МУК 4.1.4085-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика определения биоэлементов в пробах выдыхаемого воздуха и сыворотки крови спектральными методами. Методические указания по методам контроля
Актуально на 02.11.2026.
Как цитировать: "МУК 4.1.4085-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика определения биоэлементов в пробах выдыхаемого воздуха и сыворотки крови спектральными методами. Методические указания по методам контроля". МУК 4.1.4085-24. https://bukva.ai/docs/metodika-muk-4-1-4085-24
(утв. Роспотребнадзором 25.12.2024)
Примечание
Документ введен в действие с 25.03.2025.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 25 декабря 2024 года
Дата введения 25 марта 2025 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЭЛЕМЕНТОВ В ПРОБАХ ВЫДЫХАЕМОГО ВОЗДУХА И СЫВОРОТКИ КРОВИ СПЕКТРАЛЬНЫМИ МЕТОДАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4085-24
1. Разработаны ФБУН «Екатеринбургский медицинский-научный центр профилактики и охраны здоровья рабочих промпредприятий» Роспотребнадзора (Т.Н. Штин, В.Б. Гурвич, Р.Р. Сахаутдинова, А.В. Жидеев, А.А. Мкртчян, А.К. Абдрахманова).
2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 25 декабря 2024 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок измерения массовой концентрации маркеров воспалительного клеточного стресса в организме (диоксид углерода в выдыхаемом воздухе и железа, связанного с трансферрином в сыворотке крови) спектральными методами. Нижний предел количественного определения диоксида углерода в выдыхаемом воздухе равен: массовая концентрация — 3,06 г/м3; объемная доля — 0,16%; парциальное давление — 0,17 кПа/1,28 мм. рт. ст. Нижний предел количественного определения железа в сыворотке крови равен 1,0 мг/дм3. Диапазоны измерений определяемых биоэлементов, выделяемых из клинических образцов, указаны в табл. 1, 2.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
Диапазоны измерений массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода в пробах выдыхаемого воздуха
Диапазоны измерений массовой концентрации железа в пробах сыворотки крови
| Определяемый элемент | Диапазон измерений массовой концентрации элемента (X), мг/дм3 |
|---|---|
| Железо | От 1,0 до 200 включ. |
II. Показатели точности измерений
2.1. Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих.
Методы измерений, содержащиеся в настоящих МУК, обеспечивают получение результатов измерений с погрешностями, не превышающими значений, приведенных в табл. 3, 4.
Диапазоны измерений массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода в пробах выдыхаемого воздуха, значения показателей повторяемости, внутрилабораторной прецизионности, правильности и точности измерений при доверительной вероятности P = 0,95
Диапазон измерений массовой концентрации железа в пробах крови (в сывороточном трансферрине), значения показателей повторяемости, внутрилабораторной прецизионности, правильности и точности измерений при доверительной вероятности P = 0,95
III. Методы измерений
1.1. Массовую концентрацию, объемную долю и (или) парциальное давление диоксида углерода в пробах выдыхаемого воздуха определяют методом инфракрасной спектрометрии (далее — ИК-спектрометрия). Метод ИК-спектрометрии основан на: высокотемпературном каталитическом окислении соединений углерода, находящихся в растворе, поглотившим эти соединения из пропущенного через него фиксированного объема воздуха; сгорании углеродсодержащих веществ в трубке сжигания прибора; продувки продуктов сгорания в кювету бездисперсионного инфракрасного детектора; регистрации аналоговых сигналов обнаружения; определении массовых концентраций общего и органического углерода по установленной градуировочной характеристике (далее — ГХ); расчете градиента массовой концентрации неорганического углерода. Мешающие влияния от сопутствующих компонентов в выдыхаемом воздухе устраняются в процессе анализа.
1.2. Массовую концентрацию железа в сывороточном трансферрине определяют методом атомно-эмиссионной спектрометрии с микроволновой генерацией плазмы (далее — МП-АЭС). Метод МП-АЭС основан на: измерении интенсивности излучения (эмиссии) возбужденных в СВЧ-плазме азота атомов и ионов определяемого элемента после ввода раствора пробы в систему распыления; превращения его в аэрозоль; перемещения аэрозоля в плазму через центральный канал плазменной горелки; атомизации и возбуждения аналита; фокусирования излучения оптической системой спектрометра на входной щели; разложения излучения по длинам волн дифракционной решеткой; регистрации излучения определенной длины волны с последующим определением массовой концентраций железа по установленной ГХ. Мешающие влияния от матричных компонентов пробы, устраняется в процессе анализа при помощи программного обеспечения спектрометра.
IV. Средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование
4.1. При выполнении измерений массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода в пробах выдыхаемого воздуха применяются средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование, приведенные в табл. 5.
Средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование
| Наименование средств измерений, стандартных образцов, реактивов, испытательного оборудования, вспомогательных устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование | Метрологические, технические характеристики |
| 1 | 2 | 3 |
| Средства измерений | ||
| Анализатор углерода любого типа с опцией очистки воздуха, снабженный окислительным реактором, обеспечивающим окисление неорганических соединений углерода, находящихся в анализируемой пробе, кислородом в присутствии катализатора при температуре от 550 °C до 1000 °C; детектором инфракрасного излучения; устройствами для регистрации и обработки результатов испытаний, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон измерений массовой концентрации углерода: от 0 до 30000 мг/дм3. Предел допускаемого СКО случайной составляющей погрешности, % приведенной: в диапазоне от 0 до 3300 мкг/дм3 — 1,5; относительной: в диапазоне от 3300 до 30000 мкг/дм3 — 1,5. Предел детектирования, массовая концентрация общего углерода — 50 мкг/дм3 |
| Весы электронные лабораторные высокого (II) класса точности, зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | Наибольший предел взвешивания (НПВ 1/2), г: 210; наименьший предел взвешивания (НмПВ), г: 0,02; дискретность отсчета (d 1/2), мг: 1 |
| Весы электронные лабораторные специального класса точности, зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | Наибольший предел взвешивания (НПВ 1/2), г: 42/120; наименьший предел взвешивания (НмПВ), г: 0,001; дискретность отсчета (d 1/2), мг: 0,01/0,1 |
| Универсальный портативный прибор для измерения силы тока, напряжения и сопротивления любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Универсальный портативный прибор для измерения атмосферного давления, температуры, относительной влажности воздуха любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Пробоотборник (насос) для отбора проб воздуха, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Скорость прокачиваемого воздуха: (0,2 — 1,0) дм3/мин. Допускаемая основная относительная погрешность каналов с ротаметрами: с расходом (0,2 — 1,0) — +/- 7% |
| Секундомер, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Класс точности 3, цена деления 0,2 с |
| Термометр, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон измерений температур от 0 до 100 °C, цена деления 1 °C, предел допускаемой погрешности +/- 1 °C |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-1 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 1 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,015\text{см}^{3} |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-5 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 5 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,03\text{см}^{3} |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-10 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,04\text{см}^{3} |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-50 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 50 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,10\text{см}^{3} |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-1 | ГОСТ 29227-91 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 1 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,01\text{см}^{3} |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-10 | ГОСТ 29227-91 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,10\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-100-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 100 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,20\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-250-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 250 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,30\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-500-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 500 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,50\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-1000-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 1000 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,80\text{см}^{3} |
| Цилиндр 1-250-2 | ГОСТ 1770-74 | Цилиндр исполнения 1, вместимостью 250 см3, 2-го класса точности. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 2,0\text{см}^{3} |
| Цилиндр 1-500-2 | ГОСТ 1770-74 | Цилиндр исполнения 1, вместимостью 500 см3, 2-го класса точности. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 5,0\text{см}^{3} |
| Стандартные образцы | ||
| Стандартный образец состава калия фталевокислого кислого (бифталата калия) 1-го разряда | ГОСТ 8.315-2019 | Аттестованное значение: 99,989%. Границы абсолютной погрешности аттестованного значения СО при P = 0,95: не более +/- 0,028% |
| Реактивы | ||
| Кислота азотная | ГОСТ 4461-77 | Чистота не ниже II группы, 2 подгруппы, ГОСТ 13867-68 |
| Кислота соляная | ГОСТ 3118-77 | Чистота не ниже II группы, 2 подгруппы, ГОСТ 13867-68 |
| Натрия гидроокись | ГОСТ 4328-77 | Чистота не ниже II группы, 3 подгруппы, ГОСТ 13867-68 |
| Натрий углекислый (карбонат натрия) | ГОСТ 83-79 | Чистота не ниже II группы, 3 подгруппы, ГОСТ 13867-68 |
| Натрий углекислый кислый | ГОСТ 4201-79 | Чистота не ниже II группы, 3 подгруппы, ГОСТ 13867-68 |
| Вода дистиллированная | ГОСТ Р 58144-2018 | - |
| Вода дистиллированная, не содержащая диоксида углерода | ГОСТ 4517-2016 | - |
| Испытательное оборудование | ||
| Электропечь сопротивления высокотемпературная лабораторная SNOL 13/110 | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Рабочий диапазон температур: от 50 °C до 1100 °C |
| Сушильный шкаф лабораторный | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Рабочий диапазон температур от 50 °C до 200 °C |
| Вспомогательное оборудование | ||
| Установка для очистки воды | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Ультразвуковая ванна | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Склянка СН-1-200 (склянка Дрекселя) | ГОСТ 25336-82 | Номинальная вместимость 200 см3 |
| Колба Кн-1-1000-29/32 ТС | ГОСТ 25336-82 | Колба типа Кн исполнения 1, номинальной вместимостью 1000 см3, с взаимозаменяемым конусом 29/32, из термически стойкого стекла группы ТС |
| Пластиковая бутыль (пластиковая банка) с крышкой | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Стеклянная склянка | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Стакан фарфоровый № 7 | ГОСТ 9147-80 | Номинальная вместимость 1000 см3 |
| Стеклянная трубка | - | - |
| Пробка корковая, конусная | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Пакет для отбора проб воздуха/газовых смесей в комплекте со вспомогательными материалами | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Номинальная вместимость 10 дм3 |
| Зажим для носа | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Трубка силиконовая | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Внутренний диаметр 7 мм |
| Перчатки медицинские диагностические одноразовые | ГОСТ Р 52239-2004 | Гладкие, «неопудренные» |
| Стакан В-1-1000 ТС | ГОСТ 25336-82 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 1000 см3, из термически стойкого стекла группы ТС |
| Эксикатор 2-190 ХС | ГОСТ 25336-82 | Эксикатор исполнения 2, диаметром корпуса 190 мм |
| Вставка для эксикатора 2-175 | ГОСТ 9147-80 | Вставка для эксикатора исполнения 2, диаметром 175 мм |
| Силикагель | ГОСТ 3956-76 | Гранулированный мелкопористый, марки КСМГ, высшего сорта |
| Универсальная аэрозольная смазка | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Индикаторная бумага | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | pH = (1 : 10) ед. pH и pH = (7 : 14) |
| Бумага фильтровальная лабораторная ФМ-1 | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Размер пор от 3 мкм до 5 мкм |
| Шкаф лабораторный вытяжной | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Холодильник бытовой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Ступка агатовая | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Плитка электрическая | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Часы бытовые | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Устройство для отбора проб анализируемого воздуха в специализированные пакеты | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Примечание: - допускается использование других средств измерений утвержденных типов с аналогичными или лучшими техническими и метрологическими характеристиками; - допускается использование других стандартных образцов утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается использование другого испытательного оборудования с аналогичными или лучшими техническими и метрологическими характеристиками; - допускается применение вспомогательного оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками; - допускается применение других реактивов с характеристиками не хуже указанных; - метрологическое обеспечение средств измерений осуществляют организации, аккредитованные на данный вид деятельности. | ||
4.2. При выполнении измерений массовой концентрации железа в сывороточном трансферрине применяются средства измерений, стандартные образцы, реактивы, вспомогательное оборудование, приведенные в табл. 6.
Средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование
| Наименование средств измерений, стандартных образцов, реактивов, испытательного оборудования, вспомогательных устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное и вспомогательное оборудование | Метрологические, технические характеристики |
| 1 | 2 | 3 |
| Средства измерений | ||
| Спектрометр атомно-эмиссионный с микроволновой генерацией плазмы зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Спектральный диапазон, нм: 178 — 780. Спектральное разрешение (на уровне 50% от интенсивности пика), нм: не более 0,05. Пределы обнаружения контрольных элементов (по критерию 3\sigma ), мкг/дм3: - Ba (\lambda = 614,171\text{нм}) — не более 2; - Mn (\lambda = 403,076\text{нм}) — не более 7,5; - Cu (\lambda = 324,754\text{нм}) — не более 15. Относительное среднеквадратичное отклонение (ОСКО) интенсивности спектральных линий контрольных элементов (Ba, Mn, Cu), %: не более 3,0 |
| Универсальный портативный прибор для измерения силы тока, напряжения и сопротивления любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Термометр, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон измерений температур от 0 до 100 °C, цена деления 1 °C, предел допускаемой погрешности +/- 1 °C |
| Универсальный портативный прибор для измерения атмосферного давления, температуры, относительной влажности воздуха любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-10 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,04\text{см}^{3} |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-5 | ГОСТ 29169-91 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 5 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,03\text{см}^{3} |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-1 | ГОСТ 29227-91 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 1 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,01\text{см}^{3} |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-5 | ГОСТ 29227-91 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 5 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,05\text{см}^{3} |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-10 | ГОСТ 29227-91 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,10\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-10-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 10 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,05\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-50-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 50 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,12\text{см}^{3} |
| Колба мерная 2-100-2 | ГОСТ 1770-74 | Вместимость 100 см3, предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,20\text{см}^{3} |
| Стандартные образцы | ||
| Стандартные образцы состава растворов ионов элементов (для Fe) | ГОСТ 8.315-2019 | Аттестованное значение: 1,00 г/дм3. Границы относительной погрешности аттестованного значения стандартного образца при P = 0,95: не более +/- 1,0% |
| Реактивы | ||
| Вода дистиллированная | ГОСТ Р 58144-2018 | - |
| Вспомогательное оборудование | ||
| Генератор азота из воздуха | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Ультразвуковая ванна | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Пластиковая бутыль (пластиковая банка) с крышкой | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Перчатки медицинские диагностические одноразовые | ГОСТ Р 52239-2004 | Гладкие, «неопудренные» |
| Вакуумная пробирка | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Вместимость 9 см3. Без наполнителя. Цвет кода: красный/белый |
| Аргон | ГОСТ 10157-2016 | Высший сорт |
| Шкаф лабораторный вытяжной | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Холодильник бытовой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - |
| Примечание: - допускается использование других средств измерений утвержденных типов с аналогичными или лучшими техническими и метрологическими характеристиками; - допускается использование других стандартных образцов утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается применение вспомогательного оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками; - допускается применение других реактивов с характеристиками не хуже указанных; - метрологическое обеспечение средств измерений (поверку средств измерений) осуществляют организации, аккредитованные на данный вид деятельности. | ||
V. Требования безопасности
5.1. Помещения лаборатории должны соответствовать требованиям пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91, требованиям по электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и требованиям по работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76.
5.2. Санитарно-гигиенические факторы производственной среды в помещениях лаборатории должны соответствовать санитарно-эпидемиологическим требованиям <1>.
<1> СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания», утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 № 2 (зарегистрировано Минюстом России 29.01.2021, регистрационный № 62296), с изменениями, внесенными постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.12.2022 № 24 (зарегистрировано Минюстом России 09.03.2023, регистрационный № 72558).
5.3. К выполнению измерений и обработке результатов допускаются специалисты в соответствии с критериями аккредитации <2>, документами по стандартизации <3>, а также освоившие метод в процессе стажировки.
<2> Пункты 24, 24.1, 24.3, 24.4 критериев аккредитации и перечня документов, подтверждающих соответствие заявителя, аккредитованного лица критериям аккредитации, утвержденных приказом Минэкономразвития России от 26.10.2020 № 707 (зарегистрирован Минюстом России 16.11.2020, регистрационный № 60907), с изменениями, внесенными приказами Минэкономразвития России от 30.12.2020 № 877 (зарегистрирован Минюстом России 29.01.2021, регистрационный № 62281); от 29.10.2021 № 657 (зарегистрирован Минюстом России 30.11.2021, регистрационный № 66068); от 23.01.2023 № 24 (зарегистрирован Минюстом России 20.03.2023, регистрационный № 72626).
<3> Пункт 6.2 ГОСТ ISO/IEC 17025-2019 «Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий», введенного приказом Росстандарта от 15.07.2019 № 385-ст.
VI. Условия выполнения измерений
6.1 При выполнении аналитических работ в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:
- температура окружающего воздуха плюс (20 +/- 5) °C;
- атмосферное давление 84,0 — 106 кПа, 630 — 795 мм рт. ст.;
- относительная влажность воздуха — не более 80%.
6.2. При выполнении аналитических работ в лаборатории системы электропитания должны соответствовать следующим параметрам:
6.3. При подготовке к выполнению измерений и при их проведении необходимо соблюдать условия эксплуатации средств измерений и оборудования, изложенные в руководствах (инструкциях) по эксплуатации.
VII. Выполнение измерений массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода в пробах выдыхаемого воздуха методом ИК-спектрометрии (метод А)
7.1. Метод измерений массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода позволяет оценивать гомеостаз.
VIII. Подготовка к выполнению измерений
8.1 Очистка воды.
8.1.1 Приготовление дистиллированной воды.
Дистиллированную воду получают при помощи установок для очистки воды и применяют в качестве растворителя для приготовления растворов веществ и для обработки лабораторной посуды.
Качество дистиллированной воды должно соответствовать документам по стандартизации <4>.
<4> ГОСТ Р 58144-2018 «Вода дистиллированная Технические условия», введенный приказом Росстандарта от 29.05.2018 № 280-ст.
8.1.2. Приготовление дистиллированной воды, не содержащей диоксида углерода.
Для приготовления растворов веществ, реактивов при проведении испытаний (определений/измерений) используют дистиллированную воду, не содержащую диоксида углерода.
Подготовку воды, соответствующей установленным требованиям, проводят в соответствии с документами по стандартизации <5>.
<5> ГОСТ 4517-2016 «Реактивы. Методы приготовления вспомогательных реактивов и растворов, применяемых при анализе», введенный приказом Росстандарта от 15.11.2016 № 1688-ст.
Для этого дистиллированную воду нагревают в колбе до кипения и кипятят в течение 30 мин (до появления крупных пузырей). Затем колбу закрывают пробкой, в которую вставлена стеклянная трубка, соединенная с помощью силиконовой трубки с промывной банкой из пластика. Банка содержит раствор гидроксида натрия с массовой долей 20% (см. п. 8.3.1).
8.2 Подготовка посуды.
Стеклянную и фарфоровую лабораторную посуду используют для приготовления растворов веществ при определении биоэлементов в анализируемых пробах. Изделия из стекла и фарфора не следует оставлять на длительное время в контакте с растворами.
Все растворы следует хранить в пластиковой посуде. Наиболее пригодна для аналитических целей посуда из инертных материалов (например, полиэтилена, полипропилена).
8.2.1 Подготовка стеклянной посуды.
Всю используемую для анализа проб посуду из стекла промывают раствором азотной кислоты с объемной долей 1:1 (см. п. 8.4.1) в ультразвуковой ванне и трижды ополаскивают дистиллированной водой (см. п. 8.1.1).
8.2.2 Подготовка фарфоровой посуды.
Подготовку фарфоровой посуды проводят в соответствии с п. 8.2.1.
8.2.3 Подготовка пластиковой посуды.
Пластиковую посуду проверяют на наличие загрязнений, анализируя фоновый раствор (см. п. 8.10) методом ИК-спектрометрии.
8.3 Приготовление водных растворов гидроксида натрия.
Процедуру приготовления водных растворов гидроксида натрия следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
8.3.1. Приготовление водного раствора гидроксида натрия с массовой долей 20%, не содержащего карбонатов.
Навеску 100,00 г гидроксида натрия растворяют небольшими порциями при перемешивании в 250 см3 дистиллированной воды, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2), в фарфоровом стакане. После охлаждения раствор переливают в пластиковую посуду (см. п. 8.2), закрывают пробкой и в течение 15 — 20 суток выдерживают до полного осаждения осадка карбоната натрия, нерастворимого в растворе гидроксида натрия указанной концентрации. Для выполнения аналитических работ используют надосадочную жидкость.
Раствор с осадком хранят в плотно закрытой емкости не более 3 мес.
8.3.2. Приготовление водного раствора гидроксида натрия с массовой долей 2%, не содержащего карбонатов (поглотительный раствор).
Раствор гидроксида натрия готовят десятикратным разбавлением водного раствора гидроксида натрия с массовой долей 20% (см. п. 8.3.1) дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2).
Раствор готовят в необходимом количестве и сразу используют во избежание поглощения карбоната натрия из воздуха.
8.4 Приготовление водных растворов минеральных кислот.
Процедуру приготовления водных растворов минеральных кислот следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
8.4.1 Приготовление раствора азотной кислоты с объемной долей 1:1.
Раствор азотной кислоты готовят разбавлением концентрированной кислоты в стакане вместимостью 1000 см3. Для приготовления 500 см3 раствора берут 250,0 см3 концентрированной азотной кислоты и приливают к 250 см3 дистиллированной воды (см. п. 8.1.1).
Приготовленный раствор азотной кислоты тщательно перемешивают.
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) не более 6 мес.
8.4.2 Приготовление раствора соляной кислоты с объемной долей 1:1.
Раствор соляной кислоты (1:1) готовят разбавлением концентрированной кислоты в стакане вместимостью 1000 см3. Для приготовления 500 см3 раствора берут 250,0 см3 концентрированной соляной кислоты и приливают к 250 см3 дистиллированной воды (см. п. 8.1.1).
Приготовленный раствор соляной кислоты тщательно перемешивают.
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) не более 6 мес.
8.4.3. Приготовление раствора соляной кислоты с молярной концентрацией 1 моль/дм3.
В мерную колбу вместимостью 100,00 см3, предварительно заполненную на 1/4 дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2), вносят 9,00 см3 концентрированной соляной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) не более 6 мес.
8.5 Регенерация силикагеля.
Процедуру регенерации силикагеля следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
Силикагель вносят в стакан вместимостью 1000 см3 (масса вносимого силикагеля зависит от объема эксикатора), заливают разбавленной соляной кислотой (1:1) (см. п. 8.4.2) и оставляют на 18 — 20 ч при периодическом взбалтывании содержимого стакана. Затем раствор соляной кислоты (1:1) декантируют, силикагель, промывают дистиллированной водой (см. п. 8.1.1), заливают разбавленной азотной кислотой (1:1) (см. п. 8.4.1) и кипятят в течение 2 — 3 ч. После охлаждения раствор азотной кислоты (1:1) сливают, силикагель несколько раз промывают дистиллированной водой (см. п. 8.1.1) до нейтральной реакции (контроль по индикаторной бумаге) промывных вод. Промытый дистиллированной водой силикагель высушивают в сушильном шкафу при температуре плюс (130 +/- 5) °C в течение 4 — 6 ч.
Регенерированный силикагель хранят в склянках с притертой пробкой до изменения внешнего вида.
8.6 Подготовка эксикатора.
8.6.1 Мойка и сушка эксикатора.
Мойку и сушку эксикатора следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией.
Эксикатор промывают раствором азотной кислоты (1:1) (см. п. 8.4.1), затем большим количеством водопроводной воды и в заключении ополаскивают 3 — 4 раза дистиллированной водой (см. п. 8.1.1).
Окончательную сушку эксикатора проводят в сушильном шкафу, установленном в вытяжном шкафу, при температуре плюс (105 +/- 5) °C.
8.6.2 Заправка эксикатора.
На дно эксикатора помещают осушитель. В качестве осушителя используется предварительно регенерированный силикагель (см. п. 8.5).
На нижнюю часть эксикатора помещают вставку для эксикатора (см. таблицу 5) со специальными отверстиями, через которые обеспечивается циркуляция воздуха.
Вставку для эксикатора выстилают бумагой фильтровальной лабораторной (см. таблицу 5).
С целью обеспечения герметичности шлиф эксикатора смазывают вязким смазочным материалом — универсальной аэрозольной смазкой.
8.7. Приготовление основного раствора карбоната натрия и гидрокарбоната натрия с массовой концентрацией неорганического углерода 1000 мкг/см3 (раствор А1).
В мерную колбу вместимостью 1000,00 см3 вносят 4,41 г карбоната натрия, предварительно прокаленного в муфельной печи до постоянного веса (1 час при температуре плюс 285 °C) и растертого в агатовой ступке. Карбонат натрия растворяют в 500 см3 дистиллированной воды, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2). Затем добавляют 3,5 г гидрокарбоната натрия, предварительно высушенного в эксикаторе над силикагелем в течение не менее 24 ч при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1. Объем раствора в колбе доводят этой же дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) не более 6 мес.
8.8. Приготовление основного раствора калия фталевокислого кислого с массовой концентрацией общего углерода 1000 мкг/см3 (раствор Б1).
В мерную колбу вместимостью 500,00 см3, предварительно заполненную на 1/4 дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2), вносят 1,063 г калия фталевокислого кислого. Объем раствора в колбе доводят этой же дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) при температуре плюс 2 — 8 °C не более 6 мес.
8.9. Приготовление шкалы градуировочных растворов с массовой концентрацией общего углерода в диапазоне от 1,0 до 1000 мкг/см3.
Шкалу градуировочных растворов готовят из основного раствора Б1 (см. п. 8.8) в соответствии с табл. 7 в мерных колбах вместимостью 100,00 см3, предварительно заполненных на 1/4 дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2).
Раствор хранят в плотно закрытой емкости до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка) при температуре плюс 2 — 8 °C не более 3 мес.
Приготовление шкалы градуировочных растворов общего углерода
8.10 Приготовление фонового раствора для ИК-спектрометрии.
Пластиковую емкость заполняют дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2), закрывают полимерной крышкой и оставляют на 1 сутки при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1.
Объем дистиллированной воды, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2) в единице емкости должен соответствовать количеству, указанному в маркировке на емкость.
8.11 Подготовка анализатора углерода к работе.
Подготовку анализатора углерода к работе проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации прибора. Необходимые режимы работы устанавливают в соответствии с рекомендациями производителя.
IX. Установление градуировочной характеристики
9.1. Градуировочные растворы общего углерода, используемые для установления градуировочной зависимости (ГХ), готовят в соответствии с п. 8.9.
Градуировочные растворы измеряют в порядке возрастания массовой концентрации углерода.
При помощи программного обеспечения к прибору устанавливают градуировочную зависимость площади выходного сигнала S от содержания углерода C в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха S = f(C) (или высоты выходного сигнала H от содержания углерода в пробе H = f(C).
Проверяют приемлемость ГХ, используя коэффициент корреляции R, он должен быть не менее 0,878 <6>.
<6> Примечание: коэффициент корреляции указан в соответствии с таблицей И.4 РМГ 61 «Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа», введены приказом Росстандарта от 13.12.2011 № 1064-ст (далее — РМГ 61) для числа степеней свободы f = 5 — 2, где 5 — количество концентраций, выбранных для построения ГХ. При использовании программного обеспечения масс-спектрометра для установления коэффициента корреляции и выборе его приемлемого значения следует руководствоваться рекомендациями производителя.
Градуировочные зависимости устанавливают перед каждой серией измерений массовой концентрации углерода в анализируемых пробах выдыхаемого воздуха.
X. Контроль стабильности градуировочной характеристики
10.1. Стабильность ГХ проверяют периодически, например, через каждые 20 анализируемых подряд проб, с использованием не менее одного градуировочного раствора (см. п. 8.9).
При помощи программного обеспечения к прибору с использованием градуировочных зависимостей S = f(C) и (или) H = f(C) определяют концентрацию общего углерода в контрольном растворе.
ГХ признается стабильной, если выполняется условие (1):
|C - C_{\text{н}.\text{у}.}| \leq \delta_{\text{ГХ}} \cdot C \cdot 0,01 , (1)
где: C — действительное значение массовой концентрации общего углерода в контрольном растворе, мкг/см3;
Cн.у. — результат контрольного измерения массовой концентрации общего углерода в этом же контрольном растворе, установленный по ГХ, мкг/см3;
\delta_{\text{ГХ}} — погрешность установления ГХ (относительное значение), %, \delta_{\text{ГХ}} = \pm 12% ;
0,01 — коэффициент пересчета разности концентраций элемента на мкг/см3.
В случае невыполнения условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению. Если условие стабильности не выполняется при повторном измерении контрольного раствора, то устанавливают новую ГХ.
При помощи программного обеспечения к анализатору углерода проводят проверку линейности ГХ по коэффициенту корреляции R (см. главу IX).
XI. Отбор, хранение и подготовка проб выдыхаемого воздуха
11.1. Предварительно перед отбором пробы выдыхаемого воздуха пациента просят воздержаться от принятия пищи и курения за 12 ч до процедуры, чтобы уменьшить влияние этих факторов на концентрацию диоксида углерода в анализируемой пробе.
Непосредственно перед забором пробы воздуха пациента просят удалить помаду с кожи губ (при необходимости), почистить зубы, язык и тщательно прополоскать рот кипяченой дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2).
11.2. Во время процедуры забора пробы пациент осуществляет форсированные выдохи в специальный одноразовый пакет для отбора проб воздуха (см. таблицу 5, исключая риск микробной контаминации аппаратуры.
Для оценки уровней диоксида углерода в выдыхаемом воздухе используют модель возвратного дыхания. После нормального вдоха через нос пациента просят надеть зажим на нос (рисунок 1 приложения 1 к настоящим МУК) и сделать возможно глубокий выдох через рот в впускное сопло на пакете для отбора проб (рисунок 2 приложения 1 к настоящим МУК).
Объем выдыхаемого воздуха в единице емкости должен соответствовать количеству, указанному в маркировке на пакете (таблица 5 главы IV). После заполнения пакета выдыхаемым воздухом его закрывают полимерной крышкой.
11.3. Срок хранения отобранной пробы при максимально возможном объеме наполнения пакета и параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1 не ограничен.
Пакет изготовлен из двух слоев пленки. Внутренняя пленка, образующая непосредственно пакет для отбора проб, прочная и эластичная, непроницаема для CO2. Внешняя пленка более жесткая и толстая служит для защиты внутреннего пакета от механических повреждений, а также препятствует проникновению газов из окружающей среды и ультрафиолетовых лучей к содержимому пакета.
11.4. Для отбора пробы выдыхаемого воздуха не требуется активного сознательного участия пациента, что делает возможным применения методики у детей.
11.5. Отбор пробы выдыхаемого воздуха из пакета проводят аспирационным методом после его термостатирования не менее 2 ч в помещении лаборатории при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1. Аспирационный метод основан на протягивании известного объема анализируемого воздуха через три последовательно соединенных поглотительных прибора, каждый из которых заполнен 150,0 см3 2% раствора гидроксида натрия (см. п. 8.3.2). В качестве поглотительных приборов используют склянки Дрекселя (рисунок 3 приложения 1 к настоящим МУК).
При отборе пробы выдыхаемого воздуха систему, состоящую из трех последовательно соединенных склянок Дрекселя, подсоединяют к крану-клапану на пакете для отбора проб.
Пакет имеет кран-клапан, через который происходит откачивание исследуемого газа. Кран-клапан изготовлен из полипропилена с добавлением эластомера, имеет красную кнопку и красные боковые защелки. К крану-клапану прикреплена силиконовая трубка, диаметром 8 мм и длиной 70 мм, для подсоединения пакета к насосу для отбора проб воздуха (рисунок 2 приложения 1 к настоящим МУК).
Побудитель расхода воздуха у насоса для отбора проб воздуха включают в соответствии с руководством по эксплуатации. Устанавливают действительное значение объемного расхода воздуха — 0,6 дм3/мин.
Продолжительность отбора проб воздуха из пакета — 15 мин.
Параметры отбора пробы фиксируют в сопроводительном документе к анализируемой пробе.
11.6. При отборе пробы выдыхаемого воздуха из пакета в помещении лаборатории определяют следующие метеорологические параметры: температуру, атмосферное давление и относительную влажность окружающего воздуха.
Метеорологические параметры фиксируют в сопроводительном документе к отобранной, анализируемой пробе.
11.7. После исследований анализируемой пробы пакет для отбора проб воздуха утилизируют в соответствии с документами по стандартизации <7>.
<7> ГОСТ Р 54533-2011 «Ресурсосбережение. Обращение с отходами. Руководящие принципы и методы утилизации полимерных отходов», введенный приказом Росстандарта от 28.11.2011 № 612-ст.
11.8. Все работы по подготовке проб к исследованиям проводят в медицинских одноразовых перчатках.
11.9. Поглотительные растворы, поглотившие диоксид углерода из пропущенного через них фиксированного объема воздуха (см. п. 11.5), анализируют сразу после отбора пробы (см. главу XIII).
XII. Устранение мешающих влияний
12.1. Летучие соединения в выдыхаемом воздухе образуются в результате метаболических процессов в организме и возникают в результате воздействия окружающей среды (табл. 8).
Основные газовые компоненты дыхания
12.2. Соединение неорганического углерода в пробе выдыхаемого воздуха определяют в водном растворе гидроксида натрия (см. п. 8.3.2), поглотившим диоксид углерода из пропущенного через него фиксированного объема воздуха.
Компоненты дыхания, такие как диоксид углерода, диоксид азота, пероксид водорода, ацетон, ацетальдегид, формальдегид, метанол, этанол, фенол, взаимодействуют с поглотительным раствором (см. п. 8.3.2) с образованием следующих соединений (уравнения реакций 2 - 11 при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1):
2NaOH + CO_{2} \rightarrow Na_{2}CO_{3} + H_{2}O (2)
NaOH + CO_{2} \rightarrow NaHCO_{3} (3)
2NaOH + 2NO_{2} \rightarrow NaNO_{3} + NaNO_{2} + H_{2}O (4)
NaOH + H_{2}O_{2} \rightarrow NaHO_{2} + H_{2}O (5)
2(CH_{3})_{2}CO^{OH} \rightarrow (CH_{3})CH(OH)CH_{2}C(O)CH_{3} (6)
2CH_{3}CHO^{OH} \rightarrow CH_{3}CH(OH)CH_{2}CHO (7)
NaOH + 2HCOH \rightarrow NaCOOH + CH_{3}OH (8)
NaOH + CH_{3}OH \rightarrow CH_{3}ONa + H_{2}O (9)
NaOH + C_{2}H_{5}OH \rightarrow C_{2}H_{5}ONa + H_{2}O (10)
NaOH + C_{6}H_{5}OH \rightarrow C_{6}H_{5}ONa + H_{2}O (11)
Оксид углерода не взаимодействует с водным раствором гидроксида натрия (см. п. 8.3.2) при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1. Взаимодействие возможно при нагревании и под давлением, уравнение (12):
NaOH + CO^{t;P} \rightarrow HCOONa (12)
Реакция взаимодействия оксида азота с гидроксидом натрия (см. п. 8.3.2) протекает очень медленно при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1, уравнение (13):
2NaOH + 4NO \rightarrow 2NaNO_{2} + N_{2}O + H_{2}O (13)
Аммиак, водород, сероуглерод, метан, этан, бутан, пентан и этилен не взаимодействуют со щелочами.
12.3. Влияние сопутствующих компонентов в анализируемой пробе устраняют программной и аппаратурной коррекцией. Характеристические частоты в ИК-спектроскопии для рассматриваемых веществ приведены в табл. 9. Формы колебаний в ИК-спектрометрии рассмотрены на рисунке 4 приложения 2 к настоящим МУК.
Интерпретация инфракрасных спектров для диоксида углерода и матричных компонентов в анализируемой пробе
При совместном присутствии двух форм углерода, органического и неорганического, в составе разных веществ их окисление в реакционной трубке анализатора углерода в присутствии катализатора происходит с разной скоростью. В результате этого выделение диоксида углерода растянуто во времени и на выходе наблюдаются множественные пики. Программа анализатора углерода подсчитывает общую площадь всех образовавшихся пиков для определения общего углерода. Фоновые концентрации органического углерода в анализируемой пробе устраняются в процессе анализа (см. главы XIII - XIV).
Интерпретация инфракрасных спектров (табл. 10) показывает, что пероксид водорода не оказывает влияние на определение аналита методом ИК-спектрометрии.
Влияние азотсодержащих соединений устраняют аппаратурной коррекцией. Температура каталитического окисления соединений углерода составляет плюс 680 °C. Метод измерений — ИК-спектрометрия. Температура термического разложения соединений азота — плюс 720 °C. Метод анализа — хемилюминесцентный.
При реализации программной и аппаратурной коррекции достигнута высокая точность определения диоксида углерода в выдыхаемом воздухе.
12.4. Определению мешают хлориды и другие галогены, возникающее от матричных компонентов пробы. В присутствии матричных галоген-ионов наблюдаются частичные потери обеих форм углерода еще до стадии детектирования аналитического сигнала. Галогенсодержащие компоненты устраняются из анализируемой пробы в процессе анализа с применением поглотителя галогенов установленного в анализаторе углерода (аппаратурная коррекция). При реализации такого способа коррекции наблюдается значительное уменьшение потерь органического и неорганического углерода в составе разных веществ, что приводит к увеличению аналитического сигнала.
12.5. Влияние диоксида углерода из окружающего воздуха устраняют компенсацией его массовой концентрации (см. п. 14.5).
Для этого проводят анализ фоновых концентраций диоксида углерода в помещении, где осуществляют забор пробы выдыхаемого воздуха в специальный одноразовый пакет (таблица 5).
Воздух помещения со скоростью 0,6 дм3/мин аспирируют через склянку Дрекселя, содержащую 150,0 см3 2% раствора гидроксида натрия (см. п. 8.3.2). Для определения фоновых концентраций диоксида углерода достаточно отобрать 9 дм3 воздуха. Продолжительность отбора проб воздуха составляет 15 мин.
При отборе пробы окружающего воздуха в помещении определяют следующие метеорологические параметры: температуру, атмосферное давление и относительную влажность окружающего воздуха.
Метеорологические параметры фиксируют в сопроводительном документе к отобранной, анализируемой пробе.
Если проба не может быть проанализирована в день отбора, то допускается отбор проб воздуха из помещения в одноразовый пакет с использованием специального устройства, предназначенного для отбора проб в пакеты (табл. 5). При этом регистрация метеорологических параметров в точке забора пробы не требуется.
Отбор пробы из пакета проводят аспирационным методом в помещении лаборатории с регистрацией метеорологических параметров. Схема подсоединения склянки Дрекселя к крану-клапану на пакете для отбора проб приведена в п. 11.5.
12.6. Возможное попадание мокроты в пакет для отбора проб воздуха не мешает определению диоксида углерода в выдыхаемом воздухе. Фоновое выделение загрязняющих веществ в составе мокроты устраняется ее адсорбцией во внутреннем мешке (см. п. 11.3).
12.7. Температура сильно влияет на состав образцов дыхания. Когда температура пробы выдыхаемого воздуха падает ниже температуры тела (плюс 37 °C), водяной пар конденсируется внутри пакета для отбора проб воздуха и захватывает водорастворимые соединения. Растворимость сопутствующих компонентов в составе разных веществ (см. п. 12.2) приведена в табл. 11.
Матричные компоненты, такие как диоксид азота, ацетон, ацетальдегид, метанол, этанол и фенол частично устраняются уже на стадии забора пробы.
Проблемы с конденсацией и потерей диоксида углерода из-за отрицательных температурных градиентов не возникают. Диоксид углерода очень плохо растворим в воде (табл. 10).
Растворимость веществ, оказывающих влияния на определение диоксида углерода в выдыхаемом воздухе
| Вещество | Растворимость в воде |
|---|---|
| 1 | 2 |
| Диоксид углерода | 0,17 г/100 см3 при t = 20 °C |
| Диоксид азота | Вступает в реакцию при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1: 4NO_{2} + HO_{2} \rightarrow 2HNO_{3} + N_{2}O_{3} |
| Ацетон | В любом соотношении смешивается с водой |
| Ацетальдегид | В любом соотношении смешивается с водой |
| Формальдегид | Формальдегид легко присоединяет воду: CH_{2}O + HO_{2} \rightarrow (OH)CH_{2}(OH) Формальдегид в гидратированной форме неустойчив в свободном виде |
| Метанол | В любом соотношении смешивается с водой |
| Этанол | В любом соотношении смешивается с водой |
| Фенол | 8,20 г/100 см3, при температуре плюс 20 °C |
XIII. Выполнение измерений
13.1. Определение диоксида углерода в выдыхаемом воздухе.
13.1.1. Пробу объемом 5,00 см3 из каждой склянки Дрекселя (см. п. 11.5) вносят в мерные колбы вместимостью 250,00 см3 предварительно заполненные на 1/4 дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2). Объем жидкости в колбах доводят этой же дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.
13.1.2. По соответствующей ГХ (см. главу IX) устанавливают содержание общего углерода (Cу., мкг/см3) в водном растворе гидроксида натрия (см. п. 8.3.2), поглотившим углеродсодержащие вещества (см. п. 12.2) из пропущенного через него фиксированного объема выдыхаемого воздуха (см. п. 11.5).
13.1.3. Пробу объемом 5,00 см3 из каждой склянки Дрекселя (см. п. 11.5) вносят в мерные колбы вместимостью 250,00 см3. Пробы подкисляют соляной кислотой (см. п. 8.4.3) до значения pH 3 и менее (контроль по индикаторной бумаге).
При подкислении пробы соляной кислотой карбонат натрия и гидрокарбонат натрия в составе поглотительного раствора (см. п. 12.2) переводятся в диоксид углерода, уравнения (14 - 15):
Na_{2}CO_{3} + 2HCl \rightarrow 2NaCl + CO_{2} + H_{2}O ; (14)
NaHCO_{3} + HCl \rightarrow NaCl + CO_{2} + H_{2}O (15)
Удаление диоксида углерода из пробы проводят с использованием УЗ-ванны. Затем объем жидкости в колбах доводят дистиллированной водой, не содержащей диоксида углерода (см. п. 8.1.2) до метки и тщательно перемешивают.
13.1.4. По соответствующей ГХ (глава IX) устанавливают содержание органического углерода (Cо.у., мкг/см3) в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха (см. п. 11.5).
13.2 Определение диоксида углерода в окружающем воздухе.
13.2.1. Анализируют раствор из склянки Дрекселя (см. п. 12.5) после его разбавления в 50 раз (см. п.п. 13.1.1, 13.1.3).
13.2.2. По соответствующей ГХ (см. п. 9.1) устанавливают содержание общего углерода (Cу.фон, мкг/см3) в водном растворе гидроксида натрия (см. п. 8.3.2), поглотившим углеродсодержащие вещества (см. п. 12.2) из пропущенного через него фиксированного объема окружающего воздуха (см. п. 12.5).
13.2.3. По соответствующей ГХ (см. п. 9.1) устанавливают содержание органического углерода (Cо.у.фон, мкг/см3) после подкисления пробы соляной кислотой (см. п. 8.4.3) до значения pH 3 и менее (контроль по индикаторной бумаге).
XIV. Обработка результатов измерений
14.1. Массовую концентрацию диоксида углерода ( X_{N = 1 \rightarrow 3} , г/м3) в единичной пробе выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5) рассчитывают по формуле (16):
X_{N = 1 \rightarrow 3} = \frac{(C_{\text{у}.} - C_{\text{о}.\text{у}.}) \cdot V_{\text{пробы}} \cdot 3,67}{V_{\text{н}.\text{у}.} \cdot 1000} \cdot \eta , (16)
где: Cу. — массовая концентрация общего углерода в растворе анализируемой пробы выдыхаемого воздуха (см. п. 13.1.2), установленная по градуировочной зависимости, мкг/см3;
Cо.у. — массовая концентрация органического углерода в растворе анализируемой пробы выдыхаемого воздуха (см. п. 13.1.4), установленная по градуировочной зависимости, мкг/см3;
Vпробы — объем поглотительного раствора для единичной пробы выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5) — 150,0 см3;
3,67 — коэффициент пересчета содержания неорганического углерода в единичной пробе выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5), на диоксид углерода;
Vн.у. — общий объем выдыхаемого воздуха, прошедший через входной аспирационный канал у насоса для отбора проб, приведенный к нормальным условиям <8>, рассчитанный по формуле (17), дм3;
1000 — коэффициент пересчета массы диоксида углерода, который содержится в объеме 1 м3 выдыхаемого воздуха на г;
\eta — кратность разбавления раствора единичной пробы выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5) — коэффициент разбавление по п. 13.1.1 и по п. 13.1.3 - 50.
14.2. Общий объем анализируемого воздуха (Vн.у., дм3), прошедший через входной аспирационный канал у насоса для отбора проб, приведенный к нормальным условиям <8> рассчитывают по формуле (17):
<8> Примечание: нормальные условия (для атмосферного воздуха): t = 0 °C (T0 = 273 К), P0 = 760 мм. рт. ст. (101,3 кПа).
V_{\text{н}.\text{у}.} = V \cdot \frac{273 \cdot P}{(273 + t) \cdot 760} , (17)
где: V — общий объем анализируемого воздуха, прошедший через входной аспирационный канал у насоса для отбора проб, рассчитанный по формуле (18), дм3;
P — атмосферное давление в точке отбора проб (см. п. 11.5), мм рт. ст.;
t — температура в точке отбора проб (см. п. 11.5), °C.
14.3. Общий объем анализируемого воздуха (V, дм3), прошедший через входной аспирационный канал у насоса для отбора проб рассчитывают по формуле (18):
V = \upsilon \cdot \tau , (18)
где: \upsilon — значение величины расхода анализируемого воздуха, который проходит через систему отбора проб — 0,6 дм3/мин (см. п. 11.5);
\tau — время отбора проб анализируемого воздуха, который проходит через систему отбора проб — 15 мин (см. п. 11.5).
14.4. Массовую концентрацию диоксида углерода (Xфон, г/м3) в единичной пробе окружающего воздуха рассчитывают по формуле (19):
X_{\text{фон}} = \frac{(C_{\text{у}.\text{фон}} - C_{\text{о}.\text{у}.\text{фон}}) \cdot V_{\text{пробы}} \cdot 3,67}{V_{\text{н}.\text{у}.} \cdot 1000} \cdot \eta , (19)
где: Cу.фон — массовая концентрация общего углерода в растворе анализируемой пробы окружающего воздуха (см. п. 13.2.2), установленная по градуировочной зависимости, мкг/см3;
Cо.у.фон — массовая концентрация органического углерода в растворе анализируемой пробы окружающего воздуха (см. п. 13.2.3), установленная по градуировочной зависимости, мкг/см3;
Vпробы — объем поглотительного раствора для единичной пробы окружающего воздуха (см. п. 12.5) — 150,0 см3;
3,67 — коэффициент пересчета содержания неорганического углерода в единичной пробе окружающего воздуха на диоксид углерода;
Vн.у. — общий объем окружающего воздуха, прошедший через входной аспирационный канал у насоса для отбора проб, приведенный к нормальным условиям, рассчитанный по формуле (17), дм3;
1000 — коэффициент пересчета массы диоксида углерода, который содержится в объеме 1 м3 окружающего воздуха на г;
\eta — кратность разбавления раствора единичной пробы окружающего воздуха — коэффициент разбавления по п. 13.2.1 - 50.
14.5. Массовую концентрацию диоксида углерода ( \Sigma X , г/м3) в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха рассчитывают по формуле (20):
\Sigma X = (X_{N = 1} + X_{N = 2} + X_{N = 3}) - X_{\text{фон}} , (20)
где: Xфон — массовая концентрация диоксида углерода в единичной пробе окружающего воздуха <9>;
<9> Примечание: если значение массовой концентрации (Xфон, г/м3) в единичной пробе окружающего воздуха (см. п. 14.4) больше значения массовой концентрации диоксида углерода ( X_{N = 1 \rightarrow 3} , г/м3) в единичной пробе выдыхаемого воздуха (см. п. 14.1), то массовую концентрацию диоксида углерода ( X_{N = 1 \rightarrow 3} , г/м3) в единичной пробе выдыхаемого воздуха (см. п. 14.1) принимают равной нулю.
XN = 1 — массовая концентрация диоксида углерода в первой единичной пробе выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5), рассчитанная по формуле (16), г/м3;
XN = 2 — массовая концентрация диоксида углерода во второй единичной пробе выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5), рассчитанная по формуле (16), г/м3;
XN = 3 — массовая концентрация диоксида углерода в третьей единичной пробе выдыхаемого воздуха, входящей в систему отбора проб (см. п. 11.5), рассчитанная по формуле (16), г/м3.
Сумма единичных результатов XN = 1, XN = 2, XN = 3 является результатом измерений \Sigma X .
14.6. Объемную долю диоксида углерода ( \phi , %) в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха рассчитывают по формуле (21):
\phi = \frac{\Sigma X \cdot 22,4}{M \cdot 1000} \cdot 100 , (21)
где: \Sigma X — массовая концентрация диоксида углерода в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха, рассчитанная по формуле (20), г/м3;
22,4 — объем, который занимает 1 моль любого газа при нормальных условиях (см. п. 14.1), дм3/моль;
M — молярная масса диоксида углерода — 44,01 г/моль;
1000 — коэффициент пересчета объема любого газа, который занимает 1 моль этого газа на м3;
100 — коэффициент пересчета отношения двух безразмерных величин на %.
14.7. Парциальное давление диоксида углерода ( \rho , кПа) в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха рассчитывают по формуле (22):
\rho = \frac{\Sigma X \cdot R \cdot (273 + t)}{M \cdot 1000} \cdot 100 , (22)
где: \Sigma X — массовая концентрация диоксида углерода в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха, рассчитанная по формуле (20), г/м3;
R — молярная газовая постоянная — 8,31 Дж·моль-1·К-1;
t — температура в точке отбора проб (см. п. 11.5), °C;
M — молярная масса диоксида углерода (см. п. 14.7), г/моль;
1000 — коэффициент пересчета парциального давления диоксида углерода в выдыхаемом воздухе на кПа <10>.
<10> Примечание: коэффициент пересчета парциального давления ( \rho , кПа) диоксида углерода в выдыхаемом воздухе на мм. рт. ст. — 7,5.
XV. Оформление результатов измерений
15.1. Результат измерений по методике, изложенной в настоящих МУК, в документах, предусматривающих его использование, может быть представлен в виде массовой концентрации, объемной доли и (или) парциального давления диоксида углерода в выдыхаемом воздухе.
15.1.1. Результат измерений в виде массовой концентрации диоксида углерода в пробе выдыхаемого воздуха представляют в виде выражения (23):
(\Sigma X \pm \Delta_{\text{л}\Sigma X})\text{г}/\text{м}^{3} (P = 0,95), (23)
где: \Sigma X — массовая концентрация диоксида углерода в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха, рассчитанная по формуле (21), г/м3;
\Delta_{\text{л}\Sigma X} — значение абсолютной погрешности, г/м3, рассчитанное по формуле (24):
\Delta_{\text{л}\Sigma X} = \delta_{\text{л}\Sigma X} \cdot \Sigma X \cdot 0,01 , (24)
где: \delta_{\text{л}\Sigma X} — относительное значение показателя точности (табл. 3), %;
0,01 — коэффициент пересчета погрешности с % на г/м3.
15.1.2. Результат измерений в виде объемной доли диоксида углерода в пробе выдыхаемого воздуха представляют в виде (25):
(\phi \pm \Delta_{\text{л}\phi})% , (при P = 0,95) (25)
где: \phi — объемная доля диоксида углерода в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха, рассчитанная по формуле (21), %;
\Delta_{\text{л}\phi} — значение абсолютной погрешности, %, рассчитанное по формуле (26):
\Delta_{\text{л}\phi} = \delta_{\text{л}\phi} \cdot \phi \cdot 0,01 , (26)
где: \delta_{\text{л}\phi} — относительное значение показателя точности (табл. 3), %;
0,01 — коэффициент пересчета погрешности с относительной формы в % на абсолютную форму в %.
15.1.3. Результат измерений в виде парциального давления диоксида углерода в пробе выдыхаемого воздуха представляют в виде (27):
(\rho \pm \Delta_{\text{л}\rho})\text{кПа }(\text{мм рт}.\text{ст}.) (при P = 0,95), (27)
где: \rho — парциальное давление диоксида углерода в анализируемой пробе выдыхаемого воздуха, кПа (мм рт. ст.);
\Delta_{\text{л}\rho} — значение абсолютной погрешности, кПа (мм рт. ст.), рассчитанное по формуле (28):
\Delta_{\text{л}\rho} = \delta_{\text{л}\rho} \cdot \rho \cdot 0,01 , (28)
где: \delta_{\text{л}\rho} — относительное значение показателя точности (табл. 3), %;
0,01 — коэффициент пересчета погрешности с % на кПа (мм рт. ст.).
15.2. Численные значения результатов измерений должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики абсолютной погрешности, которые не должны содержать более двух значащих цифр.
XVI. Контроль точности результатов измерений
16.1. Контроль точности результатов измерений, проводимых по методике, изложенной в настоящих МУК, осуществляют путем поверки применяемых средств измерений, а также путем проведения оперативного контроля процедуры измерений для контроля точности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры.
16.2. Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления проб.
Оперативный контроль процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления пробы проводят, если массовая концентрация диоксида углерода в анализируемой единичной пробе превышает величину концентрации, соответствующую нижнему пределу диапазона измерений массовой концентрации не менее чем в два раза (чтобы при разбавлении пробы не получить значение массовой концентрации меньше, чем нижняя граница диапазона измерений определяемого компонента). В противном случае проводят оперативный контроль внутрилабораторной прецизионности (см. п. 16.3).
В качестве образцов для контроля используют пробы выдыхаемого воздуха, пропущенного через поглотительный раствор (см. п. 11.5).
Для введения добавок в растворы проб используют раствор А1 (см. п. 8.7).
Оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры Kк с нормативом контроля Kn.
Результат контрольной процедуры Kк, г/м3 рассчитывают по формуле (29):
K_{\text{к}} = X_{N}\prime\prime_{= 1 \rightarrow 3} + (\eta - 1) \cdot X_{N}\prime_{= 1 \rightarrow 3} - X_{N = 1 \rightarrow 3} - C_{\text{д}} ; (29)
где X_{N}\prime\prime_{= 1 \rightarrow 3} — результат контрольного измерения — значение результата определения массовой концентрации диоксида углерода в растворе пробы (см. п. 11.5), разбавленном в \eta раз, с известной добавкой, рассчитанное по формуле (16), г/м3;
X_{N}\prime_{= 1 \rightarrow 3} — результат контрольного измерения — значение результата определения массовой концентрации диоксида углерода в растворе пробы (см. п. 11.5), разбавленном в \eta раз, рассчитанное по формуле (16), г/м3;
X_{N = 1 \rightarrow 3} — результат измерений — значение результата контрольного измерения массовой концентрации диоксида углерода в растворе пробы (см. 11.5), рассчитанное по формуле (16), г/м3;
Cд — массовая концентрация добавки, г/м3.
Норматив контроля Kn, рассчитывают по формуле (30):
K_{\text{п}} = \sqrt{\Delta_{\text{л},X_{N}\prime\prime_{= 1 \rightarrow 3}}^{2} + (\eta - 1)^{2} \cdot \Delta_{\text{л},X_{N}\prime_{= 1 \rightarrow 3}}^{2} + \Delta_{\text{л},X_{N = 1 \rightarrow 3}}^{2}} , (30)
где: \Delta_{\text{л},X_{N}\prime\prime_{= 1 \rightarrow 3}}^{2} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации диоксида углерода в разбавленном растворе пробы (см. 11.5) с добавкой, г/м3;
\Delta_{\text{л},X_{N}\prime_{= 1 \rightarrow 3}}^{2} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации диоксида углерода в разбавленном растворе пробы (см. 11.5), г/м3;
\Delta_{\text{л},X_{N = 1 \rightarrow 3}}^{2} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации диоксида углерода в растворе пробы (см. 11.5), г/м3.
Значения характеристик абсолютной погрешности результатов измерений для соответствующих X», X', X рассчитывают по формуле (31):
\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot X(X\prime,X\prime\prime) , (31)
где: \delta_{\text{л}} — значение показателя точности (табл. 3).
Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию (32):
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (32) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (32) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
XVII. Выполнение измерений массовой концентрации железа в пробах крови (в сывороточном трансферрине) методом атомно-эмиссионной спектрометрии с микроволновой плазмой (метод б)
17.1. Метод измерений массовой концентрации железа в сывороточном трансферрине позволяет анализировать метаболизм элемента в организме.
XVIII. Подготовка к выполнению измерений
18.1 Очистка воды.
Подготовку воды для анализа проводят по п. 8.1.1.
18.2 Подготовка посуды.
18.2.1 Подготовка стеклянной посуды.
Подготовку стеклянной посуды проводят по п. 8.2.1.
18.2.2 Подготовка пластиковой посуды.
Пластиковую посуду (табл. 6) проверяют на наличие загрязнений, анализируя фоновый раствор (см. п. 18.3).
18.3 Приготовление фонового раствора для МП-АЭС.
Емкость (п. 18.2) заполняют дистиллированной водой и выдерживают не менее 1 часа при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1.
18.4. Приготовление основного градуировочного раствора железа с массовой концентрацией 100 мг/дм3 (раствор В1).
Основной градуировочный раствор В1 готовят из СО состава растворов ионов элемента в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкции по его применению.
В мерную колбу вместимостью 50,00 см3, предварительно заполненную на 1/4 дистиллированной водой, вносят 5,00 см3 СО состава раствора элемента, доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
Основной одноэлементный градуировочный раствор В1 используют в день приготовления.
18.5 Приготовление шкалы градуировочных растворов железа.
Шкалу градуировочных растворов железа готовят из основного градуировочного раствора В1 (п. 18.4) в соответствии с табл. 11 в мерных колбах вместимостью 100,00 см3, предварительно заполненных на 1/4 дистиллированной водой.
Приготовление шкалы градуировочных растворов железа
Растворы для установления ГХ используют в день приготовления.
18.6. Подготовка атомно-эмиссионного спектрометра с микроволновой плазмой.
Устанавливают необходимые режимы работы атомно-эмиссионного спектрометра в соответствии с рекомендациями производителя.
XIX. Устранение мешающего влияния матричных компонентов пробы
19.1. Сопутствующие элементы, присутствующие в пробе, могут оказывать влияние на определение железа, например, приводить к систематическим погрешностям при измерении значения сигнала на приборе.
Мешающие влияния в методе МП-АЭС подразделяют на спектральные и неспектральные.
19.2 Спектральные мешающие влияния.
Спектральные мешающие влияния (эффект интерференции) от матричных компонентов пробы могут быть скорректированы выбором альтернативной длины волны излучения определяемого элемента и при помощи программного обеспечения спектрометра.
Условия определения железа в сывороточном трансферрине приведены в табл. 12.
Условия определения железа в сывороточном трансферрине методом
19.3 Неспектральные мешающие влияния.
Неспектральные мешающие влияния, обычно называемые матричными эффектами, возникают из-за различия в вязкости и поверхностном натяжении между градуировочными растворами и образцами. Вязкость растворов влияет на эффективность распыления и, как следствие, воздействует на сигнал определяемого элемента в растворе. Вязкость водных растворов зависит от матричных компонентов анализируемой пробы.
Для обеспечения сравнимых условий, построение градуировочного графика и анализ образцов по методике, изложенной в настоящих МУК проводят в водном растворе.
XX. Установление градуировочной характеристики
20.1. Градуировочные растворы железа, используемые для установления градуировочной зависимости, готовят в соответствии с п. 18.6.
Градуировочные растворы измеряют в порядке возрастания массовой концентрации элементов (глава XXIV).
При помощи программного обеспечения к прибору устанавливают градуировочную зависимость I = f(C) для определяемого элемента.
Проверяют приемлемость ГХ, используя коэффициент корреляции R, он должен быть не менее 0,878 <11>.
<11> Примечание: коэффициент корреляции указан в соответствии с таблицей И.4 РМГ 61 для числа степеней свободы f = 5 — 2, где 5 — количество концентраций, выбранных для построения ГХ. При использовании программного обеспечения спектрометра для установления коэффициента корреляции и выборе его приемлемого значения следует руководствоваться рекомендациями производителя.
Градуировочные зависимости устанавливают перед каждым измерением массовой концентрации железа в анализируемых пробах.
XXI. Контроль стабильности градуировочной характеристики
21.1. Стабильность градуировочных графиков проверяют периодически, например, через каждые 20 анализируемых подряд проб, с использованием не менее одного градуировочного раствора (п. 18.6).
При помощи программного обеспечения к прибору с использованием градуировочных зависимостей I = f(C) определяют массовые концентрации элементов в контрольных растворах.
ГХ признается стабильной, если выполняется условие (33):
|C - C_{\text{элемента}}| \leq \delta_{\text{гх}} \cdot C \cdot 0,01 , (33)
где: C — действительное значение массовой концентрации элемента в контрольном растворе, мг/дм3;
Cэлемента — результат контрольного измерения массовой концентрации элемента в этом же контрольном растворе, мг/дм3;
\delta_{\text{ГХ}} — погрешность установления ГХ (относительное значение), %, \delta_{\text{ГХ}} = \pm 11% ;
0,01 — коэффициент пересчета разности концентраций элемента на мг/дм3.
В случае невыполнения условия (33) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению. Если условие стабильности не выполняется при повторном измерении контрольного раствора, то строят новый градуировочный график.
При помощи программного обеспечения к атомно-эмиссионному спектрометру проводят проверку линейности ГХ по коэффициенту корреляции R (глава XX).
XXII. Отбор, хранение и подготовка проб
22.1. Отбор проб крови, в зависимости от поставленной задачи, осуществляет квалифицированный медицинский персонал в медицинском учреждении в асептических условиях по общепринятым правилам взятия биологического материала в соответствии с документами по стандартизации <12>.
<12> ГОСТ Р 53079.4-2008 «Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа», введенный приказом Ростехрегулирования от 18.12.2008 № 554-ст (далее — ГОСТ Р 53079.4-2008).
Пробы крови отбирают в специальные одноразовые вакуумные пробирки для исследования сыворотки без антикоагулянтов (табл. 6) в соответствии с документами по стандартизации <13>.
<13> ГОСТ Р 53079.4-2008.
22.2. Определение железа проводят в сывороточном трансферрине. Правила первичной обработки образца биоматериала установлены в документах по стандартизации <14>.
<14> ГОСТ Р 53079.4-2008.
Объем сыворотки крови фиксируют в сопроводительном документе к анализируемой пробе.
Для определения железа в единичной пробе методом МП-АЭС необходимо (0,50 — 1,00) см3 сыворотки (рабочая проба).
22.3. Допускается хранение сыворотки не более 2 ч при параметрах микроклимата, указанных в п. 6.1. При температуре холодильной камеры плюс 3 — 5 °C до 24 ч.
22.4. Определение массовой концентрации железа в сывороточном трансферрине проводят после разбавления анализируемой пробы.
От объема раствора рабочей пробы (см. п. 22.2) отбирают две аликвоты объемом (0,50 — 1,00) см3. Анализируемый объем сыворотки крови (аликвоту) помещают в мерную колбу вместимостью 10,00 см3, предварительно заполненную на 1/2 дистиллированной водой. Склонность пробы к пенообразованию, после ее разбавления, устраняют использованием УЗ-ванны. Затем объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Подготовку пробы проводят непосредственно перед ее измерением на приборе. Разбавленные пробы хранению не подлежат.
Одновременно аналогичным образом подготавливают холостую пробу, используя чистую пробирку подготовленную в соответствии с процедурами, установленными в п. 22.2. Пробу крови заменяют на такой же объем дистиллированной воды. Вакуумных пробирок с холостыми пробами должно быть не менее трех.
22.5. Все работы по подготовке проб к исследованиям проводят в медицинских одноразовых перчатках.
XXIII. Холостой опыт
23.1. Поправка, определяемая в холостом опыте, может быть вызвана следующими причинами: неочищенным растворителем; загрязнением материала сосуда; использованием грязной посуды; соединениями, присутствующими в воздухе лабораторных помещений.
23.2. Дистиллированная вода может дать высокий результат холостого опыта. Это объясняется тем, что данный растворитель применяют в значительно больших количествах, чем анализируемая проба.
23.3. Теоретически всегда существует вероятность загрязнения пробы материалом химической посуды. Соединения некоторых элементов выщелачиваются из стекла. Так, нейтральными растворами из стекла извлекают железо. Обычно для проведения анализов выбирают посуду из химически инертных по отношению к применяемым реагентам материалов. Стеклянную посуду используют только для приготовления растворов веществ. Изделия из стекла не оставляют на длительное время в контакте с растворами. Все растворы хранят в пластиковой посуде.
23.6. Органические полимерные материалы, как правило содержат неорганические примеси катализаторов, используемые для их синтеза. Поэтому пластиковую посуду проверяют на наличие загрязнений, анализируя фоновый раствор (см. п. 18.3).
23.6. Поправка, вызванная загрязнениями из атмосферного воздуха, значительно снижается при работе в изолированных и свободных от пыли помещениях лаборатории (см. п. 5.2).
23.7. Для предотвращения влияния чистоты вакуумных пробирок (табл. 6) анализируют холостую пробу (см. п. 22.4).
XXIV. Выполнение измерений
24.1. Настраивают параметры МП-АЭС (таблица 12). Прибор выдерживают во включенном состоянии и зажженной плазмой примерно 30 мин до начала измерений с учетом требований производителя.
24.2. Для определения массовой концентрации железа в сывороточном трансферрине проводят количественный анализ раствора пробы (п. 22.4).
24.3. Аналитические сигналы обрабатывают с помощью программного обеспечения атомно-эмиссионного спектрометра с использованием градуировочных зависимостей I = f(C), рассчитанных методом наименьших квадратов.
24.5. При необходимости определения массовой концентраций железа выше верхней границы градуировочного диапазона (таблица 12) кратность разбавления пробы увеличивают.
Кратность разбавления раствора должна соответствовать условию (34):
X - X\eta>\Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\eta} , (34)
где: X — массовая концентрация железа в единичной пробе, рассчитанная по формуле (35), мг/дм3;
\eta — кратность разбавления раствора единичной пробы;
\Delta_{\text{л}} — значение абсолютной погрешности единичной пробы, мг/дм3, рассчитанное по формуле (37), мг/дм3;
\Delta_{\text{л},x\eta} — значение абсолютной погрешности единичной разбавленной в \eta раз пробы, рассчитанное по формуле (37), мг/дм3.
24.6. Выполнение измерений массовой концентрации железа в сывороточном трансферрине проводят в двух параллелях. Каждое параллельное определение выполняют из отдельной аликвоты сыворотки крови (п. 22.4).
XXV. Обработка результатов измерений
25.1 Концентрацию железа (X, мг/дм3) в единичной пробе сыворотки крови рассчитывают по формуле (35):
X = \frac{(C_{\text{элемента}} - C_{\text{хол}.}) \cdot V_{\text{раствора пробы}}}{V_{\text{сыворотки}}} , (35)
где: Cэлемента — массовая концентрация железа в растворе пробы после его разбавления (п. 22.4), установленная по градуировочному графику, мг/дм3;
Cхол. — массовая концентрация железа в холостой пробе после ее разбавления (п. 22.4), установленная по градуировочному графику, мг/дм3;
Vраствора пробы — объем раствора пробы (п. 22.4) - 10,00 см3;
Vсыворотки — объем сыворотки (п. 22.2).
25.2. Среднее арифметическое значение двух параллельных результатов единичного анализа является результатом измерений.
XXVI. Оформление результатов измерений
26.1. Результат измерений по методике, изложенной в настоящих МУК, в документах, предусматривающих его использование, может быть представлен в виде выражения (36):
(X_{\text{ср}.} \pm \Delta_{\text{л}})\text{мг}/\text{м}^{3} (при P = 0,95; n = 2), (36)
где: Xср. — среднее арифметическое значение двух параллельных результатов измерений концентрации железа в анализируемой пробе сыворотки крови, разность между которыми не превышает предела повторяемости rп <15>, мг/дм3.
<15> Примечание: при превышении предела повторяемости следует поступать в соответствии с п. 27.2.
\Delta_{\text{л}} — значение абсолютной погрешности, мг/дм3, рассчитанное по формуле (37):
\Delta_{\text{л}} = \delta_{\text{л}} \cdot X_{\text{ср}.} \cdot 0,01 , (37)
где: \delta_{\text{л}} — показатель точности (табл. 4), %;
0,01 — коэффициент пересчета погрешности на мг/дм3.
26.2. Численные значения результатов измерений должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики абсолютной погрешности, которые не должны содержать более двух значащих цифр.
XXVII. Контроль точности результатов измерений
27.1. Контроль точности результатов измерений, проводимых по методике, изложенной в настоящих МУК, осуществляют путем поверки применяемых средств измерений, а также путем проведения оперативного контроля процедуры измерений для контроля точности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры.
27.2. Алгоритм оперативного контроля повторяемости при проведении контрольной процедуры.
Алгоритм оперативного контроля повторяемости при проведении контрольной процедуры осуществляют для каждого из результатов измерений, полученных в соответствии с методикой, изложенной в настоящих МУК. Для этого от образца биоматериала после первичной его обработки (п. 22.2) отбирают две аликвоты сыворотки, проводят разбавление анализируемой пробы (п. 22.4) и выполняют измерения в соответствии с главой XXIV.
Результат контрольной процедуры rк, мг/дм3 рассчитывают по формуле (38):
где: X1, X2 — результаты единичных измерений (параллельных определений) массовой концентрации железа в анализируемой пробе, рассчитанные по формуле (35), мг/дм3.
Предел повторяемости rп, мг/дм3, рассчитывают по формуле (39):
r_{\text{п}} = 2,77 \cdot \sigma_{r} \cdot X_{\text{ср}} \cdot 0,01 , (39)
где: 2,77 — коэффициент, зависящий от числа контрольных определений (n = 2) и доверительной вероятности P = 0,95;
\sigma_{r} — показатель повторяемости, % (табл. 4), %;
Xср. — результат измерений — среднеарифметическое значение двух результатов параллельных измерений массовой концентрации железа в анализируемой пробе, рассчитанных по формуле (35), мг/дм3;
0,01 — коэффициент пересчета предела повторяемости на мг/дм3.
Результат контрольной процедуры должен удовлетворять условию (40):
В случае несоблюдения условия (40) поступают в соответствии с документами по стандартизации <16>.
<16> Раздел 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенного в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст.
27.3. Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления проб.
Оперативный контроль процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления пробы проводят, если массовая концентрация железа в анализируемой пробе превышает величину концентрации, соответствующую нижнему пределу диапазона измерений массовой концентрации не менее чем в два раза (чтобы при разбавлении пробы не получить значение массовой концентрации меньше, чем нижняя граница диапазона измерений определяемого компонента).
В качестве образцов для контроля используют образцы биоматериала после первичной его обработки (п. 22.2).
Для введения добавок используют стандартные образцы состава раствора ионов железа в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкции по его применению (табл. 6).
Оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры Kк с нормативом контроля Kn.
Результат контрольной процедуры Kк, мг/дм3 рассчитывают по формуле (41):
K_{\text{к}} = X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}} + (\eta - 1) \cdot X_{\text{с}}\prime_{\text{р}} - X_{\text{ср}} - C_{\text{д}} , (41)
где: X«ср — результат контрольного измерения — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой концентрации железа в растворе пробы (п. 22.4), разбавленном в \eta раз, с известной добавкой, рассчитанное по формуле (34), мг/дм3;»
X'ср — результат контрольного измерения — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой концентрации железа в растворе пробы (п. 22.4), разбавленном в \eta раз, рассчитанное по формуле (35), мг/дм3;
Xср — результат измерений — среднеарифметическое значение результатов параллельных контрольных измерений массовой концентрации железа в растворе пробы (22.4), рассчитанное по формуле (35), мг/дм3;
Cд — массовая концентрация добавки, мг/дм3.
Норматив контроля Kn, рассчитывают по формуле (42):
K_{\text{п}} = \sqrt{\Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}}}^{2} + (\eta - 1)^{2} \cdot \Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime_{\text{р}}}^{2} + \Delta_{\text{л},X_{\text{ср}}}^{2}} , (42)
где: \Delta_{\text{л},X\prime\prime\text{ср}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации железа в разбавленном растворе пробы (п. 22.4) с добавкой, мг/дм3;
\Delta_{\text{л},X\prime\text{ср}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации железа в разбавленном растворе пробы (п. 22.4), мг/дм3;
\Delta_{\text{л},X\text{ср}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации железа в растворе пробы (п. 22.4), мг/дм3.
Значения характеристик абсолютной погрешности результатов измерений рассчитывают по формуле (37).
Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию (43):
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (43) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (43) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
Приложение 1 к МУК 4.1.4085-24
ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ОТБОРА ПРОБ ВЫДЫХАЕМОГО ВОЗДУХА
Рис. 1. Зажим для носа: а — футляр; б — зажим
Рис. 2. Пакет для отбора проб воздуха: а — пакет; б — кран-клапан
Приложение 2 к МУК 4.1.4085-24
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ИНФРАКРАСНЫХ СПЕКТРОВ
Рис. 4. Формы колебаний в ИК-спектрометрии: а — асимметричное валентное (\upsilon_{as}) ; б — симметричное валентное (\upsilon_{s}) ; в — плоскостное деформационное или ножничное (\delta_{\delta}) ; г — внеплоскостное деформационное или веерное (\omega) ; д — внеплоскостное деформационное или крутильное (\tau) ; е — плоскостное деформационное или маятниковое (\rho) . «+» и «-» указывают направление движения перпендикулярное к плоскости рисунка
Библиографические ссылки
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания».
3. Критерии аккредитации и перечня документов, подтверждающих соответствие заявителя, аккредитованного лица критериям аккредитации.
4. ГОСТ 8.315-2019 «Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения».
5. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
6. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
7. ГОСТ 83-79 «Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия».
8. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
9. ГОСТ 3118-77 «Реактивы. Кислота соляная. Технические условия».
10. ГОСТ 3956-76 «Силикагель технический. Технические условия».
11. ГОСТ 4201-79 «Реактивы. Натрий углекислый кислый. Технические условия».
12. ГОСТ 4328-77 «Реактивы. Натрий гидроокись. Технические условия».
13. ГОСТ 4461-77 «Реактивы. Кислота азотная. Технические условия».
14. ГОСТ 4517-2016 «Реактивы. Методы приготовления вспомогательных реактивов и растворов, применяемых при анализе».
15. ГОСТ 9147-80 «Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия».
16. ГОСТ 10157-2016 «Аргон газообразный и жидкий. Технические условия».
17. 16 ГОСТ 13867-68 «Продукты химические. Обозначение чистоты».
18. ГОСТ 25336-82 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
19. ГОСТ 29169-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой».
20. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
21. ГОСТ Р 52239-2004 «Перчатки медицинские диагностические одноразовые. Часть 1. Спецификация на перчатки из каучукового латекса или раствора».
22. ГОСТ Р 53079.4-2008 «Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа».
23. ГОСТ Р 54533-2011 «Ресурсосбережение. Обращение с отходами. Руководящие принципы и методы утилизации полимерных отходов».
24. ГОСТ Р 58144-2018 «Вода дистиллированная Технические условия».
25. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
26. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
27. ГОСТ ISO/IEC 17025-2019 «Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий».
| ББК 51.214+51.242 |
|---|