---
title: "\"МУ 3.1.3490-17. 3.1. Эпидемиология. Профилактика инфекционных болезней. Изучение популяционного иммунитета к гриппу у населения Российской Федерации. Методические указания\""
number: "МУ 3.1.3490-17"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/mu-3-1-3490-17"
---

## "МУ 3.1.3490-17. 3.1. Эпидемиология. Профилактика инфекционных болезней. Изучение популяционного иммунитета к гриппу у населения Российской Федерации. Методические указания"

# "МУ 3.1.3490-17. 3.1. Эпидемиология. Профилактика инфекционных болезней. Изучение популяционного иммунитета к гриппу у населения Российской Федерации. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 27.10.2017)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной службы<br>
по надзору в сфере защиты прав<br>
потребителей и благополучия человека,<br>
Главный государственный санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
А.Ю.ПОПОВА<br>
27 октября 2017 года

</div>



#### <a id="p100002"></a>3.1 ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ


<div align="center">

<a id="p100003"></a>**ИЗУЧЕНИЕ ПОПУЛЯЦИОННОГО ИММУНИТЕТА К ГРИППУ**<br>
**У НАСЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**<br>
**МУ 3.1.3490-17**

</div>


1. <a id="p100005"></a>Разработаны Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Е.Б. Ежлова, А.А. Мельникова, Н.В. Фролова), Федеральным бюджетным учреждением науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Роспотребнадзора (Р.А. Максютов, В.Н. Михеев, А.Б. Рыжиков, Т.Н. Ильичева, А.Г. Дурыманов), Федеральным бюджетным учреждением науки "Центральный научно-исследовательский институт Эпидемиологии" Роспотребнадзора (В.В. Малеев, И.В. Михеева, С.Б. Яцышина, А.М. Домкина), ФГУП "Санкт-Петербургский НИИ вакцин и сывороток" ФМБА России (Г.М. Игнатьев).
2. <a id="p100006"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 27 октября 2017 г.
3. <a id="p100007"></a>Введены впервые.

<div align="center">

<a id="p100008"></a>**1. Область применения**

</div>


<a id="p100009"></a>1.1. Настоящие методические указания устанавливают порядок и организацию проведения серологического мониторинга в рамках эпидемиологического надзора за гриппом для достижения следующих целей:
- <a id="p100010"></a>прогнозирование эпидемиологической ситуации путем оценки состояния коллективного иммунитета к актуальным и ранее циркулировавшим антигенным вариантам возбудителей гриппа в предэпидемический период;
- <a id="p100011"></a>мониторинг за циркуляцией возбудителей гриппа с помощью обнаружения специфических антител к различным антигенным вариантам вирусов гриппа в сыворотках крови в реакции торможения гемагглютинации (РТГА);
- <a id="p100012"></a>объективная оценка эффективности специфической профилактики гриппа.
<a id="p100013"></a>1.2. Настоящие методические указания предназначены для специалистов органов, осуществляющих федеральный государственный санитарно-эпидемиологический надзор, центров гигиены и эпидемиологии, научно-исследовательских и медицинских организаций.

## <a id="p100014"></a>II. Общие положения


<a id="p100015"></a>2.1. Проведение серологического мониторинга с целью изучения популяционного иммунитета к гриппу является обязательным элементом эпидемиологического надзора, поскольку эпидемиологическое благополучие населения в отношении гриппа определяется состоянием популяционного иммунитета к актуальным штаммам возбудителей.
<a id="p100016"></a>2.2. Серологические исследования также важны для ретроспективного анализа вспышек, которые могут иметь место в учреждениях закрытого типа, школах, больницах, геронтологических учреждениях.
<a id="p100017"></a>2.3. В методических указаниях представлен общий методический подход, порядок организации и проведения лабораторных исследований по оценке популяционного иммунитета к гриппу. Особое внимание уделено описанию формирования репрезентативных групп населения для изучения популяционного иммунитета в зависимости от преследуемой цели, обработке результатов и их интерпретации.
<a id="p100018"></a>2.4. Методические указания разработаны с целью установки единых требований к порядку сбора, хранения, транспортирования образцов сыворотки крови в ходе серомониторинга гриппа в Российской Федерации, оценке результатов исследований, а также проведению экспертизы и оценки качества иммунопрофилактики гриппа объективными методами.
<a id="p100019"></a>2.5. Методические указания предназначены для применения в организациях и учреждениях Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, в медицинских и других организациях, обеспечивающих выполнение противоэпидемических мероприятий.
<a id="p100020"></a>2.6. Информация о состоянии популяционного иммунитета необходима для разработки прогноза развития эпидемиологической ситуации, а также для планирования мероприятий по вакцинопрофилактике гриппа.

#### <a id="p100021"></a>2.7 Перечень задач, решаемых в рамках изучения популяционного иммунитета к гриппу:

- <a id="p100022"></a>оценка состояния популяционного иммунитета к различным антигенным вариантам актуальных вирусов гриппа в группах населения различного возраста в предэпидемический период для разработки прогноза заболеваемости и планирования профилактических мероприятий;
- <a id="p100023"></a>выявление в предэпидемический период групп риска заболевания гриппом среди населения и территорий риска высокой заболеваемости;
- <a id="p100024"></a>оценка состояния популяционного иммунитета в сравнительном аспекте постэпидемического и предэпидемического периодов с целью определения этиологии эпидемии гриппа и истинной заболеваемости;
- <a id="p100025"></a>мониторинг вирусов гриппа животных у лиц, контактирующих с животными, с помощью серологических методов;
- <a id="p100026"></a>объективная оценка эффективности иммунизации населения в регионах;
- <a id="p100027"></a>оценка эффективности вакцин против гриппа.
<a id="p100028"></a>2.8. Проведение серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета оформляется постановлением Главного государственного санитарного врача по субъекту Российской Федерации, в котором по согласованию с органами управления здравоохранением определяются территории, время (график), контингенты и численность групп населения, подлежащих обследованию, определяются лаборатории для проведения исследований, а также лица, ответственные за организацию и проведение этой работы. В развитие постановления Главного государственного санитарного врача по субъекту Российской Федерации издается приказ органа управления здравоохранением субъекта Российской Федерации.
<a id="p100029"></a>2.9. Проведение серологического мониторинга ежегодно включается в планы работы территориальных органов Роспотребнадзора, центров гигиены и эпидемиологии и научно-исследовательских организаций Роспотребнадзора и организаций здравоохранения.

## <a id="p100030"></a>III. Введение


<a id="p100031"></a>3.1. Коллективный иммунитет популяции является лимитирующим фактором в отношении распространения различных антигенных вариантов вируса гриппа A и B. В этой связи исследование популяционного иммунитета может быть полезным для прогноза возникновения эпидемий, выявления особенностей эпидемического процесса, а также широко используется с целью оценки средств специфической профилактики при их разработке и использовании.
<a id="p100032"></a>3.2. Оценка состояния популяционного иммунитета может проводиться с целью прогнозирования возникновения эпидемического подъема гриппа. Высокий уровень популяционного иммунитета к определенному антигенному варианту гемагглютинина на протяжении 2 лет подряд указывает на возможность исчезновения из циркуляции этих антигенных вариантов вируса. Низкий уровень популяционного иммунитета к определенному антигенному варианту гемагглютинина в предэпидемический период может служить предвестником эпидемического подъема гриппа, вызванного данным вариантом вируса гриппа. Помимо этого низкий уровень популяционного иммунитета в течение длительного периода к ранее циркулировавшему антигенному варианту вируса гриппа может служить настораживающим прогностическим признаком, указывающим на возможность эпидемической циркуляции близкого антигенного варианта вируса гриппа в будущем.
<a id="p100033"></a>3.3. Наряду с другими тестами оценка состояния популяционного иммунитета по окончании эпидемии гриппа может служить дополнительным критерием оценки этиологии прошедшей эпидемии гриппа.
<a id="p100034"></a>3.4. Особое значение имеют сероэпидемиологические исследования, направленные на определение у людей антител к вирусам гриппа животных, таких как высокопатогенный вирус гриппа A (H5N1), поскольку обнаружение антител к вирусу гриппа с пандемическим потенциалом у людей, не контактировавших с птицей, будет косвенно свидетельствовать о приобретении вирусами способности передаваться от человека к человеку. Такие исследования наряду с ПЦР-исследованиями позволили бы выяснить, какова доля бессимптомных случаев инфицирования людей вирусами гриппа животных.
<a id="p100035"></a>3.5. С целью оценки эффективности вакцинации исследуется популяционный иммунитет до и после вакцинации. С целью оценки эффективности вакцин против гриппа исследуется иммунитет в целевых группах, которым рекомендована исследуемая вакцина.
<a id="p100036"></a>3.6. Поскольку доказана корреляция между титром антител в сыворотке крови к определенному антигенному варианту гемагглютинина (HA) вирусов гриппа, определенным в реакции торможения гемагглютинации (РТГА), и наличием защиты против инфицирования вирусом гриппа, имеющим данный антигенный вариант гемагглютинина, это исследование успешно используется для оценки коллективного иммунитета к гриппу. Уровень антител (или титр, определяемый в РТГА при последовательных двукратных разведениях сыворотки), при котором доля зараженных лиц (infection rate) падает в 2 раза по сравнению с наблюдаемой у лиц, не имеющих гомологичных антител, считают защитным 50%-м титром. Определенные опытным путем показатели 50%-го защитного титра различаются для вирусов гриппа разных субтипов и людей разного возраста, тем не менее, защитным считают титр 1:40, однако некоторые исследователи считают, что для детей этот показатель должен составлять 1:80.
<a id="p100037"></a>3.7. Низким титром считают значение <= 1:20, промежуточным (или средним) от 1:40 до 1:80, высоким >= 1:160. Среди лиц, имеющих антитела к гомологичному вирусу гриппа в среднем или высоком титре после перенесенной ранее инфекции, заразиться при контакте с возбудителем могут 9%, среди лиц, приобретших антитела в таком же титре в результате вакцинации - 23%, тогда как среди лиц, не имеющих антител, инфицируются 80%.

## <a id="p100038"></a>IV. Организация исследований


<a id="p100039"></a>4.1. Мониторинг состояния коллективного иммунитета к вирусам гриппа предусматривает серологическое обследование на каждой территории различных групп населения, при этом в одной пробе сыворотки крови определяют максимальный спектр антител к различным антигенным вариантам разных субтипов вирусов гриппа (эпидемическим вирусам гриппа человека: A/H1N1, A/H3N2, B/Yamagata и B/Victoria, высокопатогенным вирусам гриппа животных и пандемическим вирусам гриппа).
<a id="p100040"></a>4.2. Отбор контингентов для обследования начинается с определения территорий. Границы территории определяются сферой обслуживания той или иной организацией здравоохранения. Это может быть отдельный организованный коллектив детей и взрослых, врачебный участок, населенный пункт, приписанный к фельдшерско-акушерскому пункту, территория обслуживания одной поликлиники, фермерское хозяйство.
<a id="p100041"></a>4.3. Серологический мониторинг целесообразно проводить в первую очередь на крупных административных территориях субъектов Российской Федерации (в городах, районных центрах). Каждый сезон в обследование должны включаться разные районы и поликлиники города (районного центра). Периодичность их обследования должна составлять 6 - 7 лет (по графику).
<a id="p100042"></a>4.5. Сбор образцов сыворотки крови осуществляется при условии анонимности методом случайной выборки у людей разных возрастных групп и с различным прививочным анамнезом в отношении гриппа. Перед проведением серологического обследования отобранных лиц медицинские работники должны провести разъяснительную работу, в том числе с родителями обследуемых детей, о целях проверки у них напряженности иммунитета к гриппу. По результатам серологического обследования детей в различных возрастных группах оценивается качество прививок, проводимых в организованных коллективах.
<a id="p100043"></a>4.6. В зависимости от преследуемой цели исследования сбор сывороток производят от определенных контингентов людей в определенные сроки с соблюдением правил сбора, транспортирования и хранения собранных проб ([прилож. 1](#p100130) к МУ). Следует учитывать, что сыворотки не подлежат повторному размораживанию-замораживанию, поэтому при необходимости их многократного использования сыворотки следует предварительно аликвотировать.
<a id="p100044"></a>4.7. Для осуществления серологического мониторинга гриппа на территории Российской Федерации используется РТГА ([прилож. 2](#p100144) к МУ). Для проведения РТГА должны использоваться зарегистрированные в Российской Федерации диагностикумы.
<a id="p100045"></a>4.8. Результаты серологического обследования контингентов фиксируются в рабочих журналах лабораторий ([табл. 1](#p100315) - [3](#p100353) в прилож. 6 к МУ) с указанием населенного пункта, организации, обследуемого и титра антител.
<a id="p100046"></a>4.9. Динамическое слежение за состоянием иммунитета населения к гриппу, позволяет оценить потенциальную уязвимость населения и своевременно корректировать противоэпидемические мероприятия. При выявлении на какой-либо территории снижения уровня популяционного иммунитета в той или иной возрастной группе принимаются управленческие решения, направленные на увеличение уровня иммунной прослойки среди населения с учетом того, какой штамм представляет наибольшую эпидемическую опасность. Особое значение имеют сероэпидемиологические исследования высокопатогенных вирусов гриппа животных (например: A/H5N1, A/H7N9), поскольку значимое повышение количества людей, имеющих антитела к вирусу гриппа с пандемическим потенциалом и профессионально не контактирующих с животными, будет свидетельствовать о появлении варианта вируса, способного передаваться от человека к человеку.

## <a id="p100047"></a>V. Оценка состояния популяционного иммунитета с целью прогноза заболеваемости


<a id="p100048"></a>5.1. Изучение коллективного иммунитета к актуальным антигенным вариантам вирусов гриппа проводится по результатам исследования сывороток, собранных в предэпидемический период в количестве не менее 150 сывороток в каждом субъекте Российской Федерации. Оптимальные сроки сбора сывороток - август - сентябрь.
<a id="p100049"></a>5.2. Обследование проводится среди здорового детского и взрослого населения вне зависимости от наличия или отсутствия перенесенного гриппа в анамнезе и прививочного анамнеза в предшествовавшие эпидемические сезоны. Исследуют сыворотки крови, взятые от лиц следующих возрастных групп: 3 - 6 лет, 7 - 14 лет, 15 - 18 лет, 18 - 60 лет, старше 60 лет (не менее 30 образцов из каждой группы).
<a id="p100050"></a>5.3. Собранные сыворотки следует аликвотировать и хранить замороженными в аликвотах для последующего использования (оценка соответствия вирусам, выделенным в начале эпидемического сезона, сравнительное исследование с сыворотками после вакцинации и постэпидемического периода).

#### <a id="p100051"></a>5.4 Анализу подлежат следующие показатели:

- <a id="p100052"></a>доля сывороток с защитным уровнем антител (>= 1:40) к актуальным штаммам вирусов гриппа (штаммы, рекомендованные в состав вакцины на предстоящий эпидемический сезон, штаммы, циркулировавшие в популяции людей ранее);
- <a id="p100053"></a>доля сывороток с низким уровнем антител (<= 1:20) к актуальным штаммам вирусов гриппа (штаммы, рекомендованные в состав вакцины на предстоящий эпидемический сезон, штаммы, циркулировавшие в популяции людей ранее);
- <a id="p100054"></a>доля сывороток, не содержащих антител к актуальным штаммам вирусов гриппа (штаммы, рекомендованные в состав вакцины на предстоящий эпидемический сезон, штаммы, циркулировавшие в популяции людей ранее).
<a id="p100055"></a>5.5. Низкий уровень популяционного иммунитета - более 80% лиц, не имеющих в предэпидемический период антител, - или низкий титр (<= 1:20) к актуальному гемагглютинину может служить предвестником значительного эпидемического подъема гриппа, вызванного данным вариантом вируса гриппа.
<a id="p100056"></a>5.6. Высокий уровень популяционного иммунитета (менее 20% лиц с низким уровнем антител (<= 1:20) или их отсутствием) к актуальному гемагглютинину на протяжении 2 лет подряд указывает на возможность исчезновения из циркуляции этих антигенных вариантов вируса гриппа и высокую вероятность изменения его антигенной структуры.

## <a id="p100057"></a>VI. Оценка состояния популяционного иммунитета с целью определения этиологии эпидемии гриппа и истинной заболеваемости


<a id="p100058"></a>6.1. Исследование коллективного иммунитета к актуальным антигенным вариантам вирусов гриппа проводится среди здорового детского и взрослого населения вне зависимости от наличия или отсутствия перенесенного гриппа в анамнезе и прививочного статуса в сравнительном аспекте оценки уровня популяционного иммунитета в предэпидемический и постэпидемический период.
<a id="p100059"></a>6.2. Одномоментному исследованию подвергаются сыворотки, собранные в постэпидемический период (май) в количестве не менее 150 сывороток в каждом субъекте Российской Федерации, и аликвоты сывороток, собранных в предэпидемический период (август - сентябрь) и хранившихся в замороженном состоянии. Сыворотки крови, берут от здорового населения разных возрастных групп (3 - 6 лет, 7 - 14 лет, 15 - 18 лет, 18 - 60 лет, старше 60 лет, не менее 30 образцов из каждой группы).

#### <a id="p100060"></a>6.3 Анализу подлежат следующие показатели:

- <a id="p100061"></a>доля образцов, не имеющих антител к актуальным штаммам вирусов гриппа (штаммы, циркулировавшие в данный эпидемический сезон), доля образцов, содержащих антитела в низком, среднем и высоком титре;
- <a id="p100062"></a>средние значения геометрических титров антител (СГТ) ([прилож. 3](#p100275) к МУ) к актуальным штаммам вирусов гриппа (штаммы, циркулировавшие в данный эпидемический сезон).
<a id="p100063"></a>6.4. Индикатором активности вируса гриппа определенной антигенной структуры является кратность прироста антител к данному гемагглютинину в постэпидемический период по сравнению с предэпидемическим периодом.
<a id="p100064"></a>6.5. Показателем эпидемической активности вируса служит достоверное снижение доли лиц с отрицательным и низким уровнем антител к нему, достоверное увеличение доли лиц с высоким уровнем антител к нему и увеличение СГТ в 2 и более раз.

## <a id="p100065"></a>VII. Определение антител к вирусам гриппа животных у людей


<a id="p100066"></a>7.1. Биологический материал для исследования берут у населения, профессионально контактирующего с сельскохозяйственными животными (свиньями, птицей) и дикой птицей.
<a id="p100067"></a>7.2. С целью серологического мониторинга сыворотки крови собирают в августе - сентябре каждого года от людей, контактирующих с животными, в количестве не менее 100 образцов в каждом из 39 субъектов Российской Федерации, определенных в Приказах Роспотребнадзора от 30.09.2013 N 714 "Об организации мониторинга за циркуляцией вирусов гриппа птиц" и от 04.08.2016 N 842 "Об организации опорных баз по мониторингу за вирусом гриппа с пандемическим потенциалом".
<a id="p100068"></a>7.3. В случае контакта людей с животными, у которых лабораторно подтверждено наличие РНК вируса гриппа A с пандемическим потенциалом, необходимо собирать у контактных лиц парные сыворотки (1-я сыворотка - не позднее 7 дней от момента контакта, 2-я сыворотка - через 3 недели после контакта) с целью определения уровня сероконверсии в результате контакта с больным животным. Объем каждого образца сыворотки должен быть не менее 1,0 мл.

## <a id="p100069"></a>VIII. Оценка эффективности вакцинации


<a id="p100070"></a>8.1. Оценка эффективности вакцинации против гриппа в текущем эпидемическом сезоне проводится путем сравнения состояния популяционного иммунитета до вакцинации (в предэпидемический период) и после вакцинации среди привитого населения до начала сезонного подъема заболеваемости данной инфекцией.

##### <a id="p100071"></a>8.1.1 Отбор сывороток проводят через один месяц после вакцинации.

<a id="p100072"></a>8.1.2. Сыворотки крови, берут в количестве не менее 150 образцов от вакцинированного населения разных возрастных групп (3 - 6 лет, 7 - 14 лет, 15 - 18 лет, 18 - 60 лет, старше 60 лет, не менее 30 образцов из каждой группы) и из числа групп риска в отношении этой инфекции.
<a id="p100073"></a>8.2. К группам риска в отношении сезонного гриппа относят лиц, подвергающихся повышенному риску контакта с вирусом гриппа (прежде всего, медицинские работники), а также тех, у кого грипп может протекать в тяжелой форме, способной привести к опасным осложнениям, госпитализации и к летальному исходу (например: беременные женщины, дети в возрасте до 5 лет, пожилые люди, больные хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, органов дыхания, эндокринной системы, включая метаболические нарушения, сопровождающиеся увеличением индекса массы тела).

#### <a id="p100074"></a>8.3 В группу вакцинированных для изучения эффективности вакцинопрофилактики гриппа не включают:

- <a id="p100075"></a>детей, у которых отсутствуют сведения о прививках в изучаемом эпидемическом сезоне;
- <a id="p100076"></a>не привитых против гриппа;
- <a id="p100077"></a>перенесших какое-либо острое заболевание за 1 - 1,5 месяца до обследования, так как отдельные болезни могут привести к временному снижению титра специфических антител.
<a id="p100078"></a>8.4. По усмотрению специалистов, осуществляющих федеральный государственный санитарно-эпидемиологический надзор, серологическое обследование может быть проведено и в других возрастных и профессиональных группах.
<a id="p100079"></a>8.5. При формировании обследуемых групп населения следует придерживаться следующих принципов: единство вакцинного препарата, места получения прививки, единство прививочного анамнеза и сходство эпидемиологической ситуации, в условиях которой формируются обследуемые группы.
<a id="p100080"></a>8.5.1. Единство места получения прививки (организация здравоохранения, детское дошкольное учреждение, школа, предприятие и другие организации, в которых проводилась вакцинация). Этот принцип формирования групп позволяет выявить организации с низким качеством прививочной работы в данном эпидемическом сезоне, а при последующем тщательном расследовании определить конкретные ее недостатки (например: нарушение правил хранения, транспортирования вакцин, фальсификацию прививок, технические ошибки).
<a id="p100081"></a>8.5.2. Единство прививочного анамнеза: обследуемая группа населения должна быть однородной, для чего необходим отбор лиц, вакцинированных одинаковым вакцинным препаратом (одного состава и производителя). Наличие вакцинации в предыдущие эпидемические сезоны не учитывается.
<a id="p100082"></a>8.6. Одномоментному исследованию подвергаются сыворотки, собранные в субъекте Российской Федерации от вакцинированных через один месяц после вакцинации до начала сезонного подъема заболеваемости, и аликвоты сывороток, собранных в предэпидемический период (август - сентябрь) и хранившихся в замороженном состоянии.
<a id="p100083"></a>8.7. Оценку эффективности вакцинации проводят по критериям прироста СГТ антител и уровня серопротекции после вакцинации по сравнению с предэпидемическим периодом ([прилож. 3](#p100275) и [4](#p100282) к МУ). Показателем эффективности вакцинации считают достоверный прирост уровня серопротекции или увеличение СГТ в 2,0 и более раз.
<a id="p100084"></a>8.8. При выявлении в какой-либо группе привитых лиц несоответствия указанному критерию по каждому из актуальных вакцинных штаммов вируса гриппа необходимо:
- <a id="p100085"></a>провести анализ прививочной документации на выявленных лиц без сероконверсии для установления факта наличия прививки - сопоставить сведения о прививках во всех учетных формах (например: карта профилактических прививок (ф. N 063/у), история развития ребенка (ф. N 112/у), амбулаторная карта больного (ф. N 025/у), рабочие журналы);
- <a id="p100086"></a>оценить условия хранения и транспортирования вакцины, порядок проведения иммунизации;
- <a id="p100087"></a>дополнительно проверить состояние иммунитета к гриппу у лиц того же возраста в количестве не менее 100 человек, но в двух других коллективах той же организации здравоохранения, где выявлены несоответствия;
- <a id="p100088"></a>если после дополнительного обследования количество не защищенных от гриппа будет превышать приведенные критерии, следует провести проверку учреждений здравоохранения, в которых выявлены несоответствия, с целью установления фальсификации прививок.
<a id="p100089"></a>8.9. Материалы серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета обобщаются по организациям разного типа, поликлиникам, району, городу (районному центру) и субъекту Российской Федерации в целом. Далее по каждой возрастной группе результаты серологического обследования сопоставляют с уровнем охвата прививками, что позволит подтвердить официальные данные об иммунизации населения или выявить несоответствие охвата прививками уровню коллективного иммунитета.

## <a id="p100090"></a>IX. Оценка эффективности вакцин


<a id="p100091"></a>9.1. Эффективность средства специфической профилактики складывается из его иммунологической эффективности и профилактической эффективности.
<a id="p100092"></a>9.1.1. Наиболее объективную оценку иммунологической эффективности (или иммуногенности) препарата вакцины можно получить при вакцинации серонегативных к специфическим антигенам людей. Из таких лиц формируют опытную и контрольную группы. Лица, получившие вакцинацию против гриппа в течение предыдущих 6 месяцев, исключаются из исследования.
<a id="p100093"></a>9.1.1.1. При формировании групп соблюдают единство места получения прививки и единообразие возраста, эпидемиологической ситуации, в условиях которой формируются обследуемые группы.
<a id="p100094"></a>9.1.1.2. Первый сбор сывороток должен быть осуществлен непосредственно перед вакцинацией (сентябрь - октябрь) и содержать не менее 200 образцов.
<a id="p100095"></a>9.1.1.3. По результатам скрининга в РТГА следует отобрать не менее 50 участников испытания, имеющих наименьшие титры по отношению к антигенам вируса гриппа, входящим в состав вакцины. Из исследования исключаются лица, имеющие титр антител в РТГА 1:80 и более ко всем антигенам вакцины.
<a id="p100096"></a>9.1.1.4. Второй сбор сывороток у отобранных для испытания участников проводят спустя 21 сутки (минимум) или 28 суток (максимум) после вакцинации.
<a id="p100097"></a>9.1.2. Оценка иммунологической эффективности вакцин проводится согласно [прилож. 4](#p100282) к МУ.
<a id="p100098"></a>9.1.3. Сведения о возможности переноса критериев оценки иммунологической эффективности, установленных для взрослых, на педиатрическую популяцию весьма противоречивы, в связи с чем наиболее адекватной оценкой эффективности вакцин для детей считается оценка их профилактической эффективности. В этом случае наряду с оценкой иммунологической эффективности проводится оценка профилактической эффективности.
<a id="p100099"></a>9.2. В связи с тем, что живые аттенуированные или рекомбинантные вакцины могут способствовать выработке специфического секреторного или клеточного иммунитета, иммунологические критерии, установленные для инактивированных вакцин, для них могут быть не всегда корректны. В таких случаях наряду с оценкой иммунологической эффективности проводится оценка профилактической эффективности. Профилактическая эффективность препарата вакцины против гриппа оценивается путем сравнения долей заболевших гриппом в группе привитых и в группе непривитых (контрольных).
<a id="p100100"></a>9.2.1. Объективной оценкой заболевания гриппом является лабораторное подтверждение. С этой целью проводится исследование методом полимеразной цепной реакции с зарегистрированными в Российской Федерации наборами реагентов с идентификацией субтипа гриппа и проведением углубленного молекулярно-генетического анализа вирусов гриппа в одном из референс-центров Роспотребнадзора по мониторингу за гриппом.
<a id="p100101"></a>9.2.2. Формируются 2 группы добровольцев, одна из них - группа вакцинированных, вторая является контрольной (невакцинированные).
<a id="p100102"></a>9.2.2.1. При формировании групп соблюдают единообразие возраста и эпидемиологической ситуации, в условиях которой формируются обследуемые группы. Объем репрезентативной выборки в каждой группе рассчитывается исходя из статистических критериев, основываясь на прогнозируемой заболеваемости гриппом, и должен увеличиваться по мере снижения ожидаемой заболеваемости.
<a id="p100103"></a>9.2.2.2. За обеими группами проводится эпидемиологическое наблюдение в течение всего эпидемического сезона (с момента вакцинации до конца мая). При появлении клинических проявлений острой респираторной инфекции у участника испытаний (любой группы) берут мазки из верхних дыхательных путей для проведения лабораторного обследования.
<a id="p100104"></a>9.2.3. По окончании эпидемического сезона проводят расчет индекса эффективности и коэффициента эффективности (коэффициент защищенности) согласно [прилож. 5](#p100304) к МУ.

## <a id="p100105"></a>X. Описание метода РТГА


<a id="p100106"></a>10.1. Метод основан на способности вирусов гриппа прикрепляться посредством гемагглютинина к эритроцитам человека, кур, морской свинки и других млекопитающих, вызывая образование своеобразной решетки, связывая два эритроцита.
<a id="p100107"></a>10.1.1. Эритроциты, которые не связались с вирусом гриппа, оседают на дно лунки и образуют "пуговицу". Эритроциты, прикрепившиеся к вирусным частицам, образуют решетку, покрывающую лунку, и получается "зонтик".
<a id="p100108"></a>10.1.2. Подсчитано, что одна гемагглютинирующая единица (ГАЕ) различных типов и субтипов вируса гриппа содержит приблизительно 104 - 106 вирусных частиц.
<a id="p100109"></a>10.1.3. Реакция торможения гемагглютинации позволяет определить уровень антител к вирусу гриппа в образцах сыворотки.
<a id="p100110"></a>10.1.4. Суть реакции торможения гемагглютинации в том, что антитела к вирусу гриппа препятствуют прикреплению вируса к эритроцитам. Поэтому, если в сыворотке есть антитела к данному или родственному штамму и если их количество достаточно для связывания четырех ГАЕ вируса, гемагглютинация подавляется в присутствии сыворотки. В этом случае гемагглютинации в лунках наблюдаться не будет, пока разведение сыворотки не приведет к такому разбавлению антител, что их будет недостаточно для торможения гемагглютинации.
<a id="p100111"></a>10.1.5. Наивысшее разведение сыворотки (наименьшая концентрация антител), останавливающее гемагглютинацию, называется титром сыворотки в РТГА.
<a id="p100112"></a>10.2. Анализ занимает не более 30 минут и поэтому часто используется в лабораториях для определения относительных количеств вирусных частиц в свежеприготовленной вируссодержащей аллантоисной или культуральной жидкости.
<a id="p100113"></a>10.3. Постановка РТГА ([прилож. 2](#p100144) к МУ) включает следующие этапы работы: получение препарата антигена вируса гриппа, определение его титра в реакции гемагглютинации, подготовка сывороток, приготовление взвеси эритроцитов и постановка реакции.

<a id="p100114"></a>XI. Нормативные правовые и методические документы

<a id="p100115"></a>11.1. Федеральный закон от 17.09.1998 N 157-ФЗ (ред. от 31.12.2014) "Об иммунопрофилактике инфекционных болезней".
<a id="p100116"></a>11.2. СП 3.1/3.2.3146-13 "Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных болезней".
<a id="p100117"></a>11.3. СП 3.1.2.3117-13 "Профилактика гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций".
<a id="p100118"></a>11.4. [МУ 3.3.2.1758-03](https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-mu-3-3-2-1758-03) "Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа".
<a id="p100119"></a>11.5. Приказ Роспотребнадзора от 31.03.2005 N 373 "О совершенствовании системы эпидемиологического надзора и контроля за гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями" (вместе с "Положением об организации деятельности Федерального центра по гриппу и острым респираторным вирусным инфекциям", "Положением об организации деятельности опорной базы Федерального центра по гриппу и острым респираторным вирусным инфекциям", "Положением об организации деятельности Центра экологии и эпидемиологии гриппа", "Положением об организации деятельности опорной базы Центра экологии и эпидемиологии гриппа", "Порядком представления информации по форме "Срочное донесение о заболеваемости гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ)", "Порядком представления донесений о результатах лабораторных исследований в опорных базах Федерального центра по гриппу и ОРВИ и Центра экологии и эпидемиологии гриппа", "Порядком представления информации о заболеваемости гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями Федеральным центром по гриппу и острым респираторным вирусным инфекциям и Центром экологии и эпидемиологии гриппа").
<a id="p100120"></a>11.6. Приказ Роспотребнадзора от 30.09.2013 N 714 "Об организации мониторинга за циркуляцией вирусов гриппа птиц".

<a id="p100121"></a>XII. Список сокращений

<a id="p100122"></a>МУ - методические указания
<a id="p100123"></a>ПЦР - полимеразная цепная реакция
<a id="p100124"></a>РТГА - реакция торможения гемагглютинации
<a id="p100125"></a>РНК - рибонуклеиновая кислота
<a id="p100126"></a>RDE - фермент, разрушающий неспецифические ингибиторы
<a id="p100127"></a>СГТ - среднегеометрический титр
<a id="p100128"></a>ФСБР - фосфатно-солевой буферный раствор





<a id="p100129"></a>Приложение 1

<a id="p100130"></a>ПОРЯДОК
СБОРА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ СЫВОРОТОК КРОВИ

1. <a id="p100131"></a>Техника взятия и первичная обработка крови
(не для станций переливания крови)

<a id="p100132"></a>При проведении исследований по мониторингу популяционного иммунитета в организованных коллективах детей и учащихся составляется список обследованных лиц, в котором указываются город (район); номер детского дошкольного учреждения, группы; школы, класса; номер среднего специального учреждения, группы; название вуза, факультета, группы; регистрационный номер, фамилия, имя пациента, дата рождения, дата прививок против гриппа, дата взятия крови; подпись ответственного лица.
<a id="p100133"></a>Капиллярную кровь берут из пальца в асептических условиях. Перед взятием крови кисть руки пациента согревают горячей водой, затем насухо вытирают чистым полотенцем. Палец, протерев 70%-м спиртом, прокалывают стерильным скарификатором одноразового пользования. Кровь в объеме 1,0 - 1,5 мл собирают непосредственно через край стерильной одноразовой центрифужной пробирки с пробкой (или в специальные микропробирки для взятия капиллярной крови). После взятия крови место укола смазывают 5%-м раствором йода.
<a id="p100134"></a>При определении антител к вирусам гриппа животных у людей из групп риска, при оценке эффективности вакцинации и оценке эффективности вакцины берут кровь из вены в асептических условиях в объеме не менее 3 мл.
<a id="p100135"></a>Пробирку следует пронумеровать и приложить к ней этикетку с указанием регистрационного номера, фамилии, инициалов, даты взятия крови.
<a id="p100136"></a>Для получения сывороток пробирку с кровью ставят в кабинете, где проводился забор крови, при комнатной температуре на 20 - 30 мин для образования сгустка, после чего ее встряхивают для отделения сгустка от стенки пробирки.
<a id="p100137"></a>Пробирки с кровью вместе со списками направляют в клинико-диагностическую лабораторию ЛПО, где оставляют на ночь в холодильнике при температуре 4 - 8 °C.
<a id="p100138"></a>После отделения сыворотки от сгустка (пробирки обводят по внутренней поверхности стерильной пастеровской пипеткой) ее центрифугируют при 1 000 - 1 200 об/мин в течение 15 - 20 мин. Затем сыворотку осторожно переливают или переносят пипеткой в стерильные центрифужные (пластиковые) пробирки с обязательным переносом на них этикетки с соответствующей пробирки.
<a id="p100139"></a>В лаборатории сыворотки (без сгустка) до исследования можно хранить в холодильниках при температуре (5 +/- 3) °C в течение 7 дней. При более длительном хранении сыворотка должна быть заморожена при -20 °C или ниже. Не допускается повторное замораживание размороженной сыворотки. Собрав необходимое количество сывороток, их отправляют в лабораторию ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" Роспотребнадзора в субъекте Российской Федерации на исследование.

2. <a id="p100140"></a>Транспортирование образцов сыворотки (крови)

<a id="p100141"></a>Перед транспортированием собранного материала из района обследования очень важно принять меры предосторожности: проверить наличие собранной информации, прочно закрыть пробирки пробкой, расположить пробы согласно их номерам и пр. На месте сбора следует хранить списки обследованных лиц. Для транспортирования сыворотки крови используют термоконтейнеры (сумки-холодильники). В течение всего периода транспортирования сыворотки должны оставаться при температуре -20 °C или ниже.
<a id="p100142"></a>При пересылке проб железнодорожным или воздушным транспортом лаборатории необходимо известить (по телефону, телеграммой) о номере поезда (рейса), дате и времени отправки и прибытия, количестве проб и пр.





<a id="p100143"></a>Приложение 2

<a id="p100144"></a>ПРОВЕДЕНИЕ РЕАКЦИИ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА)

<a id="p100145"></a>Подготовка сывороток

<a id="p100146"></a>Материалы

1. <a id="p100147"></a>Фермент, разрушающий неспецифические ингибиторы - RDE.
2. <a id="p100148"></a>ФСБР - фосфатно-солевой буферный раствор.
3. <a id="p100149"></a>Пробирки, пипетки.
4. <a id="p100150"></a>Водяная баня.

<a id="p100151"></a>Процедура

<a id="p100152"></a>Сыворотки крови животных и людей содержат различные полисахариды, включающие сиаловые кислоты, которые могут прикрепляться к гемагглютинину вируса гриппа и затруднять связывание специфических в отношении гриппа гемагглютинирующих антител. Для удаления этих неспецифических ингибиторов гемагглютинации образцы сыворотки обрабатываются ферментом RDE, разрушающим сиаловые кислоты. Работа проводится в ламинарном боксе II класса биобезопасности.
1. <a id="p100153"></a>Быстро разморозьте исследуемые сыворотки крови при 37 °C на водяной бане. Сразу после разморозки поместите сыворотки на лед и держите на нем во время использования.
2. <a id="p100154"></a>Добавьте 40 мкл образца сыворотки в пробирку.
3. <a id="p100155"></a>Добавьте 120 мкл RDE в каждую пробирку.
4. <a id="p100156"></a>Закройте пробирки пробками.
5. <a id="p100157"></a>Выдерживайте на водяной бане при 37 °C от 18 до 20 часов.
6. <a id="p100158"></a>Затем поместите пробирки в водяную баню при 56 °C на 30 минут.
7. <a id="p100159"></a>Добавьте 240 мкл ФСБР, pH = 7,2 в каждую пробирку. Конечное разведение сыворотки имеет соотношение 1:10. Конечный объем ~= 400 мкл.
8. <a id="p100160"></a>Оставьте на ночь при 4 °C. Если необходимо более долгое хранение, заморозьте до -20 °C или ниже.

<a id="p100161"></a>Подготовка эритроцитов

<a id="p100162"></a>Материалы

1. <a id="p100163"></a>Кровь человека группы 0 или морской свинки в буфере Олсвера должна быть свежей. Для работы с некоторыми антигенами штаммов вируса гриппа могут быть использованы эритроциты петуха, индейки или лошади. Допустимо хранение эритроцитов при 4 °C не более 1 недели.
2. <a id="p100164"></a>Стерильная хлопковая марлевая салфетка.
3. <a id="p100165"></a>Физиологический раствор с ФСБР (0,01 М ФСБР, pH = 7,2). Должен быть холодным. Хранить при температуре 4 °C и держать на льду или при 4 °C во время использования.
4. <a id="p100166"></a>70%-й этанол в деионизованной воде.
5. <a id="p100167"></a>Конические центрифужные пробирки для отмывания эритроцитов.
6. <a id="p100168"></a>Стерильные пипетки.
<a id="p100169"></a>Примечание. 0,5%-е эритроциты готовятся в тот же день, когда тестируются сыворотки на неспецифические агглютинины, и могут храниться при 4 °C для использования в РТГА на второй день. Остатки необходимо уничтожить в конце второго дня.

<a id="p100170"></a>Процедура

1. <a id="p100171"></a>Аккуратно наберите, используя пипетку объемом 10 мл, примерно 5 мл эритроцитов со дна колбы. Профильтруйте через стерильную хлопковую марлевую салфетку в коническую центрифужную пробирку объемом 50 мл.
2. <a id="p100172"></a>Осторожно наполните коническую пробирку холодным ФСБР, закройте пробкой и слегка перемешайте, переворачивая пробирку.
3. <a id="p100173"></a>Центрифугируйте при 1 200 об/мин в течение 10 минут при 4 °C.
4. <a id="p100174"></a>Удалите надосадочную жидкость, используя пипетку объемом 10 мл. Будьте внимательны: не всколыхните осадок эритроцитов.
5. <a id="p100175"></a>С осторожностью повторите промывку холодным ФСБР (пункты 2 - 4) еще два раза, чтобы всего было три промывки эритроцитов. Для предотвращения гемолиза всегда бережно обращайтесь с эритроцитами, держите ФСБР на льду при температуре 4 °C и не промывайте эритроциты больше трех раз.
6. <a id="p100176"></a>Удалите оставшийся супернатант при помощи микропипетки и храните уплотненные эритроциты на льду.
7. <a id="p100177"></a>Приготовьте рабочую суспензию эритроцитов: добавьте 2,5 мл уплотненных эритроцитов к 247,5 мл холодного ФСБР в стеклянную колбу объемом 500 мл (сполосните колбу ФСБР перед использованием). Перемешайте с помощью вращательных движений.
8. <a id="p100178"></a>Приготовьте раствор суспензии эритроцитов 1:100. Для этого добавьте 100 мкл эритроцитов к 9,9 мл холодного ФСБР в конической пробирке объемом 15 мл. Осторожно перемешайте, переворачивая пробирку.
9. <a id="p100179"></a>Тщательно вымойте гемоцитометр 70%-м этанолом и протрите насухо бумагой для оптических стекол или мягкой тканью, не оставляющей ворса. Вымойте и просушите покровное стекло тем же способом и аккуратно положите его в гемоцитометр так, чтобы оно покрывало зону чувствительности счетчика.
10. <a id="p100180"></a>Поместите 10 мкл разбавленных 1:100 эритроцитов в гемоцитометр, вставляя наконечник автоматической пипетки в канал и позволяя клеткам распределиться по счетной зоне. Будьте внимательны: не переполняйте канал.
11. <a id="p100181"></a>Посчитайте эритроциты в каждом из 4 больших угловых квадратов в гемоцитометре.
12. <a id="p100182"></a>Каждое большое поле содержит 16 маленьких полей. Обратите внимание, что предполагаемое число эритроцитов в одном большом поле составляет от 40 до 60 клеток. Если количество клеток в каждом большом поле < 40, то добавьте еще уплотненных эритроцитов и посчитайте снова. Если количество клеток в каждом большом поле > 70, то добавьте холодного ФСБР к суспензии эритроцитов и посчитайте снова. Если количество эритроцитов в больших полях отличается друг от друга более чем в 2 раза, то это указывает на неверную загрузку или плохое перемешивание эритроцитов, и, следовательно, необходимо провести процедуру повторно.
<a id="p100183"></a>A. После подсчета эритроцитов сполосните гемоцитометр и покровное стекло 70%-м этанолом и протрите насухо.
<a id="p100184"></a>B. Рассчитайте, какое количество холодного ФСБР необходимо добавить для получения 0,5%-й суспензии эритроцитов. Для этого используйте следующую формулу:

<a id="p100185"></a> ![формула](https://i.bukva.ai/3rbxV84V/img_0.png) 

<a id="p100186"></a>Пример:
    1)    <a id="p100187"></a>Количество эритроцитов в каждом большом угловом поле
<a id="p100188"></a>          50
<a id="p100189"></a>          48
<a id="p100190"></a>          42
<a id="p100191"></a>          40
2) <a id="p100192"></a>$\frac{180 \times 250}{160} = 280,25\text{мл}$ 
3) <a id="p100193"></a>281,25 - 250 = 31,25 мл ФСБР надо добавить к суспензии эритроцитов.

<a id="p100194"></a>Адсорбция сывороток с эритроцитами
для удаления неспецифических агглютининов

<a id="p100195"></a>Присутствие неспецифических агглютининов в образцах сывороток может привести к ложноотрицательному результату в РТГА. Наличие неспецифических агглютининов можно обнаружить, если к разбавленной сыворотке добавить раствор эритроцитов. Если наблюдается гемагглютинация, то в этом случае сыворотка должна быть адсорбирована с эритроцитами перед тестированием в реакции торможения гемагглютинации.

<a id="p100196"></a>Материалы

1. <a id="p100197"></a>Эритроциты человека группы 0 или морской свинки.
2. <a id="p100198"></a>Физиологический раствор с ФСБР (0,01 М ФСБР, pH = 7,2). Должен быть холодным. Хранить при температуре 4 °C и во время использования держать на льду.
3. <a id="p100199"></a>Образцы сывороток, обработанных RDE.
4. <a id="p100200"></a>Полистироловый 96-луночный микропланшет с V-образным дном.
5. <a id="p100201"></a>Стерильные пипетки.
6. <a id="p100202"></a>Одноразовые наконечники для многоканальных пипеток.
7. <a id="p100203"></a>Микроцентрифужные пробирки.

<a id="p100204"></a>Тестирование неспецифических агглютининов
(работа в ламинарном боксе II класса биобезопасности!)

1. <a id="p100205"></a>Разделите планшет с V-образным дном пополам, прочертив линию маркером со стойкими чернилами между рядами D и E. Лунки рядов A и E будут служить для внесения в них сывороток. Сыворотки из ряда A будут тестироваться между рядами A и D. Сыворотки из ряда E будут тестироваться между рядами E и H.
2. <a id="p100206"></a>Добавьте 25 мкл холодного ФСБР в лунки от ряда B до ряда D (с B1 - B10 до D1 - D10) для сывороток, которые будут протестированы в планшете торможения гемагглютинации N 1, и в лунки от ряда F до ряда H (с F1 - F10 до H1 - H10) для сывороток, которые будут протестированы в планшете торможения гемагглютинации N 2.
3. <a id="p100207"></a>Добавьте по 50 мкл каждой сыворотки в лунки A1 - A10 и E1 - E10, соответствующие пронумерованным колонкам. В каждом планшете будет содержаться 22 образца сывороток.
4. <a id="p100208"></a>Произведите серию двукратных разведений, перенося 25 мкл сыворотки из первого ряда в последующие ряды. Другими словами, перенесите из A в B, из B в C и из C в D. Удалите 25 мкл после ряда D. Также перенесите 25 мкл из E в F, из F в G, из G в H. Удалите 25 мкл после ряда H.
5. <a id="p100209"></a>Добавьте 25 мкл холодного ФСБР во все лунки, содержащие сыворотки; колонки 1 - 10.
6. <a id="p100210"></a>Добавьте 50 мкл холодного ФСБР в колонку 12 на планшете в качестве контроля эритроцитов. Колонка 11 остается пустой.
7. <a id="p100211"></a>Слегка постучите по планшету, чтобы сыворотки хорошо перемешались с ФСБР.
8. <a id="p100212"></a>Добавьте 50 мкл 0,5%-х эритроцитов во все лунки, кроме 11-й колонки.
9. <a id="p100213"></a>Слегка постучите по планшету для лучшего перемешивания.
10. <a id="p100214"></a>Выдержите при комнатной температуре в течение 30 минут, чтобы эритроциты смогли осесть.
11. <a id="p100215"></a>Наклоните планшет под углом от 45° до 60°. Осевшие эритроциты в колонке 12 должны "потечь", напоминая слезу, под воздействием гравитации. Дождитесь, пока эти эритроциты не перестанут течь, и после этого запишите, в каких сыворотках произошла агглютинация эритроцитов. Агглютинированные эритроциты не "текут" и не образуют капли наподобие слезы.
12. <a id="p100216"></a>Образцы сывороток с агглютинированными эритроцитами в лунках с разведением сыворотки 1:20 или больше должны быть адсорбированы с эритроцитами до тестирования в РТГА. Если агглютинация наблюдается только в первой лунке - разведение сыворотки 1:10, - тогда адсорбция необязательна.

<a id="p100217"></a>Адсорбция сывороток с эритроцитами
(работа в ламинарном боксе II класса биобезопасности!)

1. <a id="p100218"></a>Смешайте в микроцентрифужной пробирке 100 мкл уплотненных эритроцитов с 400 мкл сыворотки, обработанной RDE.
2. <a id="p100219"></a>Осторожно переверните, чтобы перемешать содержимое, и выдержите 30 минут при температуре 4 °C.
3. <a id="p100220"></a>Снова осторожно переверните и выдержите еще 30 минут при температуре 4 °C.
4. <a id="p100221"></a>Центрифугируйте в микроцентрифуге Эппендорф при 600? g в течение 5 минут.
5. <a id="p100222"></a>Аккуратно соберите сыворотку, не затрагивая эритроциты.

<a id="p100223"></a>Определение титра гемагглютинина вируса гриппа

<a id="p100224"></a>Материалы

1. <a id="p100225"></a>0,5%-я суспензия эритроцитов человека группы 0 или морской свинки в ФСБР.
2. <a id="p100226"></a>Физиологический раствор с ФСБР (0,01 М ФСБР, pH = 7,2). ФСБР необходимо хранить при температуре 4 °C.
3. <a id="p100227"></a>Антиген вируса гриппа.
<a id="p100228"></a>Примечание. Антиген вируса гриппа должен храниться при температуре -70 °C в аликвотах одноразового использования. Быстро разморозьте антиген вируса незадолго до использования и положите на лед. После работы все остатки антигена вируса гриппа должны быть утилизированы. Никогда не используйте размороженный и повторно замороженный антиген вируса гриппа.

4. <a id="p100229"></a>Полистироловый 96-луночный микропланшет с V-образным дном.
5. <a id="p100230"></a>Стерильные пипетки, одноразовые наконечники для многоканальных пипеток.

<a id="p100231"></a>Процедура

1. <a id="p100232"></a>На V-образных планшетах подпишите названия двух антигенов вирусов, которые вы будете использовать в тесте. Каждый антиген вируса тестируется дважды.
2. <a id="p100233"></a>Добавьте 50 мкл холодного ФСБР в лунки со 2-го по 12-й в рядах A и B для первого антигена и в лунки со 2-й по 12-ю в рядах D и E для второго антигена.
3. <a id="p100234"></a>Добавьте 50 мкл холодного ФСБР во весь ряд H. Этот ряд будет выполнять функцию контроля эритроцитов.
4. <a id="p100235"></a>Добавьте 100 мкл первого антигена для тестирования в лунки A1 и B1. Добавьте 100 мкл второго тестируемого антигена в лунки D1 и E1.
5. <a id="p100236"></a>Проведите серию двукратных разведений, перенеся 50 мкл из первой лунки в каждую последующую до 12-й лунки. Из 12-й лунки удалите 50 мкл.
6. <a id="p100237"></a>Добавьте 50 мкл 0,5%-й суспензии эритроцитов во все лунки в рядах A, B, D, E и H на планшете.
7. <a id="p100238"></a>Аккуратно постучите по планшету, чтобы перемешать содержимое.
8. <a id="p100239"></a>Выдержите при комнатной температуре или при 4 °C в течение 30 минут.
9. <a id="p100240"></a>Определите титры гемагглютининов, наклонив планшет под углом от 45° до 60°. Осевшие эритроциты в ряду H должны "потечь" и образовать каплю. Дождитесь, пока эти эритроциты не перестанут течь, после чего отметьте те лунки, в которых эритроциты образовали "пуговки" и потекли. Наибольшее разведение антигена, которое дает полную гемагглютинацию ("зонтик"), считается титром гемагглютинина.
10. <a id="p100241"></a>Разведите антиген вируса в холодном ФСБР таким образом, чтобы приготовить рабочий раствор, содержащий 8 ГАЕ/50 мкл. Например, у Вас получился титр HA, равный 160. Разделите его на 8, получите 20. Следовательно, необходимо разбавить исходный вирусный антиген в 20 раз, т.е. смешать 1 часть антигена с 19 частями холодного ФСБР.
11. <a id="p100242"></a>Убедитесь в том, что разведенный антиген содержит 8 ГАЕ на 50 мкл, проведя вторую реакцию гемагглютинации (РГА), как описано выше. Титр вирусного антигена должен равняться 8. Если у Вас получилось другое число, использовать этот рабочий раствор антигена нельзя!
12. <a id="p100243"></a>Храните рабочее разведение антигена на льду и используйте в тот же день.
<a id="p100244"></a>Примечание. Стандартное рабочее разведение вирусного антигена должно иметь титр HA, равный 8 ГАЕ в 50 мкл. Это то же самое, что и 4 ГАЕ в 25 мкл. При таком титре наблюдается гемагглютинация в первых четырех лунках при титровании антигена в РГА. Если полная гемагглютинация наблюдается в 5 лунках, антиген имеет титр 16 ГАЕ/50 мкл и тестовый антиген должен быть разбавлен в 2 раза. И наоборот, если гемагглютинация наблюдается только в 3 лунках, то антиген имеет титр 4 ГАЕ/50 мкл. В этом случае к рабочему разведению антигена надо добавить такой же объем исходного антигенного раствора, какой был взят вначале. Это удвоит концентрацию антигена в рабочем разведении, чтобы дать титр 8 ГАЕ/50 мкл. Если после 1 - 2 исправлений у вас так и не получился титр 8 ГАЕ/50 мкл, процедуру приготовления рабочего раствора антигена лучше повторить сначала с постановки реакции гемагглютинации.

<a id="p100245"></a>Реакция торможения гемагглютинации (протокол)

<a id="p100246"></a>Материалы

1. <a id="p100247"></a>0,5%-я суспензия эритроцитов в ФСБР.
2. <a id="p100248"></a>Физиологический раствор с ФСБР (0,01 М ФСБР, pH = 7,2). ФСБР необходимо хранить при температуре 4 °C.
3. <a id="p100249"></a>Диагностикумы гриппозные сухие для РТГА (применять согласно инструкции изготовителя).
4. <a id="p100250"></a>Вирус гриппа, инактивированный бета-пропиолактоном (BPL-антиген). Аликвоты аллантоисной или культуральной антигенсодержащей жидкости хранить при -70 °C.
5. <a id="p100251"></a>Образцы сывороток, обработанные RDE, тестированные на неспецифические агглютинины эритроцитов.
<a id="p100252"></a>Примечание. Сыворотка должна быть заморожена один раз и храниться при температуре от -20 до -70 °C.

6. <a id="p100253"></a>Полистироловый 96-луночный микропланшет с V-образным дном. В каждом планшете может быть протестировано 11 образцов сывороток.
7. <a id="p100254"></a>Стерильные пипетки.
8. <a id="p100255"></a>Конические центрифужные пробирки для разведения антигена.
9. <a id="p100256"></a>Одноразовые наконечники для многоканальных пипеток.

<a id="p100257"></a>Процедура

1. <a id="p100258"></a>Быстро разморозьте сыворотки на водяной бане при 37 °C. Как только сыворотки растают, держите их на льду во время работы.
2. <a id="p100259"></a>Пронумеруйте планшеты и подпишите названия двух тестируемых антигенов. Сыворотки тестируются в повторах на двух идентичных планшетах.
3. <a id="p100260"></a>Добавьте 25 мкл холодного ФСБР в ряды от B до H (от B1 - B11 до H1 - H11).
4. <a id="p100261"></a>Добавьте 50 мкл каждого образца сывороток в первую лунку (A1 - A10).
5. <a id="p100262"></a>Внесите 50 мкл положительного контроля в лунку A11 одного планшета и отрицательного контроля в лунку A11 второго планшета.
6. <a id="p100263"></a>Проведите серию двукратных разведений, перемещая 25 мкл сыворотки из A1 - 11 в лунки последующих рядов. Последние 25 мкл сыворотки из ряда H утилизируйте.
7. <a id="p100264"></a>Добавьте 25 мкл рабочего раствора антигена, содержащего 4 ГАЕ, в лунки, содержащие сыворотки. Обратите внимание на то, что это то же самое, что 50 мкл, содержащих 8 ГАЕ.
8. <a id="p100265"></a>Аккуратно постучите по планшету, чтобы перемешать содержимое.
9. <a id="p100266"></a>Выдержите при комнатной температуре в течение 30 минут.
10. <a id="p100267"></a>Добавьте 50 мкл ФСБР в колонку 12, что послужит контролем эритроцитов.
11. <a id="p100268"></a>Добавьте 50 мкл 0,5%-й суспензии эритроцитов в каждую лунку.
12. <a id="p100269"></a>Аккуратно постучите по планшету, чтобы перемешать содержимое.
13. <a id="p100270"></a>Выдержите при комнатной температуре или при 4 °C в течение 30 минут.
14. <a id="p100271"></a>Результат оценивают через 30 минут инкубирования, наклонив планшет под углом от 45° до 60°. Осевшие эритроциты в колонке 12 должны "потечь" и образовать каплю. Дождитесь, пока эти эритроциты не перестанут течь, после чего отметьте те лунки, в которых эритроциты образовали "пуговки" и потекли так же, как в 12-й колонке. Лунки, где произошло полное торможение гемагглютинации, будут выглядеть как контрольные.
<a id="p100272"></a>Если произошло взаимодействие антиген/антитело, гемагглютинация эритроцитов будет ингибирована. Для записи данных следует пользоваться следующими знаками: знак "+" - для полной гемагглютинации ("зонтик"), знак "+/-" - для частичной гемагглютинации и знак "-" - для торможения гемагглютинации ("пуговка"). Титр в РТГА соответствует наибольшему разведению сыворотки, которое полностью тормозит гемагглютинацию (последняя "пуговка"). Необходимо внимательно следить за инкубацией. Если реакция проведена при комнатной температуре, результат следует прочитать сразу после того, как эритроциты в контроле полностью осядут. Если реакция проведена при температуре 4 °C, результат можно прочитать в течение 0,5 - 1 часа после того, как эритроциты в контроле полностью осядут.
15. <a id="p100273"></a>Титр сыворотки в РТГА - это разведение сыворотки в последней лунке с полным торможением гемагглютинации, например, 1:640. Обратный титр сыворотки - это величина, обратная титру, например, 640.





<a id="p100274"></a>Приложение 3

<a id="p100275"></a>РАСЧЕТ СРЕДНЕГЕОМЕТРИЧЕСКИХ ТИТРОВ АНТИТЕЛ (СГТ)

<a id="p100276"></a>Для проведения расчета СГТ титр антител в РТГА менее 1:10 принимают равным 1:5. Титр антител в РТГА равный или более 1:1 280 принимают равным 1:1 280. Для определения СГТ обратные титры антител переводят в логарифмы по основанию 2, суммируют и делят на число исследованных сывороток. Полученную в результате деления цифру используют как показатель степени числа 2, а число, получившееся после возведения 2 в эту степень, представляет собой обратный среднегеометрический титр сывороток исследуемой группы добровольцев.
<a id="p100277"></a>Образец расчета СГТ:

<a id="p100278"></a> ![рис. 2](https://i.bukva.ai/3rbxV84V/img_1.png) 

<a id="p100279"></a>Из 148 исследованных сывороток 10 имели титр менее 1:10; 20 - титр 1:10; 68 - титр 1:20; 40 - титр 1:40 и 10 - титр 1:80. Переведя абсолютные значения титров в логарифмы по основанию 2, получим следующую величину среднегеометрического титра (СГТ) антител:
<a id="p100280"></a> $\frac{(2,3 \cdot 10) + (3,3 \cdot 10) + (4,3 \cdot 10) + (5,3 \cdot 10) + (6,3 \cdot 10)}{148} = \frac{661}{148} = 4,5.$ Обратный СГТ = 24,5 = 22. СГТ = 1:22.





<a id="p100281"></a>Приложение 4

<a id="p100282"></a>ОЦЕНКА ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВАКЦИН

<a id="p100283"></a>При оценке иммунологической эффективности вакцин против гриппа пользуются критериями, определенными Европейским медицинским агентством (COMMITTEE FOR PROPRIETARY MEDICINAL PRODUCTS (CPMP); http://www.ema.europa.eu/docs/en__GB/documnent_ library/Scientific_guideline/2009/09WC500003945.pdf).
<a id="p100284"></a>Определяют фактор сероконверсии, уровень сероконверсии и уровень серопротекции.
- <a id="p100285"></a>Фактор сероконверсии - кратность нарастания среднегеометрического титра (СГТ) антител после вакцинации по сравнению со среднегеометрическим титром до вакцинации;
- <a id="p100286"></a>Уровень сероконверсии - суммарная доля лиц, выраженная в процентах, с повышением титра от серонегативного (< 1:40) до серопозитивного (>= 1:40) или с четырехкратным приростом титра антител после вакцинации, если до вакцинации титр был >= 1:40;
- <a id="p100287"></a>Уровень серопротекции - доля лиц, выраженная в процентах, с защитным титром антител >= 1:40 через 21 - 28 дней после вакцинации.
<a id="p100288"></a>Измерение титров антител проводится одновременно в парных сыворотках крови, взятых непосредственно до и через один месяц после вакцинации.
<a id="p100289"></a>По крайней мере, один из параметров должен отвечать требованиям, представленным в таблице.


<table>
<colgroup><col width="49%"><col width="25%"><col width="26%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100290"></a>Параметры иммуногенности вакцины гриппа</td><td colspan="2"><a id="p100291"></a>Возраст</td></tr>
<tr><td><a id="p100292"></a>18 - 60 лет</td><td><a id="p100293"></a>старше 60 лет</td></tr>
<tr><td><a id="p100294"></a>Фактор сероконверсии</td><td><a id="p100295"></a>более 2,5</td><td><a id="p100296"></a>более 2,0</td></tr>
<tr><td><a id="p100297"></a>Уровень сероконверсии</td><td><a id="p100298"></a>более 40%</td><td><a id="p100299"></a>более 30%</td></tr>
<tr><td><a id="p100300"></a>Уровень серопротекции</td><td><a id="p100301"></a>более 70%</td><td><a id="p100302"></a>более 60%</td></tr>
</table>






<div align="center">

<a id="p100303"></a>**Приложение 5**

</div>


<a id="p100304"></a>ОЦЕНКА ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВАКЦИН

<a id="p100305"></a>Оценка профилактической эффективности вакцин против гриппа проводится путем расчета индекса эффективности и коэффициента эффективности.
<a id="p100306"></a>Индекс эффективности: $K = \frac{b}{a}$ , где
<a id="p100307"></a>a - доля заболевших гриппом среди вакцинированных;
<a id="p100308"></a>b - доля заболевших гриппом среди невакцинированных.
<a id="p100309"></a>Коэффициент эффективности: $E = 100\% \frac{b - a}{b}$ , где

<div align="right">

<a id="p100310"></a>a - доля заболевших гриппом среди вакцинированных;

</div>

<div align="center">

<a id="p100311"></a>**b - доля заболевших гриппом среди невакцинированных.**

</div>






<div align="center">

<a id="p100312"></a>**Приложение 6**

<a id="p100313"></a>ТАБЛИЦЫ ДЛЯ ОФОРМЛЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

</div>


<a id="p100314"></a>Таблица 1

<a id="p100315"></a>Результаты РТГА для серомониторинга гриппа


<table>
<colgroup><col width="11%"><col width="5%"><col width="12%"><col width="6%"><col width="8%"><col width="12%"><col width="10%"><col width="8%"><col width="11%"><col width="11%"><col width="6%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100316"></a>Субъект Российской Федерации</td><td rowspan="2"><a id="p100317"></a>N п/п</td><td rowspan="2"><a id="p100318"></a>ФИО или идентификационный код</td><td rowspan="2"><a id="p100319"></a>Пол</td><td rowspan="2"><a id="p100320"></a>Возраст</td><td rowspan="2"><a id="p100321"></a>Наличие вакцинации против гриппа за последние 2 года</td><td rowspan="2"><a id="p100322"></a>Наличие контакта с животными или птицей</td><td rowspan="2"><a id="p100323"></a>Дата сбора образца сыворотки</td><td colspan="3"><a id="p100324"></a>Титр в РТГА с антигеном (в обратных величинах)</td></tr>
<tr><td><a id="p100325"></a>A (H1N1)</td><td><a id="p100326"></a>A (H3N2)</td><td><a id="p100327"></a>B</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
</table>


<a id="p100328"></a>    "___" __________ 20_ г.                Руководитель лаборатории

<a id="p100329"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100330"></a>Учет заболеваемости гриппом лиц,

</div>

вакцинированных против гриппа


<table>
<colgroup><col width="7%"><col width="9%"><col width="11%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="4%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100331"></a>Субъект РФ</td><td><a id="p100332"></a>ФИО или идентификационный код</td><td><a id="p100333"></a>Наименование вакцины</td><td colspan="3"><a id="p100334"></a>Возбудитель (ПЦР)</td><td colspan="9"><a id="p100335"></a>Состояние противогриппозного иммунитета после вакцинации (РТГА)</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td><a id="p100336"></a>H1N1</td><td><a id="p100337"></a>H3N2</td><td><a id="p100338"></a>B</td><td colspan="3"><a id="p100339"></a>H1N1</td><td colspan="3"><a id="p100340"></a>H3N2</td><td colspan="3"><a id="p100341"></a>B</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td><a id="p100342"></a>&lt; 1:20</td><td><a id="p100343"></a>1:20 - 1:40</td><td><a id="p100344"></a>&gt; 1:40</td><td><a id="p100345"></a>&lt; 1:20</td><td><a id="p100346"></a>1:20 - 1:40</td><td><a id="p100347"></a>&gt; 1:40</td><td><a id="p100348"></a>&lt; 1:20</td><td><a id="p100349"></a>1:20 - 1:40</td><td><a id="p100350"></a>&gt; 1:40</td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
</table>


<a id="p100351"></a>    "___" __________ 20_ г.                Руководитель лаборатории

<div align="center">

<a id="p100352"></a>Таблица 3

</div>


<a id="p100353"></a>Оценка эффективности вакцинации против гриппа


<table>
<colgroup><col width="7%"><col width="10%"><col width="9%"><col width="8%"><col width="6%"><col width="5%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="8%"><col width="8%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100354"></a>Субъект РФ</td><td rowspan="2"><a id="p100355"></a>Наименование вакцины</td><td rowspan="2"><a id="p100356"></a>Антигенная формула вируса гриппа <a href="#p100400">&lt;*&gt;</a></td><td rowspan="2"><a id="p100357"></a>Количество обследованных сывороток</td><td colspan="9"><a id="p100358"></a>Количество сывороток с указанными титрами антител</td><td rowspan="2"><a id="p100359"></a>Доля <a href="#p100401">&lt;**&gt;</a> серонегативных лиц, %</td><td rowspan="2"><a id="p100360"></a>Среднегеометрические титры антител</td></tr>
<tr><td><a id="p100361"></a>&lt; 1:10 (2,3 log2)</td><td><a id="p100362"></a>1:10 (3,3 log2)</td><td><a id="p100363"></a>1:20 (4,3 log2)</td><td><a id="p100364"></a>1:40 (5,3 log2)</td><td><a id="p100365"></a>1:80 (6,3 log2)</td><td><a id="p100366"></a>1:160 (7,3 log2)</td><td><a id="p100367"></a>1:320 (8,3 log2)</td><td><a id="p100368"></a>1:640 (9,3 log2)</td><td><a id="p100369"></a>&gt;= 1:1280 (10,3 log2)</td></tr>
<tr><td colspan="15"><a id="p100370"></a>Титр противогриппозных антител в популяции до вакцинации</td></tr>
<tr><td rowspan="9"></td><td rowspan="3"></td><td><a id="p100371"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100372"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100373"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100374"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100375"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100376"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100377"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100378"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100379"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="15"><a id="p100380"></a>Титр противогриппозных антител у привитых через 1 месяц после вакцинации</td></tr>
<tr><td rowspan="9"></td><td rowspan="3"></td><td><a id="p100381"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100382"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100383"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100384"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100385"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100386"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100387"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100388"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100389"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="15"><a id="p100390"></a>Титр противогриппозных антител в популяции после окончания эпидсезона</td></tr>
<tr><td rowspan="9"></td><td rowspan="3"></td><td><a id="p100391"></a>A(H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100392"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100393"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100394"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100395"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100396"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="3"></td><td><a id="p100397"></a>A (H1N1)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100398"></a>A (H3N2)</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100399"></a>B</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="15"><a id="p100400"></a><a id="p100401"></a>&lt;*&gt; Используются только диагностические штаммы, рекомендованные для производства вакцины.<br>&lt;**&gt; С титром антител 1:20 и ниже.</td></tr>
</table>


<a id="p100402"></a>    "___" __________ 20_ г.                Руководитель лаборатории



<a id="p100403"></a>

---