Методические указания по лабораторным исследованиям на гистомоноз (тифлогепатит) птиц

(одобрены Госагропромом СССР 29.12.1985)

Одобрены 29 декабря 1985 года

1.1. Гистомоноз — протозойная болезнь птиц, вызывающая Histomonas meleagridis. Протекает остро и хронически. Болеют в основном индюшата и цыплята 3 — 4-месячного возраста.

1.2. Диагноз на гистомоноз ставят на основании результатов микроскопического исследования с учетом эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных.

1.3. Для исследования в лабораторию доставляют 3 — 4 больных живых птиц.

1.4. Лабораторные исследования на гистомоноз птиц включают обнаружение гистомонад в патологическом материале методом световой микроскопии и их дифференциацию.

2. Микроскопическое исследование.

2.1. Материал для исследования берут сразу после убоя птицы. Со слизистой оболочки синуса делают соскоб. Слепые кишки, соскоб и печень помещают в физиологический раствор 38 — 40 °C и pH 7,2 — 7,4.

2.2. Из содержимого слепых кишок готовят раздавленные капли. Каплю содержимого слепых кишок помещают на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют в раздавленной капле под малым, а затем под средним увеличением микроскопа в затемненном поле зрения. Живые гистомонады совершают вращательные или толчкообразные движения.

2.3. Со слизистой оболочки слепых кишок на границе пораженной и здоровой тканей делают соскоб.

2.4. Из соскобов слепых кишок, синуса и пораженных участков печени готовят 3 — 4 тонких мазка.

2.4.1. Для дифференциации к капле соскоба добавляют каплю свежей неконсервированной крови кролика, смешивают, из капли смеси готовят тонкий мазок.

2.5. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом в течение 3 — 5 мин или этиловым — 20 — 25 мин, окрашивают по Романовскому в течение 40 — 50 мин (1 — 2 капли красителя азур-эозина на 1 мл дистиллированной воды, pH 7,0 — 7,2, температурой 18 — 20 °C), промывают дистиллированной водой, высушивают и исследуют под иммерсионной системой микроскопа.

2.6. При микроскопии необходимо учитывать, что в окрашенных мазках встречаются жгутиковые и безжгутиковые формы гистомонад. Первые — продолговатые или овальные, бывают с одним, реже — с 3 — 4 жгутиками, вторые — овальные или круглые. Цитоплазма гистомонад окрашивается в голубой цвет, ядро — в темно-красный, жгутики — в розовый. Ядро гистомонад чаще расположено эксцентрично, имеет неправильную округлую или подковообразную форму.

3. Гистомонад необходимо дифференцировать от трихомонад и эймерий. Дифференциация основана на различии в морфологии возбудителей и их локализации. При определении возбудителя пользуются следующей таблицей.

Возбудитель	Морфология	Локализация
Гистомонада	Жгутиковая форма — овальная, продолговатая, бывает с одним, реже — с 3 — 4 жгутиками; безжгутиковая — овальная, круглая	Слепые кишки, синус, печень
Трихомонада	Округлая, продолговатая, с 4 жгутиками, ундулирующей мембраной и аксостилем	Синус, слепые кишки, печень
Эймерия	Ооциста — круглая, овальная; эндогенные формы: шизонт — клетка, внутри которой находятся мерозоиты; мерозоит — клетка продолговатая, с ядром	Кишечник, почки

4. Результат исследования считают положительным при обнаружении в мазках гистомонад.

5. Срок исследования — 1 - 2 дня.

---