МУК 4.1.059-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика выполнения измерения массовой концентрации ортохлорбензилиденмалонодинитрила (CS), хлорацетофенона (CN), дибензоксазепина (CR), капсаициноидов, морфолида пеларгоновой кислоты (МПК) в спиртовом растворе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля
(утв. ФМБА России 25.12.2008)
Примечание
Документ введен в действие с 25.12.2008.
Утверждаю Заместитель руководителя Федерального медико-биологического агентства, Главный государственный санитарный врач по обслуживаемым организациям и обслуживаемым территориям В. В. Романов 25 декабря 2008 года
Дата введения — с момента утверждения
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЯ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ОРТОХЛОРБЕНЗИЛИДЕНМАЛОНОДИНИТРИЛА (CS), ХЛОРАЦЕТОФЕНОНА (CN), ДИБЕНЗОКСАЗЕПИНА (CR), КАПСАИЦИНОИДОВ, МОРФОЛИДА ПЕЛАРГОНОВОЙ КИСЛОТЫ (МПК) В СПИРТОВОМ РАСТВОРЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.059-08
1. Разработаны: ФГУН «Институт токсикологии» ФМБА России (Александрова М.Л., Кульбицкий Г.Н., Бабаина Е.В., Муковский Л.А.).
2. Методические указания по методам контроля «Методика выполнения измерения массовой концентрации ортохлорбензилиденмалонодинитрила (CS), хлорацетофенона (CN), дибензоксазепина (CR), капсаициноидов, морфолида пеларгоновой кислоты (МПК) в спиртовом растворе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии» аттестованы Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследовательский институт метрологии им. Д.И. Менделеева» Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии (Свидетельство об аттестации МВИ № 242/90-08 от 11 ноября 2008 года).
3. Рекомендованы к утверждению Подкомиссией по специальному нормированию ФМБА России Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию (протокол № 57 от 24.12.2008 г.).
4. Утверждены Заместителем руководителя Федерального медико-биологического агентства, Главным государственным санитарным врачом по обслуживаемым организациям и обслуживаемым территориям В.В. Романовым.
5. Введены в действие с момента утверждения.
Настоящий документ устанавливает методику выполнения измерений массовой концентрации ортохлорбензилиденмалонодинитрила (CS), хлорацетофенона (CN), дибензоксазепина (CR), капсаициноидов (дигидрокапсаицин и капсаицин), морфолида пеларгоновой кислоты (МПК) в спиртовом растворе.
Методические указания могут быть использованы при разработке мер по ограничению содержания и реализации гигиенического нормирования ирритантов в производственной и окружающей среде, при проведении судебно-медицинских и криминалистических экспертиз по результатам применения газового оружия, при сертификации газового оружия, в соответствующих отраслевых лабораториях.
Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «ГСОЕИ. Методики выполнения измерений», ГОСТ Р 1.5-92 «ГСС. Общие требования и построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов».
Диапазон измерений массовой концентрации лакриматоров:
дигидрокапсаицин — 0,01 — 1,0 г/дм3;
морфолид пеларгоновой кислоты — 0,01 — 1,0 г/дм3.
CN представляет собой 2-хлорацетофенон (регистрационный номер по КАС 532-27-4) — белое кристаллическое вещество с температурой плавления 59 °C и с довольно сильным давлением паров. При низких концентрациях CN пахнет как яблоневые цветы.
CS представляет собой 2-хлорбензалмалононитрил (регистрационный номер по КАС 2698-41-1), известный также как [(2-хлорфенил) метилен], пропандинитрил, о-хлорбензилиденмалононитрил и \beta , \beta -дициан-о-хлорстирол. При обычной температуре это кристаллическое вещество белого цвета.
CR представляет собой дибенз-(b,f)-1,4-оксазепин (регистрационный номер по КАС 257-07-8), твердое вещество бледно-желтого цвета с Tпл 95 °C, мало растворимо в воде, хорошо растворимо в большинстве органических растворителей. Будучи стойким CR может сохраняться в окружающей среде в течение многих месяцев.
Олеарезин капсикум (OC) представляет собой эфирное масло стручкового перца (натуральное масло красного стручкового перца) Capsicum annuum или C. frutescens (семейство пасленовых), которое практически не растворяется в воде, но растворяется в таких органических растворителях, как эфир, спирты или хлороформ. OC обычно на 60 — 80% состоит из масел, его активные элементы — это капсаицин, известный также как транс-8-метил-N-ваниллил-6-ноненамид (регистрационный номер по КАС 8023-77-7), и дигидрокапсаицин. Это белый кристаллический порошок с Tпл 63 — 65 °C, слабо растворим в воде, растворим в полярных органических растворителях.
Морфолид пеларгоновой кислоты ранее использовался в некоторых странах как пищевая добавка в кулинарии для придания остроты продукту. Это маслянистая прозрачная жидкость с желтоватым оттенком, молекулярная масса 227,31, температура кипения 310 — 315 °C, летучесть при температуре 20 °C — 27 мг/м3, при 35 °C — 43 мг/м3, не растворима в воде, растворима в полярных органических растворителях (ацетоне, диметилформамиде, бензоле, спиртах), жирах (подсолнечное, касторовое масла и др.); устойчиво к гидролизу, окислению, фотодеструкции.
В Методических указаниях учтены требования, указания и рекомендации, изложенные в следующих нормативных документах:
2.1. Федеральный закон от 13 декабря 1996 г. № 150-ФЗ «Об оружии» с изменениями от 27 и 31 июля, 17 декабря 1998 г., 19 ноября 1999 г., 10 апреля 2000 г., 7 августа и 27 ноября 2001 г. (ст. 1, 3, 6, 7).
2.2. Колтукин В.В., Исаков В.Д., Бабаханян Р.В., Муковский Л.А. и др. Судебно-медицинская диагностика поражений из газового оружия. Методические рекомендации, — Министерство обороны РФ, Москва, 2001 г. — 62 с.
2.3. ГОСТ Р 50741-95 с изменением 1998 г. Пистолеты и револьверы газовые. Требования безопасности. Виды и методы контроля при сертификационных испытаниях на безопасность. М., Госстандарт РФ — 1995 г.
2.4. ГОСТ Р 50743-95 с изменением 1998 г. Средства самообороны в аэрозольной упаковке и механические распылители. Требование безопасности. Виды и методы контроля при сертификационных испытаниях на безопасность. М., Госстандарт РФ — 1995 г.
2.5. ГОСТ Р 51894-2002. Устройства аэрозольные с пиромеханическими баллонами. Требования безопасности и методы испытаний на безопасность. М., Госстандарт РФ — 2002 г.
2.6. Медико-биологические и химико-аналитические испытания безопасности и эффективности газового оружия самообороны. Методические указания. Утверждены первым Зам. Министра здравоохранения РФ 23.12.1998 г. М., 71 с.
2.7. ГОСТ 1770-74. Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия.
2.8. ГОСТ 29169-91. Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой.
2.9. ГОСТ 24104-01. Весы лабораторные. Общие технические требования.
2.10. ГОСТ 6709-72. Вода дистиллированная.
2.11. ГОСТ 22967-90. Шприцы медицинские, инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытания
2.12. ГОСТ 25336-82. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры.
2.13. ГОСТ 29224-91. Посуда лабораторная стеклянная. Термометры жидкостные стеклянные лабораторные. Принципы устройства, конструирования и применения.
2.14. ТУ 25-11.1592. Установка для высокоэффективной очистки воды или бидистиллятор.
2.15. ГОСТ 2222-95. Метанол технический.
2.16. ГОСТ Р 52473-2005. Спирт этиловый из пищевого сырья.
2.17 ТУ № 6-02-197-80. Ортохлорбензилиденмалонодинитрил (CS).
2.18 ТУ № 2821. Хлорацетофенон (CN).
2.19 ТУ № 6-57-03-88. Дибензоксазепин (CR).
2.20 ТУ 7893-001-13052820-95. Морфолид пеларгоновой кислоты (МПК).
2.21. № 21750 каталог фирмы Fluka. Капсаицин и дигидрокапсаицин (смесь), (65% + 35%).
2.22. ГОСТ 12.1.004-91. Пожарная безопасность. Общие требования.
2.23. ГОСТ 12.1.019-79. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура.
2.24. ГОСТ 12.1.005-88. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны.
2.25. ГОСТ 12.1.007-76. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества.
2.26. ГОСТ 12.0.004-90. Организация обучения безопасности труда.
3. ПРИПИСАННЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОГРЕШНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ И ЕЕ СОСТАВЛЯЮЩИХ
Характеристики погрешности измерений
| Наименование определяемого вещества | Массовая концентрация определяемого вещества, г/дм3 | Расширенная неопределенность измерений (при коэффициенте охвата 2) <*>, U | Относительное стандартное отклонение результатов измерения (в условиях повторяемости) |
| CN | от 0,001 до 0,01 вкл. | 0,12 \cdot \overline{C} | 5,0 |
| CS | св. 0,01 до 1,0 вкл. | 0,10 \cdot \overline{C} | 3,8 |
| CR | от 0,001 до 0,01 вкл. | 0,16 \cdot \overline{C} | 5,0 |
| св. 0,01 до 1,0 вкл. | 0,14 \cdot \overline{C} | 3,8 | |
| Капсаицин Дигидрокапсаицин МПК | от 0,01 до 0,1 вкл. | 0,18 \cdot \overline{C} | 7,5 |
| св. 0,1 до 1,0 вкл. | 0,12 \cdot \overline{C} | 4,5 |
где \overline{C} — результат измерения массовой концентрации определяемого вещества, г/дм3.
Примечание: <*> — значение расширенной неопределенности соответствует границе абсолютной погрешности ( \pm \Delta) при P = 0,95.
4. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ (СИ), СТАНДАРТНЫЕ ОБРАЗЦЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ
4.1 Средства измерений
1. Хроматографическая система фирмы Beckman, System GOLD с программным обеспечением или другая в комплекте:
\cdot градиентный насос высокого давления;
\cdot детектор УФ с переменной длиной волны и возможностью сканирования;
\cdot колонка хроматографическая: Колонка: Spheresorb ODS C 18, 4,6*25 см, 5 мк (кат. № Z226068 фирма Supelco или аналогичная);
Допускается применение современных жидкостных хроматографов других фирм, иных элементов измерительной системы (хроматографических аналитических колонок, программ обработки данных и др.), при этом может потребоваться адаптация настоящей методики к применяемому оборудованию. Например, при работе с колонками другого типа изменяется время удерживания определяемого вещества, эффективность разделения с другими веществами, которые, возможно, присутствуют в анализируемой пробе. В этом случае при идентификации должен быть выбран такой хроматографический режим, который обеспечивал бы необходимое разделение определяемого вещества и других соединений, присутствующих в анализируемой пробе.
2. Цилиндры мерные 2-500, 2-1000, ГОСТ 1770-74.
3. Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2, ГОСТ 1770-74.
4. Пипетки градуированные 4-2-0,5, 4-2-1, 4-2-5, 4-2-10, 4-2-25, ГОСТ 29227-91.
5. Весы лабораторные ВРЛ-200, 2-го класса точности, ГОСТ 24104-88 или другие, не уступающие по техническим характеристикам.
6. Микрошприцы вместимостью 100 мкл фирмы «Rheodyne» серия 700, модель 810 (кат. № 58393 фирма Supelco) или аналогичные.
Допускается применять оборудование и материалы с аналогичными техническими и метрологическими характеристиками.
4.2 Реактивы и материалы
1. Метанол, ГОСТ 2222-95.
2. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.
3. Ортохлорбензилиденмалонодинитрил (CS) (не менее 98,7%), ТУ № 6-02-197-80.
4. Хлорацетофенон (CN) (не менее 96%), ТУ № 2821.
5. Дибензоксазепин (CR) (не менее 90%), ТУ № 6-57-03-88.
6. Морфолид пеларгоновой кислоты (МПК) (не менее 95%), ТУ 7893-001-13052820-95.
7. Капсаицин и дигидрокапсаицин (смесь) (65% + 35%), № 21750, каталог фирмы Fluka.
8. Спирт этиловый ректификованный по действующей нормативной или технической документации с объемной долей не менее 96,2%, ГОСТ Р 52473-2005.
Допускается использование реактивов, изготовленных по другой нормативно-технической документации, в том числе импортных, с квалификацией не ниже указанной в настоящем разделе.
4.3 Вспомогательное оборудование и материалы
1. Комплект для фильтрации и дегазации растворов с насадкой, колбой на 500 мл и переходником, ЗАО «БиоХимМак СТ» (г. Москва), номер по каталогу 48.7220.
2. Мембранные фильтры с размером пор 0,45 мкм, 13 мм и мембранные фильтры 0,45 мкм, 50 мм, ЗАО «БиоХимМак СТ» (г. Москва), номер по каталогу 48.7032.02 и 48.7052.05 соответственно.
3. Комплект для фильтрации образцов НФ-13 с фильтрами, ЗАО «БиоХимМак СТ» (г. Москва), номер по каталогу 48.713Х.0Х.
5. УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия: - температура воздуха (20 +/- 5) °C; - атмосферное давление 84,0 — 106,7 кПа (630 — 800 мм рт. ст.); - влажность воздуха не более 80% при температуре 25 °C.
Определение концентраций лакриматоров в спиртовых растворах методом абсолютной градуировки основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектором на длине волны 230 нм.
Методика включает в себя следующие основные процедуры:
- подготовку градуировочных растворов лакриматоров в этиловом спирте;
- градуировку хроматографа по растворам с известным значением массовой концентрации вещества (лакриматора) в этиловом спирте на длине волны 230 нм;
- анализ раствора пробы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с регистрацией сигнала при длине волны 230 нм (основная), 280 нм (вспомогательная);
- идентификацию конкретного лакриматора по параметрам удерживания;
- вычисление массовой концентрации конкретного лакриматора на основе зарегистрированного аналитического сигнала и градуировочной характеристики.
При работе с используемыми химическими соединениями необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами.
При выполнении измерений необходимо соблюдать требования безопасности в соответствии с ниже перечисленными нормативными документами: ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования», ГОСТ 12.1.019-79 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты», раздел инструкции по эксплуатации хроматографа «Меры предосторожности и техника безопасности».
8. ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРА
К выполнению измерений и обработке их результатов допускают специалиста, имеющего квалификацию инженера или техника-химика, владеющего методом ВЭЖХ хроматографии, знающего конструкцию, принцип действия и правила эксплуатации данного оборудования, освоившего данную методику выполнения измерений и уложившегося в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля точности измерений.
9. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
9.1 Подготовка химической посуды для выполнения измерений
Стеклянную посуду тщательно моют, ополаскивают последовательно дистиллированной и бидистиллированной водой и сушат. Использованную стеклянную посуду перед дальнейшим употреблением ополаскивают последним из применявшихся растворителем и тщательно моют горячей водой с любым моющим средством, ополаскивают последовательно дистиллированной и бидистиллированной водой и сушат.
9.2 Отбор проб, хранение и обращение с ними
9.2.1. Образец, направленный в лабораторию для проведения измерений, делят на две части, одну половину оставляют на хранение в течение 3-х месяцев.
9.2.2. Из второй половины образца готовят лабораторную пробу для проведения анализа: в стеклянный флакон вместимостью 1,8 см3 помещают 1 см3 жидкости соответствующей пипеткой.
9.3 Приготовление элюента
(водный раствор метанола 70/30 (V/V))
В мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 1000 см3 вносят 700 см3 метилового спирта, отмеренные цилиндром вместимостью 1000 см3. Доводят до уровня на 1 см ниже метки деионизованной и дистиллированной водой и выдерживают при температуре 20 °C в течение 25 минут. Затем доводят до метки, перемешивают, закрывают пробкой. Готовый элюент фильтруют через мембранный фильтр и проводят вакуумную дегазацию.
9.4 Приготовление градуировочных растворов
9.4.1. Готовят семь градуировочных растворов с концентрацией определяемого вещества согласно таблице 1.
| Порядковый номер градуировочного раствора (N) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Ориентировочная массовая концентрация определяемого вещества, г/дм3 | 1 | 0,5 | 0,1 | 0,05 | 0,01 | 0,005 | 0,001 |
Градуировочные растворы готовят объемным методом, путем последовательного разбавления соответствующего раствора.
9.4.2. Для приготовления градуировочного раствора № 1 в мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 50 см3 вносят по 50,0 +/- 0,2 мг [капсаициноидов по 80,0 +/- 0,2 мг] каждого определяемого вещества, наливают около 20 см3 этилового спирта. Содержимое колбы перемешивают взбалтыванием, затем доводят до метки растворителем и перемешивают.
Действительное значение массовой концентрации определяемого вещества, г/см3, рассчитывают по формуле:
\text{С}_{i}^{1} = \frac{m \cdot w^{\text{о}} \cdot 10}{V} , (1)
где m — масса навески определяемого вещества, мг;
wо — массовая доля основного вещества, %;
V — вместимость мерной колбы, равная 50 см3.
В случае капсаициноидов, где одновременно присутствуют капсаицин и дигидрокапсаицин, вводят поправочные коэффициенты, позволяющие определить массовую концентрацию каждого из них в градуировочном растворе:
\text{С}_{\text{к}}^{1} = \frac{m \cdot w^{\text{о}} \cdot 0,65 \cdot 10}{V} - \text{капсаицин}, (2)
\text{С}_{\text{дк}}^{1} = \frac{m \cdot w^{\text{о}} \cdot 0,35 \cdot 10}{V} - \text{дегидрокапсаицин}. (3)
9.4.3. Для приготовления градуировочных растворов № 2 — 7, в мерную колбу наливают около 25 см этилового спирта (см. таблицу 2). Далее в колбу вносят пипеткой аликвоту разбавляемого градуировочного раствора № 1 согласно таблице 3. Содержимое колбы перемешивают взбалтыванием, затем доводят до метки и перемешивают. Массовую концентрацию определяемого вещества, г/дм3, рассчитывают по формуле:
\text{С}_{i}^{j} = \frac{a \cdot C_{i}^{1}}{V} , (4)
где a — аликвота разбавляемого раствора № 1, см3;
V — вместимость мерной колбы, см3;
C_{i}^{1} — массовая концентрация определяемого вещества в разбавляемом градуировочном растворе № 1, г/дм3;
j — номер градуировочного раствора.
Приготовление градуировочных растворов
Относительная погрешность расчетных значений массовой концентрации определяемого вещества в градуировочных растворах не превышает +/- 2%.
Градуировочные растворы хранят в холодильнике в герметически закрытой посуде. Срок хранения — не более 1 месяца.
9.5 Подготовка хроматографической системы
Хроматограф включают и подготавливают к работе в соответствии с его описанием и руководством по эксплуатации. Прокачивают через хроматографическую систему элюент до стабилизации базовой линии детектора.
9.6 Построение градуировочных характеристик
9.6.1 Условия проведения измерения:
Режим работы ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектором задают в соответствии с руководством по эксплуатации, и контролируют на мониторах в следующем виде:
- число длин волн — 2;
- длина волны — 230 нм;
- длина волны — 280 нм;
- объем пробы — 0,01 см3;
- скорость потока подвижной фазы — 1,0 см3/мин;
- подвижная фаза (элюент) — водный раствор метанола 70/30 (V/V), приготовленный по п. 9.3.
При проведении анализа в данных условиях ориентировочные времена удерживания лакриматоров следующие:
- CN — 4,8 мин;
- CS — 7,5 мин;
- CR — 9,0 мин;
- капсаицин — 13,0 мин;
- дегидрокапсаицин — 19,3 мин;
- МПК — 15,9 мин.
Хроматографическая система позволяет произвести удовлетворительное разделение всех шести определяемых веществ.
При проведении анализа производится оценка и контроль степени разделения пиков определяемых веществ. Коэффициент разделения (R) рассчитывается следующим образом:
R = \frac{2L}{W_{1} + W_{2}} , (5)
где L — расстояние между вершинами пиков на хроматограмме, ед. времени;
W1 и W2 - ширина основания пиков, ед. времени.
Хроматограммы пригодны для дальнейшей обработки, если R >= 0,8.
Допускается проведение анализа в других условиях хроматографирования, обеспечивающих разделение определяемых веществ.
Для построения градуировочной характеристики используют данные анализа градуировочных растворов с содержанием определяемого вещества, соответствующего рабочему диапазону измерений. Для построения градуировочной характеристики капсаицина и дегидрокапсаицина используют данные анализа градуировочных растворов № 1 — 4. Для построения градуировочной характеристики остальных лакриматоров в диапазоне измерений от 0,0010 до 0,010 мг/дм3 используют данные анализа градуировочных растворов № 4 — 7, в диапазоне измерений от 0,010 до 1,0 мг/дм3 — № 1 — 4.
Определяемые вещества идентифицируют по абсолютному времени удерживания, используя информацию, накапливаемую в ходе проведения градуировки.
Градуировку осуществляют последовательным вводом (в условиях проведения измерения) номинального объема градуировочных растворов в порядке возрастания их массовых концентраций.
9.6.2. Градуировочный раствор хроматографируют трижды при условиях, указанных в п. 9.6.1. Полученные значения площадей пиков усредняют и проверяют приемлемость выходных сигналов хроматографа.
Процедуру повторяют для каждого градуировочного раствора.
Результаты считают приемлемыми, если для каждой градуировочной точки выполняется условие:
\frac{S_{i_{max}}^{j} - S_{i_{min}}^{j}}{\overline{S_{i}^{j}}} \cdot 100 \leq g_{1}, (6)
где S_{i_{max}}^{j} , S_{i_{min}}^{j} , \overline{S_{i}^{j}} — максимальное, минимальное и среднее значения площади пика определяемого вещества в j-ой градуировочной точке, у.е.;
g1 - норматив, соответствующий вероятности 0,95, %.
Значения g1 в зависимости от диапазона измеряемых концентраций приведены в таблице 4.
9.6.3 Для каждой градуировочной точки рассчитывают градуировочный коэффициент K_{i}^{j} по формуле (7)
K_{i}^{j} = \frac{\overline{S_{i}^{j}}}{C_{i}^{j}} . (7)
9.6.4. Рассчитывают среднее значение градуировочного коэффициента по всему диапазону массовых концентраций градуировочных растворов, \overline{K_{i}} .
9.6.5. Каждый раз при установлении градуировочной характеристики проводят проверку приемлемости градуировочной характеристики. Проверяют выполнение условия:
\frac{(K_{i}^{j})^{max} - (K_{i}^{j})^{min}}{\overline{K_{i}}} \cdot 100 \leq g_{2}, (8)
где (Kj)max, (Kj)min — максимальное и минимальное значения градуировочных коэффициентов в диапазоне измерений;
g2 — норматив, соответствующий вероятности 0,95, %.
Значения g2 в зависимости от диапазона измеряемых концентраций приведены в таблице 4.
Градуировку хроматографа проводят при внедрении методики, после мероприятий, заведомо приводящих к ее изменению, а также при отрицательных результатах контроля.
Типовая хроматограмма анализа градуировочной смеси представлена на рис. 1.
Рис. 1. Типовая хроматограмма лакриматоров
Количественный анализ пробы осуществляют в том же режиме работы измерительной системы, в котором проводится ее градуировка.
Определяемое вещество идентифицируют по временам удерживания в соответствии с градуировкой.
Проводят два параллельных измерения массовой концентрации определяемого вещества в пробе.
Массовую концентрацию определяемого вещества Ci, г/дм3, вычисляют по формуле:
C_{i} = \overline{K_{i}} \cdot S_{i}, (9)
где \overline{K_{i}} — градуировочный коэффициент определяемого вещества;
Si — площадь пика определяемого вещества в пробе, у.е.
Полученные значения массовой концентрации, г/дм3, определяемого вещества усредняют и проверяют приемлемость единичных результатов измерений по условию (10) для P = 0,95:
\frac{|C_{i_{1}} - C_{i_{2}}|}{\overline{C_{i}}} \cdot 100 \leq d, (10)
где C_{i_{1}} — массовая концентрация определяемого вещества при 1-ом измерении, г/дм3;
C_{i_{2}} — массовая концентрация определяемого вещества при 2-ом измерении, г/дм3.
Значения d в зависимости от диапазона измеряемых концентраций приведены в таблице 4.
11. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
Результаты количественного анализа при записи в документах представляют в виде:
(\overline{C} \pm U)\text{мг}/\text{дм}^{3}, k = 2, (11)
где U — значение расширенной неопределенности измерений (при коэффициенте охвата k = 2), приведенное в п. 3.
12. КОНТРОЛЬ ТОЧНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
Рекомендуемый период контроля один раз в месяц. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят по свежеприготовленным по п. 9.4 контрольным растворам. Используют два раствора в начале и конце диапазона измерений. Ввод проб в хроматограф осуществляется в соответствии с п. 9, после чего проверяют выполнение условия (12).
Обработку результатов проводят в соответствии с п. 10.
Результаты контроля считают положительными при выполнении условия:
\frac{|C_{\text{изм}} - \text{С}_{\text{к}}|}{\text{С}_{\text{к}}} \cdot 100 \leq K, (12)
где Cк — массовая концентрация определяемого вещества в контрольном растворе, г/дм3;
Cизм — среднее значение массовой концентрации определяемого вещества, полученное из градуировочной характеристики, г/дм3.
Значения K в зависимости от диапазона измеряемых концентраций приведены в таблице 4.
Нормативы контроля погрешности
При постоянном применении методики рекомендуется регистрировать результаты на контрольных картах (карте средних значений для K и карте размахов для S), руководствуясь ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002.