЛЕСТЕРИНА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.0.336-96**

</div>


1. <a id="p100006"></a>Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. <a id="p100007"></a>Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного Государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.
4. <a id="p100009"></a>Включенные в данный выпуск "Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ", ГОСТа Р 1.5-92, п. 7.3, ГОСТа 8.010-90.
<a id="p100010"></a>Методические указания одобрены комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Госкомсанэпиднадзоре России и Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профпатологии".
<a id="p100011"></a>Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 31) предназначены для центров Госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также НИИ МЗ России и заинтересованных министерств и ведомств.
<a id="p100012"></a>Ответственный исполнитель: Г.А. Дьякова.
<a id="p100013"></a>Исполнители: Л.Г. Макеева, Е.М. Малинина, С.М. Попова, Н.С. Горячев, М.И. Аржанова, Т.В. Рязанцева, Е.Н. Грицун.

<a id="p100014"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/ZgVOHa87/img_0.png) 
<a id="p100015"></a>                                                               М. м. 386,64

<a id="p100016"></a>Холестерин $(10 - \alpha - (\text{холест} - 5 - \text{ен} - 3\beta - \text{ол}))$ - кристаллическое вещество белого цвета. Хорошо растворим в диоксане и гексане. Растворим в изопропиловом спирте. Не растворим в воде, метиловом и этиловом спиртах. $T_{\text{плав}.}149^{\circ}C$ .
<a id="p100017"></a>В воздухе находится в виде аэрозоля.
<a id="p100018"></a>Обладает общетоксическим действием.
<a id="p100019"></a>ОБУВ в воздухе - 1 мг/м3.


### <a id="p100020"></a>Характеристика метода


<a id="p100021"></a>Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
<a id="p100022"></a>Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.
<a id="p100023"></a>Нижний предел измерения холестерина в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) - 0,2 мкг.
<a id="p100024"></a>Нижний предел измерения холестерина в воздухе (при отборе 40 л воздуха) - 0,5 мг/м3.
<a id="p100025"></a>Диапазон измеряемых концентраций холестерина в воздухе от 0,5 до 10 мг/м3.
<a id="p100026"></a>Определению не мешает динитробензонат эргокальциферола.
<a id="p100027"></a>Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.
<a id="p100028"></a>Время выполнения измерения, включая отбор пробы, - около 40 мин.


### <a id="p100029"></a>Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100030"></a>Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром"
или другие модели с УФ-детектором
<a id="p100031"></a>Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним
диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб 600"
с размером зерен 7,0 мкм (ЧСФР)
<a id="p100032"></a>Электроаспиратор ЭА-1                                       ОСТ 95.10052-84
<a id="p100033"></a>Фильтродержатель
<a id="p100034"></a>Колбы мерные вместимостью 100 мл [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74)
<a id="p100035"></a>Пипетки вместимостью 1, 10 мл [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100036"></a>Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл      ГОСТ 10515-75


### <a id="p100037"></a>Реактивы, растворы, материалы


<a id="p100038"></a>Холестерин фармакопейный
<a id="p100039"></a>Гексан, х.ч.                                                ТУ 6-09-3375-78

<a id="p100040"></a>Гексан очищенный получают из гексана путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 x 2 x 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 69 °C (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °C.

<a id="p100041"></a>Изопропанол, х.ч.                                           ТУ 9805-76

<a id="p100042"></a>Изопропанол очищенный получают из изопропанола путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 x 2 x 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 82,4 °C (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °C.
<a id="p100043"></a>Элюент: гексан - изопропанол (50:1).
<a id="p100044"></a>Основной стандартный раствор с концентрацией холестерина 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.
<a id="p100045"></a>Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.

<a id="p100046"></a>Фильтры аналитические стекловолокнистые                     ТУ 8-ЮП-1-77


### <a id="p100047"></a>Отбор пробы воздуха


<a id="p100048"></a>Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.
<a id="p100049"></a>Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.


### <a id="p100050"></a>Подготовка к измерению


<a id="p100051"></a>Хромотографическая колонка промышленного изготовления.
<a id="p100052"></a>Инжектируют в хроматограф от 0,2 до 4 мкг из основного стандартного раствора.
<a id="p100053"></a>Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
<a id="p100054"></a>температура термостата колонки                                 +20 °C;
<a id="p100055"></a>скорость подачи элюента гексан:изопропанол (50:1)              200 мкл/мин;
<a id="p100056"></a>длина волны УФ-дефектора                                       212 нм;
<a id="p100057"></a>скорость движения диаграммной ленты                            6 мм/мин;
<a id="p100058"></a>чувствительность детектора                                     0,2 - 0,8;
<a id="p100059"></a>диапазон измерения самописца                                   100 мВ;
<a id="p100060"></a>максимальный объем вводимой пробы                              50 мкл;
<a id="p100061"></a>время удерживания холестерина                                  5 мин 15 с;
<a id="p100062"></a>элюирующий объем                                               1050 мкл;
<a id="p100063"></a>эффективность колонки по холестерину                           4600 тт.
<a id="p100064"></a>На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм2) от содержания холестерина в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
<a id="p100065"></a>Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.


### <a id="p100066"></a>Проведение измерения


<a id="p100067"></a>Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая. Степень десорбции с фильтра 96,5%.
<a id="p100068"></a>Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.
<a id="p100069"></a>Количественное определение содержания холестерина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.


### <a id="p100070"></a>Расчет концентрации


<a id="p100071"></a>Концентрацию холестерина "C" в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:

<div align="center">

<a id="p100072"></a> $C = \frac{\text{а} \cdot \text{в}}{\text{б} \cdot V}$ ,

</div>


<a id="p100073"></a>где а - содержание холестерина в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;
<a id="p100074"></a>б - объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;
<a id="p100075"></a>в - общий объем анализируемого раствора, мл;
<a id="p100076"></a>V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. [Приложение 1](#p100079)).

<a id="p100077"></a>Методические указания разработаны 2 МОЛГМИ, г. Москва.





<div align="right">

<a id="p100078"></a>Приложение 1

</div>


<div align="center">

<a id="p100079"></a>**ПРИВЕДЕНИЕ ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ**

</div>


<a id="p100080"></a>Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °C и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

<div align="center">

<a id="p100081"></a> $V_{20} = \frac{V_{t}(273 + 20) \cdot P}{(273 + t) \cdot 101,33}$ ,

</div>


<a id="p100082"></a>где $V_{t}$ - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
<a id="p100083"></a>P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
<a id="p100084"></a>t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
<a id="p100085"></a>Для удобства расчета $V_{20}$ следует пользоваться таблицей коэффициентов [(Приложение 2)](#p100087). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить $V_{t}$ на соответствующий коэффициент.





<div align="right">

<a id="p100086"></a>Приложение 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100087"></a>**КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ**<br>
**ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="4%"><col width="10%"><col width="10%"><col width="9%"><col width="10%"><col width="10%"><col width="8%"><col width="10%"><col width="10%"><col width="10%"><col width="10%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">°C</td><td colspan="10">Давление P, кПа/мм рт. ст.</td></tr>
<tr><td>97,33/730</td><td>97,86/734</td><td>98,4/738</td><td>98,93/742</td><td>99,46/746</td><td>100/750</td><td>100,53/754</td><td>101,06/758</td><td>101,33/760</td><td>101,86/764</td></tr>
<tr><td>-30</td><td>1,1582</td><td>1,1646</td><td>1,1709</td><td>1,1772</td><td>1,1836</td><td>1,1899</td><td>1,1963</td><td>1,2026</td><td>1,2058</td><td>1,2122</td></tr>
<tr><td>-26</td><td>1,1393</td><td>1,1456</td><td>1,1519</td><td>1,1581</td><td>1,1644</td><td>1,1705</td><td>1,1768</td><td>1,1831</td><td>1,1862</td><td>1,1925</td></tr>
<tr><td>-22</td><td>1,1212</td><td>1,1274</td><td>1,1336</td><td>1,1396</td><td>1,1458</td><td>1,1519</td><td>1,1581</td><td>1,1643</td><td>1,1673</td><td>1,1735</td></tr>
<tr><td>-18</td><td>1,1036</td><td>1,1097</td><td>1,1158</td><td>1,1218</td><td>1,1278</td><td>1,1338</td><td>1,1399</td><td>1,1460</td><td>1,1490</td><td>1,1551</td></tr>
<tr><td>-14</td><td>1,0866</td><td>1,0926</td><td>1,0986</td><td>1,1045</td><td>1,1105</td><td>1,1164</td><td>1,1224</td><td>1,1284</td><td>1,1313</td><td>1,1373</td></tr>
<tr><td>-10</td><td>1,0701</td><td>1,0760</td><td>1,0819</td><td>1,0877</td><td>1,0986</td><td>1,0994</td><td>1,1053</td><td>1,1112</td><td>1,1141</td><td>1,1200</td></tr>
<tr><td>-6</td><td>1,0540</td><td>1,0599</td><td>1,0657</td><td>1,0714</td><td>1,0772</td><td>1,0829</td><td>1,0887</td><td>1,0945</td><td>1,0974</td><td>1,1032</td></tr>
<tr><td>-2</td><td>1,0385</td><td>1,0442</td><td>1,0499</td><td>1,0556</td><td>1,0613</td><td>1,0669</td><td>1,0726</td><td>1,0784</td><td>1,0812</td><td>1,0869</td></tr>
<tr><td>0</td><td>1,0309</td><td>1,0366</td><td>1,0423</td><td>1,0477</td><td>1,0535</td><td>1,0591</td><td>1,0648</td><td>1,0705</td><td>1,0733</td><td>1,0789</td></tr>
<tr><td>+2</td><td>1,0234</td><td>1,0291</td><td>1,0347</td><td>1,0402</td><td>1,0459</td><td>1,0514</td><td>1,0571</td><td>1,0627</td><td>1,0655</td><td>1,0712</td></tr>
<tr><td>+6</td><td>1,0087</td><td>1,0143</td><td>1,0198</td><td>1,0253</td><td>1,0309</td><td>1,0363</td><td>1,0419</td><td>1,0475</td><td>1,0502</td><td>1,0557</td></tr>
<tr><td>+10</td><td>0,9944</td><td>0,9999</td><td>0,0054</td><td>1,0108</td><td>1,0162</td><td>1,0216</td><td>1,0272</td><td>1,0326</td><td>1,0353</td><td>1,0407</td></tr>
<tr><td>+14</td><td>0,9806</td><td>0,9860</td><td>0,9914</td><td>0,9967</td><td>1,0027</td><td>1,0074</td><td>1,0128</td><td>1,0183</td><td>1,0209</td><td>1,0263</td></tr>
<tr><td>+18</td><td>0,9671</td><td>0,9725</td><td>0,9778</td><td>0,9830</td><td>0,9884</td><td>0,9936</td><td>0,9989</td><td>1,0043</td><td>1,0069</td><td>1,0122</td></tr>
<tr><td>+20</td><td>0,9605</td><td>0,9658</td><td>0,9711</td><td>0,9783</td><td>0,9816</td><td>0,9868</td><td>0,9921</td><td>0,9974</td><td>1,0000</td><td>1,0053</td></tr>
<tr><td>+22</td><td>0,9539</td><td>0,9592</td><td>0,9645</td><td>0,9696</td><td>0,9749</td><td>0,9800</td><td>0,9853</td><td>0,9906</td><td>0,9932</td><td>0,9985</td></tr>
<tr><td>+24</td><td>0,9475</td><td>0,9527</td><td>0,9579</td><td>0,9631</td><td>0,9683</td><td>0,9735</td><td>0,9787</td><td>0,9839</td><td>0,9865</td><td>0,9917</td></tr>
<tr><td>+26</td><td>0,9412</td><td>0,9464</td><td>0,9516</td><td>0,9566</td><td>0,9618</td><td>0,9669</td><td>0,9721</td><td>0,9773</td><td>0,9799</td><td>0,9851</td></tr>
<tr><td>+28</td><td>0,9349</td><td>0,9401</td><td>0,9453</td><td>0,9503</td><td>0,9555</td><td>0,9605</td><td>0,9657</td><td>0,9708</td><td>0,9734</td><td>0,9785</td></tr>
<tr><td>+30</td><td>0,9288</td><td>0,9339</td><td>0,9391</td><td>0,9440</td><td>0,9432</td><td>0,9542</td><td>0,9594</td><td>0,9645</td><td>0,9670</td><td>0,9723</td></tr>
<tr><td>+34</td><td>0,9167</td><td>0,9218</td><td>0,9268</td><td>0,9318</td><td>0,9368</td><td>0,9418</td><td>0,9468</td><td>0,9519</td><td>0,9544</td><td>0,9595</td></tr>
<tr><td>+38</td><td>0,9049</td><td>0,9099</td><td>0,9149</td><td>0,9199</td><td>0,9248</td><td>0,9297</td><td>0,9347</td><td>0,9397</td><td>0,9421</td><td>0,9471</td></tr>
</table>






<div align="right">

<a id="p100112"></a>Приложение 3

</div>


<div align="center">

<a id="p100113"></a>**ВЕЩЕСТВА, ОПРЕДЕЛЯЕМЫЕ ПО РАНЕЕ УТВЕРЖДЕННЫМ**<br>
**МЕТОДИЧЕСКИМ УКАЗАНИЯМ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ**<br>
**ВРЕДНЫХ ВЕЩЕСТВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ**

</div>



| Определяемое вещество | Ссылка на источник |
| --- | --- |
| Аммонийные соли полифосфорных кислот (с соотношением азота и фосфора 1:3) | Методические [указания](https://bukva.ai/docs/1631-77) на фотометрическое определение фосфорного ангидрида в воздухе рабочей зоны, в. 1 - 5, М., 1981, с. 46 |
| Барий-кадмиевые соли синтетических жирных кислот фракции C - C (контроль по кадмию) 10 16 | Методические указания по фотометрическому измерению концентраций кадмия в воздухе рабочей зоны, в. VIII, М., 1983, с. 60 |
| Моносилан дисилан (контроль по SiO ) 2 | Методические [указания](https://bukva.ai/docs/5887-91) по фотометрическому определению диоксида кремния в производственной пыли, в. 12 (дополненный и переработанный), утв. 10 сентября 1991 г. |
| Нитрат, сульфат и основной карбонат марганца | Методические указания на определение вредных веществ в воздухе, вып. 1 - 5, М., 1981, с. 16 |
| Палладиевая чернь | Методические указания по спектрофотометрическому измерению концентраций хлорплатината аммония и хлорпалладозамина в воздухе рабочей зоны, в. 22, М., 1988, с. 350 |
| Протаргол | Методические указания по измерению концентраций серебра и его соединений в воздухе рабочей зоны методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии, в. 22, М., 1988, с. 268 |
| Пыль стекла и стеклянных строительных материалов | Методические [указания](https://bukva.ai/docs/1719-77) на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок, в. 1 - 5, М., 1981, с. 235 |
| Эпоксидная смола на основе бисфенола 1 (контроль по эпихлоргидрину) | Методические указания по газохроматографическому измерению концентраций эпихлоргидрина в воздухе рабочей зоны, в. 22, М., 1988, с. 378 |







## <a id="p100123"></a>Приложение 4


<div align="center">

<a id="p100124"></a> ![Приложение 4](https://i.bukva.ai/ZgVOHa87/img_1.png) 

<a id="p100125"></a>Рис. 1. Ловушка-концентратор. Общий вид

</div>




<div align="center">

<a id="p100126"></a> ![Приложение 4](https://i.bukva.ai/ZgVOHa87/img_2.png) 

<a id="p100127"></a>Рис. 2. Ловушка-концентратор

</div>




<a id="p100128"></a>

---