Методические указания по профилактике, лечению и диагностике инфекционного мастита овец

(утв. Минсельхозом СССР 06.09.1976)

6 сентября 1976 года

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ, ЛЕЧЕНИЮ И ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОГО МАСТИТА ОВЕЦ

1. Общие положения

Инфекционный мастит овец — энзоотически протекающее заболевание лактирующих, чаще первородящих овцематок, характеризующееся тяжелым, нередко гангренозным воспалением молочной железы и большой смертностью заболевших животных.

Возбудителями инфекционного мастита являются: патогенный стафилококк и пастерелла, именуемая бактериум маститидис овис <*>.

---

<*> В литературе описаны случаи, когда заболевание вызывают другие микроорганизмы и их ассоциации (ешерихиа коли, протей, псевдомонас аеругиноза, клостридиум перфрингенс и др.).

Заболевание, обусловленное патогенным стафилококком, протекает в форме гнойного абсцедирующего мастита или геморрагического с переходом в гангрену вымени. Серозное и катаральное воспаление при этом возбудителе встречается редко.

Бактериум маститидис овис в основном вызывает серозный или катарально-гнойный мастит и редко гнойный и геморрагический.

Пути заражения:

галактогенный — через молочный канал соска при контакте с инфицированной подстилкой, сосании ягнятами больных и затем здоровых маток;

лимфогенный — заразное начало попадает через различные травмы вымени;

гематогенный — при гнойных или гангренозных процессах в матке.

Помимо этого, ягнята, больные пневмонией, вызванной бактерией маститидис овис, заражают овцематку при сосании.

Возбудители маститов могут находиться на коже вымени и на слизистой канала соска здоровых овец и проявлять свое болезнетворное действие при ослаблении резистентности животных неблагоприятными условиями кормления и содержания.

2. Диагностика

В комплекс диагностических исследований входят:

Анамнестические данные. Выясняют время появления и количество заболевших овец по декадам, начиная с момента окота текущего года, и количество случаев заболевания овец маститом в предыдущие годы, уровень кормления и условия содержания животных.

Клиническое обследование вымени. Обращают внимание на величину вымени и цвет кожи пораженной доли по сравнению со здоровой, консистенцию, температуру и болезненность при пальпации, состояние надвыменных лимфатических узлов и сосков вымени, характер секрета вымени (цвет, наличие примеси хлопьев, гноя, крови). Клиническую дифференциацию маститов проводят в соответствии с Приложением 1.

Эпизоотическая ситуация хозяйства. Инфекционный мастит начинается через 2 — 4 недели после окота, в течение 3 — 4 месяцев получает наибольшее распространение в отаре и прекращается с окончанием лактации. Заболевание может возникнуть вновь при последующем окоте и принять стационарный характер. Инкубационный период — от нескольких часов до суток.

Исследование молока овец (для выявления начальных форм заболевания) по методике, изложенной в Приложении 2.

Лабораторное исследование секрета пораженной доли молочной железы, а также кусочков этой железы от павших животных (для определения возбудителя и его устойчивости к антибиотикам).

Секрет пробы молочной железы берут в стерильные пробирки.

Перед взятием пробы вымя моют теплой водой, вытирают чистой салфеткой соски вымени овцы и руки доярки обрабатывают 70 °C спиртом (денатурированным или гидролизным).

От павших животных в лабораторию посылают кусочки пораженной доли вымени, вырезанные вместе со здоровой тканью и заключенные в 30-процентный стерильный раствор глицерина. Бактериологическое исследование патматериала проводят в соответствии с Приложением 3.

3. Профилактика заболевания

Маточные отары формируют только поголовьем, благополучным по инфекционному маститу.

В неблагополучных хозяйствах маточному поголовью сразу после окота вводят внутримышечно бициллин-5 по 15 — 20 тыс. ЕД на 1 кг массы животного, инъекции повторяют с месячным интервалом 2 — 3 раза (до отъема ягнят).

Лактирующих маток обеспечивают полноценным кормлением и создают надлежащие условия содержания. Систематически осматривают их, обращая внимание на изменения молочной железы.

Перед доением вымя обтирают полотенцем, смоченным 0,5-процентным теплым раствором дезмола или гипохлорита. Перед употреблением этого же полотенца для другой овцы его прополаскивают в чистой воде, отжимают и вновь смачивают в дезинфицирующем растворе. После доения необходимо соски смазывать антисептической дезинфицирующей эмульсией.

При подозрении на мастит молоко дойных овец исследуют экспресс-методами в хозяйстве, а пробы молока больных и кусочки вымени павших животных направляют в лабораторию для бактериологического исследования.

В кошарах поддерживают надлежащий санитарный порядок с обязательной очисткой и дезинфекцией помещений после выделения больных. Для дезинфекции используют горячие растворы (температура 50 — 60 °C) следующих дезсредств: 2-процентная каустическая сода, или 1-процентный формалин, или осветленная хлорная известь, содержащая 2% активного хлора, из расчета 0,5 л на 1 кв. м площади, при экспозиции не менее 1 часа.

4. Лечение

Заболевших овец изолируют (кошары дезинфицируют в соответствии с разделом 3 настоящих указаний), обеспечивают полноценным кормлением. При обнаружении первых признаков заболевания больным овцам внутримышечно вводят пенициллин по 100 — 200 тыс. ЕД 3 раза в день и внутрь применяют норсульфазол по 1 — 3 г на голову 2 раза в день. Применение норсульфазола можно комбинировать с внутримышечными инъекциями эритромицина (4 — 6 тыс. ЕД на 1 кг массы животного 2 раза в сутки).

1 раз в сутки одновременно с внутримышечным введением антибиотиков в пораженную долю вымени после сдаивания секрета через сосок вводят по 50 — 100 тыс. ЕД пенициллина и стрептомицина, растворенных в 10 мл физиологического раствора, или бактерицидные эмульсии на масляной основе (мастицид, мастисан А, мастисан Б или мастисан Е) в соответствии с наставлением по их применению.

Для разжижения экссудата вымени перед введением указанных препаратов через сосок вводят теплый 1 — 2-процентный раствор двууглекислой соды и сдаивают. В зависимости от клинического состояния больного животного лечение продолжают 3 — 4 дня.

В отгонном животноводстве для лечения больных животных более удобно применение препаратов, обладающих пролонгирующим действием:

бициллин-3 растворяют в 5 мл стерильного физраствора и вводят внутримышечно в область бедра в дозе 20 — 40 тыс. ЕД на 1 кг массы животного;

бициллин-3 в сочетании с короткой новокаиновой блокадой. Для этого 600 тыс. ЕД бициллина-3 растворяют в 50 — 60 мл 0,5-процентного раствора новокаина и вводят по методу Логвинова;

дибиомицин в форме 10-процентной эмульсии на 30-процентном прокипяченном растворе глицерина или на стерильной сыворотке крови лошади (крупного рогатого скота). Эмульсию вводят внутримышечно в дозе 0,5 — 0,7 мл на 1 кг массы животного;

бициллин-5 вводят животному внутримышечно в дозе 750 тыс. ЕД, растворенных в 8 — 10 мл 0,5-процентного новокаина.

Указанные выше препараты применяют однократно и при необходимости проводят повторные инъекции через 3 — 5 дней.

При абсцессах и гангрене вымени делают разрез, удаляют гной или омертвевшую ткань, орошают полость дезинфицирующим раствором (риванол 1:1000 — 3000, или 3-процентная перекись водорода, или 1-процентный лизол и т.п.), после чего вводят антибиотики, сульфаниламидные препараты в вышеуказанных дозах.

Примечание. Убой животных на мясо допускается не ранее чем через 6 дней после применения бициллинов, 30 дней — дибиомицина и 1 суток — пенициллина.

После определения возбудителя болезни и его чувствительности к антибиотикам, а также при смешанной инфекции лечение продолжают в соответствии с рекомендациями ветеринарной лаборатории.

Переболевших маститом овец с необратимыми изменениями вымени и при агалактии после нагула выбраковывают на мясо.

5. Молоко овец из неблагополучной отары после удаления больных животных используют для изготовления молочных продуктов при условии пастеризации его при температуре 74 — 76 °C в течение 20 секунд (режим пластинчатого пастеризатора). Молоко от больных животных кипятят, после чего уничтожают.

6. Молоко, полученное от животных, подвергавшихся лечению антибиотиками, запрещается использовать для пищевых целей после последнего применения препарата в течение:

при внутримышечном введении непролонгированных форм пенициллина — 12 часов, бициллинов — 36 часов;

при внутривыменном введении пенициллина — 2 суток, стрептомицина — 5 суток.

Приложение 1

КЛИНИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ МАСТИТОВ ОВЕЦ

Характер воспаления	Течение	Общее состояние животного и клинические признаки	Изменение в пораженной доле вымени и соске	Изменение секрета вымени
1	2	3	4	5
Геморрагический мастит с	Чаще острое	Угнетение, отказ от корма, высокая температура (40,5 -	Пораженная доля увеличена, плотная, болезненная, покрывающая ее кожа напряжена,	Секрета мало, он водянистый, красноватый с
переходом в гангрену Серозный и серознокатаральный мастит	Острое или подострое	42 °C), учащенное дыхание (80 — 100) и пульс (110 — 120). Животное передвигается с трудом, расставляя широко задние конечности. Отек с больной доли вымени распространяется на брюшную стенку, внутреннюю поверхность бедра. Надвыменные лимфатические узлы увеличены, болезненны. В затянувшихся случаях болезни отмечается исхудание животного, на спине, боках, крестце выпадает шерсть Аппетит понижен, температура повышена на 0,5 — 1 °C. Животное больше лежит, движение затруднительно	горячая, гиперемированная. Затем на коже появляются синевато-красные пятна, увеличивающиеся и постепенно сливающиеся. Доля становится холодной, нечувствительной. Сосок делается сине-багровым, почти черным. Ткани пораженной доли распадаются и на их месте возникают гангренозные язвы с неровным серым дном, покрытые марким ихорозным, противного запаха экссудатом. При глубоком гангренозном процессе вся пораженная доля вымени отторгается, на месте распавшейся ткани видны переплетающиеся обнаженные кровеносные сосуды Больная доля увеличена, равномерно уплотнена, болезненная, кожа гиперемирована или цвет ее не изменен. Сосок чаще увеличен или без изменения	примесью хлопьев. С развитием гангрены экссудат приобретает сероватый оттенок и неприятный запах Секрет водянистый с примесью хлопьев, имеет щелочную реакцию и большое количество лейкоцитов
Абсцедирующий мастит	Чаще хроническое	Угнетение, понижение аппетита, временами повышенная температура, постепенное исхудание	Вначале увеличение и равномерное уплотнение доли вымени, затем в различных участках пораженной доли образуются инфильтраты, флюктуирующие очаги различной величины. При глубоком расположении абсцессов флюктуация может быть незаметной. Абсцессы вскрываются и прорастают соединительной тканью, образуя плотные рубцы	Секрет водянистый с примесью хлопьев и гноя. При вскрытии абсцессов в просвет молочных ходов количество гноя в секрете увеличивается

Приложение 2

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАЧАЛЬНЫХ ФОРМ МАСТИТА

Исследование молока овец экспресс-методами проводят непосредственно в отаре во время доения. С этой целью применяют пробы с мастидином или димастином и отстаивание.

Проба с мастидином или димастином

2 г мастидина или 5 г димастина растворяют в 100 мл дистиллированной воды и выливают в бутылочку с автоматом-клювиком. В две луночки молочно-контрольной пластинки надаивают из каждой доли вымени по 1 мл молока, добавляют по 1 мл раствора мастидина или димастина и перемешивают палочкой в течение 20 — 30 секунд. (Молочно-контрольная пластинка имеет четыре луночки, одна половина каждой луночки окрашена в черный цвет для контрастирования, другая половина прозрачная. В каждой луночке имеется по две кольцевые канавки; первая канавка соответствует 1 мл объема луночки, вторая — 2,5 мл. На черном фоне дна луночки более отчетливо выявляются в молоке белые хлопья, на прозрачном — сгустки крови.)

Появление желеобразного сгустка в молоке и изменение цвета реактива указывает на наличие воспалительного процесса в вымени. При этом мастидин окрашивает молоко в сиреневый или фиолетовый цвет, димастин — в алый, пунцовый, малиновый.

Молоко здоровых животных не образует желеобразного сгустка, а его цвет в присутствии мастидина остается почти белым или окрашивается в светло-сиреневый цвет, димастина — в желтый или оранжево-красный цвет.

При положительном результате с реактивами ставят пробу отстаивания.

Проба отстаивания

В две бактериологические пробирки из каждой половины вымени выдаивают по 10 — 15 мл молока и выдерживают при температуре 5 — 10 °C в течение 16 — 18 часов.

Осадок на дне пробирки высотой 0,1 см и больше указывает на воспалительный процесс в вымени. Молоко от здоровых овец осадка не образует.

Приложение 3

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Перед посевом на питательные среды кусочки вымени отмывают от глицерина стерильным физиологическим раствором и растирают в ступке с небольшим количеством физиологического раствора.

1. Исследование на наличие патогенного стафилококка

Патогенный стафилококк грамположителен, обладает гемолитическими свойствами, плазмокоагуляцией, сбраживает маннит с образованием газа и при внутрикожном введении кролику вызывает некроз на месте инъекции. Из всех перечисленных свойств патогенного стафилококка свойство коагулировать плазму крови является обязательным.

Определение гемолитических свойств. Патологический материал высевают на кровяной агар в три чашки Петри. В первую чашку вносят 0,1 — 0,2 мл молока или суспензии, растертого органа. Нанесенный на среду посевной материал распределяют равномерно по поверхности шпателем или согнутой пастеровской пипеткой, а затем, не обжигая их, делают дробные пересевы на 2-ю и 3-ю чашки. Посевы инкубируют в термостате при 37 °C в течение 18 — 24 часов.

Выросшие на среде круглые серо-белые влажные колонии с ровными краями, образующие зону гемолиза, вызывают подозрение на наличие патогенного стафилококка. Из такой колонии делают мазок и окрашивают по Граму (стафилококки под микроскопом имеют вид виноградной грозди или кучек, состоящих из нескольких кокков), а также пересевают на МПА, содержащий 0,2% глюкозы, и МПБ для получения чистой культуры и изучения свойств.

Реакция плазмокоагуляции. 8 мл свежеполученной крови кролика смешивают с 2 мл 5-процентного раствора лимоннокислого натра. Плазму, полученную после центрифугирования этой смеси, отсасывают и разводят 1:4 физиологическим раствором, разливают по 0,5 мл в пробирки, количество которых соответствует числу проб, вносят в каждую пробирку пипеткой по 0,1 мл суточной бульонной культуры стафилококка и ставят в термостат при температуре 37 °C. Посевы просматривают через 2, 3, 5, 18 и 24 часа. Для контроля плазму оставляют без культуры. В случае положительной реакции плазма свертывается, образуя желеобразный сгусток, при отрицательной — плазма остается жидкой.

Ферментация маннита. 2 — 3 капли испытуемой бульонной культуры стафилококка засевают в бульон, содержащий 0,5% маннита и индикатор Андрадэ. Можно также пользоваться готовой полужидкой сухой средой с маннитом и индикатором ВР. Засеянные пробирки заливают стерильным вазелиновым маслом слоем до 1 см, выдерживают 48 часов в термостате при температуре 37 °C. Изменение цвета индикатора и появление пузырьков газа в бродильной трубочке бульона или в толще полужидкого агара указывает на разложение маннита.

Дермонекротическая проба. Суточную культуру смывают с МПА стерильным физиологическим раствором. Концентрацию микробной взвеси доводят по оптическому стандарту до 2 миллиардов микробных тел в 1 мл. В опыт берут кроликов массой 2,5 — 3 кг. Волосы на боку кролика выстригают, в толщу кожи вводят 0,2 мл культуры (при правильном введении на месте инъекции образуется заметный инфильтрат). Учет результатов проводят ежедневно в течение 5 суток. Положительной реакцией считают появление некроза на месте инъекции. Гиперемия и инфильтрация без некроза рассматривается как отрицательная реакция.

2. Исследование на наличие бактерий маститидис овис

Молоко или суспензию из растертого кусочка вымени высевают по 0,1 мл дробно на сывороточный или кровяной агар в три чашки Петри и инкубируют 24 часа при температуре 37 °C. Бактерии маститидис овис, выросшие на этих средах, образуют мелкие округлые голубоватые колонии диаметром 1 — 2 мм. Через 3 — 5 дней колонии приобретают сероватый оттенок и вокруг них возникает слизистый ободок. В мазках, окрашенных по Граму, обнаруживают маленькие (1 — 2 микрометра длины и до 0,5 микрометра толщины) грамотрицательные палочки с округленными краями. При окраске Лефлеровской синькой некоторые палочки окрашиваются биполярно. Микроб спор не образует, неподвижен. Колонии отвивают на пробирки с сывороточным агаром. Выросшую культуру микроскопируют и засевают на сывороточный бульон, на среды с углеводами и многоатомными спиртами, в желатин, молоко и пептонную воду (для образования индола). На простом бульоне эти бактерии растут скудно, образуют легкую муть, на сывороточном — более интенсивно. Через 3 — 5 дней бульон просветляется и на дне образуется слизистый осадок. На желатине при комнатной температуре роста не дают, молоко не свертывают, большинство штаммов индола не образует. Ферментация углеводов — непостоянный признак. Однако большинство штаммов образует кислоту на средах с глюкозой, сахарозой, мальтозой, ксилозой, сорбитом и не сбраживают лактозу, арабинозу, раффинозу и дульцит. Для лучшего роста возбудителя среды с углеводами готовят на полужидком агаре.

Бактериум маститидис овис убивает белых мышей на 4 — 5-е сутки при подкожном введении им 0,2 — 0,5 мл суточной бульонной культуры. Внутрибрюшинное заражение бульонной культурой в количестве 1 — 2 мл вызывает гибель морских свинок на 3 — 4-е сутки, кроликов на 5 — 6-е.

3. В лаборатории выделенные чистые культуры возбудителей мастита проверяют на их чувствительность к антибиотикам согласно «Методическим указаниям по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных».

бактериум маститидис овис

Кровяной и сывороточный агар. Мясопептонный агар, pH 7,4 — 7,6, растапливают и охлаждают до 50 °C. Добавляют 5% дефибрированной крови или сыворотки барана, крупного рогатого скота или кролика, смешивают и разливают по чашкам.

Сывороточный бульон. В мясопептонный бульон, pH 7,4 — 7,6, добавляют 5% сыворотки крови барана или крупного рогатого скота и стерильно разливают по пробиркам.

Полужидкие среды с углеводами. В 1-процентную пептонную воду, pH 7,4 — 7,7, добавляют 0,15% агара, 0,5% соответствующего углевода и 1% индикатора Андрадэ, разливают по пробиркам и стерилизуют при 0,5 атмосферы 30 минут.

---